CC BY
42
Приложение
при первичной экстранодальной диффузной В-ККЛ составила 72%, а при нодальной - 39% (р = 0,005); 5-летняя бессобытийная выживаемость (БСВ) равна 70% и 39% соответственно (р = 0,009). При III-IV стадии лимфомы, общем состоянии по шкале ECOG, равном 2-4 баллам, уровне сывороточного ЛДГ более 450 ЕД/л, высоком и высоком/промежуточном риске раннего прогрессирования по МПИ, возрасте больных моложе 60 лет отдаленные результаты лечения были достоверно лучше при экстранодальной диффузной В-ККЛ (р < 0,05). На результативность лечения экстранодальной диффузной В-ККЛ влияет возраст: ОВ 91% против 50% (р = 0,001); БСВ 79% против 56% (р = 0,01) и достижение полной ремиссии в результате терапии I линии терапии: ОВ 93% против 36% (р = 0,001); БСВ 84% против 0% (р = 0,001). Нами изучено прогностическое значение биологических характеристик первич-
ной экстранодальной диффузной В-ККЛ. Показатели общей и бессобытийной выживаемости лучше при центробластном морфологическом варианте: ОВ 68% против 52% (р = 0,05); БСВ 65% против 42% (р = 0,08). Экстранодальная локализация при non-GCB - типе диффузной В-ККЛ оказывают благоприятное влияние на показатели общей и бессобытийной выживаемости: ОВ 70% против 32% (р = 0,01); БСВ 59% против 32% (р = 0,01). В группе больных BCL-2 - позитивной диффузной В-ККЛ экстранодальная локализация по сравнения с нодальной и проведение иммунохимиотерапии благоприятно влияют на отдаленные показатели лечения: ОВ 74% против 50% (р = 0,05); БСВ 68% против 36% (р = 0,04). При PdCD4 -позитивной первичной экстранодальной диффузной В-ККЛ проведение иммунохимиотерапии ритуксимабом улучшает показатели общей выживаемости (р = 0,07).
Концентрация гомоцистеина в сыворотке крови спортсменов-разрядников с мутациями
в генах MTHFR и MTR
М. А. Суховольская, Т. Н. Субботина
Красноярский филиал ФГБУ Гематологический научный центр Минздравсоцразвития России, Москва; Красноярский научный центр СО РАН,
Сибирский федеральный университет, Красноярск
Введение. Гомоцистеин (ГЦ) способен оказывать повреждающее действие на эндотелий сосудов, являясь независимым фактором риска развития сердечно-сосудистой патологии. Гипергомоцистеинемия (ГГЦ) является одной из причин возникновения ряда осложнений беременности и врожденных патологий плода. На уровень ГЦ в крови влияют такие факторы, как питание: поступление фолиевой кислоты, витаминов В6 и B12, диета, обогащенная метионином, употребление кофе, прием ряда медикаментов и курение. Интенсивные физические нагрузки и соревнования у спортсменов сопровождаются стрессовой реакцией и сопряженным изменением метаболизма ГЦ. Хорошо известны наследственные особенности обмена метионина и ГЦ, негативный эффект которых в отношении развития ГГЦ может усиливаться при интенсивных спортивных нагрузках и употреблении некоторых "спортивных" диет. В связи с этим обсуждается целесообразность скрининга спортсменов на носительство мутаций ферментов обмена метионина с целью разработки индивидуальных профилактических программ. Целью настоящей работы явилось выявление зависимости концентрации ГЦ в сыворотке крови спортсменов-разрядников с мутациями C677T (Ala222Val) в гене MTHFR (rs1801133) и A2756G (Asp919Gly) в гене MTR (rs1805087).
Материалы и методы. Группу обследованных составили 107 добровольцев (59 женщин и 48 мужчин, средний возраст 28,86 ± 11,85 года), среди которых 50 спортсменов-разрядников и 57 условно здоровых людей (контрольная группа), находящихся на своей обычной диете и не имеющих на момент исследования клинических симптомов. С образцами ДНК была проведена ПЦР с детекцией продуктов амплификации в режиме реального времени. Определение
концентрации ГЦ в сыворотке крови проводили энзиматическим методом на автоматическом биохимическом анализаторе Sapphire-400. Статистическую обработку полученных результатов проводили с помощью программы Statistica 7.
