CC BY
40
5. Илюхина В.А. Энергодефицитные состояния здорового и больного человека. - СПб: Медицина, 1993. -С.221.
6. Комаров Ф.И., Рапопорт С.И. Возвращаясь к язвенной болезни // Врач. - 2000. - №4. - С.9-11.
7. Ларионов Н.П., Маленюк Е.Б., Круглов С.В. и др. Роль оксида азота (N0) в патогенезе язвенной болезни желудка // Патофизиология органов и систем. Типовые патологические процессы: Тез. докл. II Рос. Конф. по патофизиологии. - М., 2000. -С.131.
8. Марков Х.М. О биорегуляторной системе арге-нин - окись азота // Патол. физиол. и эксперемен-тальная терапия. - 1996. - С.34-39.
9. Поленов С.А. Окись азота в регуляции функции желудочно-кишечного тракта II Рос. журн. гастроэнтерологии, гепатологии, колопроктолоши. -1998. -№ 1. -С.53-60.
10. Ребров В.Г., Станковский В.А., Куланина Г.И. Особенности регистрации электрической активности желудка и кишечника с поверхности тела пациента // Рос. журн. гастроэнтерологии, гепатологии, колопроктолоши. - 1996. - №2. - С.48-52.
11. Товбушенко М.П. Неспецифическая адаптация организма и энергетический обмен при язвенной болезни двенадцатиперстной кишки, их динамика под влиянием лечебных физических фактов: Автореф. дис. ... д-ра. мед наук. - Пятигорск, 1995. - 35 с.
12. Флейшман А.Н. Медленные колебания гемодинамики. - Новосибирск: Наука, 1999. - 254 с.
13. Флейшман А.Н. Медленные колебания (теория, практическое применение в практической медицине и профилактике), Новосибирск: Наука, 1998. -264 с.
14. Хендерсон Д.М. Патофизиология органов пищеварения: Пер. с англ. -М., СПб., 1999. - 354 с.
15. Чернякевич С.А. Моторная функция верхних отделов пищеварительного тракта в норме и патологии // Рос. журн. гастроэнтерологии, гепатологии, колопроктолоши. - 1998. - №2. - С.33-39.
16. Эттингер А.П. Основы регуляции электрической и двигательной активности желудочно-кишечного тракта // Рос. журн. гастроэнтерологии, гепатологии, колопроктолоши. - 1998. -№4. - С.13-17.
17. Petros A., Lamb G.,Leone A. Effects of a nitric oxide synthase inhibitor in humans with septic shock // Car-diovasc. Res. - 1994. - Vol.28. - P.34-39.
© ПОЛЫНЦЕВА Л.В., УБАШЕЕВ И.О.. КОЖЕВНИКОВА Н.М., АЛЕКСАНДРОВА Т.Е.,
СТРУБИНОВА В Н. -УДК 616-002.44.001.5-092.9+615.246.2+546.654
ОЦЕНКА ВЛИЯНИЯ ПРИРОДНОГО ЦЕОЛИТА, МОДИФИЦИРОВАННОГО ИОНАМИ ЛАНТАНА, НА ТЕЧЕНИЕ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЙ ЯЗВЫ ЖЕЛУДКА У БЕЛЫХ КРЫС
Л.В. Полыпцева, И.О. Убашеев, Н.М. Кожевникова, Т.Е. Александрова, В.Н. Струбипова.
(Институт общей и экспериментальной биологии Сибирского отделения Российской академии наук, г. Улан-Удэ. директор - д.б.н., чл.-корр. РАН В.М. Корсунов, лаборатория безопасности биологически активных веществ, зав. - д.б.н., проф. И.О. Убашеев)
Резюме. Изучали антиульцерогенную активность природного цеолита и цеолита, модифицированного ионами редкоземельного элемента лантана, в опытах на крысах с хронической ацетатной язвой желудка. Установлено, что цеолит, модифицированный ионами лантана, за счет наличия в нем ионов редкоземельного элемента обладает более выраженной антиульцеро-генной активностью, ускоряя процессы регенерации и стимулируя функциональную активность желудочного сока. Показано, что в основе выявленного эффекта лежит ингибирование процессов перекисного окисления липидов, стимуляция барьерной функции слизистой оболочки желудка.
