CC BY
36
УДК 636.22/.28.087.8
ВЛИЯНИЕ ВЫПАИВАНИЯ ТЕЛЯТАМ РАЗНЫХ ДОЗ ПРОБИОТИКА «ПРОВАГЕН» И КОМПЛЕКСА ЭТОГО ПРОБИОТИКА С ХИТОЗАНОМ
НА ЛЕЙКОГРАММУ
Е.В. КРАПИВИНА. Д.В. ИВАНОВ, А.И. ФЕСЬКОВ ФГБОУ ВПО «Брянская государственная сельскохозяйственная академия
А.И. АЛБУЛОВ, О.В. БУХАНЦЕВ (ВЕШИ биологической промышленности)
ВВЕДЕНИЕ
В настоящее время твердо установлено, что изменения состава крови являются важными показателями состояния гомеостаза организма [1, 2]. Так, повышение уровня нейтро-филов в крови сверх нормативных значений, снижение содержания лимфоцитов и эозинофи-лов свидетельствует о развитии в организме стрессорной реакции адаптационного синдрома [3, 4]. Пробиотики, вводимые в желудочно-кишечный тракт животных, вызывают изменения метаболизма, что отражается на клеточном составе крови [5].
Целыо наших исследований было изучение влияния выпаивания телятам разных доз п роб нотиса «проваген» и комплекса этого пробиотика с хитозаном на их лейкограмму.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ Для достижения поставленной цели были проведены 2 эксперимента. Для проведения 1 научно-хозяйственного опыта на МТФ СПК Агрофирма "Культура" с учетом живой массы и интенсивности роста методом парных аналогов были сформированы 3 группы (по 10 голов) телят черно-пестрой породы 1-1,5-месячного возраста: 1 группа - контрольная. 2 и 3 -опытные. Телятам 2 группы ежедневно в течение 7 суток выпаивали пробиогик «Проваген» (14 г/голову), животным 2 группы - комплекс этого пробиотика (14 г/голову) с хитозаном (0,8 г/голову). Для проведения 2 научно-хозяйственного опыта на той же МТФ СПК Агрофирма "Культура" с учетом живой массы и интенсивности роста методом парных аналогов были сформированы 3 группы телят черно-пестрой породы 1-1,5-месячного возраста: 1 группа - контрольная (7 голов), 2 (6 голов) и 3 (7 голов) - опытные. Телятам 2 группы ежедневно в течение 7 суток выпаивали пробиотик «Проваген» (28 г/голову), животным 2 группы - комплекс этого пробиотика (28 г/голову) с хитозаном (1,6 г/голову). Телята содержались в условиях отвечающих ветеринарно-зос гигиеническим требованиям, получали хозяйствен-
ный рацион в соответствии с общепринятыми нормами [6]. Эксперименты проводились в соответствии с «Правилами проведения работ с использованием экспериментальных животных» (приложение к приказу Министерства здравоохранения СССР от 12.08.1977 г. № 755). Пробы крови брали утром до кормления из яремной вены перед началом 1 опыта (у 10 животных из контрольной группы и 5 телят из каждой опытной) и после выпаивания препаратов у 5 голов из каждой группы.
Количество лейкоцитов в крови у телят определяли прямым подсчетом в камере Го-ряева, гематокрит - в гематокригаой центрифуге. Лейкоцитарную формулу подсчитывали (на трех стеклах по 600 клеток на кажлом, используя трехпольный метод Филнгшченко) в мазках, окрашенных по Романовскому-Гимза
Полученные цифровые данные обработаны методом вариационной статистики. Для выявления статистически значимых различий использован критерий Стьюдента-Фишера по Н. А. Плохинскому [7]. В качестве значений физиологической нормы принимали интервалы соответствующих показателей, приведенные в литературе [8, 9].
РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ В результате анализа проб крови животных подопытных групп, использованных в 1 опыте, установлено (табл. 1), что перед началом опыта содержание лейкоцитов соответствовало нормативным значениям и по окончании его существенно не изменялось.
Относительное содержание палочкоядерных нейтрофилов в крови у животных подопытных групп перед началом опыта соответствовало нормативным значениям. После окончания опыта установлено значительное увеличение числа этих клеток у животных контрольной группы (на 252,37%, р<0,05) по сравнению с доопытным периодом, что указывает на наличие стрессорной реакции. У животных, получавших препараты, существенного изменения содержания в крови этих клеток не отмечено. При этом уровень палочкоядерных нейтрофилов в крови у телят 3 группы был достоверно ниже (на 74,44%), чем у контрольных.
Относительное количество сегментоядерных нейтрофилов и сумма нейтрофилов всех ядерных форм в крови у животных 1 и 2 групп перед началом опыта соответствовали нормативным значениям, а у телят 3 группы несколько превышало их. После окончания опыта у животных контрольной группы отмечена тенденция к повышению количества как сегментоядерных нейтрофилов (на 32,30%), так и суммы всех нейтрофилов (на 62,12%), что привело к значительному превышению нормативных значений. У животных 2 и 3 групп после выпаивания препаратов обнаружена обратная тенденция - снижение в крови уровня всех нейтрофилов (на 18,38 и 24.47%) и, в частности сегментоядерных (на 27,43 и 29,75% соответственно).
