CC BY
9
не было. У обеих подопытных крыс появилось резкое утолщение и неподвижность правых коленных суставов.
В настоящее время мы имеем возможность сделать лишь предварительные выводы, которые сводятся к следующему.
1. Пшеница сбора 1948 г. из ряда сел, где наблюдалась болезнь Кашина-Бека, сильно поражена грибками Fusarium различных видов.
2. Выделенные культуры Fusarium токсичны по кожной пробе, по характеру роста на среде с жиром и при кормлении мышей.
3. При кормлении белых крыс токсичной культурой Fusarium (секция Sporotricniella) на пшенице у части из них отмечаются изменения ■в костно-суставной системе, обнаруживаемые на рентгенограмме: остеопатия (повидимому, токсического характера), а также изменения в области мета-эпифизарной зоны, не наблюдаемые у контрольных крыс того же возраста (2—2х/г месяца).
4. Отмечены изменения в диафизах и эпифизах костей и поражения в области коленных суставов у 2 крыс (из '3 подопытных) при кормлении их пшеницей из села, где (наблюдалась болезнь Кашина-Бека.
5. Крысы являются, повидимому, подходящими лабораторными животными для экспериментального изучения болезни Кашина-Бека.
6. Некоторые культуры Fusarium из пшеницы способны в определенных условиях образовать токсические вещества, которые при энтераль-ном введении крысам вызывают у них патологические процессы в костях.
А. А- Левит
Бактерии тифо-паратифозной группы в сточных водах, почве и на овощах полей орошения1
Из кафедры гигиены Московского медицинского института Министерства здравоохранения РСФСР
Проблема развития полей орошения, призванная решить задачу всестороннего использования сточных вод, приобретает в настоящее время серьезное народнохозяйственное значение.
По предложению профессора Н. М. Анастасьева на кафедре гигиены Московского медицинского института РСФСР нами была проведена работа, которая имела целью решение следующих основных задач, связанных с проблемой применения сточных вод в агрикультурных целях:
1. Изучение зараженности городских сточных вод бактериями тифо-паратифозной группы.
2. Проведение специальных исследований для выяснения выживаемости бактерий т^фо-паратифозной группы в сточных водах.
3. Исследование почвы полей орошения с целью выяснения зараженности ее бактериями тифо-паратифозной группы.
4. Установление длительности выживания бактерий тифо-паратифозной группы в почве после искусственного заражения.
5. Изучение зараженности овощей, выращиваемых на полях орошения, бактериями тифо-паратифозной группы.
Для проведения экспериментальных исследований нами была развернута работа на опытном участке в районе города N.
1 Работа доложена на Всесоюзной конференции по вооросам (гигиены воды и почвы, созванной Институтом общей и коммунальной гигиены Академии медицинских наук ССОР в 1948 Г.
В течение 1946—1947 гг. было проделано в общей сложности около 1 ООО исследований: сточных вод, идущих на поля орошения, почвы полей орошения и овощей, выращиваемых на этих полях.
Наилучшей средой для выделения бактерий тифо-паратифозной группы является висмут-сульфитная среда. Данная среда создает благоприятные условия для развития брюшно- и паратифозных бактерий, подавляет рост сопутствующей ¡микрофлоры, облегчая этим самым выделение названных микробов из подозрительных объектов. Для окончательного решения вопроса о выборе среды мы поставили предварительные опыты с параллельными посевами сточной воды двух инфекционных больниц на висмут-сульфитную среду и среду Эндо. При исследовании всех проб сточной жидкости были получены результаты, представленные в табл. 1.
Таблица 1
«3 я Взятие пробы Количество Результаты исследования
О из место дата время посевов среда Эндо висмут-сульфитная среда
№ 1 Инфекционный 10. VII. 11 часов 30 Бакте- Бактерии тифо-
корпус № 15 1945 г. рии тифо-парати- паратифозной группы не обнаружены
№ 1 Общий сток 11. VII. 10 часов 40 фозной группы не обнаружены Обнаружены
всех инфекцион- 1945 г. 30 минут палочки парати-
1 ных корпусов фа В
№ 1 Общебольничный сток 12. VII. 1945 г. То же 40 Обнаружены палочки паратифа В
Убедившись в бесспорном преимуществе висмут-сульфитной среды, «мы приступили к решению следующей задачи: проследить выживаемость бактерий тифо-паратифозной группы по всему пути следования стоков вплоть до полей орошения.
Протяженность пути сточной жидкости, выбранного нами для исследования, была равна 19 км. Ежедневно по этому пути на поля орошения поступает до 1 800 м3 сточной жидкости. Время прохождения от отправной точки до полей орошения исчисляется 7—8 часами.
