Научная статья на тему 'Универсальная среда для микобактериоподобных микроорганизмов'

Универсальная среда для микобактериоподобных микроорганизмов Текст научной статьи по специальности «Ветеринарные науки»

CC BY
987
50
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.
Журнал
Ветеринарный врач
ВАК
Область наук
Ключевые слова
КОРИНЕБАКТЕРИИ / CORYNEBACTERIUM / НОКАРДИИ / NOCARDIA / РОДОКОККИ / ПИТАТЕЛЬНАЯ СРЕДА / NUTRIENT MEDIUM / МИКОБАКТЕРИОПОДОБНЫЕ / УГЛЕВОДОРОДОКИСЛЯЮЩИЕ / УНИВЕРСАЛЬНАЯ / ГЕОТЕРМАЛЬНАЯ ВОДА / GEOTHERMAL WATER / RHODOCOCCUS / MYCOBACTERIUM-LIKE / HYDROCARBON-VERSATILE

Аннотация научной статьи по ветеринарным наукам, автор научной работы — Баратов М.О., Найманов А.Х., Нажалов М.И., Вердиева Э.А.

При бактериологической идентификации культур, выделенных от реагирующих на туберкулин животных, приходится пользоваться разными средами, что создает определенные трудности в работе. Цель исследования создание полноценной питательной среды для выращивания углеводородокисляющих микроорганизмов. Материалы и методы. Среды для изолирования коринебактерий (нитритный агар по Виноградскому, среда Сотона, кровяной агар, кровяно-теллуритовый агар, среда Клауберг II, сывороточный агар, среда Бучина), для выделения нокардий и родококков (среда Мюнца, УМ-агар, питательный бульон, среда с овсяной мукой, декстрозный агар) не получили признание диагностических лаборатории по ряду причин. Предлагаемая универсальная среда (М-10), отвечает требованиям, предъявляемым к питательным средам, прежде всего, пластического материала и источников энергии. Дистиллированную воду, как основу жизнедеятельности микроорганизмов, заменили геотермальной, которая отличается по количественному и качественному содержанию микро-макроэлементов, а также по содержанию углеводородов. Результаты исследований. Для посева использовали тест-штаммы коринебактерий, нокардий и родококков (Corynebacterium xerosis N1911, N.asteroides ВКМ Ас 1077 и R. bronchialis ИМВ Ас 737), а нативным материалом служила эпизоотическая культура из объектов внешней среды (почва, корма, навоз и кровь крупного рогатого скота). Изучали в сравнительном плане, высеваемость, скорость и характер роста, ингибирующие постороннюю микрофлору свойства, а также доступность в лабораториях широкой сети, простоту и трудоемкость в изготовлении, материальные расходы. Заключение. Исследования показали превосходства предлагаемой среды над остальными по изученным свойствам, что позволить обеспечить высокий уровень выполнения диагностических исследований.

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

Похожие темы научных работ по ветеринарным наукам , автор научной работы — Баратов М.О., Найманов А.Х., Нажалов М.И., Вердиева Э.А.

iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

VERSATILE MEDIUM FOR CULTIVATION OF MYCOBACTERIA-LIKE MICROORGANISMS

For bacteriological identification of cultures isolated from tuberculin-positive animals various nutrient media are used; it complicates the detection. The aim of the work was to design a whole nutrient medium for cultivation of carbon-oxidizing microorganisms. Methods and materials: medium for isolation of Corinebacterium (Vinogradsky nitrate agar, Sauton’s medium, blood and telluric agar, Clauberg’s medium II, serum agar, Buchin’s agar), Nocardia and Rhodococci (Muntz’s medium, UM agar, nutrient broth, medium from oatmeal flour, dextrose agar) failed laboratory trials because of various reasons. The proposed versatile medium (M-10) meets the requirements put forward for nutrient media, first of all for plastic materials and energy resources. Distilled water as a basic element for microorganism life was replaced by the geothermal water which differs by qualitative and quantitative content of microand macroelements and the content of carbons. The investigation results: corinebacterium, Nocardia, and Rhodococci test-strains (Corynebacterium xerosis N1911, N.asteroides VKMАс 1077 and R. Bronchialis ІМВАс 737) were used for cultivation and epizootic cultures from environmental objects (soil, fodder, cattle manure and blood) were used as native materials. Cultivation rate, growth rate, inhibition of secondary microflora, availability in common laboratories, simplicity and complexity of production were subjected to comparative studies. Conclusion: the studies showed the advantages of the proposed medium on the studied features enabling to ensure a high level of diagnostic trials.

