CC BY
20© КОЛЛЕКТИВ АВТОРОВ, 2013
Л.Г.Горина1, И.В.Раковская1, О.И.Бархатова1, С.А.Гончарова1, Г.А.Левина1, НА.Крылова2
ЦИРКУЛИРУЮЩИЕ ИММУННЫЕ КОМПЛЕКСЫ КАК ДЕПО СОХРАНЕНИЯ КЛЕТОЧНЫХ КОМПОНЕНТОВ МИКОПЛАЗМ
1НИИ эпидемиологии и микроиологии им. Н.Ф.Гамалеи, Москва; 2Первый Московский государственный медицинский университет им. И.М.Сеченова.
Цель. Изучение возможности длительного сохранения в макроорганизме антигенов, ДНК клеток микоплазм и живых клеток патогена в составе ЦИК на фоне персистирующих антигенных биоструктур. Материалы и методы. Для определения антигенов и ДНК использовали реакции агрегат-гемагглютинации, прямой иммунофлюоресценции и метод ПЦР. Циркулирующие иммунные комплексы из проб сыворотки крови выделяли по M.Digeon et al., выделение микоплазм из ЦИК осуществляли на среде SP-4, видовую идентичность выделенных мини-колоний подтверждали методом ПЦР в реальном времени. Результаты. У больных с урогенитальной и респираторной патологией частота обнаружения антигенов Mycoplasma hominis, Ureaplasma urealyticum и Mycoplasma pneumoniae в свободном состоянии составила 63,3; 53,1 и 80,82% случаев соответственно. Специфические ЦИК у больных с верифицированным респираторным микоплазмозом через месяц от начала заболевания регистрировали у больных с тяжелым течением заболевания, при бронхитах и при заболеваниях верхних дыхательных путей — в 92,5; 74,7 и 25,7 % случаев соответственно. У детей, больных бронхиальной астмой, частота обнаружения антигенов и ДНК клеток M.pneumoniae в свободном состоянии составила 72,6 и 12,33%, в составе ЦИК — в 60,27 и в 43,8 случаев соответственно. Антигены и ДНК M.hominis в крови в этой группе больных были выявлены в 32,9 и 26,02% , в составе ЦИК — в 53,42 и 52,05% случаев соответственно. При повторном обследовании 12 детей после проведения этиотропного лечения (в основном, через 1,5—6 месяцев) в 75% случаев были обнаружены как антигены M. pneumoniae , так и антигены М. hominis в свободном состоянии и в составе ЦИК. ДНК клеток этих видов микоплазм выявили в 20 и 33% , в составе ЦИК—в 41,6 и 50% случаев соответственно. У 5 больных через 6 месяцев (в одном случае через 1 год) ДНК и антигены мико-плазм были идентифицированы в ЦИК или в сыворотке крови. При культивировании компонентов ЦИК, преципитированных из 5 образцов крови этой группы больных, содержащих ДНК М. hominis, в 4 случаях выделили культуру мини-колоний М. hominis. Заключение. Показана возможность длительной персистенции антигенов, ДНК и целых клеток микоплазм как в свободном состоянии, так и в составе ЦИК у больных с респираторной и урогенитальной патологией. Таким образом, ЦИК являются своеобразным депо, местом сохранения не только различных клеточных компонентов микоплазм, но и живых клеток.
