CC BY
111
УДК 616.33-002
М Л. КОЛОТИЛОВА
ЦЕОЛИТСОДЕРЖАЩИЙ ТРЕПЕЛ В ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЙ ТЕРАПИИ ТОКСИЧЕСКОГО ОСТРОГО ГАСТРИТА У КРЫС
По данным В.Т. Ивашкина, Т.Л. Лапиной в Сиднейской системе к особым формам гастрита отнесены химический, радиационный и инфекционный гастриты, которые они группируют по этиологическому признаку, и эозинофильный, лимфоцитарный и гранулематозный гастриты, которые они группируют по их морфологическим особенностям и диагностике [3].
Как показали наши предварительные исследования цеолитсодержащий трепел обладает энтеросорбционной, ионообменной и положительной биологической активностью и как детоксикант может быть исследован в клинике [4]. Химический состав трепела Первомайского месторождения Чувашской Республики в процентах к массе сухого вещества по ряду исследований составляет: SiO2 - 60,3-72,5; Fe2O3 - 2,8-4,2; A12O3 - 8,4-10,1; TiO2 - 0,41-0,52; CaO - 2,6-12,3; MgO - 0,9-1,3; Na2O - 0,18-0,29; K2O - 1,4-1,5; SO3 - 0,1-0,3; P2O5 - 0,2. Количественный анализ (мг/кг) показал: медь - 300 мг/кг; молибден - 25 мг/кг; фтор - 90 мг/кг; марганец - 510 мг/кг; бор - 75 мг/кг; фосфор P2O5 - 3900 мг/кг [6]. Результаты качественного спектрального анализа следующие: мышьяк, кадмий, ртуть, селен, свинец, цинк, кобальт, сурьма и хром отсутствуют.
По данным радиологического анализа цеолитсодержащего трепела, выполненного Чувашским радиологическим центром, массовая доля свинца составляет 3,9 мг/кг при допустимой дозе 50 мг/кг, ртути - 0,04 мг/кг при допустимой дозе 0,1 мг/кг, а мышьяка нет [2].
Трепел обладает обменной емкостью, равной по кислоте 0,05 мМ/100г трепела, по кальцию и магнию - 12,5 мМ/100 г трепела. Радиологическая лаборатория государственного комитета санитарно-эпидемиологического надзора Чувашской Республики, проводя контроль трепела на радиоактивность, показала, что уровень радиоактивности исследованных образцов не превышает многолетнего уровня естественного радиологического фона на территории Чувашской Республики, что составляет 7-9 мкР/ч [6].
Целью настоящих исследований явилось исследование динамики изменения секреторной функции желудка при остром гастрите у экспериментальных животных и при пероральном введении цеолитсодержащего трепела (ЦТ).
Методы исследования. Н.П. Чеснокова с соавт. воспроизводили альтерацию слизистой оболочки желудка у кроликов введением через зонд уксусной кислоты [7]. При этом они получали как гипо-, так и гиперацидные состояния. Для воспроизведения гипоацидного состояния за сутки до опыта вводили 10 мл
5%-ного раствора уксусной кислоты, а для воспроизведения гиперацидного состояния за 5 дней до опыта вводили 10 мл 5%-ного раствора той же кислоты.
Опыты проводились на 79 крысах обоего пола массой от 160 до 225 г. Первая (контрольная) серия 22 крысы, - интактные, из них 7 крыс - на гистологические исследования. Вторая (опытная) серия 28 крыс, введение через зонд уксусной кислоты за 5 дней до опыта по рН-метрии, из них 10 крыс - на гистологические исследования. 3-я (опытная) серия 29 животных, ежедневное пероральное введение цеолитсодержащего трепела из расчета 1,5 г/кг массы с кормами и однократное введение 5%-го раствора уксусной кислоты из расчета 4 мл/кг массы через зонд за 5 дней до опыта по рН-метрии. Из них 10 крыс использовались на гистологическое исследование.
Внутрижелудочная рН-метрия проводилась введением в полость желудка стеклянным электродом (ЭЛ-40) с помощью рН-метра («рН 340») под внутри-брюшинным наркозом тиопенталом натрия в дозе 30 мг/кг массы животного. Для рН-метрии проводилась верхнесрединная лапаротомия, и делался доступ к желудку. Далее проводилась гастротомия в области дна желудка. Вначале проводилось определение базального уровня кислотности желудка, затем внутримышечно вводился гистамин (10 мг/кг массы тела) с последующим измерением рН через 5, 15, 30 мин.
Гистологическое исследование ткани желудка проводилось методом гема-токсилин+эозин [5]. Кроме того, применялась методика гистохимических исследований нейтральных и кислых мукополисахоридов: методом ШИК - по Мас Manus и альциановым голубым и толуидиновым синим.