В настоящее время в связи с высокой заболеваемостью язвенной болезнью желудка актуальной задачей является поиск новых лекарственных средств, позволяющих оптимизировать терапию данного заболевания. В этом аспекте представляет огромный интерес многовековой опыт тибетской медицины. Тибетские медики еще в глубокой древности хорошо знали лечебные свойства различных минералов и успешно применяли их в своей лечебной практике. Как в народной, так и в современной медицине для коррекции патологических состояний широко использовались природные цеолиты как средства, оказывающие положительное влияние на функциональное состояние органов пищеварения [3]. В последнее деся-
тилетие в ряде стран (США, Япония, Куба, КНР, Италия, Франция, Турция и др.), в том числе и в России проводится большая работа по исследованию природных цеолитов. В медицине возникло новое направление, которое можно обозначить как сорбционная терапия. Методом сорбционной технологии разработаны эффективные стимуляторы регенерации на основе клиноптилолитсодер-жащего туфа и редкоземельных элементов (РЗЭ). Эта технология позволяет повысить биологическую активность природных цеолитов путем введения в матрицу цеолита микроэлементов, в частности, РЗЭ лантана [4].
Целью исследования явилось изучение анти-ульцерогенной активности цеолита, модифициро-
ваного ионами лантана (ЦМЛ), и не модифицированного природного цеолита (ЦП) на модели хронической ацетатной язвы желудка (ХЛЯЖ).
Материал и методы
Эксперименты проведены на 78 белых крысах линии Вистар массой 250,0±20,0 г ХЛЯЖ воспроизводили по методу' Окабэ [11]. Под гексенало-вым наркозом к передней стенке желудка прикладывали кольцо из пластмассы с внутренним диаметром 5 мм', в просвет которого на серозную оболочку наносили на 1 мин. 2-3 капли ледяной уксусной кислоты. Через неделю напротив места аппликации кислоты формировался язвенный дефект. Крысы первой группы получали ЦМЛ, второй группы - ЦП. Средства вводили внутрижелу-дочно в экспериментально-терапевтической дозе 1 мг/кг массы тела 1 раз в сутки в течение 14 дней. Животные третьей (контрольной) группы получали дистиллированную воду. Четвертую группу составляли интактные животные. Исследования проводили на 7-, 14- и 21-е сутки опыта. Оценивали функциональное состояние слизистой оболочки желудка (СОЖ) по темпу секреции желудочного сока, концентрации свободной НС1 [8], ферментативной активности пепсина и содержанию мукополисахаридов (МПС) в желудочном соке [10]; об интенсивности процессов перекисного окисления липидов (ПОЛ) судили по уровням содержания малонового диальдегида (МДЛ) [7] и 5Н-групп в гомогенате ткани желудка [9]. Крыс декапитировали под легким барбамиловым наркозом. При макроскопическом исследовании желудка определяли размеры язв. Ткань желудка фиксировали в 10%-ом растворе нейтрального формалина, заливали в целлоидин-парафин, срезы окрашивали гематоксилин-эозином и пикрофукси-ном по ван Гизону по общепринятым методикам [6]. Статистическую обработку данных проводили с использованием критерий Стьюдента (1). Различие считали достоверным при вероятности 95% (Р<0,05).
Результаты и обсуждение
Редкоземельные элементы обладают высокой биологической активностью благодаря их способности конкурировать с ионами кальция, магния, железа и др. и комплексообразующим свойствам. В малых дозах они стимулируют регенерацию, улучшают окислительно-восстановительные процессы, ингибируют процессы свободнорадикального окисления липидов, оказывают спазмолитическое действие [2]. Поэтому добавление ионов РЗЭ в матрицу природных цеолитов обусловливает усиление антиульцерогенной активности последних, что было показано в нашем исследовании.
Установлено, что под влиянием ЦМЛ по сравнению с контролем и животными, получавшими ЦП, происходит более раннее отторжение со дна язвы струпа, пропитанного фибринозным налетом, и формирование зрелой грануляционной ткани. Наблюдаются умеренная полиморфно-клеточная инфильтрация слизистой оболочки и подсли-
зистого слоя, менее выраженные признаки гастрита в периульцерозной зоне. Быстрое развитие грануляционной ткани под влиянием ЦМЛ обусловливает ускорение регенерации язвенного дефекта, о чем свидетельствует уменьшение его размеров у животных этой группы по сравнению с контрольными показателями в 1,5; 3,1 и 10,1 раза и по сравнению с таковыми у животных, получавших ЦП, в 1,3; 1,4 и 1,5 раза на 7-, 14-, 21-е сутки исследования соответственно (рис.1).