Журн. микробирол., 2013, № 2, С. 74—82
Ключевые слова: микоплазмы, уреаплазма, антигены, ЦИК, ДНК, уроге-нитальная и респираторная инфекции
L.G.Gorina1, I.V.Rakovskaya1, O.I.Barkhatova1, S.A.Goncharova1, G.A.Levina1, N.A.Krylova2
CIRCULATING IMMUNE COMPLEXES AS A DEPOT OF CONSERVATION OF MYCOPLASMA CELL COMPONENTS
1Gamaleya Research Institute of Epidemiology and Microbiology, Moscow; 2Sechenov First Moscow State Medical University, Russia
Aim. Study the possibility of prolonged conservation in macroorganism of antigens, mycoplasma cell DNA and live pathogen cells as part of CIC against the background of persisting antigen biostructures. Materials and methods. Aggregatehemagglutination, direct immunofluorescence reactions and PCR method were used to determine antigens and DNA. Circulating immune complexes from blood sera samples were isolated by M. Digeon et al., mycoplasma isolation from CIC was carried out in SP-4 medium, species identity of the isolated mini-colonies was confirmed by real-time PCR method. Results. In patients with urogenital and respiratory pathology the frequency of detection of Мycoplasma hominis, Ureaplasma urealyticum and Mycoplasma pneumoniae in free state was 63.3, 53.1 and 80.82% of cases, respectively. Specific CIC in patients with verified respiratory mycoplasmosis 1 month after the onset of the disease were registered in patients with severe course of the disease, bronchitis and diseases of upper respiratory tract — in 92.5, 74.7 and 25.7% of cases, respectively. In children, bronchial asthma patients the frequency of detection of antigens and DNA of M. pneumoniae cells in free state was 72.6 and 12.33%, as part of CIC — in 60.27 and 43.8% of cases, respectively. Antigens and DNA of М. hominis in blood of this group of patients were detected in 32.9 and 26.02%, as part of CIC — in 53.42 and 52.05% of cases, respectively. During repeated examination of 12 children after etiotropic therapy execution (generally in 1.5 — 6 months) in 75% of cases antigens of both M. pneumoniae and М. hominis were detected in free state and as part of CIC. DNA of cells of these mycoplasma species were detected in 20 and 33%, as part of CIC — in 41.6 and 50% of cases, respectively. In 5 patients after 6 months (after 1 year in 1 case) mycoplasma antigens and DNA were identified in CIC or in blood sera. During cultivation of CIC components precipitated from 5 blood samples of patients of this group containing М. hominis DNA, culture of М. hominis mini-colonies were isolated in 4 cases. Conclusion. The possibility of prolonged persistence of antigens, DNA and whole mycoplasma cells in both free state and as part of CIC in patients with respiratory and urogenital pathology was shown. CIC are thus a peculiar depot, a place of conservation of not only various mycoplasma cell components, but also live cells.
Zh. Mikrobiol. (Moscow), 2013, No. 2, P. 74—82
Key words: mycoplasma, ureaplasma, antigens, CIC, DNA, urogenital and respiratory infections
ВВЕДЕНИЕ
Основными возбудителями урогенитального микоплазмоза являются Mycoplasma hominis, Ureaplasma urealyticum и Mycoplasma genitalium, респираторного — Mycoplasma pneumoniae [1, 6, 11]. Другие виды микоплазм,
обитающих в респираторном тракте человека (Mycoplasma hominis, Mycoplasma fermentans, Mycoplasma penetrans), значительно реже вызывают заболевания верхних дыхательных путей. В последние годы исследователей заинтересовал вопрос о причастности М. hominis к респираторным инфекциям, о чем свидетельствуют публикации по выявлению этой ми-коплазмы у детей с бронхиальной астмой и обструктивным бронхитом [6, 10, 13, 15, 16, 18].
Микоплазмы и их антигены способны длительно персистировать в макроорганизме, но форма и природа сохранения живых клеток и клеточных компонентов до сих пор не ясна. С помощью метода агрегации тромбоцитов показано, что при инфекции, обусловленной M. pneumoniae, в 41% случаев в первые две недели заболевания обнаруживается присутствие высокого уровня ЦИК в пробах сыворотки крови, размер этих комплексов составлял 19S и выше. В составе ЦИК, выделенных из проб сыворотки крови больных с микоплазменной инфекцией в реакции прямой имму-нофлюоресценции (РИФ), были выявлены микоплазменные антигены [3, 14, 17].
При исследовании в иммуноблоттинге ЦИК, также преципитирован-ных из проб сыворотки крови больных с респираторной патологией, были обнаружены белки M. pneumoniae с молекулярной массой в пределах от 37 до 170 kD (37, 58, 72, 130 и 170). Антигенный профиль специфических биоструктур М. hominis, преципитированных из образцов крови пациентов с урогенитальной инфекцией, располагался в зоне от 25 до 110 kD (55, 60, 58, 80 и 110). Эти результаты свидетельствуют о том, что при респираторных и урогенитальных микоплазменных инфекциях в организме присутствуют как антигены в свободном состоянии, так и в составе ЦИК, основная часть которых относится к высокоантигенным мембранным белкам, ответственным за адгезию [4, 5].