На всем пути следования было избрано 7 точек, которые и служили •местом забора проб сточной жидкости (см. рисунок). Первой отправной точкой исследований была взята инфекционная больница на 150 коек. К моменту проведения нашей работы в больнице было занято 120 коек, на которых находились больные брюшным тифом, паратифами, дизентерией и в небольшом числе больные терапевтические.
На территории двора больницы имеется пять смотровых колодцев, расположенных примерно на одной линии, причем последний из них является сборным для всех сточных вод больницы. Он и служил нам местом забора проб. Пробы сточной жидкости забирались в стерильные бутылки и немедленно доставлялись в лабораторию для исследования. Посевы сточной воды делались непосредственно на висмут-сульфитный агар, приготовленный в день исследования.
Методика исследования была следующая: 0,2—0,3 мл сточной жидкости наносили на середину чашки Петри с висмут-сульфитным агаром и осторожно размазывали шпателем по всей поверхности чашки. Посевы ставились в термостат при температуре 37°. Через 24 часа чашки просматривали и подозрительные колонии перевивали на среду Эндо, приготовленную с лактозой и сахарозой. Чашки со средой Эндо в свою ■очередь ставились на сутки в термостат при 37°, после чего с бесцветными колониями проводилась реакция агглютинации на стекле.
Ориентировочная реакция агглютинации производилась со смесыо сывороток: paratyphi A, paratyphi В и typhi abdominalis, смешанных в равных объемах в разведении 1 : 100. Колонии, давшие положительную реакцию агглютинации в разведении 1 : 100, считались подозрительными и подвергались детальному изучению (окраска по Граму, подвижность, реакция на индол, посевы на синтетические среды и сахара). Если подозреваемый штамм по биохимическим и морфологическим данным мог быть отнесен к бактериям тифо-паратифозной группы, то с данной культурой ставилась развернутая агглютинация со специфической сывороткой в разведении до титра сыворотки.
Мы считали возможным, как это принято при бактериологическом исследовании, причислить ту или иную культуру к патогенным, если она в основном — по своим морфологическим, биохимическим и серологическим свойствам — вполне отвечала подозреваемому микробу, давая реакцию агглютинации в разведении не меньше чем на титра специфической сыворотки.
Анализы сточной жидкости, взятой из сборного смотрового колодца № 1, обнаружили палочку брюшного тифа и паратифа В (табл. 2).
Вторая точка взятия проб сточной . жидкости — смотровой колодец № 2. Здесь происходит слияние сточных вод инфекционной больницы с хозяйственно-бытовыми сточными водами, идущими главным образом от жилых домов. По данному участку обнаружена палочка паратифа В (табл. 2).
Третьим местом забора проб сточной жидкости мы избрали смотровой колодец № 3. Здесь сточные воды смешиваются со сточными водами ряда промышленных предприятий (гвоздильно-фурнитур-ный завод, кожевенный завод, механические заводы и др.). Как видно из табл. 2, нам опять удалось выделить палочку паратифа В.
Четвертым местом забора проб сточной жидкости была главная насосная станция города. Сюда поступает около 80% всех городских сточных вод из различных больниц, хозяйственно-бытовых, банно-прачечных и целого ряда промышленных предприятий.
Пробы сточной жидкости забирались внутри здания насосной станции, непосредственно из люка — места, где сточная жидкость проходит через грабли и решотки, освобождаясь от крупных взвешенных частиц (тряпки, бумага и т. д.). Результаты исследования показали, что наличие палочки паратифа В остается неизменным (табл. 2).
Пятая точка забора проб — смотровой колодец № 5, где состав сточных вод тот же, что и на главной насосной станции. Здесь опять выделена палочка паратифа В (табл. 2).
Таблица 2. Характеристика штам
Место взя гия пробы Наименование выделенного штамма № штамма Окраска по Граму Подвижность
Инфекционная больница, смотровой колодец № 1 В. typhi abdomlnalis1 В. paratyphi В В. paratyphi В В. paratyphi В 1 5 4 1 Отрицательная • • Положительн. •
Смотровой колодец № 2 В. paratyphi В ; 8 Отрицательная Положительн.
Смотровой колодец № 3 В. paratyphi В 6 Отрицательная Положительн.