Текст научной работы на тему «Универсальная среда для микобактериоподобных микроорганизмов»

4. Butler, A. Economic impact assessment of Bovine Tuberculosis in the South West of England / A.Butler, M.Lobley, M.Winter// CRPR Research Report Centre for Rural Policy Research University of Exeter. - 2010. - № 30. - Р. 57-59.

5. Cousins, D.V. Mycobacterium bovis infection and control in domestic livestock / D.V.Cousins // Rev Sci Tech. -2001. - Vol. 20, № 1. - P. 71-85.

6. Eurosurveillance editorial team. The European Union summary report on trends and sources of zoonoses, zoonotic agents and food-borne outbreaks in 2009 // European communicable disease bulletin. - 2011. - Vol. 9, № 3. - P. 378-380.

7. Eurosurveillance editorial team. The European Union summary report on trends and sources of zoonoses, zoonotic agents and food-borne outbreaks in 2013 // Euro surveillance: European communicable disease bulletin. European Food Safety Authority. - 2015. - Vol. 13, № 1. - P. 162-165.

8. Prevalence of Bovine Tuberculosis in Abattoirs of the Littoral and Western Highland Regions of Cameroon: A Cause for Public Health Concern / J.Awah-Ndukum [et al.] // Vet. Med. Int. - 2010. - Vol. 2010. - P. 8-11.

9. OIE. OIE World Animal Health Information System [Electronic resource] // Weekly Animal Disease sevice global report. 2015. URL: http://www.oie.int/wahis_2/public/wahid.php/Reviewreport/Review/viewsummary?fupser=&dothis= &reportid=17998 (accessed: 07.12.2015).

10. Horzheyev, V. Epizootolohichnyy monitorynh ta udoskonalennya systemy borot'by z tuberkul'ozom velykoyi rohatoyi khudoby u hospodarstvakh Ukrayiny [Epizootological monitoring and improvement of system to controlcattle tuberculosis in farms of Ukraine]: dissetation thesis for Candidate of vet.sci. / V. Horzheyev. - Kharkiv, 2005. - 126 p.

11. Good, M. Perspectives on the History of Bovine TB and the Role of Tuberculin in Bovine TB Eradication / M.Good, A.Duignan // Vet. Med. Int. - 2011. - Vol. 2011. - P. 1-11.

12. Burrows, W. Burrows Textbook of microbiology / W.Burrows, B.A.Freeman. - Philadelphia and London: W.B.Saunders Company, 1985. - 1038 р.

13. Pathogenesis of Mycobacterium bovis infection in cattle / S.D.Neill [et al.] // Vet. Microbiol. - 1994. - Vol. 40, №1-2. - P. 41-52.

14. Tuberculosis / edited by M.M.Madkour. - Berlin: Springer Berlin Heidelberg, 2004. - 930 р.

15. Kosenko, V. Vliyaniye obrabotki patologicheskogo materiala na vysevayemost mikobakteriy tuberkuleza [The effect of pathological material treatment on the isolation rate of Mycobacterium tuberculosis] / V.Kosenko, A.Kadochkin, N.Tazhgaliyev // Veterinariya. - 1984. - Vol. 5. - P. 67-68.

16. A national audit of the laboratory diagnosis of tuberculosis and other mycobacterial diseases within the United Kingdom / F.Drobniewski [et al.] // J.Clin. Pathol. - 1999. - Vol. 52, № 5. - P. 334-337.

17. Ratnam, S. Simplified acetylcysteine-alkali digestion-decontamination procedure for isolation of mycobacteria from clinical specimens / S.Ratnam, F.A.Stead, M.Howes // J. Clin. Microbiol. - 1987. - Vol. 25, № 8. - P. 1428-1432.

18. Nuratinov, R. A.Metod predposevnoy obrabotki biomateriala dlya vydeleniya mikobakteriy [Pretreatment method of biological material for indication of mycobacteria] / R.A.Nuratdinov [et al.] // Problemy tuberkulyoza i bolezney lyegkih - Problems of tuberculosis and lung disease. - 2006. - Vol. 9. - P. 48-50.