Формирование ХЛЯЖ сопровождается резким снижением функциональной активности желудка. У крыс контрольной группы по сравнению с показателями интактных животных резко снижается темп секреции желудочного сока, общая кислотность и концентрация свободной НС1, а также ферментативная активность пепсина (табл.1). Введение крысам с ХЛЯЖ ЦМЛ стимулирует функциональную активность желудка. Так, в исследуемые сроки напряженность секреции желудочного сока у животных, получавших ЦМЛ, превышает контрольные значения на 49,3; 69,3 и 52,6%, общая кислотность - на 60,6; 62,7 и 72,7%. В меньшей степени увеличивается концентрация свободной НС1, при этом резко повышается ферментативная активность пепсина - на 74,4; 83,4 и 72,8% по сравнению с контролем в исследуемые сроки. Однако показатели общей кислотности и концентрации свободной НС1 у крыс, получавших ЦМЛ, значительно ниже таковых у интактных животных. Введение ЦП в значительно меньшей степени стимулирует функциональную активность желудочного сока. У животных этой группы темп желудочной секреции увеличивается на 45,8; 64,3 и 50,0%, общая кислотность - на 56; 56,7 и 70,3% по сравнению с контролем.
ЕЗ контроль О ЦМЛ ВЦП
Сутки исследования
Рис. 1. Влияние ЦМЛ и ЦІ I на площадь язвенного дефекта у крыс с ХЛЯЖ
Согласно современным представлениям о патогенезе язвенной болезни желудка важную роль в нем играет нарушение физиологического равновесия между факторами агрессии желудочного сока и защиты СОЖ. Введение крысам ЦМЛ улучшает барьерную функцию СОЖ, повышая уровень мукополисахаридов в исследуемые сроки соответственно в 2,5; 2,9 и 2,1 раза по сравнению с контролем.
Повышенное содержание МДЛ в гомогенатах ткани желудка характеризует избыточное появле-
Таблица 1.
Влияние ЦМЛ и ЦП на функциональные показатели желудочного сока у белых крыс с ХАЯЖ
(М±т, п=6)
Условия опыта Показатели функциональные желудочной секреции
Темп секреции, мл/час Общ. кислот-ть, титр. ед. Свобод. НС1, титр. ед. Содерж. пепсина, г/л Содерж. МПС, мкг/мл
Интакт. крысы 0,87±0,053 27,5+2,83 8,8+0,71 2,5+0,25 0,10+0,010
7-е сутки
ХАЯЖ + Н,0 0,32+0,024** 6,7+0,34** 3,5+0,23** 0,41+0,02** 0,95+0,032**
ХАЯЖ + ЦМЛ 0,63+0,055* 17,0+1,02* 4,6+0,38* 1,6+0,14* 0,54+0,041*
ХАЯЖ + ЦП 0,59+0,033* 15,2+0,95* 4,7+0,25* 1,4+0,11* 0,60+0,052*
14-е сутки
ХАЯЖ + Н-0 0,20+0,028** 5,9+0,34** 3,1+0,12** 0,3+0,02** 0,82+0,022**
ХАЯЖ + ЦМЛ 0,65+0,027* 15,8+1,21* 4,3+0,37* 1,8+0,12* 0,29+0,015*
ХАЯЖ + ЦП 0,56+0,042* 13,6+1,12* 3,8+0,24 1,8+0,14* 0,32+0,021*
21 -е сутки
ХАЯЖ + НЮ 0,37+0,012** 6,3+0,44** 2,9+0,11** 0,6+0,04** 0,59+0,013**
ХАЯЖ + ЦМЛ 0,78+0,043* 23,0+1,77* 6,5+0,42* 2,2+0,15* 0,14+0,012*
ХАЯЖ + ЦП 0,74+0,014* 21,2+1,10* 7,4+0,18* 2,0+0,16* 0.17+0,01*
Примечание: здесь и далее * - различия достоверны по сравнению с контролем при Р<0,05; верны по сравнению с интактным контролем при Р<0,05.