Ранее было показано, что после заражения кроликов М. arthritidis, М. fermentans микоплазменные антигены длительно (6 месяцев — срок наблюдения) сохранялись в костном мозге и в органах иммуногенеза [4]. Дальнейшие исследования, проведенные в этом направлении, свидетельствуют о том, что антигены М. hominis и U. urealyticum персистируют в крови инфицированных кроликов в составе ЦИК в течение 6 и 8,5 месяцев, а ДНК клеток — 6 и 2,5 месяца соответственно [4, 12]. Недавно были опубликованы данные о выделении из проб сыворотки крови пациентов, содержащих антигены M. hominis, мини-колоний размером менее 10 мкм, которые с трудом пассировались и никогда не приобретали классическую для микоплазм форму [8]. Можно предположить, что ЦИК представляют собой своеобразное депо сохранения не только антигенов и ДНК мико-плазм, но и атипичных клеток микроорганизмов.
Выявление специфических ЦИК и дифференциация их состава может дать ценную информацию о динамике образования ЦИК, о наличие связи между их длительной персистенцией с продолжительностью и тяжестью заболевания и, следовательно, может иметь диагностическое значение. Кроме того, высокий уровень ЦИК может расцениваться как фактор риска возникновения рецидива, и эти данные могут быть использованы для прогнозирования течения болезни и ответа на этиотропную терапию [3, 9].
Цель работы — изучение возможности длительного сохранения в макроорганизме антигенов, ДНК клеток микоплазм и живых клеток патогена в составе ЦИК на фоне персистирующих антигенных биоструктур.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
Из клиники детских болезней I МГМУ им. И.М. Сеченова были получены 73 пробы сыворотки крови детей в возрасте от 1 до 4 лет, больных бронхиальной астмой (БА) и 300 детей от 7 до 14 лет с респираторным микоплазмозом (РМ). 468 образцов сыворотки крови пациентов с уроге-нитальными инфекциями с диагнозами острого и хронического уретрита были получены из медико-санитарной части Федерального Управления медико-биологических и экстремальных проблем при МЗ России.
В работе использовали М. pneumoniae (FH), М. hominis (H-34), U. urealyticum (8 серотип), которые выращивали на жидкой среде, приготовленной по обычной методике, используемой для культивирования мико-плазм и уреаплазм. Антисыворотки к антигенам указанных видов микроорганизмов получали путём иммунизации кроликов фракциями цитоплазматических мембран клеток микоплазм по схеме, разработанной в лаборатории микоплазм и L-форм бактерий. В качестве антигенов были использованы как целые клетки микоплазм, так и биополимеры цитоплаз-матических мембран и цитоплазматическая фракция клеток микоплазм. Реакцию агрегат-гемагглютинации (РАГА) применяли для идентификации антигенов микоплазм и уреаплазм, определение антигенов и ДНК в составе ЦИК в пробах сыворотки крови пациентов проводили методами РИФ и ПЦР. Для определения специфических антител к микоплазмам использовали РПГА. Общие ЦИК выделяли из проб сыворотки крови по M.Digeon et al. [14] путем преципитации 3,5% полиэтиленгликолем. Постановку РАГА, РПГА, РИФ осуществляли по [2]. Выявление ДНК микоплазм в ПЦР осуществляли с помощью тест-систем ООО Интерлабсервис ЦНИИ эпидемиологии.
Для выделения микоплазм из сыворотки крови и ЦИК использовали среду SP-4, рекомендуемую для выделения трудно культивируемых видов микоплазм [19]. Видовую идентичность выделенных мини-колоний M. ^minis подтверждали в РИФ, методом классической ПЦР и ПЦР-РВ. Для этого смывы, сделанные физиологическим раствором с чашек с мини-колониями разных пассажей, исследовали с помощью реагентов ЗАО «Синтол» для качественного и количественного определения микоплазм. Анализ проводили согласно инструкции (версия 230408 ANK).
