CC BY
0
| ГЕМАТОЛОГИЯ И ТРАНСФУЗИОЛОГИЯ | RUSSIAN JOURNAL OF HEMATOLOGY AND TRANSFUSIOLOGY (GEMATOLOGIYA I TRANSFUSIOLOGIYA) | 2022; ТОМ 67; №2 |
организации службы крови России. Оптимальным является возложение функции рекрутинга доноров КМ и ГСК на службу крови. Подключение к рекрутингу потенциальных доноров КМ и ГСК
организаций службы всех субъектов РФ позволит обеспечить комплектование Регистра необходимым количеством доноров сучетом генетического разнообразия населения России.
Захарько Е. И., Сидорова Ю. В., Дрокова Д. Г., Лавришинец К. А., Рыбкина Е. Б., Клаар Ю. А., Рыжикова Н. В., Бадмажапова Д. С.,
Моисеева Т. Н., Судариков А. Б., Двирнык В. Н.
ТЯВС1 ДЛЯ ОЦЕНКИ Т-КЛЕТОЧНОЙ КЛОНАЛЬНОСТИ МЕТОДОМ ПРОТОЧНОЙ ЦИТОМЕТРИИ
ФГБУ «НМИЦ гематологии» Минздрава России
Введение. Определение Т-клеточной клональности методом ПЦР является важным исследованием для диагностики онкогематологических заболеваний. В последние годы появилась возможность оценивать клональность Т-лимфоцитов (Тлф) при иммунофенотипировании методом проточной цитометрии (ИФТ). Для этого используется моноклональное антитело (ЖА) к С1 константному региону (одному из двух возможных) ß-цепи Т-клеточного рецептора (TRBC1), которое в норме экспрессиру-ется на половине Тлф. Данный метод представляется актуальным, так как позволяет исследовать клональность не в общей массе Тлф, а на отдельных субпопуляциях, учитывая аберрантность ИФТ по другим маркерам.
Цель работы. Оценить Т-клеточную клональность при определении экспрессии TRBC1 на Т-лимфоцитах, сравнить данные ИФТ И ПЦР.
Материалы и методы. Проанализировано 35 образцов крови и/или костного мозга 34 пациентов (16 Ж/18 Ж., Же возраста 58 лет), которым проводились одновременно ИФТ-исследование и молеку-лярно-генетическая диагностика клональности Т-клеточного рецептора по генам гамма-цепи на момент первичного исследования при подозрении на ЛПЗ или на фоне предшествующей терапии при верифицированном заболевании. Для ИФТ использовался проточный цитометр FACS Canto, Becton Dickinson; ЖАк TRBC1, CD2, CD3, CD3, CD4, CDS, CD7, CD8, CD16, CD45, CD56, TCRyö. Учитывалась аберрантность экспрессии Т-клеточных антигенов и оценка клональности по TRBC1. Популяция считалась монокло-нальной, если более 85% или менее 15% клеток экспрессировали антиген TRBC1. Жолекулярно-генетический метод проводился
мультиплексной ПЦР по протоколу BIOMED-2 с последующим фрагментным анализом на секвенаторе «Нанофор05» (Россия).
Результаты и обсуждение. В 18 из 35 образцов клональность была выявлена как ИФТ, так и ПЦР. Из них 15 пациентов с Т-ЛПЗ в дебюте заболевания, 1 — аутоиммунным лимфопролифератив-ным синдромом (ALPS), 1 — с реактивными изменениями (РИ) на фоне лечения острого лимфобластного лейкоза в ремиссии заболевания, 1 — с РИ на фоне инфекционного процесса. В 13 из 35 образцов не было выявлено моноклональных Тлф при исследовании двумя методами. Из них 2 — пациенты с Т-ЛПЗ в ремиссии заболевания, 5 — пациенты с другим онкогематологическим заболеванием (ЖДС, ДВККЛ, ИТП, АА); б - с РИ на фоне инфекционного или аутоиммунного процесса. В 4 случаях определялась клональная популяция только при ИФТ-исследовании. У одного пациента методом ИФТ выявлялась опухолевая популяция 0,032% с иммунофенотипом CD3~CD4+CD5+TRBCP на фоне терапии по поводу ангиоиммунобластной Т-клеточной лимфомы. У второго — моноклональная дубль-позитивная (CD4+CD8+TRBC1+) Т-клеточная популяция, а в двух остальных случаях определялись Т-лимфоциты со слабой экспрессией TRBC1. Подобные изменения, вероятно, имели реактивный характер, т. к. дополнительных данных за Т-лимфопролиферативное заболевание не было получено.
Заключение. Определение клональности Тлф методом проточной цитометрии с анализом экспрессии TRBC1 преимущественно совпадает с данными ПЦР, а в некоторых случаях, когда доля опухолевых клеток невелика, может оказаться более информативным. Требуются дальнейшие исследования для интерпретации реактивных клональных популяций, выявленных при ИФТ.