1 значения досто-
нии зоны рубцевания, сокращении сроков заживления язвенного дефекта и восстановлении функциональной активности желудка. Эффективность ЦМЛ превышает таковую ЦП, что объясняется биологическими свойствами редкоземельных элементов и пролонгирующим действием указанного средства.
Таблица 2.
Влияние ЦМЛ и ЦП на содержание МДА и БН-групп в гомогенате ткани желудка у белых крыс с ХАЯЖ (М±т, п=б)
ние свободнорадикальных форм кислорода. Само-ускоряющийся процесс перекисного окисления липидов приводит к разрушению гидрофобных углеводородных хвостов жирных кислот, которые образуют липидный бислой мембраны, ненасыщенных липидов, нарушениям структуры и функции белков, нуклеиновых кислот и других молекул. У контрольных животных в исследуемые сроки уровень содержания МДЛ в гомогенатах ткани желудка превышает показатели интактных крыс 3,7; 4,8 и 3,6 раза (табл.2). ЦМЛ, регулируя свободнорадикальное окисление липидов, обеспечивает в клетке систему антиоксидантной защиты и активно ингибирует процессы образования свободных радикалов, снижая содержание МДЛ в гомогенатах ткани желудков на 50,7; 56,2 и 100% соответственно срокам исследования и сохраняя сульфгидрильный пул на протяжении всего эксперимента. Содержание SH-групп в ткани желудка во все сроки эксперимента у крыс, получавших ЦМЛ. превышает показатели контрольных животных в 1,6; 2,7 и 2,4 раза соответственно. Отмечено, что введение крысам ЦП менее выражено влияет на процессы ПОЛ, снижая содержание МДЛ по сравнению с контролем на 27,2; 34,4 и 59,4% соответственно срокам исследования.
Таким образом, у крыс с хронической ацетатной язвой желудка ЦМЛ оказывает антиульцеро-генное влияние, проявляющееся в уменьшении площади повреждения стенки желудка, увсличс-
AN ESTIMATION OF INFLUENCE OF THE NATURAL ZEOLITE, MODIFIED BY IONS OF LANTHANUM, ON THE COURSE OF EXPERIMENTAL STOMACH ULCER IN WHITE RATS
L.V. Polynzeva, I.O. Ubasheev, N.M. Kozhevnikova, T.Y. Alexandrova, V.N. Strubinova (The Institute of General and Experimental Biology, Russian Academy of Science)
Anti-ulcerogenic activity of the natural zeolite and zeolite modified by ions of rare element lanthanum were studied in the experiments on white rats with chronic acetate stomach ulcer. It has been established that
Условия опыта SH-группы, титр. ед. МДА, нМоль/г
Интактные крысы 3,6+0,15 2,6+0,32
7-е сутки
ХАЯЖ + Н,0 0,95+0,032** 9,8+0,59**
ХАЯЖ + ЦМЛ 1,54+0,081* 6,5+0,30*
ХАЯЖ + ЦП 1,60+0,052* 7,7+0,17*
14-е сутки
ХАЯЖ + Н,0 0,7+0,01** 12,5+0,92**
ХАЯЖ + ЦМЛ 1,9+0,12* 8,0+0,24*
ХАЯЖ + ЦП 1,7+0,03* 9,3+0,51*
21-е сутки
ХАЯЖ + Н,0 0,9+0,06** 9,6+0,58**
ХАЯЖ + ЦМЛ 2,2+0,09* 4,8+0,73*
ХАЯЖ + ЦП 2,0+0,23* 6,02+0,151*
zeolite modified by ions of lanthanum at the expense of availability of ions of rare element in it has more expressed anti-ulcerogenic activity accelerating the processes of regeneration and stimulation of functional activity of gastric juice. It is shown that inhibition of the processes of lipid peroxidation, stimulation of barrier function of stomach mucous membranes are in the basis of the revealed effect.
Литература
1. Богер Б.М. Язвенная болезнь. Современные аспекты этиологии, патогенеза, саногенеза. - Новосибирск, 1986.-257 с.
2. Верхова О.А., Сорока В.Р. Биологическая роль лантанидов // Успехи современной биологии. -1980. -Т.90, №3(6). - С.365-381.