Результаты обрабатывали согласно общепринятым статистическим методам.
РЕЗУЛ ЬТАТЫ
Данные о длительной персистенции в организме инфицированных животных антигенов и ДНК клеток микоплазм и уреаплазм в составе ЦИК послужили основой для аналогичных исследований антигенемии у больных с урогенитальной и респираторной патологией.
Комплексное лабораторное обследование 158 мужчин в возрасте от 18
до 52 лет с диагнозами хронического и острого уретрита показало, что антигены и ДНК М. hominis были выявлены в 63,3 и 4,5%, U. urealyticum
— в 53,1 и 6,3% случаев соответственно. В соскобах из урогенитального тракта у этих пациентов число положительных результатов по ДНК было выше: так, ДНК клеток М. hominis была обнаружена в 8,86%, а U. urealyticum — в 31,64% случаев. Эти данные позволили предположить, что низкая частота обнаружения в крови микоплазменной и уреаплазменной ДНК обусловлена тем, что значительная часть ДНК находится в связанном состоянии в составе ЦИК.
Эти же методы исследования были использованы для выяснения пер-систенции антигенов и ДНК у больных с респираторной патологией. Аспекты иммунокомплексной патологии при РМ достаточно внимательно рассматривались рядом исследователей [3, 17]. Наличие специфических ЦИК при микоплазменной инфекции было показано ранее, однако мало сведений о частоте их выявления, динамике образования и элиминации при РМ у детей. Анализ данных, полученных нами, показал, что из 300 обследованных детей в возрасте от 1 года до 14 лет с атипичным течением респираторных заболеваний РМ был верифицирован у 146 больных с одинаковой частотой во всех возрастных группах. В 80,82% случаев были обнаружены антигены M. pneumoniae, а в 62% — специфические антитела к ним. Частота выявления специфических иммунных комплексов в РИФ составила 87,5%. Изучение закономерностей обнаружения ЦИК и длительности их персистенции показало, что в острый период заболевания специфические ЦИК, в состав которых входили антигены M. pneumoniae, у больных с легким (n=33) и среднетяжелым (n=195) течением выявляли в 90,0 и 79,1% случаев соответственно, тогда как при тяжелом (n=72) — только у половины больных. У последних специфические ЦИК длительно циркулировали в крови, и через месяц от начала заболевания их регистрировали у 92,5% больных, а в группах детей с легким и среднетяжелым течением эти показатели составили 48,0 и 33,3% соответственно.
Анализ результатов, полученных при исследовании ЦИК у детей с различными клиническими формами РМ, показал, что в острый период заболевания специфические ЦИК регистрировали значительно реже у больных пневмонией (n=129), чем при бронхитах (n=109) и заболеваниях верхних дыхательных путей (n=62): 25,7; 52,9; 72,7% соответственно. Существенных различий в показателях общих ЦИК обнаружено не было. Через месяц после начала заболевания специфические ЦИК были обнаружены при пневмонии в 96,2% случаев, при бронхитах — в 74,7% и в 25,7%
— при заболеваниях верхних дыхательных путей.
Эти показатели позволили предположить, что такой высокий процент обнаружения микоплазменных антигенов в составе ЦИК может служить косвенным показателем эффективности этиотропной терапии. Учитывая тот факт, что в последнее время диагностика респираторных микоплазмо-зов основана, главным образом, на ПЦР-диагностике, мы проследили длительность персистенции ДНК M. pneumoniae и М. hominis в составе ЦИК у детей, больных БА.
Таблица 1. Частота обнаружения антигенов и ДНК М. pneumoniae и М. hominis у детей с БА
Число обследо- Антигены в РАГА, абс. (%) Антигены в ЦИК (РИФ), абс. (%) ДНК в сыворотке крови (ПЦР), абс. (%) ДНК в ЦИК (ПЦР), абс. (%)
ванных M.p. M.h. M.p. M.h. M.p. M.h. M.p. M.h.
