Научная статья на тему 'Токсические культуры Fusarium из злаков Забайкалья (К этиологии болезни Кашина-Бека)'

Токсические культуры Fusarium из злаков Забайкалья (К этиологии болезни Кашина-Бека) Текст научной статьи по специальности «Биологические науки»

CC BY
29
11
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.
Журнал
Гигиена и санитария
Scopus
ВАК
CAS
RSCI
PubMed
Область наук
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.
iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

Текст научной работы на тему «Токсические культуры Fusarium из злаков Забайкалья (К этиологии болезни Кашина-Бека)»

наблюдений установлено, что стопа возвращается к исходному нормальному состоянию.

Наши наблюдения, устанавливающие быстрое возвращение стопы в нормальное состояние после нагрузки в условиях носки рационализированной обуви, свидетельствуют о том, что те патологические реакции, которые были описаны выше, в большой степени зависят <уг недостатков обуви. Это обстоятельство дает чрезвычайно благоприятные перспективы в отношении возможности профилактики патологических изменений стоп у почтальонов и у лиц аналогичных профессий путем гигиенической рационализации обуви.

Ю. И. Рубинштейн

Токсические культуры Fusarium из злаков Забайкалья (К этиологии болезни Кашина-Бека)

Из Института питания АМН СССР

В настоящем сообщении мы имеем целью поделиться предварительными данными, которые получены при микологическом исследовании образцов зерна, собранных осенью 1948 г. в очаге уровской (Кашина-Бека) болезни (экспедиция Института питания АМН СССР).

Директором уровской научно-исследовательской станции Ф. П. Сергиевским в 1943 г. была выдвинута гипотеза о роли местных злаков в этиологии уровской болезни. Наша экспедиция в результате проведенной работы подтвердила алиментарный фактор как причину заболевания и установила известную связь его с потреблением местных злаков. Однако экспериментальных доказательств этой связи до последнего времени не было. Мы попытались изучать зерно из очагов заболевания, исходя из предположения о возможной его токсичности. Мы начали работу с изучения грибковой флоры, т. е. с выделения культур грибков и постановки экспериментов на животных.

Мы имели в своем распоряжении 79 образцов главным образом пшеницы, собранных как в селах, где имели место заболевания, так и в тех, где заболеваний не было. Образцы собирались на различных участках поля (в низменной влажной части, на небольших возвышенностях и на поле, расположенном на горе) ,-^а также со склада и в отдельных семьях при подворных обходах. Часть образцов была нам представлена Н. И. Журавлевым и Ф. П. Сергиевским из различных сел.

Весь материал относится к урожаю 1948 г.

Наибольший интерес представляли образцы, собранные в четырех селах, где были заболевания, и трех непораженных, так как мы имели возможность подвергнуть этот материал микологическому исследованию непосредственно после сбора.

Микологическое исследование зерна производилось путем посева на среду Чапека и на фильтровальной бумаге. Суммируя полученные данные всех посевов, можно отметить:

1. На чашках при посеве свежесобранных злаков вырастают преимущественно грибки Alternaria и Fusarium, изредка Cladosporium и Trichothecium.

В образцах, взятых на складе и в семьях, обнаружены грибки Pénicillium и Mucor.

2. Пораженность злаков различными видами Fusarium (в среднем— 16—24%).

3. Зерно, собранное на пашнях в низменной части, поражено Fusarium значительно сильнее (40—44—68%), чем зерно с пашен на возвышенности (4—8%).

Такое сильное поражение зерна грибками рода Fusarium сразу привлекло наше внимание и направило мысль на возможную токсичность зерна: именно среди Fusarium известны токсическиё виды, вызывающие заболевания «пьяный хлеб» (Fusarium graminearum), алиментарно-токсическая алейкия (Fusarium sporotrichoides).