Результаты и обсуждение. Как в контрольной группе, так и у спортсменов-разрядников. не обнаружено статистически значимого влияния полиморфизма A2756G в гене MTR на уровень ГЦ в крови. Вместе с тем, показано статистически значимое увеличение концентрации ГЦ в крови спортсменов-разрядников, имеющих гомозиготное состояние гена C677T MTHFR, как по сравнению со спортсменами, не имеющими мутацию (р < 0,001), так и по сравнению со спортсменами, имеющими гетерозиготный аллель (р = 0,0017). Статистически значимых изменений уровня ГЦ у людей, имеющих гомозиготный полиморфизм гена MTHFR в контрольной группе не обнаружено. У спортсменов-разрядников, имеющих мутацию C677T в гене MTHFR в гомозиготном состоянии показано статистически значимое (р = 0,005) повышение уровня ГЦ по сравнению с контрольной группой гомозиготных лиц. В отношении мутации A2756G в гене MTR у спор-тсменов-разрядников, имеющих таковую в гетерозиготном состоянии, показано статистически значимое (р = 0,015) понижение уровня ГЦ по сравнению с контрольной группой лиц, гетерозиготных по исследуемому полиморфизму.
Заключение. Спортсмены-разрядники, имеющие мутацию C677T в гене MTHFR, входят в потенциальную группу генетического риска развития ГГЦ. А гетерозиготное носи-тельство мутации A2756G в гене MTR у спортсменов можно рассматривать в качестве протективной в отношении развития ГГЦ.
Цитокиновый профиль и влияние аллогенных мезенхимальных стволовых клеток костного мозга на пролиферацию и апоптоз нормальных гемапоэтических клеток-предшественников и лейкемических клеток
О. Татаринова, Е.Ю. Осипова, Т.В. Шаманская, С.А. Плясунова, О.В. Козлитина, Б.Б. Пурбуева, З.М. Дышлевая, Е.В. Скоробогатова,
С.А. Румянцев
Федеральный научно-клинический центр детской гематологии, онкологии и иммунологии им. Дмитрия Рогачева Минздравсоцразвития России,
Москва
Введение. В настоящее время различные свойства мезенхимальных стволовых клеток (МСК) нашли широкое терапевтическое применение в трансплантации, улучшая приживление и используя их для коррекции реакции "трансплантат против хозяина" (РТПХ). У МСК есть способность поддержать гемопоэз (например, через продукцию Г-КСМ, ГМ-КСФ), оказывать иммуномодулирующие действие (продуцируя IFN-y, IL-2, IL-6, IL-1 в, фНОа и хемокины - IL-8, MCP1, MIP-1P) и влиять на регенеративные процессы (через продукцию VEGF, FGF-основного, IGF-1, IL-6, TIMP-1/MMP-9). Возможно свое влияние МСК оказывают и на
лейкемические клетки у больных с гемобластозами. Цель работы - исследовать влияние аллогенных МСК костного мозга на способность лейкемических клеток к спонтанному и индуцированному апоптозу, влияние на пролиферативную активность нормальных гранулоцитарно-макрофагальных (ГМ) предшественников. А также оценка цитокинового профиля МСК в зависимости от длительности культивирования.
Материалы и методы. Лейкемические клетки были получены из образцов костного мозга пациентов (6 мес -17 лет) с впервые диагностированным острым лейкозом (ОЛ): В-острый лимфобластный лейкоз (В-ОЛЛ)-45,
81
Гематол. и трансфузиол., 2012, т. 57, № 3
Т-острый лимфобластный лейкоз (Т-ОЛЛ)-13, острый мие-лобластный лейкоз (ОМЛ)-19 реципиентов. МСК (от 54 здоровых доноров) культивировались в DMEM с добавлением 20% телячьей сыворотки. Клоногенное исследование ГМ-предшественников (от 15 здоровые доноры), было выполнено в полутвердой агаровой питательной среде. Чувствительность лейкемических клеток к цитотоксическим препаратам была исследована МТТ-тестом. Определение уровня спонтанного и индуцированного апоптоза в лейкемических клетках и проводили с помощью цитометрического набора Apoptosis Detection Kit II ("BD"). Цитокиновый профиль МСК костного мозга исследовали с применением на ранних (0-4) и поздних (5-10) пассажах.
Результаты и обсуждение. Использование подложки МСК стимулировало пролиферацию ГМ-предшественников. Эффективность клонирования была 27,9 (SD 1,5). При культивирование лейкемических клеток с MSC в течение 4 дней пропорция жизнеспособных клеток была более высокой в 47,2% при ОЛЛ, 63,1% при ОМЛ по сравнению с контрольными группами. Инкубация лейкемических клеток с МСК заканчивалась уменьшением чувствительности к цитара-
бину в 2 раза при В-ОЛЛ, в 1,5 раза при ОМЛ и 6 раз при Т-ОЛЛ. Во всех группах под влиянием МСК чувствительность лейкемических клеток к даунорубицину снижалась, чувствительность к метилпреднизолону увеличивалась в лейкемических клеток при ОЛЛ. Отмечалось снижение доли апоптотических клеток при использовании подложки из МСК. Исследование культур МСК показало, что они се-кретируют широкий спектр цитокинов (например, IL-2, IL-4, IL-6, IL-10; FGF, VEGF, sVCAM, ICAM), который может оказывать влияние и на жизнеспособности нормальных гематопоэтических клеток-предшественников и на лейкеми-ческие клетки. Наблюдалось некоторое изменение в уровня продукции различных цитокинов в зависимости от сроков культивирования.