19. Alikayeva, A.P. Uproschenniy metod vydeleniya i vyraschivaniya chistyh kultur tuberkulyoznyh batsill iz patologicheskogo materiala [A simplified method of isolation and cultivation of tuberculosis bacilla pure cultures from pathological material] / A.P.Alikayeva // Sovetskaya veterinariya - 1940. - Vol. 11 - P. 12.

УДК 619: 616. 992. 211: 636

УНИВЕРСАЛЬНАЯ СРЕДА ДЛЯ МИКОБАКТЕРИОПОДОБНЫХ МИКРООРГАНИЗМОВ

1М.О.Баратов - кандидат ветеринарных наук, зав. лабораторией; 2А.Х.Найманов - доктор ветеринарных наук, профессор, зав.лабораторией; 1М.И.Нажалов - научный сотрудник;

1Э.А.Вердиева - научный сотрудник.

1ФГБНУ«Прикаспийский зональный научно-исследовательский ветеринарный институт», г.Махачкала (367000, РД, г. Махачкала, ул. Дахадаева, 88;е-та11:а1ата500@гатЫвг.ги).

2ФГБНУ «Всероссийский научно-исследовательский институт экспериментальной ветеринарии имени Я.Р.Коваленко», г.Москва (109428, Россия, г.Москва, Рязанский проспект, д. 24,

тел. +7(495) 995-88-67).

При бактериологической идентификации культур, выделенных от реагирующих на туберкулин животных, приходится пользоваться разными средами, что создает определенные трудности в работе. Цель исследования - создание полноценной питательной среды для выращивания углеводородокисляющих микроорганизмов. Материалы и методы. Среды для изолирования коринебактерий (нитритный агар по Виноградскому, среда Сотона, кровяной агар, кровяно-теллуритовый агар, среда Клауберг II, сывороточный агар, среда Бучина),

32

НАУЧНО-ПРОИЗВОДСТВЕННЫЙ ЖУРНАЛ

№ 3/2016

для выделения нокардий и родококков (среда Мюнца, УМ-агар, питательный бульон, среда с овсяной мукой, декстрозный агар) не получили признание диагностических лаборатории по ряду причин. Предлагаемая универсальная среда (М-10), отвечает требованиям, предъявляемым к питательным средам, прежде всего, пластического материала и источников энергии. Дистиллированную воду, как основу жизнедеятельности микроорганизмов, заменили геотермальной, которая отличается по количественному и качественному содержанию микро-макроэлементов, а также по содержанию углеводородов. Результаты исследований. Для посева использовали тест-штаммы коринебактерий, нокардий и родококков (Corynebacterium xerosis N1911, N.asteroides ВКМ Ас 1077 и R. bronchialis ИМВ Ас 737), а нативным материалом служила эпизоотическая культура из объектов внешней среды (почва, корма, навоз и кровь крупного рогатого скота). Изучали в сравнительном плане, высе-ваемость, скорость и характер роста, ингибирующие постороннюю микрофлору свойства, а также доступность в лабораториях широкой сети, простоту и трудоемкость в изготовлении, материальные расходы. Заключение. Исследования показали превосходства предлагаемой среды над остальными по изученным свойствам, что позволить обеспечить высокий уровень выполнения диагностических исследований.

клюЧЕВЫЕ слоВА: коринебактерии, нокардии, родококки, питательная среда, микобактериопо-добные, углеводородокисляющие, универсальная, геотермальная вода.

Накопленные на сегодняшний день научные и практические данные по лабораторному выявлению микобактериоподобных микроорганизмов не позволяют определить универсальную, простую в изготовлении, доступную и эффективную питательную среду для культивирования, поэтому для повышения результативности приходиться пользоваться несколькими средами. Нередко, при выборе сред исходят из лабораторных возможностей, доступности сред, пренебрегая при этом диагностическими свойствами [1, 5, 7].

Для изолирования коринебактерий широко используют питательные среды: нитритный агар по Виноградскому, среда Сотона, кровяной агар, кровя-но-теллуритовый агар, среда Клауберг II, среда Бучина и т.д., к недостаткам которых относятся, определённые сложности в изготовлении, низкая высеваемость, слабые ингибирующие свойства по отношению к сопутствующей микрофлоре, низкие дифференцирующие свойств и т.д. [1,7].