Сопоставляя данные микологического исследования зерна, собранного в селах, где наблюдались заболевания, с зерном из непораженных сел, удается установить известную связь между пораженностью зерна Fusarium и заболеваемостью, что весьма отчетливо видно на чашках со средой Чапека.

| Зерно из сел, где наблюдалась болезнь Кашина-Еека Зерно из здоровых сел

количество образцов зерна количество образцов, пораженных Fusarium степень поражения образцов Fusarium в % определение Fusarium (секция) количество образцов зерна количество образцов, по-раже пшх Fusarium степе ль пора-жешя образцов Fusarium в % определение Fusarium (секция)

25 25 6—68 Roseum и Sporotrichiella 11 4 2 Roseum

Таблица показывает разницу в степени заражения отдельных образцов, причем пораженность зерна из здоровых сел не превышает 2%. В образцах из здоровых сел мы встречаем грибки Fusarium только из одной секции Roseum, а в злаках из сел, где имелись заболевания, из двух секций — Roseum и Sporotrichiella.

Из исследованных нами штаммов 11 можно отнести к секции Sporotrichiella и 17—к секции Roseum. Часть культур не давала споро-ношения при обычных условиях культивирования.

Для определения токсичности культур мы использовали: 1) кожную пробу на кролике, 2) метод посева на среду с жиром, разработанный нами ранее для определения токсических свойств грибков Fusarium, и 3) кормление мышей пшеницей, зараженной определенными штаммами. 'Кожная проба на кролике ставилась, как обычно, для испытания токсичности зерна и грибковых культур. Для засева культур мы пользовались продовольственной пшеницей, полученной в Москве из Загот-зерна: для апликации мы применяли эфирную вытяжку. Из испытанных 18 штаммов 7 было из секции Sporotrichiella, 8 — из секции Roseum и 3 штамма —без спороношения. Положительную кожную реакцию дали только культуры, принадлежащие к секции Sporotrichiella, причем 4 из. них дали резкую реакцию.

На среде с жиром 6 штаммов Sporotrichiella 5 дали рост, типичный для токсичных культур Fusarium. Все культуры Roseum и неспоронося-щие росли на этой среде как нетоксичные культуры Fusarium.

Опыты на мышах

Для испытания токсичности культур мы пользовались разработанной нами ранее методикой, которая сводится к следующему. Продовольственную пшеницу (1 часть + 1 часть воды) стерилизуют и заражают определенной культурой. После выращивания зерно нагревают в течение часа при 100°. Готовится вытяжка в соотношении 1 : 10 с физиоло-

гическим раствором и 1 ¡мл этой вытяжки ежедневно вводят мышам в желудок с помощью специального зонда; таким образом, ежедневно животные получают одинаковое количество испытуемого материала. В качестве контроля мы всегда имели группу мышей, которым вводили по 1 мл таким же образом приготовленной вытяжки из той же стерильной продовольственной пшеницы, не зараженной культурами грибков. Все мыши, как подопытные, так и контрольные, содержались на обычном, полноценном рационе.

В опыте имелось 86 мышей (63 опытных и 23 контрольных). Из 63 опытных погибло 49 мышей (в продолжение 3—20 дней), причем у 48 из них на вскрытии обнаружена пневмония. Гистологические данные (И. С. Дергачев) установили сливную или очаговую пневмонию гнойно-геморрагического характера; в других органах особых изменений не отмечалось. По истечении месяца всех выживших подопытных и контрольных мышей забивали. Из 23 контрольных пали 3 мыши, причем пневмония была обнаружена в одном случае. Из 14 подопытных мышей, выживших более месяца и забитых, пневмония была обнаружена у 3. В ряде случаев при вскрытии был сделан посев ткани легкого и крови из сердца в сахарный бульон для установления микрофлоры, обусловливающей развитие пневмонии. Обнаружена палочка типа В. Friedländer.

Опыты на крысах

На белых крысах мы остановились из тех соображений, что их костно-суставная система, повидимому, является достаточно лабильной (работы по изучению рахита проводятся только на крысах). Вопросы алиментарной недостаточности, в частности, минеральных компонентов пищи, также изучаются на крысах. Опыты на крысах еще не закончены. Весь гистологический материал находится в работе.

Эксперименты были поставлены на отдельных выводках крыс, которые со дня рождения находились под нашим наблюдением. По достижении веса 30—35 г каждый выводок разделялся на две группы, одна из них шла в опыт, другая служила контролем. Более молодые крысы весом 18—20 г оказались непригодными для опыта, так как они быстро погибали. Все крысы содержались на полноценном по калорийности и витаминному составу рационе: они получали ежедневно кашу, черный хлеб, сено, овощи, вареное мясо, молоко, дрожжи, подсолнухи. Подопытным крысам ежедневно при помощи зонда вводился 1 мл 10% вытяжки из пшеницы, зараженной Fusarium. Вытяжка приготовлялась так же, как и в опытах с мышами. Контрольным крысам тоже вводилась ежедневно зондом автоклавированная, но незараженная пшеница.