Относительное количество :юзинофилов в крови у животных подопытных групп перед началом опыта соответствовало нормативным значениям, но у телят 1 группы их было больше на 268%, чем у животных 2 группы и на '513,33% (р>0.05) - 3 группы. Это указывает на более низкую активность пучковой зоны коры надпочечников у животных контрольной группы по сравнению с опытными. После окончания опьгга у животных 2 и 3 групп уровень эозинофилов в крови изменился незначительно, а у контрольных телят снизился на 83,70%, что указывает на повышение уровня глюкокоргикоидов, характерное для стрессорной реакции.
Таблица 1
Лейкограмма подопытных телят (I опыт)
Показатели Перед начатом опыта После выпаивания препаратов
1 группа, п=10 2 группа, п=5 3 группа, п=5 1 группа, п=5 2 группа, п=5 3 группа, п=5
Лейкоциты, 10у/л 9,17*0,60 10,29*2,48 10,88±1,25 10,32*1,42 8,99*1,04 13,14*3,97
Палочкоядерные нейтрофилы, % 4,22±1,20 3,24±2,48 2,45*0,30 14,87*3,80* 5,05*1,82 3,80*0,48*
Сегментоядерные нейтрофилы, % 26,93±3,33 26,69*5,41 36,57±6,Н 35,63±6,55 19,37*3,47 25,69*1,57
Сумма нейтрофилов, % 31,15±4,12 29,92*6,74 39,03±1,14 50,50*10,16 24,42*5,09 29,48*1,28
Сумма нейтрофилов, 109/л 2,99*0,53 3,66±1,83 4,42±1,05 5,51*1,62 2,37*0,72 2,72*0,33
Эозинофилы, % 0,92*0,61 0,25*0,19 0,15±0,09 0,15±0,07 0,27*0,16 0,17*0,09
Базофилы, % 0,33±0,08 0,40±0,15 0,19*0,07 0,45±0,17 0,75*0,21 0,50*0,09 А
Моноциты, % 6,38*0,89 3,99*0,58 3,89*0,22* 1,73*0,20* 2,02*0,47 4,25*0,46**
Лимфоциты, % 61,21±4,28 65,80*6,00 56,70*6,04 47,17±10,10 72,55*4,98 65,61*1,34
Лимфоциты, 10ч/л 5,49±0,33 6,25±0,81 5,99±0,73 4,58*0,74 6,36*0,47 6,10*0,81
Примечания: здесь и далее - *- р< 0,05 к 1 группе, • - р< 0,05 - к 2 группе, А - р< 0,05 - к предыдущему периоду
Уровень базофилов в крови у животных подопытных групп в исследованных периодах соответствовал нормативным значениям. При этом установлена тенденция к повышению содержания этих клеток в конце опыта по сравнению с начальными значениями: у животных 1 группы на 36,36 %, у телят 2 группы на 87,90% и достоверное увеличение у животных 3 группы на 163,16%. Имеются сведения, что повышение уровня базофилов в крови сопутствует снижению активности щитовидной железы [10]. По-видимому, выпаивание пробиотика, а в ещё большей степени комплекса «Проваген» с хитозаном снижало (в нормативных пределах) активность щитовидной железы у телят.
Относительное количество моноцитов перед началом опыта в крови у животных 2 и 3 групп соответствовало средним нормативным значениям, а у животных контрольной группы - наиболее высоким. При этом содержание моноцитов у телят 3 группы было достоверно ниже на 39,03%, чем у животных 1 группы. После окончания опыта у животных I и 2 групп установлено снижение по сравнению с доопытным периодом уровня этих клеток на 72,88% (р<0,05) и 49,37% (р>0,05), а у телят 3 группы, напротив, повышение на 9,25% (р>0,05). При
этом содержание моноцитов в крови у телят 3 группы стало достоверно более высоким по сравнению с контрольными животными на 145,66% и с телятами 2 группы на 110,40%.
Учитывая повышенный уровень палочкоядерных нейгрофилов в крови у животных 1 группы по окончании опыта и снижение содержания эозинофилов, следует предположить, что при развитии стресса, вызванного, вероятно, воспалительным процессом, моноциты перешли в ткани в связи с большой потребностью организма в макрофагах.
Относительное количество лимфоцитов в крови у животных подопытных групп перед началом опыта соответствовало нормативным значениям без межгрупповых различий. После окончания опыта по сравнению с начальным периодом у животных 1 группы отмечена тенденция к снижению числа лимфоцитов на 22,94%, а у телят 2 и 3 групп - к повышению на 10,26 и 15,71% соответственно.
Б результате анализа проб крови животных подопытных групп, использованных во 2 опыте, установлено (табл. 2) отсутствие, в отличие от 1 опыта, стрессорного воздействия на организм телят, на что указывает соотЕ.етствие показателей лейкограммы животных контрольной группы нормативным значениям.