Низкими диагностическими свойствами также характеризуются среды для выделения и выращивания нокардий и родококков, среда Мюнца, УМ-агар, среда с овсяной мукой, декстрозный агар, питательный бульон и др. [5,6]

В сложившихся условиях возникла настоятельная необходимость в конструировании универсальной питательной среды, для культивирования углеводо-родокисляющих микроорганизмов, обладающие диагностической ценностью и практической значимостью.

Материалы и методы. Нитритный агар по Виноградскому [2], для изолирования коринебактерий, с н-алканами (гексодекан С16Н34) в количестве 2% и синтетическая среда Сотона с добавлением 2%-ой смеси углеводородов имеют существенные недостатки. Углеводороды имеют разные температурные параметры кипения, в связи, с чем стерилизовать в термостате их приходиться по отдельности при разных температурных режимах, что создает определенные трудности при их подготовке. Кроме того, среды отличаются слабыми ростовыми свойствами.

Кровяной агар, включением расплавленного и ох-

лажденного до 45-500С питательного агара и 5-10% дефибринированной или цельной свежи взятой крови животного, имеет низкие ингибирующие свойства по отношению к сопутствующей микрофлоре.

Указанные недостатки относятся и к кровяно-тел-луритовому агару, отличающееся от кровяного агара наличием 2 мл 2% раствора теллурита калия (К2ТеО3).

Среда Клауберг II, отличается сложностью в изготовлении. Химически чистый глицерин, требуемый для приготовления глицериновой смеси, необходимо стерилизовать при 1100С в течение 30 минут. Изготовление среды осложняется еще и тем, что нужно предварительно приготовить лаковую кровь из дистиллированной воды и дефибринированной крови животного, что сопряжено с дополнительными расходами и временем. Видимые колонии на данной среде появляются не раньше 48 часов.

Сывороточный агар состоящий из питательной среды с 10-15% лошадиной или бычьей стерильной сывороткой, имеет низкие дифференцирующие свойства на фоне обильного роста сопутствующей микрофлоры.

Сухая хинозольная среда Бучина [4], характеризуется низкой высеваемостью проб. Кроме того, среда содержит 2 вида минеральных солей, что по нашему мнению недостаточно для качественного обеспечения коринебактерий необходимыми микро и макроэлементами [1,6].

Среда Мюнца для выделения и выращивания но-кардий и родококков, с добавлением парафиновой приманки, обладает слабыми ростовыми свойствами.

Низкими ингибирующими свойствами характеризуются среды УМ-агар и питательный бульон.

Среда с овсяной мукой и декстрозный агар не отличаются диагностической ценностью из-за низкой высеваемости, а также обильным ростом посторонней микрофлоры

С учетом выше сказанного, при конструировании универсальной питательной среды мы исходили из содержания в среде пластического материала (азот, углерод, водород, кислород) для построения тела

микробных клеток, источника энергий (Д-глюкоза), а также минимального количество микроэлементов, участвующих в образовании коферментов. Кроме основных компонентов (пластических и энергетических) для нормального развития микроорганизмам необходим «фактор роста», которыми являются агар микробиологический и дефибринированная кровь животных.

Воду (дистиллированную), как основной растворитель питательных веществ, мы заменили на геотермальную (с минерализацией 5,02 г/л), в том числе и в целях расширения солевого состава среды, что позволить качественно обеспечить среду минеральными солями, анионами, катионами и тд.

Расширенный лабораторный анализ геотермальной воды (фотометрия, потенциометрия, атомно-аб-сорбционная спектрометрия, комплексометрия и т.д.) показал качественное и количественное отличие данной воды от дистиллированной по микро и макроэлементам. Суммарное значение составляла: анионов - 1,6771 г/л (NH4, Na, K, Mg, Ca, Sr, Fe, Mn, Zn, Cu, Ni), катионов - 3,4732г/л (Cl, Br, I, SO4, HCO3, HPO4, NO3). Кроме того, в геотермальной воде содержатся нейтральные и кислые битумы (2,5 мг/л), гумусовые вещества (7,1 мг/л) как источник углеводородов. Для угле-водородокисляющих микроорганизмов, к которым относятся коринебактерии, нокардии и родококки, такой источник является стимулом повышения ростовых свойств, предлагаемой среды [3, 5, 6, 7].

Результаты исследований. В сравнительном плане испытали наиболее часто используемые питательные среды для изолирования коринебактерий, нокардии и родококков.