Изложенные ниже эксперименты касаются работ, проведенных с одним штаммом (Fusarium № 1238). Эта культура была выделена тотчас же после сбора пшеницы в низменной части одного из полей села, где наблюдалась болезнь Кашина-Бека. По кожной пробе на кролике, по росту на среде с жиром и в опытах на мышах эта культура может быть охарактеризована как токсичная.

Опыты были проведены на шести группах (семьях) крыс — 24 подопытных и 21 контрольная; в каждой группе самцы и самки. В процессе опыта учитывалось общее состояние животных, их вес (взвешивание производилось регулярно два раза в неделю), данные рентгенографии (систематически через 3—4 недели) и патоморфологических исследований.

При болезни Кашина-Бека людей единственным объективным показателем являются рентгеновские снимки, которые позволяют диагносциро-вать ранние стадии заболевания. Крыс мы снимали в лежачем положении на брюшке, в станке с фиксированными, вытянутыми лапками. Производились снимки коленных суставов и отмечались изменения в ме-та-эпифизарной зоне и в диафизах.

Вес. 'У ряда подопытных крыс систематически в процессе всего опыта наблюдалось заметное отставание веса по сравнению с контрольными «з той же семьи. Из 24 подопытных крыс отставали .в весе 12; все контрольные равномерно прибывали в весе. Через l'/г—2 месяца проведения опыта были получены следующие данные в отношении веса.

Семья А. Вес самца подопытного 150 г, контрольного — 230 г; остальные 2 подопытных крысы пали через 5—7 недель, у обеих вес был меньше, чем у контрольных.

Семья В. Из 5 подопытных отставание веса у 3. Вес подопытных самцов 116, 148, 142 г; контрольных — 200, 204, Г80 г. В этой группе подопытные самки не отставали в весе от контрольных.

Семья Д. Из 5 подопытных крыс отставали в весе 4; через 1V2 месяца от начала опыта вес подопытного самца 113 г, контрольных— 182, 188, 154 г; вес самок: подопытных—112, 116, 140 г, двух контрольных — по 160 г.

Подопытные животные менее подвижны, апатичны, шерсть взъерошена.

Рентгенограммы ряда подопытных крыс показывают переломы диа-физов « изменения в мета-эпифизарной зоне. Так же как и отставание веса, нарушения в костях (на рентгенограммах) наблюдаются не у всех крыс, принадлежащих к одной семье; 9 контрольных крыс на рентгенограмме показали нормальное развитие костей, без патологических изменений.

Изменения у подопытных крыс выражаются в переломах трубчатых костей со значительным смещением фрагментов. В ряде случаев наблюдалось разрежение костной ткани. На месте переломов иногда имелась костная мозоль; в некоторых случаях имело место рассасывание костной ткани. В семье А через 5 недель от начала опыта у всех трех подопытных животных были отмечены односторонние поражения в костях голени, выражавшиеся в наличии патологических переломов (зон перестроек) в метафизах и диафнзах; иногда имели место дозольно значительные деформации за счет расхождения отломков; у одной крысы был обнаружен «рупнооскольчатый свежий перелом диафиза бедра с дефектом кости; у другой (из этой же семьи) отмечены ясно выраженные явления репарации в виде образования периостальной и энд-остальной костной мозоли, вплоть до восстановления структуры. Указанные изменения можно характеризовать как картину развивающейся остеопатии, повидимому, токсического характера. У двух контрольных крыс развитие костей шло нормально. У ряда подопытных крыс в области мета-эпифизарной зоны наблюдалась некоторая смазан-ность контуров и структуры; в некоторых случаях создавалось впечатление, что мета-эпифизарная линия извилиста, смазана и отсутствует резкая граница между эпифизом и метафиэом. У ряда животных можно было отметить едва уловимое сужение в мета-эпифизарной линии, которая была выражена менее отчетливо, чем у контрольных того же возраста {той же семьи). В 2 случаях зону росткового хряща в болъшебер-цовых костях едва можно было проследить у крыс 6-недельного возраста. У контрольных крыс не отмечалось ни переломов, ни рассасывания костей, ни деструкции. Изменений в мета-эпифизарной зоне тоже не наблюдалось: она четко контурирована, хорошо видна структура и ясно выражена мета-эпифизарная линия.