3. Кожевникова Н.М., Убашеев И.О., Митыпов Б.Б. и др. Получение модифицированных лантаном природных цеолитов - потенциальных стимуляторов регенерации животных тканей // Химия в интересах устойчивого развития. - 2001. - Т.9, №6. -С.207-211.
4. Кушеев Ч.Б. Цеолиты Холинского месторождения при токсическом повреждении печени животных: Дисс. ... канд. вет. наук. - Улан-Удэ, 1995. - 132 с.
5. Махакова Г.Ч., Орлов В.А., Николаев С.М. Фармакологическая регуляция свободнорадикальных процессов при язвенной болезни. - Улан-Удэ, 2001. - 194 с.
6. Меркулов Г.А. Курс патологогистологической техники. -JL, 1969.-424 с.
7. Стальная И.Д., Гаришвили Т.Г. Метод определения малонового диальдегида с помощью тиобарби-туровой кислоты // Современные методы в биохимии. -М., 1977. - С.66-68.
8. Туголуков В.Н. Современные методы функциональной диагностики состояния слизистой оболочки желудка и их клиническое значение. - М., 1965. -212 с.
9. Фоломеев В.Ф. Количественное определение в тканях тиоловых сульфшдрильных групп // Лабор. дело. - 1980. -№ 11. - С.653-656.
10. Фышзон-Рысс Ю.М. Современные методы исследования желудочной секреции. - М., 1972. - 249 с.
ll.Ocabe S., Roth J„ Pfeifer C.Y. The acetic ulcer model - a procedure for chronic duodenal ulcer // Amer. J. diq. Dis. - Copengagen, 1971. - Vol. 16, N.2. - P.277-281.
© ТЭМУУЛЭН Д., БАТСУХ 3.. СУМЪЯА Г., ГУРБАДАМ А., БАТЦЭЦЭГ Г., ЭРДЭНЭСАЙХАН Т. -УДК 616.995.121+616-097+615.373
ПРИГОТОВЛЕНИЕ АНТИГЕНОВ ИЗ TAENIA SAGINATA (TAENIARHYNCHUS SAGINA TUS) И ПОЛУЧЕНИЕ ГИПЕРИММУННОЙ СЫВОРОТКИ К НИМ
Д. Тэмуулэп, 3. Батсух, Г. Сумъяа, А. Гурбабсш, Г. Батцэцэг. Т .Эр&эпэсайхап.
(Монгольский государственный медицинский университет, ректор - д.м.н., проф. Ц. Лхагвасурэн, кафедра биологии и генетики, зав - д.м.н. проф. И. Пурэвдорж. Институт ветеринарной медицины Монголии, директор - акад. Б. Бямба, Монгольский Национальный Центр инфекционных болезней, директор - доктор (Sc). Б. Бат-Очир)
Резюме. Нами были приготовлены соматический и метаболитный антигены и гипериммунные сыворотки к ним для диагностики тениидоза человека и цистицеркоза крупного рогатого скота и их активность была определена реакцией непрямой агглютинации (РИГА).
В результате проведения исследования паразитологической лабораторией Монгольского национального центра инфекционных болезней установлено. что за последние 10 лет тениидозы занимают второе место среди гельминтозов человека.
Тениидозы вызывают заболевания не только у человека, но и у животных, и причиняют огромный экономический ущерб экономике страны за счет браковки сильно пораженных туш, снижения качества инвазированного мяса, и затрат на его обезвреживание.
В нашей стране почти не изучались вопросы по распространению и эпизоотологии тениидоза и цистицеркоза, поэтому перед нами стояла задача разработать препарат для серологической диагностики тениидоза человека и цистицеркоза крупного рогатого скота и изучить распространение этих
заболеваний, возбудители которых передаются от крупного рогатого скота (Bos taurus) к человеку и от человека к крупному рогатому скоту.
Материалы и методы 1. Приготовление образца соматического антигена из Taenia saginata (T.saginata).
Получили T.saginata путем дегельминтизации зараженных T.saginata людей широко применяемыми в медицинской практике препаратами, под наблюдением врачей-эпидемиологов.
Тенииды, полученные после дегельминтизации, тщательно промывали проточной водой. Брали только половозрелые членики для приготовления соматического антигена. Половозрелые членики гомогенизировали с помощью гомогенизатора (MOULINETTE, Испания) до получения однородной массы. Затем полученную суспензию озвучивали ультразвуком (UH-50, Тайланд) низ-