Предлагаемую (универсальную) среду готовили следующим образом. Взяли панкреатический гидро-лизат кильки - 31,7 г, Д-глюкозу - 16,0 г, КН2РО4 -

0,17 г, MgS04 - 0,2 г, водный голубой -0,28 г, натрий углекислый - 0,3 г ±0,05, агар микробиологический -8,1 г ±1,0 (рН 7,4±0,2), добавили геотермальную воду до 1 литра и 5% стерильной дефибринированной крови животных. В процессе размешивания, не допуская образование пены, вносили 4-5 капель смеси н-алка-нов (парафин), разлили в чашки Петри. После застывания среду слегка подсушили в термостате при температуре (37±1)0С в течение 40-60 минут. Цвет готовой среды темно-синий. Хранили в холодильнике, использовали в течение 3-4 суток.

Остальные среды готовили по прописи авторов [2, 4].

Оценку сред проводили посевом тест-штаммов и свежевыделенных культур коринебактерий, нокардий и родококков. В качестве музейного штамма использовали Corynebacterium xerosis N1911, N.asteroide ВКМ Ас 1077 и R.bronchialis ИМВ Ас 737. а нативным материалом служили лабораторные штаммы, выделенные из объектов внешней среды (почва, корма, навоз и кровь крупного рогатого скота).

Культуру каждого штамма высевали в 8 чашках Петри каждой среды. Коринебактерии на нитритный агар по Виноградскому, среду Сотона, кровяной агар, кровя-но-теллуритовый агар, среду Клауберг II, среду Бучина и на универсальную среду. Нокардии и родококки - среду Мюнца, УМ-агар, среду с овсяной мукой, дакстроз-ный агар, питательный бульон, универсальная среда.

Для соблюдения равнозначности опыта материал высевали равными дозами (500 клеток в 0,1 мл.). При учёте результатов провели сравнительный анализ эффективности сред изучаемых образцов с предлагаемым по скорости и интенсивности роста, по величине колоний и ингибирующим к сопутствующей микрофлоре свойствам. Результаты учитывали через 24 и 48 часов. Опыты повторялись двукратно.

Таблица 1

Характеристика роста нокардий и родококков на питательных средах

Среда Показатель прорастания колоний в |++++) Величина колоний в мм, через 48ч

24 ч 48 ч

тест штаммы нативный материал тест штаммы нативный материал

Среда Мюнца + - + + 0,8-1,2

УМ-агар - - + 1,3-1,5

Среда с овсяной мукой + - + 0,9-1,6

Дексрозный агар - - - + 1,3-1,7

Питательный бульон + 0,7-1,9

Универсальная среда ++ 1,5-1,8

Примечание: + + + + - сплошной рост. Колонии не поддаются подсчету; + + + - обильный рост (от 13 до 23 колоний); ++ - умеренный рост (от 4 до 12колоний); + - скудный рост (от 1 до 3 колоний; - - рост отсутствует.

НАУЧНО-ПРОИЗВОДСТВЕННЫЙ ЖУРНАЛ № 3/2016

34

По результатам проведенных исследований, среда Мюнца и декстрозный агар показали низкие ростовые свойства 1-2 колонии. Низкие ингиби-рующие постороннюю микрофлору свойства обнаружили на среде с овсяной мукой, аналогичная картина на УМ-агаре, на фоне слабых ростовых свойств (табл. 1).

На питательном бульоне колонии не поддаются подсчету, из-за обильного роста посторонней микрофлоры.

На универсальной среде обнаружили умеренный рост на первые сутки с тест штаммами и с нативным материалом - до 12 колонии, на вторые сутки - до 23 колонии в чашках с нативным материалом, но фоне хороших ингибирующих постороннюю микрофлору свойств.

Таблица 2

Характеристика роста коринебактерий на питательных средах

Среда Показатель прорастания колоний в (++++) Величина колонии в мм, через 48 ч

24ч 48 ч

тест штаммы нативный материал тест штаммы нативный материал

Нитритный агар + - + + 1,3-1,5

Среда Сотона + ++ + ++ 1,9-2,1

Клауберг II - + - + 1,3-1,8

Кровяной агар ++ ++ ++++ +++ 1,4-2,1

Кровяной-теллуритовый агар + ++ +++ ++++ 2,3-2,6

Сывороточный агар ++ ++ ++++ ++++ 1,9-2,6

Среда Бучина + ++ ++ ++ 2,4-2,7

Универсальная среда ++ ++ +++ +++ 2,1-3,2

Примечание: + + + + - сплошной рост. Колонии не поддаются подсчету; + + + - обильный рост (от 13 до 23 колоний); ++ - умеренный рост (от 4 до 12колоний); + - скудный рост (от 1 до 3 колоний; - - рост отсутствует.