73 53 24 44 39 9 19 32 38
(72,6+5,2) (32,9+5,49) (60,27+5,7) (53,42±5,83)(12,33±3,84) (26,02+5,1) (43,8+5,8) (52,05±5,84)
Примечание. M.p. — M.pneumoniae, M.h. — M.hominis.
Таблица 2. Частота выявления ДНК и антигенов М. pneumoniae и М. hominis у детей с БА до и после лечения
Сроки обсле- Антигены в РАГА , абс. (%) ДНК в сыворотке крови (ПЦР), абс. (%) ДНК в ЦИК (ПЦР), абс. (%) Антигены в ЦИК (РИФ), абс. (%)
M.p M.h. M.p M.h. M.p M.h. M.p M.h.
До лече- 12 10 3 6 8 8 10 11
ния (100) (83,3+10,7) (25+12,5) (50+14,4) (66,6+13,6) (66,6+13,6) (83,3+10,7) (91,6+8,0) (n=12)
После 99345699
лечения (75+12,5) (75+12,5) (25+12,5) (33,3+13,6) (41,6+14,2) (50+14,4) (75,0+12,5) (75+12,5) (n=12)
Примечание. M.p. — M.pneumoniae, M.h. — M.hominis.
В табл. 1 представлены результаты анализа 73 проб сыворотки крови детей, больных БА. В 53 (72,6%) случаях были обнаружены антигены M. pneumoniae в свободном состоянии и у 5 (6,8%) пациентов общие антитела к ним. Антигены М. hominis, антитела к ним были выявлены в 24 (32,9%) и 4 (5,5%) случаях соответственно.
Для инфекций, обусловленных микоплазмами, характерен низкий уровень антител, что связано со слабой иммуногенностью микоплазм, частично обусловленной отсутствием антигенов клеточной стенки, а частично и тем, что основная часть специфических иммуноглобулинов находится в составе иммунных комплексов. Последний вывод был подтвержден изучением в РИФ антигенного состава ЦИК, выделенных из сыворотки крови больных детей. Как видно из данных, представленных в табл. 2, частота обнаружения антигенов M. pneumoniae и М. hominis в составе ЦИК составила 60,27 и 53,42% соответственно, что косвенно объясняет отсутствие антител в крови пациентов. ДНК клеток M. рneumoniae в сыворотке крови была выявлена в 12,3% случаев, ДНК М. hominis — в 26,1%. Анализ состава ЦИК на присутствие в них ДНК микоплазм показал, что положительный результат обнаружения специфических ДНК составил для M. pneumoniae и М. hominis 43,8 и 52,05% соответственно. Эти данные убедительно свидетельствуют о возможности получения ложно-отрицательных результатов при проведении анализов на присутствие специфических ДНК клеток микоплазм в сыворотках крови у больных с респираторными инфекциями. Антигенная диагностика и диагностика на основе выявления специфической ДНК, с учетом исследования состава ЦИК, дают одинаковые результаты.
Пробы сыворотки крови 12 детей, больных БА, полученные в разные сроки после проведения этиотропного лечения (в основном, через 1,5; 3 и
6 месяцев), удалось вторично проверить на присутствие микоплазм. В табл. 2 представлены результаты обнаружения в этой группе больных антигенов и ДНК M. pneumoniae и М. hominis в свободном состоянии и в составе ЦИК. Если до лечения антигены данных видов микоплазм выявляли в крови и в ЦИК в 100 и 83,3% случаев, то ДНК M. pneumoniae и М. hominis в образцах сыворотки крови была обнаружена в 25 и 50% соответственно. В составе ЦИК ДНК клеток этих видов микоплазм была идентифицирована в 75% случаев. После проведения курса лечения частота этих показателей снизилась незначительно, к примеру, свободные и связанные в ЦИК микоплазменные антигены были выявлены в 75% , а ДНК M. pneumoniae и М. hominis в ЦИК — в 41,6 и 50% случаев соответственно. Следует заметить, что через 6 месяцев после лечения (5 больных) и в одном случае через 1 год ДНК микоплазм была обнаружена в сыворотке крови или в ЦИК, или в свободном состоянии.
