CC BY
38УСТОЙЧИВОСТЬ ВИРУСА ГЕПАТИТА А к ФИЗИКО-ХИМИЧЕСКИМ ВОЗДЕЙСТВИЯМ. Как известно, гепатит А (ГА) - острое инфекционное заболевание с преимущественным поражением паренхимы печени, распространенное повсеместно, но крайне неравномерно: выделяют территории высокой, средней и низкой эндемичности.
Возбудителем ГА является вирус, обозначенный как вирус гепатита А, относящийся к таксономическому семейству Picornaviridae. На основании некоторого сходства биофизических и биохимических характеристик с другими пикорновирусами ВГА был ранее классифицирован как энтеровирус 72 (J.L. Melnick,1982; A.J.Coulepis et al.,1982). Однако дальнейшие исследования по определению: аминокислотной и нуклеотидной последовательности генома ВГА; размеров протеинов; трудностей адаптации вируса к росту в клеточных культурах; отсутствия цито патогенно го эффекта; стабильности ВГА при прогревании и к воздействию некоторых химических веществ, которые инактивируют многие другие пикорновирусы, и не характерный для этой группы вирусов гепатотропизм позволили классифицировать вирус в самостоятельный род Hepatovirus (J.R.Ticehurst, 1986, 1988; J. Sigl,1984; P. Provost et al.,1979). Идентифицировано семь генотипов, объединенных в один серотип ВГА (S.M. Lemon et al., 1987; J.Siegl,1988). Небольшие различия геномного состава, встречающиеся у индивидуальных штаммов (изолятов), не влияют на антигенную структуру вируса.
По данным электронной микроскопии вирус представляет собой сферическую частицу диаметром 27-30 нм. При негативном контрастировании в препаратах выявляются как полные, так и пустые частицы. Зрелые вирионы ВГА имеют плавучую плотность в хлориде цезия, равную 1,32-1,34 г/см, и коэффициент седиментации в нейтральных растворах сахарозы порядка 156-160 S. Морфологические исследования показали, что ВГА не имеет наружной оболочки, состоит из нуклеокапсида, содержащего положительную одноцепочечную РНК. Капсид, в свою очередь, построен из отдельных капсомеров, симметрично уложенных по принципу пятиосевого двенадцатигранника. Каждый капсомер состоит из четырех вирусных белков: VP1, VP2, VP3, VP4. Эти белки имеют различную форму и вес.
В последнее десятилетие проблеме гепатита А уделялось неоправдано меньшее внимание, чем другим вирусным гепатитам. Отчасти это было связано с многолетним снижением заболеваемости ГА, которое началось с середины 90-х годов двадцатого столетия (Л.И.Шляхтенко, 2001). Однако с 2000-го года зарегистрирован очередной циклический подъем: уровень заболеваемости ГА в 2000г. по сравнению с 1999г. увеличился на 83%, а в общей структуре вирусных гепатитов доля ГА возросла с 31% в 1999г. до 45% в 2000г. Почти на четверть уменьшилась доля лиц с наличием анти-ВГА, преимущественно среди возрастных групп от 14 до 40 лет. В настоящее время число людей, не восприимчивых к ВГА-инфекции, не столь велико, чтобы положительно влиять на сдерживание распространения ВГА и по территориям и по возрастным группам, за исключением самых старших возрастов, > 50 лет (М.С.Балаян, 2000).
Известно, что ГА имеет фекально-оральный механизм передачи возбудителя, который реализуется следующими путями: пищевым, водным, контактно-бытовым.
В целях профилактики наряду с активной и пассивной иммунизацией решающую роль имеет также комплекс санитарно-гигиенических мероприятий, направленных на разрыв механизма передачи инфекции (С.Н.Соринсон,1998). Как и при других инфекциях с энтеральным механизмом заражения, первостепенное значение имеет проведение в эпидемических очагах текущей и заключительной дезинфекции, направленной на инактивацию вируса гепатита А.