Рост колоний на среде Бучина формировался на первые сутки от 1 до 3 колоний с тест штаммами и умеренным ростом с нативным материалом от 4 до 12 колоний (табл.2). На вторые сут количество колоний в чашках с тест штаммами увеличилось до 12 колоний.

По ростовым свойствам кровяной и кровяно-тел-луритовые агары не уступают среде Бучина, но рост колоний формировался на фоне низких ингибирующих свойств по отношению к сопутствующей микрофлоре.

Низкими дифференцирующими свойствами обладает и сывороточный агар, где обнаружили обильный рост сопутствующей микрофлоры на вторые сутки.

Эффективность нитритного агара и Клауберг II была самой низкой. Слегка заметный рост обнаружили на средах через 48 часов.

Слегка заметное помутнение обнаружили на среде Сатона, на вторые сут картина практически не изменилось.

Предлагаемая среда показала высокие дифференцирующие и ингибирующие свойства. Колонии появились на первые сут в количестве от 4 до 12 в чашках с тест штаммами и с нативным материалом. На вторые сут обнаружили обильный рост в обеих чашках до 23 колонии, без сопутствующей микрофлоры, что является показателем высокой ингибирующей активности. Рост отличался не только числом, но и характером и размером колонии.

Заключение. Таким образом, проведенные исследования показали, что универсальная среда (М-10), для микобактериоподобных микроорганизмов обладает хорошими ростовыми свойствами на фоне высокой активности ингибирующей постороннюю микрофлору свойств. Кроме того, среда отличается от остальных вариантов по массивности выросших колонии, что в конечном итоге является показателем диагностической ценности и практической значимости универсальной среды.

Литература

1. Баратов, М.О. Сравнительное изучение наиболее часто используемых сред для выделения коринебактерий / М.О.Баратов, М.М.Ахмедов, О.П.Сакидибиров // Повышение продуктивности с/х. животных и птицы на основе инновационных достижений: мат. Всерос. науч.- практ. конф. - Новочеркасск, 2009. - С. 64-67.

ЕГЕПШАРНЫЙ

Врач

2. Биргер, М.О. Справочник по микробиологическим и вирусологическим методам исследования / М.О.Бир-гер, Е.А.Ведьмина, В.В.Влодавец. - М.: Медицина, 1985. - 261 с.

3. Высоцкий, В.В. Сравнительное электронно-микроскопическое изучение 8 представителей рода Corynebacterium, выращенных на твердой питательной среде в стационарной фазе развития / В.В.Высоцкий, И.К.Мазурова, Е.А.Шмелева // Микробиология. - 1976. - № 7. - С. 121-125.

4. Сухие микробиологические питательные среды: Каталог / М.М.Меджидов [и др.]. - Махачкала, 1998. - 78 с.

5. Кислотоустойчивые микроорганизмы - микобактерии, нокардии, родококки: химический состав, биологические свойства, антигенная структура / Р.А.Нуратинов [и др.] // Проблемы туберкулеза. - 2001. - № 5. - С. 54-58.

6. Нестеренко, О.А. Нокардиоподобные и коринеподобные бактерии / О.А.Нестеренко. - Киев: Наукова Думка. - 1985. - С. 320-333.

iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.

7. Шапелева, Р.Г. Сравнительное изучение питательных сред для выделения коринебактерий / Р.Г.Шапеле-ва, З.Г.Андреева, Г.П.Сокольникова // Микробиология. - 1989. - № 5. - С. 62-64.

VERSATILE MEDIUM FOR MYCOBACTERIA-LIKE MICROORGANISMS

Baratov M.O. - Candidate of Veterinary Sciences; 2NaimanovA.H. - Doctor of Veterinary Medicine,

professor; 1Nazhalov M.I. - researcher; 1Verdieva E.A. - researcher.

1Caspian Zonal - Research Veterinary Institute, Makhachkala (e-mail: alama500@rambler.ru.).