Таблица 2
Лейкограмма подопытных телят (2 опыт)
Показатели После выпаивания препаратов
1 фуппа, п=5 2 группа, п=5 3 группа, п=5
Лейкоциты, 10"/л 10,69±1,35 8,60*0,13 9,72*0,68
Палочкоядерные нейтрофилы, % 4,95±0,% 4,63*0,73 7,58±1,24
Сегментоядерные нейтрофилы, % 28,63*5,44 26,90±4,37 26,80*3,13
Сумма нейтрофилов, % 33,58*6,29 31,53±5,09 34,38±3,58
Сумма нейтрофилов, 10и/л 3,79±0,9б 2,72*0,44 3,39*0,52
Эозинофилы, % 0,18*0,05 0.15+0,05 0,58*0,25
Базофилы, % 0,34±0,07 0,23*0,09 0,40*0,10
Моноциты. % 2,20±0,38 1,92±0,33 1,83±0,26
Лимфоциты, % 63,70±6,61 66,15*4,94 62,80*3,51
Лимфоциты, 10у/л 6,60±0,68 5,68*0,40 6,07*0,43
Выпаивание препаратов в 2 раза более высоких дозах, чем в 1 опыте, не оказало существенного влияния на показатели лейкограммы животных опытных групп.
ВЫВОДЫ
Ежедневное выпаивание в течение; 7 суток телятам пробиотика «Проваген» в дозе 14 г/гол и комплекса этого пробиотика (14 г/гол) с хитозаном (0,8 г/гол) оказало антистрессорное действие на их организм, более выраженное при выпаивании комплекса препаратов. На это указывает, в отличие от контрольных животных, отсутствие увеличения числа палочкоядерных нейтрофилов и снижения уровня моноцитов в крови у телят, получавших комплекс препаратов.
Ежедневное выпаивание в течение 7 суток телятам пробиотика «Проваген» в дозе 28 г/гол и комплекса этого пробиотика (28 г/гол) с хитозаном (1,6 г/гол) при отсутствии дейст-
вия на подопытных животных стресс-факторов не оказало существенного воздействия на показатели лейкограммы.
ЛИТЕРАТУРА
1. Даштаянц, ГА. Клиническая гематология / Г.А. Даштаян. - Киев, Здоров'я, 1978.- 288 с.
2. Симонян, Г.А. Ветеринарная гематология / Г.А. Симонян, Ф.Ф. Хисамутдинов. -М.: Колос, 1995.-256 с.
3. Чернушенко, Е.Ф. Иммунологические исследования в клинике / Е.Ф. Чернушен-ко, Л.С. Когосова. - Киев: Здоров'я, 1978.- 160 с.
4. Гаркави, Л.Х. Адаптационные реакции и резистентность организма / Л.Х. 1 аркави, Е.Б. Квакина, М.А. Уколова. - Ростов-на-Дону: изд-во Ростовского ун-та, 1990.- 224 с.
5. Крапивина, Е.В. Влияние разных доз пробиотика «Тетралактобактерин» на морфо-(шилимическис характеристики гомеоотаза телят / Е.В. Крапивина, Д.В. Иванои, Я.В. Лифа-иов //ВестникОрелГАУ, 2011. -№4 (31). -С. 41-44.
6. Нормы и рационы кормления сельскохозяйственных животных. Справочное пособие / Под ред. А.П. Калашникова, В.И. Фясинина, В.В. Щеглова, Н.И. Клейменова: 3-е изд. перераб. и доп. - М.: Агропромиздат, 2003. - 456 с.
7. Плохинский, Н.А. Биометрия. - Изд-во Сибирского отделения АН СССР, Новосибирск, 1961.-362 с.
8. Карпуть, И.М. Гематологический атлас сельскохозяйственных животных // Минск: Ураджай, 1986,- 183 с.
9. Методы ветеринарно-клинической лабораторной диагностики: Справочник / И.П. Кондрахин, А.В. Архипов, В.И. Левченко и др.; Под ред. И.П. Кондрахина. - М.: КолосС., 2004. - 520 с.
10. Исследование системы крови в клинической практике / Под ред. Г.И. Козинца и В.А.Макарова//М.: Триада-Х, 1997. 480 с.
EFFECT OF DIFFERENT DOSES OF WATERING TO CALVES PROBIOTICS "PROVAGEN"
AND COMPLEX OF THIS PROBIOTICS WITH CH1TOSAN ON LEYKOGRAMM
E.V. Krapivin, D.V. Ivanov, A.I. Feskov (Bryansk State Agricultural Academy) A.I. Albulov, O.V. Buhantsev (VNITI biological industry)
Daily watering for 7 days calves probiotic "Provagen" at a dose of 14 g / calve and a complex of probiotic (14 g / calve) with chitosan (0.8 g / calve) had antisttess effect on their organism, more pronounced for watering the complex of products . This is indicated, in contrast to control animals, no increase in the number of stab neutrophils and monocytes in reducing the blood of calves treated with complex products.
Daily watering for 7 days calves probiotic "Provagen" at a dose of 28 g / calve and a complexof probiotic (28 g / calve) with chitosan (1.6 g / calve) in the absence of experimental animals to stress factors had no significant impact on the performance Jeykogramm.