К сожалению, в литературе имеется не так много работ по изучению устойчивости ВГА к действию различных физико-химических агентов и факторов. Стабильность ВГА, как правило, определяется при помощи различных методических приемов: а) изменение инфекционной активности при заражении адаптированных к росту ВГА линий клеточных культур или при экспериментальном заражении восприимчивых к ГА лабораторных животных (мармозеты, шимпанзе и др.); б) изменение антигенной активности в
и
иммунологических реакциях; в) изучение структурной целостности вирусных частиц по данным электронномикроскопического исследования и седиментационного анализа.
Инактивационные характеристики ВГА, полученные в результате этих исследований, очень важны для практического здравоохранения, так как они учитываются при обработке сточных вод, очистке питьевой воды, пастеризации морепродуктов (устричных, крабовых), стерилизации медицинского инструментария, постельного белья, посуды и других предметов обихода, которыми пользуются больные гепатитом А.
Как показали исследования, инактивационные характеристики ВГА сходны с таковыми для других энтеровирусов, таких как полиовирусы, Коксаки, ECHO и др. Считается, что ВГА - один из наиболее устойчивых вирусов к действию неблагоприятных факторов окружающей среды.
Вирус ГА устойчив в диапазоне рН 3,0-11,0; к кислотам (рН 3,0 в течение 3-х часов при температуре +25°С); к жирорастворителям, таким как эфир (10% при +4°С в течение 4 часов, 20% при +4°С в течение 18 часов), хлороформ, фреон, генетдон и др. Эти характеристики устойчивости ВГА свидетельствуют, что липиды не входят в состав вируса гепатита A (S.A. Locamini, 1976,1978).
Некоторые отличия между ВГА и другими энтеровирусами были установлены при изучении воздействия повышенных температур и хлора. При +60 С ВГА полностью сохраняется в течение 60 минут; частично инактивируется за 10-12 часов; полная инактивация вируса происходит при +85° С за несколько секунд. Кипячение приводит к разрушению вируса за 5 минут (J.V.Parry et al.,1984, J.Siegl et al.,1984, P.J.Provost et al.,1984).
Установлено, что 50% частиц полиовируса типа 2 разрушается в течение 10-ти минутного инкубирования при +43°С в среде с рН 7,0, тогда как очищенные вирионы вируса гепатита А дают аналогичный эффект при нагревании до +61 С (J.V. Рапу et al., 1984).Устойчивость ВГА и полиовируса может увеличиваться при добавлении одномолярного MgCl2. В данных условиях полиовирус начинал разрушаться при +61°С, тогда как ВГА сохранял устойчивость до +81°С. Известно, что вирус полиомиелита инактивируется в воде при +55-69°С в течение 15-30 мин.; вирус Коксаки ВЗ при +55°С инактивируется в течение 45 мин., а при +60°С в течение 30 минут. Эти данные позволяют сделать вывод, что ВГА более устойчив к действию повышенных температур.
Установлена также высокая устойчивость ВГА к действию хлора. Показано, что обработка очищенного препарата ВГА дозой остаточного свободного хлора 0,5-1,5 мг/л при рН 7,0 недостаточна для полной инактивации вируса. При экспериментальном заражении гепатитом А мармозет установлено, что инфекционная активность ВГА полностью исчезала при обработке вируса дозой остаточного хлора 2,0 - 2,5 мг/л. В данном эксперименте вирусный препарат был очищен центрифугированием в градиенте сахарозы с последующим диализом. Следует учесть, что уровень свободного хлора, необходимого для инактивации вируса ГА в окружающей среде, содержащей органические вещества и плотные примеси, будет более высоким (D.A. Peterson et al., 1982).
Инактивирующая доза хлорамина-1 для ВГА составляет 1г/л в течение 15 минут при +20°С, а для вируса полиомиелита (тип I) - 30 мг/л при тех же условиях (R. Scheid et al., 1982).