2All-Russian Scientific and Research Institute of Experimental Veterinary Medicine J.R.Kovalenko,

Moscow (tel. +7(495) 995-88-67).

For bacteriological identification of cultures isolated from tuberculin-positive animals various nutrient media are used; it complicates the detection. The aim of the work was to design a whole nutrient medium for cultivation of carbon-oxidizing microorganisms. Methods and materials: medium for isolation of Corinebacterium (Vinogradsky nitrate agar, Sauton's medium, blood and telluric agar, Clauberg's medium II, serum agar, Buchin's agar), Nocardia and Rhodococci (Muntz's medium, UM agar, nutrient broth, medium from oatmeal flour, dextrose agar) failed laboratory trials because of various reasons. The proposed versatile medium (M-10) meets the requirements put forward for nutrient media, first of all for plastic materials and energy resources. Distilled water as a basic element for microorganism life was replaced by the geothermal water which differs by qualitative and quantitative content of micro- and macroelements and the content of carbons. The investigation results: corinebacterium, Nocardia, and Rhodococci test-strains (Corynebacterium xerosis N1911, N.asteroides VKMAc 1077 and R. Bronchialis IMBAc 737) were used for cultivation and epizootic cultures from environmental objects (soil, fodder, cattle manure and blood) were used as native materials. Cultivation rate, growth rate, inhibition of secondary microflora, availability in common laboratories, simplicity and complexity of production were subjected to comparative studies. Conclusion: the studies showed the advantages of the proposed medium on the studied features enabling to ensure a high level of diagnostic trials.

KEYwORDS: corynebacterium, Nocardia, Rhodococcus, nutrient medium, mycobacterium-like, hydrocarbon-versatile, geothermal water.

1. Baratov, M.O. Sravnitelnoe izuchenie naibolee chaste ispolzuemyh sred dlya vydeleniya korinebakteriy[A comparative study of the most often used media for corynebacteria isolation] / M.O.Baratov, M.M.Ahmedov,

0.P.Sakidibirov // «Povyshenie produktivnosti s/h. zhivotnyh i ptitsy na osnove innovatsionnyh dostizheniy» - Improving livestock and poultry production rate basing on innovative achievements: proceedings from All-Russian scientific and practical conference. - Novocherkassk, 2009. - P. 64 - 67.

2. Birger, M.O. Spravochnik po mikrobiologicheskim i virusologicheskim metodam issledovaniya [A reference of microbiological and virological research methods] / M.O.Birger, E.A.Vedmina, V.V.Vlodavets. - Moscow: Meditsina, 1985. - 261 p.

3. Vysotsky, V.V. Sravnitelnoe elektronno - mikroskopicheskoe izuchenie 8 predstaviteley roda Corynebacterium, vyrashhennyh na tverdoy pitatelnoy srede v statsionarnoy faze razvitiya [Comparative electronic microscope-based study of 8 species of Corynebacteriumgenus, grown on solid medium in the stationary phase of development ] / V.V.Vysotsky,

1.K.Mazurova, E.A.Shmeleva // Mikrobiologiya. - 1976. - Vol.7. - P. 121-125.

4. Suhie mikrobiologicheskie pitatelnye sredy: Katalog [Dry microbiological nutrient media: Catalogue] / M.M.Medzhidov [et al.] - Mahachkala, 1998. - 78 p.

References

НАУЧНО-ПРОИЗВОДСТВЕННЫМ ЖУРНАЛ

№ 3/2016

5. Kislotoustoychivye mikroorganizmy - mikobakterii, nokardii, rodokokki: himicheskiy sostav, biologicheskie svoystva, antigennaya struktura [Acid bacteria - Mycobacterium pectoris, Nocardia, Rhodococcus: chemical composition, biological properties, antigenic structure] / R.A.Nuratinov[et al.] // Problemy tuberkuleza. - 2001. - Vol.5. - P.54-58.

6. Nesterenko, O.A. Nokardiopodobnye i korinepodobnye bakterii [Nokardia-like and Corynebacterium-like bacteria] / O.A.Nesterenko. - Kiev «Naukova Dumka» - 1985. - P. 320-333.

7. Shapeleva, R.G. Sravnitelnoye izuchenie pitatelnyh sred dlya vydeleniya korinebakteriy [A comparative study of nutrient media for corynebacteria isolation] / R.G.Shapeleva, Z.G.Andreeva, G.P.Sokolnikova // Mikrobiologiya. - 1989. - Vol. 5. - P. 62-64.