Звонков Е. Е., Габеева Н. Г., Королева Д. А., Татарникова С. А., Дроков М. Ю., Бидерман Б. В., Судариков А. Б., Ковригина А. М.,
Обухова Т. Н., Кузьмина Л. А., Паровичникова Е. Н.
ТРАНСПЛАНТАЦИЯ АЛЛОГЕННЫХ ГЕМОПОЭТИЧЕСКИХ СТВОЛОВЫХ КЛЕТОК (АЛЛО-ТГСК) ОТ ГАПЛОИДЕНТИЧНОГО ДОНОРА В ПЕРВОЙ ЛИНИИ ТЕРАПИИ БОЛЬНОМУ ПЛАЗМОБЛАСТНОЙ ЛИМФОМОЙ (ПБЛ) С МУТАЦИЕЙ В ГЕНЕ ТР53
ФГБУ «НМИЦ гематологии» Минздрава России
СЛ38+, СЛ138+, СВ79а+, С020-, ВСЬ2-, ЕВУ-, ЖУС+, ЖиЖ1+,
Введение. ПБЛ диагностируется преимущественно у ВИЧ-инфицированных больных и ассоциирована с EBV позитивностью (EBV+ПБЛ). Случаи EBV-негативной ПБЛ у иммунокомпетент-ных больных (EBV-ПБЛ) встречаются редко. Жедиана выживаемости в группе EBV-ПБЛ составляет 12—18 месяцев. Жутации в гене ТР53 у больных EBV-ПБЛ встречаются в 25%; прогноз крайне неблагоприятный. Применение ауто-ТГСК в первой линии или в рецидиве неэффективно. Описаны единичные случаи выполнения алло-ТГСК, однако большинство больных погибает от прогрессии, не дожив до трансплантации. Учитывая редкость и агрессивность заболевания, стандарта терапии нет.
Цель работы. Представить оригинальный протокол лечения по программе m-NHL-BEM-90 в сочетании с леналидомидом и алло-ТГСК в первой ремиссии у пациента с EBV-ПБЛ и мутацией в гене ТР53.
Материалы и методы. ВИЧ-негативный пациент, 43 года, в октябре 2020 г. нарастающие в течение 2 месяцев увеличение левой небной миндалины, боль и затруднение при глотании. По результатам МРТ, просвет ротоглотки деформирован и сужен до 2 мм (рис. 1А, В). По данным ПЭТ-КТ, размеры левой небной миндалины составляли 30x35x53 мм, SUV 33,27, размеры яремных л/узлов 20x18 мм, SUV 30,5 (рис. 2А). Гистологическое и ИГХ-исследование биоптата миндалины выявило инфильтрацию крупными лимфоидными клетками с иммунофенотипом
в 60% мономорфная ядерная экспрессия р53. В результате ИвН-исследования выявлена 1(8;14)(д24;д32), делеция ВСБ2/18д21 и снижение интенсивности флуоресцентного сигнала от одного
НО
ПРИЛОЖЕНИЕ 1
из локусов 17р13/ТР53. Методом NGS выявлена протяженная де-леция c.529_546del (p.Prol77_Cysl82del) в 5-м экзоне гена ТР53. Был установлен диагноз EBV-ПБЛ с перестройкой гена MYC и мутацией в гене ТР53.
Результаты и обсуждение. Пациенту была проведена терапия по протоколу m-NHL-BFM-90 (4 блока А) с леналидомидом (25 мг/сут 10 дней) с эффектом в виде полной нормализации размеров левой миндалины и лимфоузлов (рис. 1А—Д). В феврале 2021 года ему была выполнена «up-front» алло-ТГСК от родственного HLA-гаплоидентичного донора (сын); режим кондиционирования (флударабин 180 мг/м2 + бусульфан 8 мг/кг) (рис. 3). Было перелито 6,2х106/кг CD34+ клеток. Иммуносупрессивная терапия проводилась по схеме: циклофосфамид 50 мг/кг на +3-Й и 4-й день, циклоспорин 3 мг/кг/день и микофенолат мофетил 3 г/день с +5-го дня. Восстановление гемопоэза на +20 день. В посттрансплантационный период серьезных осложнений не отмечалось. На +30-Й день отмечался 100%-й донорский химеризм. Через 3 мес. после алло-ТГСК достигнута полная ПЭТ-негативная ремиссия (рис. 3). В настоящее время +275-Й день после алло-ТГСК пациент находится в полной ремиссии без признаков РТПХ.
Заключение. Несмотря на короткий срок наблюдения, данный случай продемонстрировал, что интенсивная индукционная терапия в комбинации с леналидомидом с последующей алло-ТГСК является эффективной стратегией для лечения пациентов с EBV-ПБЛ с мутацией в гене ТР53, кандидатов для трансплантации. Учитывая успешный опыт, планируется продолжить набор больных.
ЕВУПБЛ перестройка c-MYC Ki68 98%
экспрессия MUM1
мутация в гене ТР53
тИН1.-ВРМ-90 + леналидо1\л»ад
J
г-х
поиск донора, сбор клеток
f л
up-front
алло-ТГСК
V
Рис.2.