В 2 случаях на вскрытии были отмечены локтевые сгибательные контрактуры и мышечная атрофия. У одной крысы обнаружено искривление позвоночника. У контрольных крыс на вскрытии патологических изменений не отмечено. Из 24 подопытных крыс пало 10. Контрольные не погибали, но их забивали по мере того, как погибала соответствующая подопытная крыса.

Помимо опытов с культурами Fusarium, нами были поставлены опыты с группой крыс (3), которые получали пшеницу, привезенную из села, где было больше заболеваний. Эти крысы содержались на полном обычном рационе, но взамен каши они получали испытуемое зерно. Контрольные крысы (3) вместо каши получали нормальную продовольственную пшеницу. Через 2 месяца от начала опыта у 2 подопытных крыс на рентгенограмме были отмечены значительные односторонние переломы в области диафизов голени. Через 31/г месяца от начала опыта эта картина стала еще резче; кроме того, появилась смазанность в области мета-эпифизарной линии. У контрольных крыс за тот же период никаких отклонений от нормального развития костей обнаружено

не было. У обеих подопытных крыс появилось резкое утолщение и неподвижность правых коленных суставов.

В настоящее время мы имеем возможность сделать лишь предварительные выводы, которые сводятся к следующему.

1. Пшеница сбора 1948 г. из ряда сел, где наблюдалась болезнь Кашина-Бека, сильно поражена грибками Fusarium различных видов.

2. Выделенные культуры Fusarium токсичны по кожной пробе, по характеру роста на среде с жиром и при кормлении мышей.

3. При кормлении белых крыс токсичной культурой Fusarium (секция Sporotricniella) на пшенице у части из них отмечаются изменения в костно-суставной системе, обнаруживаемые на рентгенограмме: остеопатия (повидимому, токсического характера), а также изменения в области мета-эпифизарной зоны, не наблюдаемые у контрольных крыс того же возраста (2—2х/г месяца).

4. Отмечены изменения в диафизах и эпифизах костей и поражения в области коленных суставов у 2 крыс (из 3 подопытных) при кормлении их пшеницей из села, где (наблюдалась болезнь Кашина-Бека.

5. Крысы являются, повидимому, подходящими лабораторными животными для экспериментального изучения болезни Кашина-Бека.

6. Некоторые культуры Fusarium из пшеницы способны в определенных условиях образовать токсические вещества, которые при энтераль-ном введении крысам вызывают у них патологические процессы в костях.

А. А- Левит

Бактерии тифо-паратифозной группы в сточных водах, почве и на овощах полей орошения1

Из кафедры гигиены Московского медицинского института Министерства здравоохранения РСФСР

Проблема развития полей орошения, призванная решить задачу всестороннего использования сточных вод, приобретает в настоящее время серьезное народнохозяйственное значение.

По предложению профессора Н. М. Анастасьева на кафедре гигиены Московского медицинского института РСФСР нами была проведена работа, которая имела целью решение следующих основных задач, связанных с проблемой применения сточных вод в агрикультурных целях:

1. Изучение зараженности городских сточных вод бактериями тифо-паратифозной группы.

2. Проведение специальных исследований для выяснения выживаемости бактерий т^фо-паратифозной группы в сточных водах.

3. Исследование почвы полей орошения с целью выяснения зараженности ее бактериями тифо-паратифозной группы.

4. Установление длительности выживания бактерий тифо-паратифозной группы в почве после искусственного заражения.

5. Изучение зараженности овощей, выращиваемых на полях орошения, бактериями тифо-паратифозной группы.

Для проведения экспериментальных исследований нами была развернута работа на опытном участке в районе города N.

1 Работа доложена на Всесоюзной конференции по вооросам (гигиены воды и почвы, созванной Институтом общей и коммунальной гигиены Академии медицинских наук ССОР в 1948 Г.

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.