УДК: 619:614.31+614.78:637.12

ОРГАНИЗАЦИЯ ВЕТЕРИНАРНО-САНИТАРНОЙ ЭКСПЕРТИЗЫ МОЛОКА И МОЛОЧНЫХ ПРОДУКТОВ В ГОРОДЕ

Р.Р.Нигматзанов - аспирант; Е.Н.Трофимова - доктор ветеринарных наук, доцент.

ФГБОУ ВО«Казанская государственная академия ветеринарной медицины им.Н.Э.Баумана», г.Казань (420029, г.Казань, ул.Сибирский тракт, 35; e-mail: rais0818@mail.ru, alenatro@mail.ru).

Молоко и молочные продукты являются ценнейшими продуктами питания человека. На продовольственных рынках они реализуются в большом объеме. Оценка качества молока и молочной продукции осуществляется в соответствии с требованиями действующего международного и российского законодательства ветеринарными специалистами государственной ветеринарной службы. Целью данной работы явилось изучение организации ветеринарно-санитарной экспертизы молока и молочных продуктов в условиях г.Казань, Ижевск, Чебоксары. Материалы и методы. Исследования контрольной и экспертной деятельности ветеринарных специалистов в некоторых городах Приволжского федерального округа осуществляли за 5 лет монографическим, статистическим, микробиологическими методами. Результаты исследований. Результаты проведенных исследований позволили установить систему и порядок организации ветеринарно-санитарной экспертизы молока и молочных продуктов в условиях крупных городов, являющихся центрами субъектов Российской Федерации. Объемы проводимых ветеринарно-санитарных экспертиз молока и молочной продукции мало зависят от объема поступающего молока и молочной продукции. За анализируемый период (с 2010 по 2014 гг.) на продовольственные рынки и магазины г.Казани поступило 2 438,6 тыс. тонн молока и молочной продукции, за 5 лет проведено 20993 экспертизы, в Чебоксары, соответственно, поступило 2789,96 тыс. тонн продукции и проведено 102790 экспертиз и в г.Ижевске сотрудниками ГЛВСЭ проведено 44243 экспертизы, а поступило гораздо меньше молока и молочной продукции на торговые площадки (250,66 тыс. тонн). Заключение. По результатам ветеринарно-са-нитарной экспертизы исследуемую продукцию допускали в свободную реализацию, переработку в зависимости от степени соответствии требованиям технического регламента. Продукция с низким качеством подвергалась браковке с последующей переработкой в корм животным или же уничтожению: в г.Казани забраковано за 20102014 гг. 5,47 т. молока и молочной продукции, в Чебоксарах - 1,95 т, в Ижевске - 0,3 т соответственно.

КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: молоко и молочная продукция, ветеринарно-санитарная экспертиза, качество, безопасность, организация государственного ветеринарного надзора.

Поступающая ежедневно на рынки и торговые комплексы сельскохозяйственная продукция формирует продовольственный рынок [11]. Одним из ключевых элементов потребительского рынка является молоко и молочные продукты. Значимость сегмента молока и молочных продуктов на потребительском рынке обуславливается не только значительными объемами производства и потребления данного продукта в стране, но и его важностью в рационе питания человека наряду с мясом и другими продуктами питания [10, 12, 13]. В состав молока входит более 200 сложных по химической структуре компонентов, многие из которых природа не повторила ни в одном из продуктов [14]. Молоко и молочная продукция, как и другая продукция животного происхождения, может быть потенциальной угрозой для здоровья человека [7, 9], соответственно, должна

быть получена от здоровых животных и соответствовать показателям безопасности. Вместе с тем, молоко и продукты из него могут быть источниками возбудителей многих инфекционных заболеваний, прежде всего ток-сикоинфекций, токсикозов бактериального происхождения [13]. Причиной может быть нарушение технологии получения, транспортировки, переработки, хранения и реализации молока и молочных продуктов. Таким образом, одной из важнейших задач ветеринарной службы является правильная организация ветеринарно-сани-тарного контроля на всех этапах получения, транспортировки, закупки, переработки, хранения и реализации [8]. Оценка соответствия молока и молочной продукции осуществляется в соответствии с действующим международным и российским законодательством [2, 3]. Основная цель и задача госветнадзора - исключение из

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.