Рис. 3.
Зоренко В. Ю., Полянская Т. Ю., Карпов Е. Е., Садыкова Н. В., Сампиев М. С., Мишин Г. В., Голобоков А. В., Петровский Д. Ю.,
Королева А. А., Хаупшева А. В.
30-ЛЕТНИЙ ОПЫТ ЭНДОПРОТЕЗИРОВАНИЯ СУСТАВОВ У БОЛЬНЫХ ГЕМОФИЛИЕЙ
ФГБУ «НМИЦ гематологии» Минздрава России
Введение. Отсутствие или недостаточная заместительная ге-мостатическая терапия у больных с гемофилией приводит к развитию гемофилической артропатии. Эффективным методом лечения терминальной стадии артропатии является эндопротезирование суставов. Нами выполнен анализ эндопротезирования суставов у больных гемофилией за 30 лет в условиях одного отделения.
Цель работы. На большой выборке пациентов в условиях одного отделения показать результаты эндопротезирования суставов у больных с гемофилической артропатией.
Материалы и методы. Всего выполнено 1096 эндопротезиро-ваний коленного сустава (ЭКС), тазобедренного сустава (ЭТС) 217, плечевого сустава (ЭПС) 16, локтевого сустава (ЭЛС) 12 у 775 пациентов (669 (86%)) с гемофилией А(ГА), 79 (10%) с гемофилией В (ГВ), 27 (4%) с ингибиторной формой гемофилии (ИГ). 1049 (894 первичное, 155 ревизионное). ЭКС выполнено у 653 больных без ингибитора (ГА 585, ГВ 68), 47 ЭКС (34 первичное, 13 ревизионное) у больных с ингибиторной формой гемофилии. 211 (192 первичное, 19 ревизионное) ЭТС выполнено у 174 больных без ингибитора (ГА 151, ГВ 23), б ЭТС (6 первичное) у больных с ингибиторной формой гемофилии.
Результаты и обсуждение. Перипротезная инфекция при ЭКС у больных без ингибитора развилась у 4,14%, при ингибиторной форме в 11,6%. При ЭТС перипротезная инфекция в 3,13% у больных без ингибитора и у пациентов с ингибиторной формой пери-протезитов тазобедренного сустава не было. Асептическая нестабильность компонетов эндопротеза коленного сустава развилась в 5,26% у больных без ингибитора и в 8,82% у больных с ингибиторной формой гемофилии. При ЭТС нестабильность компонентов
развилась в 3,13% у больных без ингибитора, у больных с ингибитором нестабильности компонентов ЭТС не было. Перипротезные переломы коленного сустава чаще встречались у больных с ИГ, чем у больных с гемофилией без ингибитора, в 2,94% и 0,89% соответственно. Перипротезный перелом тазобедренного сустава у больных без ингибитора развился в 1,04%.
Заключение. Частота осложнений при эндопротезировании суставов у больных гемофилией выше, чем в общей популяции, что имеет многофакторные причины: длительное поражение суставов (с детства), интра- и послеоперационная кровопотеря больше, более выраженные послеоперационные гематомы и гемартрозы, частые внутривенные введения препаратов факторов свертывания на протяжении всей жизни, приводящие к генерализации кожной флоры и развитию перипротезной инфекции, плохая санация полости рта и наличие нелеченых хронических инфекций назофарингеальной зоныу больных гемофилией. У больных гемофилией при ЭКС осложнения встречаются чаще, чем при ЭТС, что обусловлено высокой частотой и тяжестью поражения у них коленных суставов. У больных с ИГ при ЭКС частота осложнений выше, чем у больных без ингибитора, т.к., несмотря на современные возможности гемостатической терапии препаратами с шунтирующими механизмами действия, гемостаз у больных с ИГ хуже, больше интра- и послеоперационная кровопотери, более выраженные п/о гематомы, чаще требуются внутривенные введения препаратов. Исходное физическое состояние больных с ИГ обычно хуже, чем у больных без ингибитора, т.к. профилактическая терапия у них менее эффективна. Отсутствие осложнений при ЭТСу больных с ИГ обусловлено небольшим количеством ЭТС в данной группе больных.
Зоренко В. Ю., Королева А. А., Полянская Т. Ю., Карпов Е. Е., Садыкова Н. В., Сампиев М. С., Петровский Д. Ю., Мишин Г. В.,
Голобоков А. В., Хаупшева А. В.
КЛИНИЧЕСКИЙ СЛУЧАЙ ОПЕРАТИВНОГО ЛЕЧЕНИЯ ПСЕВДООПУХОЛИ У БОЛЬНОГО ГЕМОФИЛИЕЙ
ФГБУ «НМИЦ гематологии» Минздрава России
Введение. Развитие псевдоопухолей является одним из ред- 1—2%. Основной этиологической причиной считается наличие ких осложнений гемофилии. Частота встречаемости составляет гематомы, которая при отсутствии лечения или проведении