Заключение. В результате исследования показано, что МСК могут оказывать свое влияние на чувствительность лейкемических клеток к химиопрепаратам in vitro. Функциональная способность МСК, которую они оказывают через продукцию цитокинов широкого профиля, может играть важную роль в регулировании иммунологических, реконструктивных и других процессов.
Лечение пожилых больных острыми миелоидными лейкозами
В.В. Троицкая, Е.Н. Паровичникова, А.В. Кохно, А.Н. Соколов, В.Г. Савченко ФГБУ Гематологический научный центр Минздравсоцразвития России, Москва
Введение. Острые миелоидные лейкозы (ОМЛ) - это болезнь пожилых людей. Медиана возраста при ОМЛ составляет 64 года. Результаты терапии пожилых больных существенно отличаются от таковых у молодых пациентов. Так, частота ремиссий была существенно ниже (45-50%), а ранняя летальность - существенно выше (30-40%), чем у больных моложе 60 лет. Всеми исследователями признано, что возраст пациента является независимым универсальным фактором прогноза при ОМЛ.
Материалы и методы. С 2002 г. Российской группой по изучению острых лейкозов инициировано нерандомизированное исследование по лечению пожилых больных ОМЛ, основное задачей которого стала оценка переносимости и выполнимости дифференцированных программ терапии больных от 60 до 70 лет и старше 70 лет. Все больные были разделены на две основные ветви исследования в соответствии с возрастом: 1-я - в возрасте от 60-69 лет - программа лечения "7 + 3" (даунорубицин 45 мг/м2) (3 курса) с последующей ротируемой схемой поддерживающего лечения; 2-я -70 лет и старше - программа терапии малыми дозами цита-рабина (МДЦ) (10 мг/м2 2 раза в сутки в течение 21-28 дней подкожно) в течение 3 лет.
Результаты и обсуждение. С 2002 г. в исследование было включено 46 больных (31 женщина и 15 мужчин) ОМЛ старше 60 лет: медиана возраста составила 69 лет
Возраст, годы
Показатель 60-69лет(n = 28) 70 лет и (n = старше 18)
”7 + 3” (n = 20) МДЦ (n = 8) "7 + 3" (n = 6) МДЦ (n = 12)
абс. % абс. % абс. % абс. %
Частота ремиссий 10 50 1 12,5 2 33 9 75
Ранняя летальность 5 25 1 12,5
Первичная резистентность 5 25 6 75 4 66 3 25
(60-79 лет). В возрасте 60-69 лет были 28 (61%) больных и в возрасте 70 лет и старше - 18 (29%). Вариант ОМЛ М1-2 (по FAB-классификации) был диагностирован у 45,6% больных, М4 - у 45,6%, М5 - у 6,5% и М6 - у 2,3% больных. При анализе частоты факторов неблагоприятного прогноза: вторичные ОМЛ и ОМЛ в исходе миелодиспластического синдрома диагностированы у 12 из 46 (26%) больных, число лейкоцитов более 30 х 109/л в дебюте заболевания - у 10 из 46 (22%). Прогностически неблагоприятный кариотип (-5/5q-, -7/7q- и комплексные нарушения) выявлен у 18 из 41 (44%) больного, все остальные больные были отнесены к группе промежуточного риска. Полученные результаты представлены в таблице.
Медиана длительности ремиссии составила 12 мес (296 мес): в группе "7 + 3" (60-69 лет) - 8 мес, в группе МДЦ (70 лет и старше) - 14 мес.
Как следует из таблицы, терапия МДЦ является эффективной программой лечения больных ОМЛ старше 70 лет, позволяющей достичь ремиссии у 75% больных в отличии от больных моложе 70 лет (12,5%). В целом, медиана длительности курса МДЦ составила 22 дня (13-28 дней), однако было отмечено, что у больных, у которых была достигнута полная ремиссия ОМЛ медиана длительности курса МДЦ составила 28 дней, у которых ремиссия ОМЛ не достигнута - 21 день. Это лишний раз доказывает необходимость проведения 28-дневных курсов терапии МДЦ. Частота инфекционных осложнений при проведении программы "7 + 3" составила 92,3%, а МДЦ - 82,4%. Смерть в ремиссии ОМЛ - 3 больных (2 от солидных опухолей, 1 от инфекции). На момент проведения анализа были живы 10 (21,7%) из 46 больных.
Заключение. По результатам проведенных исследований можно говорить, что больным ОМЛ старше 60 лет необходимо проведение химиотерапии, позволяющей достигнуть ремиссии в половине случаев; больным 60-70 лет показано проведение полихимиотерапии в стандартных дозах; химиотерапия МДЦ - существующая схема терапии для пациентов старше 70 лет; длительность курса должна составлять не менее 28 дней.
82