Таким образом, представленные данные свидетельствуют о возможности длительного сохранения как антигенов, так и ДНК микоплазм в свободном состоянии и в составе ЦИК у больных с респираторной патологией. Закономерно возникал вопрос, могут ли в составе ЦИК находиться не только биомолекулярные структуры клеток микроорганизмов, но и живые клетки, способные к размножению.
При исследовании проб сыворотки крови больных с хронической уро-генитальной инфекцией (n=61), содержащих антиген М. hominis, в 59% была обнаружена специфическая микоплазменная ДНК. Из этих образцов микробиологическим методом в 42,6% случаев были выделены культуры мини-колоний М. hominis, видовая идентичность которых была подтверждена методом ПЦР-РВ. Вероятно, присутствие специфической ДНК является индикатором наличия в циркуляторном русле персистирующих клеток микоплазм и, скорее всего, со сниженной способностью к росту и размножению в условиях in vitro. Дополнительно проверить это предположение удалось путем культивирования компонентов, входящих в состав ЦИК, преципитированных из 5 образцов сыворотки крови этой группы больных, содержащих ДНК М. hominis. В 4 случаях из препаратов ЦИК были выделены культуры мини-колоний М. hominis, специфичность которых была подтверждена методом ПЦР.
ОБСУЖДЕНИ Е
Суммируя полученные результаты, можно сделать заключение, что антигены и ДНК M. pneumoniae, М. hominis, U. urealyticum способны длительно персистировать в организме больных с респираторной и уроге-нитальной патологией как в свободном состоянии, так и в составе ЦИК. Одним из компонентов развития иммунопатологических процессов при БА являются иммунные комплексы, играющие роль своеобразного депо длительного хранения антигенов. Ранее было установлено, что при хронических респираторных инфекциях длительная персистенция антигенов М. pneumoniae в крови больных сопровождалась циркуляцией мелких специфических ЦИК [2, 3]. Клиренс ЦИК зависит от их размеров.
Известно, что патогенное значение имеют ЦИК, которые образуются в умеренном избытке антигена. Чем больше размер ЦИК, тем быстрее они активируют комплемент, легче фагоцитируются и элиминируются из организма больного. Так, высокомолекулярные ЦИК (19S и более) быстрее выводятся мононуклеарной фагоцитарной системой, чем промежуточные ЦИК (~11S и ниже), которые могут достаточно долго сохраняться в макроорганизме.
В наших исследованиях было показано, что мембранные антигены M.pneumoniae, U. urealyticum и М. hominis способны длительно сохраняться в составе ЦИК, и эти данные подтверждают существующее мнение, что иммунный ответ, который приводил бы к полной элиминации антигенов, просто невозможен, а судьба антигенов, переработанных макрофагами, до конца еще не изучена [4, 5, 7, 8].
К механизмам, обеспечивающим выживание микоплазм в макроорганизме, можно отнести и способность микроорганизмов в определенных условиях к превращению типичных клеток в формы, с трудом культивируемые, которые имеют существенные морфологические и ультраструктурные различия [9, 12]. По предположению ряда авторов структурные изменения клеток происходят как под действием антимикробных препаратов, так и под действием разнообразных неблагоприятных условий и характеризуются образованием мини-колоний [8, 12]. В качестве примера можно привести публикации об атипичных колониях стафилококков (small colony variants) и других микроорганизмов с измененными феноти-пическими, биохимическими и генетическими характеристиками (Froctor R.A. et al., 2006). Присутствие в составе длительно персистирующих ЦИК измененных клеток микоплазм (мини-колоний), их ДНК и антигенов является дополнительным аргументом для уточнения диагностических критериев, используемых в качестве контроля выздоровления после этиотропной терапии. Приоритетной медико-биологической задачей является изучение роли этих форм в патогенезе микоплазменных инфекций.
ЛИТЕРАТУРА
1. Бахарева И.В., Кузнецов П.А., Романовская В.В. Современные теории патогенеза бактериального вагиноза. Лечение и профилактика. 2012, 1 (2): 61-64.
2. Горина Л.Г., Гончарова С.А., Игумнов А.В. Лабораторная диагностика мико-плазмозов человека. Вестник акад. мед. наук СССР. 1991, 6: 44-47.