У крыс 1-й, контрольной, серии базальная кислотность (рН) в среднем составила 2,54±0,03, что колебалось в пределах 2,20-2,80. Через 5 мин после стимуляции гистамином, величина рН составила 2,16±0,03 в интервале 2,00-2,40; через 15 мин уровень рН повысился до 1,95±0,03 в пределах 1,80-2,15. Через 30 мин. рН в среднем составила 2,01±0,03 с колебаниями в пределах 1,85-2,25. Следовательно, кислотность после стимуляции гистамином стала максимальной через 15 мин (таблица и рисунок).
Динамика изменения рН свидетельствует о том, что крысы относятся к животным с достаточно высокой устойчивостью к гистамину даже при такой высокой концентрации вводимого экзогенного гистамина в дозе 10 мг/кг. По данным Н.Ш. Амирова и Д.В. Антонова, в опытах у здоровых крыс в ответ на введение гистамина отмечается высвобождение почти всех запасов секретируе-мых протеаз [1]. Тот факт, что уже к 30-й мин стимулирование кислотообразо-вания значительно снижается, вероятно, связан с высокой гистаминазной активностью крыс.
У подопытных крыс во 2-й серии (таблица и рисунок) уровень базальной кислотности составил 1,92±0,02 (р<0,001), при этом кислотность колебалась в пределах 1,80-2,00. После стимуляции гистамином величина рН желудочного сока через 5 мин была равна 1,82±0,02 (р<0,001) с колебаниями в пределах 1,702,00; через 15 мин кислотность повысилась до 1,67±0,008 (р<0,001), при этом
рН колебалась в пределах 1,60-1,70; через 30 мин рН понизилась до 1,71±0,02 (р<0,001). Однако кислотность во всех опытах была достоверно выше, чем в контрольной серии.
Как видно из таблицы, у подопытных крыс 3-й серии уровень базальной кислотности был равен 2,55±0,6, он практически не отличался от аналогичного показателя интактных крыс (2,54±0,03). Эти показатели колебались в пределах 2,35-3,00. После стимуляции гистамином рН желудочного сока у крыс данной серии через 5 мин составила 2,139±0,03 с колебаниями в пределах 2,00-2,35 и практически не отличалась от показателей интактных крыс. Через 15 мин рН повысилась до 1,95±0,04 против аналогичного показателя интактных крыс 1,95±0,03. Через 30 мин кислотность составила 2,10±0,04 с колебаниями от 1,90 до 2,50, при соответствующих показателях интактных крыс 2,01±0,03 с колебаниями в пределах 1,85-2,25. Следовательно, у подопытных крыс с введением ЦТ базальная секреция и динамика изменения общей кислотности после стимуляции гистамином не отмечались от аналогичных показателей интактных крыс. Данная динамика полностью подтверждает тот факт, что исследуемый минерал ЦТ не оказывает существенного влияния на функциональное состояние секреторного аппарата желудка. Как известно, нормативными документами и клинической практикой к энтеросорбентам предъявляются следующие требования:
1) полная безвредность и нетоксичность;
2) высокая биосовместимость с тканями, кровью и другими биосубстратами организма;
3) неповреждающее действие на слизистые оболочки полости рта, пищевода, желудочно-кишечного тракта;
4) выборочная сорбция среднемолекулярных токсических метаболитов;
5) высокая адсорбционная емкость [8].
Введение уксусной кислоты позволило получить гиперацидное состояние подопытных крыс 2-й серии опытов.
У подопытных крыс 4-й серии с однократным введением уксусной кислоты на фоне введения ЦТ (таблица и рисунок) базальная кислотность желудка (рН) составила 2,20±0,04, что по сравнению с данными 2-й серии достоверно ниже (р<0,001). Показатели 2-й и 3-й серии опытов сравниваются с показателями интактных животных (1-я серия).
Как видно из таблицы через 5 мин после стимуляции экзогенным гистамином рН составила 2,01±0,02 (р<0,001) с колебаниями от 1,85 до 2,30; через 15 мин уровень рН повысился до 1,85±0,02 (р<0,001) с колебаниями в пределах 1,60-2,00; через 30 мин рН составила 1,93±0,01 с колебаниями в пределах 1,75-2,00, что достоверно ниже аналогичных показателей животных 2-й серии (р<0,001).
Следовательно, у животных 4-й серии показатели рН как базальной кислотности, так и после стимуляции гистамином оказались достоверно ниже, чем у животных 2-й серии, что свидетельствует о том, что введение ЦТ позволяет достоверно снизить выраженность ацетатного гиперацидного состояния.
Динамика изменения кислотности желудочного сока у интактных крыс (1-я серия) и подопытных крыс (2-я и 3-я , 4-я серия) через 5, 15, 30 мин
Серия опытов Базальная секреция (рН) М+т 5 15 30
1-я (интактные) 2,54+0,03 2,16+0,03 1,95+0,03 2,01+0,03
2-я (введение уксусной кислоты) 1,92+0,02 р<0,001 1,82+0,02 р<0,001 1,67+0,008 р<0,001 1,71+0,02 р<0,001
3-я (пероральное введение ЦТ) 2,55+0,03 2,13+0,03 1,95+0,04 2,10+0,04
4-я (введение ЦТ и уксусной кислоты) 2,20+0,04 р<0,001 2,01+0,02 р<0,001 1,85+0,02 р<0,001 1,93+0,01 р<0,001
Как считают В.Т. Ивашкин, Т. Л. Лапина, диагноз гастрита без морфологического исследования гастробиоптатов практически не имеет смысла, ибо «гастрит» - это диагноз морфологический [3].