Что касается действия на ВГА относительно низких температур или температур комфорта, то было установлено, что он может сохраняться в течение нескольких лет при температуре ниже -20°С; при +4°С - устойчив в течение месяцев. ВГА остается инфекционным в течение, по крайней мере, 1 месяца после высушивания на твердой поверхности при +25°С и 42% влажности (КА McCaustland et al., 1982). Инактивация ВГА в сточных водах кобальтовым облучением оказалась не слишком эффективной.
Особый интерес представляют данные об инактивации ВГА химическими веществами, часто используемыми при дезинфекции. ВГА инактивируется формалином (1:4000 за 72 часа при +37°С; 3% в течение 5 минут при +25°С; 8% за 1 минуту при +25°С).
Хлорамин в концентрации 2,0-2,5 мг/л полностью инактивирует ВГА за 15 минут; перманганат калия (30 мг/л) - за 5 минут; йодистые соединения (3 мг/л) - за 5 минут; В-ргорПас11опе (0,03%) при +4°С в течение 72 часов; 70% этанол при +25°С или хлорсодержащие соединения, такие как гипохлорит натрия (3-10 мг/л), при +20°С в течение 5-15 минут.
Эффективным методом стерилизации вируссодержащих материалов является автоклавирование (+121°С в течение 20 минут) и сухой жар ( +180°С в течение 1 часа). На поверхностях дезинфицирующий эффект может быть достигнут ультрафиолетовым облучением (1,1 Вт на глубину 0,9 см в течение 1 минуты или 197 (ш^уСМ2 в течение 4 минут).
До последнего времени в практическом здравоохранении в качестве дезинфекционных средств использовались синтетические моющие вещества в сочетании с перекисью водорода и хлорсодержащие растворы различной концентрации активного вещества (от 0,5% до 20% в зависимости от объекта, подлежащего дезинфекции, и времени экспозиции).
В то же время известно, что хлорсодержащие растворы представляют собой агрессивную среду, вызывают аллергию и требуют неукоснительного соблюдения правил техники безопасности во время работы с ними. Кроме того, при неумелом обращении они способны вызывать острые химические отравления.
В последние годы в ряде стран в качестве дезинфектантов стали применяться более безопасные химические агенты, которые по своему действию гораздо активнее хлора и не вызывают аллергических и иных побочных реакций организма человека. Это могут быть моющие средства с дезинфицирующим эффектом (ЧАС, ПАВ плюс перекисное соединение, альдегид или спирт), а также ферментные препараты. Перспективными препаратами, применяемыми для дезинфекции ВГА, могут быть препараты, сконструированные на основе четвертичных аммониевых соединений, типа «Дезэффект», «Септадор», «Септопол», «Лизоформин 3000».
Н.А.Замятина, Институт полиомиелита и вирусных энцефалитов М.П. Чумакова РАМН.
ВНИМАНИЕ!!!
С 1 января 2000 года в Интернете по адресу www. hepatitinfo. ru открыта страница нашего некоммерческого партнерства «ГЕПАТИТИНФО».
Только на этой странице Вы найдете:
Полнотекстовые варианты бюллетеня «Мир вирусных гепатитов» и бюллетеня «Вирусные гепатиты: достижения и перспективы», издаваемых при содействии Московского представительства фирмы «ШерингПлау» (до выпуска их печатных аналогов).
Информацию о различных конференциях с опубликованием наиболее интересных тезисов.
Электронную обновляемую версию «Энциклопедический словарь - Вирусные гепатиты» (М.С. Балаян и М.И. Михайлов).
Специальный раздел, посвященный препарату «Зеффикс» С«Ламивудин») фирмы «ГлаксоВэллком». Вы найдёте тезисы, слайды и ещё много разнообразной информации.
ЗАВОДИТЕ, НЕ ПОЖАЛЕЕТЕ.