3. Горина Л.Г., Гончарова С.А. Раковская И.В. и др. Частота обнаружения антигенов микоплазм в свободном состоянии и в составе циркулирующих иммунных комплексов у детей с бронхиальной астмой. Журн. микробиол. 2006, 4: 85-88.
4. Горина Л.Г., Раковская И.В., Бархатова О.И. и др. Сохранение антигенов и ДНК урогенитальных микоплазм в составе циркулирующих иммунных комплексов. Журн. микробиол. 2009, 4: 85-88.
5. Горина Л.Г., Шершнева Н.Н., Балабанов Д.Н. и др. Персистенция микоплазм при респираторных и урогенитальных инфекциях. Эпидемиология и вакцино-профилактика. 2008, 6: 41-44.
6. Дорощенко Н.Э., Кирюхина Н.В. Роль внутриклеточных микроорганизмов в
6. ЖМЭИ 2 № 5183
81
этиологии инфекционно-воспалительных заболеваний лор-органов. Вестник МЕДСИ, 2009, 4: 54-62.
7. Раковская И.В., Бархатова О.И., Балабанов Д.Н. и др. Длительность сохранения жизнеспособных клеток ДНК и антигенов Mycoplasma hominis в сыворотке крови человека при 37°С. Клинич. лаб. диагностика. 2008, 11: 40-42.
8. Раковская И. В., Бархатова О. И., Гамова Н. А. и др. Нетипичные формы мико-плазм в организме зараженных ими людей. Клинич. лаб. диагностика. 2011, 12: 35-38.
9. Раковская И.И., Горина Л.Г., Бархатова О.И. Персистенция микоплазм, сохранение их антигенов и ДНК в органах инфицированных животных. Журн. микро-биол. 2009, 5: 20-25.
10. Селиверстова Н.А., Раковская И.В., Горина Л.Г. и др. Особенности течения и лечения бронхиальной астмы, ассоциированной с микоплазменной инфекцией. Вопросы практ. педиатрии. 2008, 3 (1): 26-29.
11. Хулуп Г.Я., Василевский И.В., Качан Г.Л. и др. Роль микоплазменой инфекции в возникновении и течении заболеваний органов дыхания у детей и подростков. М., Медицина, 2007.
12. Чернов В. М., Чернова О. А., Горшков О. В. и др. Адаптация Mycoplasma gallisepticum к неблагоприятным условиям роста, изменение морфологических и физиологических свойств. Микробиология. 2008, 77 (6): 777-781.
13. Чучалин А.Г., ОспельниковаТ.П., Осипова Г.Л. и др. Роль респираторных инфекций в обострениях бронхиальной астмы. Пульмонология. 2007, 5: 14-19.
14. Шершнева Н.Н, Горина Л.Г. Разработка иммуноферментной тест-системы для выявления антигенов Mycoplasma hominis и Mycoplasma pneumoniae. Российский иммунол. журн. 2008, 2 (11): 420-426.
15. Garcia C., Ugalde E., Monteagudo I. et al. Isolation of Mycoplasma hominis in critically ill patients with pulmonary infections: clinical and microbiological analysis in an intensive care unit. Intensive Care Med. 2007, 33: 143-147.
16. Martin R. J., Kraft M., Chu H.W. et al. A link between chronic asthma and chronic infection. J. Allergy. Clin. Immunol. 2001, 107: 595-601.
17. Mizutani Hiroko, Mizutani Hiromishi. Circulating immune complexes in patients with Mycoplasma pneumoniae. Ann. Rev. Respir. Dis. 1984, 130: 627-629.
18. Mufson M.A. Mycoplasma hominis: a review of its role as a respiratory tract pathogen of humans. Sexually Transmitted Dis. 1983, 10: 335-340.
19. Withcomb R. Culture media for spiroplasmas. In: Methods of Mycoplasmology. NY, Academic Press, 1983.
Поступила 19.06.12
Контактная информация: Горина Луиза Георгиевна, д-р биол. наук,
123098, Москва, ул. Гамалеи, 18, р.т. (499)190-43-68