У интактных крыс слизистая желудка представляет собой цилиндриче-ски-кубический эпителий с умеренным слизеобразованием, собственную пластинку слизистой с умеренными полнокровными сосудами. Встречаются небольшие скобления лимфоциов и эозинофилов. У всех животных 2-й серии установлен поверхностный острый гастрит, о чем свидетельствует очаги ней-трофильная инфильтрация в поверхностном эпителии в слизистой оболочке желудка. В поверхностном эпителии выявлялись нейтральные мукополисаха-риды. При этом отмечалось нормальное строение главных клеток, а в некоторых из них обнаруживались нейтральные мукополисахариды. В поверхностном эпителии встречались также кислые мукополисахариды. В клетках глубоких слоев желез кислые мукополисахариды не выявлялись.
Данные гистологических исследований ткани желудка 3-й серии полностью соответствовали показателям интактных крыс, что свидетельствовало о том, что цеолитсодержащий трепел никак не повреждает слизистую оболочку желудка крыс. По данному показателю, ЦТ практически соответствует свойствам, характеризующими «идеальный» энтеросорбент [8].
Гистологические и гистохимические методы исследования желудка у животных 4-й серии с введением ЦТ показали, что очаги инфильтраций полиморфноядерных лейкоцитов в эпителиальных клетках встречались значительно реже, что свидетельствует о меньшей выраженности воспалительных процессов. Нейтральные и кислые мукополисахариды также выявляются значительно реже, чем таковые у животных 2-й серии опытов.
Следовательно, у подопытных животных 4-й серии показатели исходных и стимулированных значений рН оказались достоверно ниже, чем аналогичные показатели у животных 2-й серии. Функциональные показатели париетальных желез желудка нашли подтверждение в результатах гистологических
и гистохимических исследований, ибо явления гастрита практически отсутствовали или встречались значительно реже, чем у животных 2-й серии.
Динамика изменения кислотности желудочного сока у подопытных и интактных животных через 5, 15, 30 мин
□ Базальная секреция
П5 мин
□ 15 мин В 30 мин
Благоприятные результаты применения цеолитсодержащего трепела с лечебной целью в опытах 4-й серии, очевидно, можно объяснить выраженными сорбционными свойствами трепела. Энтеросорбционная активность ЦТ позволяет снижать степень альтеративного действия уксусной кислоты на эпителиальные клетки слизистой желудка и кишечника. Кроме того, ЦТ связывает, вероятно, токсические ингредиенты, образующиеся в желудке и кишечнике в процессе пищеварения. Следует рассматривать также механизм усиления транспорта токсических веществ, в том числе и уксусной кислоты, из сосудистого русла с последующей абсорбцией в кишечном тракте.
Литература
1. Амиров Н.Ш., Антонов Д.В. Остаточная активность протеаз слизистой желудка после стимулирования гистамином в норме и при ацетатной язве у крыс // Пат. физиол. и эксперим. тер. 1988. №3. С. 64-66.
2. Иванов Г.И., Григорьева Т.Е. Итоги применения трепела Первомайского месторождения Чувашской Республики в животноводстве и ветеринарии и проблемы дальнейшего исследования // Применение местных сырьевых ресурсов в народном хозяйстве: Сб. ст. Чебоксары, 1997. С.18-34.
3. Ивашкин В. Т., Лапина Т.Л. Хронический гастрит: современные представления, принципы диагностики и лечения // Болезни органов пищеварения. 2001. Т.3. №2. С. 54-60.
4. Колотилова М.Л., Иванов Л.Н. Цеолитсодержащий трепел в медицине. Чебоксары, 2003. С. 119.
5. Меркулов Г.А. Курс патологогистологической техники. Л., 1969.
6. Скребков Г.П. О месторождениях и свойствах трепелов Чувашии // Применение местных сырьевых ресурсов в народном хозяйстве: Сб. ст. Чебоксары, 1997. С. 6-13.
7. Частная патофизиология / Чеснокова Н.П., Афанасьева Г.А., Брилль Г.Е. и др. 3-е изд. Саратов, 1995. С. 159.
8. Шевченко Ю.Н. Кремнийорганические сорбенты. Свойства и области применения. Эн-теросгель и комплексные препараты на его основе // Сб. работ по применению препарата энте-росгель в медицине. М., 2002. Ч.1. С. 3-12.
КОЛОТИЛОВА МАРИНА ЛЕОНИДОВНА. См. с. 78.
