CC BY
35
УСИЛЕНИЕ АПОПТОЗА ЛИМФОЦИТОВ ПОД ВЛИЯНИЕМ СИНТЕТИЧЕСКОГО ПЕПТИДА Е ПРИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЙ ЯЗВЕ
Терентьев А. А.1, Лычкова А. Э.2, Казимирский А. Н. 1, Салмаси Ж. М. 1
' ГБОУ ВПО Российский национальный исследовательский медицинский университет им. Н. И. Пирогова Минздрава России 2 ГБУЗ Московский Клинический Научный Центр ДЗМ
LYMPHOCYTE APOPTOSIS ENHANCEMENT BY THE SYNTHETIC PEPTIDE E IN EXPERIMENTAL ULCER
Terentev A. A. 1, Lychkova A. E. 2, Kazimirsky A. N. 1, Salmasi J. M. 1
' Pirogov Russian National Research Medical University (RNRMU) 2 State Budget Institution of Health Moscow Clinical Scientific Center
Терентьев Александр Александрович, заведующий кафедрой биохимии РНИМУ им. Н. И. Пирогова Лычкова Алла Эдуардовна, д.м.н, заведующая отделом научных и патентных исследований ГБУЗ Московский Клинический Научный Центр ДЗМ
Казимирский Александр Николаевич, профессор кафедры биохимии РНИМУ им. Н. И. Пирогова Салмаси Жеан Мустафаевич, профессор кафедры патфизиологии РНИМУ им. Н. И. Пирогова Terent'ev Alexander Alexander, head of the Department of Biochemistry RNIMU after N. I. Pirogov
Lychkova Alla Edward, MD, Head, Department of scientific and patent research State Budget Institution of Health Moscow Clinical Scientific Center
Kazimirsky Alexander Nicola, Professor, Department of Biochemistry RNIMU after N. I. Pirogov Salmasy Jeahn Mustafa, professor of pathological physiololgy RNIMU after N. I. Pirogov
Лычкова Алла Эдуардовна
Lychkova Alla E.
E-mail:
lychkova@mail.ru
Резюме
Изучено влияние регуляторного пептида типа Е на течение экспериментальной язвы желудка. Показано, что активация процессов апоптоза усиливает местную воспалительно-некротическую реакцию, с одной стороны, и активирует развитие спаечного процесса, с другой.
Ключевые слова: апоптоз лимфоцитов, синтетический пептид Е, экспериментальная язва желудка Экспериментальная и клиническая гастроэнтерология 2014; 112 (12):61-63
Summary
The influence of regulatory peptide type of AFP on the course of experimental ulcer was investigated. It has been shown that activation of apoptosis enhances local necrotic inflammatory reaction, on the one hand, and enables the development of adhesions with on the other.
Keywords: apoptosis of lymphocytes, a synthetic peptide E, experimental gastric ulcer Eksperimental'naya i Klinicheskaya Gastroenterologiya 2014; 112 (12):61-63
Регуляторные пептиды типа Е и АФ относятся к числу эффективных стимуляторов апоптоза. Химическая структура регуляторного пептида Е представлена комбинацией аминокислотных остатков. Аминокислотная цепочка компонуется в пространственные кольцевые структуры, связанные дисульфидными мостиками. Известно, что проапоптозная активность регуляторного пептида Е ниже, чем у пептида АФ.
Эксперименты проводили на 15 крысах породы Вистар 230-250 г в условиях нембуталового наркоза. Моделирование язвы желудка осуществляли путем
нанесения ацетоуксусной кислоты на границу фун-дального и антрального отделов желудка (модель язвы по Окабе). Регистрировали электромоторную активность фундального и антрального отделов желудка с помощыо погружных и поверхностных электродов площадью контактной поверхности 0,1-0,3 мм2и 0,5-1 мм2, соответственно. На 4-5-й день модели язвы проводили контрольную регистрацию ЭМА отделов желудка с последующим обкалыванием периульцерозной зоны регуля-торным пептидом Е (1-я группа) и пептидом АФ
экспериментальная и клиническая гастроэнтерология | выпуск! 12 | № 12 2014 экспериментальная гастроэнтерология | experimental gastroenterology
(2-я группа). На 10-й день вновь проводили лапа-ротомию, регистрировали ЭМА отделов желудка.
Результаты исследования
Моделирование язвы по Окабе в контрольных опытах сопровождалось резким усилением ЭМА желудка, с возникновением так называемой «болевой моторики». Так, частота медленных волн ЭМА фундального отдела желудка увеличивается в 2,52,7 раза, амплитуда — в 1,8-1,9 раза. Проявления болевой моторики отмечались также в антральном отделе желудка: частота увеличилась в 3,2-3,5 раза, амплитуда — в 1,9-2,1 раза.
Фоновая частота медленноволновой активности фундального отдела желудка на 4-5 день язвы по Окабе составляла 7,1±1,2 в мин, амплитуда 0,12±0,02 мВ.
Фоновая ЭМА гладких мышц антрального отдела желудка представлена медленноволновой и спайковой активностью. Частота медленных волн ЭМА составила 7,7±1,4 в мин, амплитуда — 0,16±0,03 мВ. В 42,8% случаев отмечается низкоамплитудная спайковая активность частотой 0,52 на 100 медленных волн и амплитудой 0,15±0,02 мВ.
Введение пептида Е в периульцерозную зону сопровождалось активацией медленных волн ЭМА гладких мышц фундального отдела желудка: частота увеличивается до 10,0±1,3 в мин (40,9%, р<0,05), амплитуда — до 0,20±0,03 мВ (66,7%, р<0,05). В 43% наблюдений отмечалась спайковая активность амплитудой 0,17±0,03 мВ, частотой 0,17±0,02 на 100 медленных волн.
Введение пептида Е в периульцерозную зону сопровождалось активацией медленных волн ЭМА
Исследование роли пептида АФ
Фоновая частота медленноволновой активности фундального отдела желудка на 4-5 день язвы по Окабе составляла 7,6±1,1 в мин, амплитуда 0,14±0,02 мВ.
Фоновая активность гладких мышц антрального отдела желудка представлена медленноволновой и спайковой активностью. Частота медленных волн ЭМА составила 7,5±0,9 в мин, амплитуда — 0,12±0,02 мВ. В 22% случаев отмечается низкоамплитудная спайковая активность частотой 0,2±0,02 на 100 медленных волн и амплитудой 0,1±0,02 мВ.
Введение пептида АФ в периульцерозную зону сопровождалось активацией медленных волн ЭМА гладких мышц фундального отдела желудка: частота увеличивается до 8,5±1,3 в мин (18%), амплитуда — до 0,18±0,03 мВ (28,5%). В 52% наблюдений отмечалась спайковая активность амплитудой 0,10±0,01 мВ, частотой 0,40±0,02 на 100 медленных волн.
Введение пептида АФ в периульцерозную зону сопровождалось активацией медленных волн ЭМА гладких мышц антрального отдела желудка: частота увеличивается до 8,3±1,2 в мин (10,7%), амплитуда — до 0,15±0,04 мВ (25%). В 22% наблюдений наблюдалась спайковая активность амплитудой 0,2±0,02 мВ, частотой 0,60±0,02 на 100 медленных волн (200%, р<0,01).То есть, введение пептида АФ
Контрольную группу составили 5 животных с моделью язвы по Окабе.
гладких мышц антрального отдела желудка: частота увеличивается до 10,0±1,6 в мин (29,9%, р<0,05), амплитуда — до 0,23±0,03 мВ (43,8%, р<0,05). В 67% наблюдений наблюдалась спайковая активность амплитудой 0,2±0,02 мВ, частотой 0,34±0,03 на 100 медленных волн (33,3%, р<0,01).То есть, введение пептида Е в периульцерозную зону сопровождается ростом медленноволновой и спайковой активности ЭМА отделов желудка.
На 10-й день существования язвы желудка в условиях введения индуктора апоптоза пептида Е частота и амплитуда медленноволновой активности увеличивается соответственно дополнительно на 87-89% и на 56-90%. Спайковая активность — среднечастотная и высокоамплитудная. То есть, введение регуляторного пептида Е сохраняет электромоторную активность отделов желудка на высоком уровне, тогда как в контроле к 10-му дню существования язвы по Окабе показатели моторики практически нормализуются.
Макроскопически на 10-й день язва по Окабе, активированная пептидом Е, представляет собой глубокий дефект стенки желудка с подрытыми краями, дно которого выполнено гнойными наложениями. Существенной гиперемии периульцерозной зоны не отмечено. Соединительнотканные спайки образуются между желудком, селезенкой и правой долей печени. Таким образом, введение проапоп-тозного пептида Е потенцирует альтернативные процессы в зоне язвы желудка.
в периульцерозную зону сопровождается ростом медленноволновой и значительным увеличением спайковой активности отделов желудка, то есть увеличением, главным образом, моторной деятельности желудка.
На 10-й день существования язвы желудка в условиях введения индуктора апоптоза АФ частота и амплитуда медленноволновой активности увеличивается соответственно, дополнительно на 45-49% и на 120-150%. Спайковая активность выявляется чаще на 60-80% и амплитуда ее несколько выше. То есть, введение регуляторного пептида АФ сохраняет электромоторную активность отделов желудка на высоком уровне, тогда как в контроле к 10-му дню существования язвы по Окабе показатели моторики практически нормализуются.
Макроскопически на 10-й день язва по Окабе, активированная пептидом АФ, представляет собой глубокий обширный дефект стенки желудка с подрытыми краями, дно которого заполнено гнойными наложениями. Отмечаются мощный спаечный процесс в брюшной полости. Соединительнотканные спайки образуются между желудком, селезенкой, правой долей печени, тонкой и толстой кишкой.
Таким образом, повреждающее действие пептида АФ на фоне моделированной язвы желудка более
Фундальный отдел Антральный отдел
Язва по Окабе частота амплитуда частота амплитуда
Язва по Окабе на 5-й день 7,1±1,2 0,12±0,02 7,7±1,4 0,16±0,03
Е-пептиды 5-й день 10,0±1,3 0,2±0,03 10,0±1,6 0,23±0,03
Е-пептиды 10-й день
18,7±2,9
0,36±0,04
18,9±1,9
0,38±0,03
Таблица
ЭМА фундального и антрального отдела желудка при моделировании язвы по Окабе и применении Е-пептида
выражено, чем у пептида Е, что подтверждается электрофизиологическими и макроскопическими исследованиями и обусловлено...
Как показано ранее, усиление электромоторной активности желудка при моделировании язвы по Окабе сопровождается активацией серотонинер-гических систем, величина которой коррелирует с усилением электромоторной активности. Введение пептидов Е и АФ приводит к выраженному
увеличению электромоторной активности, которое нарастает к 10-му дню существования язвы. Это может быть связано, прежде всего, с активацией процесса апоптоза на фоне усиления активности серотонинергических систем, которые в совокупности уменьшают местную иммунологическую реактивность тканей желудка и компенсаторно увеличивают реактивные процессы в брюшной полости.