Главная насосная станция города В. paratyphi В ■ . . ' За Зв 7 1а 16 1 в 1 г 25 22 22а 11 Отрицательная > • Положительн. • • - •
Смотровой колодец № 5 В. paratyphi В 13 13а 136 13в 13г 13д 1 Зе 13ж 1.S3 13и 31 31а 316 31в Отрицательная » а ■ > Положительн. » • • •
Насосная станция полей орошения В. paratyphi В 9 7 8 10 11 21о 21 Отрицательная Положительн. ■ ;
Разводящий канал на полях орошения 1 — кислота. 3 0 — газ. 42™" В. paratyphi В 4а 12 14 15 Отрицательная Положительн.
мое, выделенных из сточной воды
Реакция на индол Брожение Сахаров Реакция Титр Количество
лактоза глюкоза сахароза мальтоза агглютинации сыворотки выделенных штаммов
Отрицательная > > > _ +1- +0 +0 +0 -4- — +0 40 +0 1:25000 1:12 800 1: 6 400 1 1: 6 400 | 30 000 40 000 40000 40000 4
Отрицательная — -Н> — +0 1:40 000 40 000 1
Отрицательная — 40 — +0 — — —
Отрицательная э » » > 9 » » > > — 40 +0 +0 +0 +0 +0 4-0 +0 +0 +0 +0 — н Н - - н - -0 -0 -0 -0 -0 -0 -0 -0 г0 -0 -0 1:25 000 1:40 000 1:25 000 1:40 000 1:25000 1:25 000 1:40000 1:12 800 1:40000 1:40 000 1:12 000 40 000 40 000 40 000 40 000 40 000 40 000 40 000 40 000 40 000 40 000 40 ООО 11
Отрицательная » з> э » э > > э > > — +0 +0 +0 +0 40 40 40 +0 -0 4-0 +0 +0 40 4-о — Н> 1-0 1-0 ко -0 -0 -0 -0 -0 -0 -0 -0 -0 -0 1:40 000 1:40 000 1:400,0 1:40 000 1:40 0Э0 1:40 001 1:40 000 1:40 000 1:40 0^ 1:40 0С0 1:40 000 1:25 ООО 1:25 ООО 1:25000 40 000 40000 40 000 4000.) 40 000 40 00) 40 000 40 0-0 40 000 40 000 40 000 40 000 40 000 40 000 14
Отрицательная * * » » > — +0 +0 +0 +0 40 +0 +0 Е - НО -0 -0 -0 -0 -0 НО 1:25000 1:25 000 1:25 ООО 1:25 ООО 1:25 000 1:25 ООО 1:25000 40000 40 000 40 000 40 000 40 000 40 ООО 40 000 7
Отрицательная > - > > — 40 -1-0 40 40 4-0 -гО 40 1:40 000 1:40 000 1:25 000 1:10 ООО 40000 40003 40000 40 000 4
Шестая и седьмая точка забора проб сточной жидкости были уже на полях орошения.
Сточная жидкость здесь также представляла собой омесь бытовых, больничных и промышленных сточных 'ВОД.
В последних двух точках были также обнаружены палочки паратифа В (табл. 2).
Таким образом, суммируя все вышеприведенные данные, мы видим, что по всему пути следования сточной жидкости и в разводящем канале полей орошения обнаруживаются бактерии тифо-паратифозной группы.
В табл. 2 даны сводные результаты наших исследований по всем точкам с подробной характеристикой каждого штамма. Указанные данные позволяют с полным основанием причислить выделенные штаммы к группе тифо-паратифозных бактерий.
Палочка брюшного тифа была обнаружена нами только в сточных водах инфекционной больницы, в то время как палочка паратифа В неизменно выделялась по всему пути следования сточной жидкости. Это явление, повидимому, объясняется различной устойчивостью микробов в сточной жидкости.
Затем мы решили проследить, какова же дальнейшая судьба этих бактерий, попавших на почву полей орошения.
В свете современного учения роль почвы в передаче тех или иных, инфекционных заболеваний и ее роль как носителя большого количества патогенных микроорганизмов ставится (за исключением спорообразую щих бактерий) под сомнение. Патогенные бактерии погибают и разрушаются здесь под воздействием специфических бактериофагов, под действием микробов-антагонистов, под влиянием вырабатываемых микробами специфических антибиотических веществ, которые разрушающе действуют на бактерий. Заболотный, Горовиц-Власова, Диатроптов, Ваксман, Фрост, Мартини считают почву мало удобной средой для патогенных бактерий. Такие микробы, как тифозные, холерные, чумные, быстро погибают в почве. Все авторы сходятся на том, что более загрязненная почва ухудшает условия существования патогенной микрофлоры, приводя ее к быстрой гибели.
Для того чтобы установить дальнейшую судьбу бактерий, попавших со сточной жидкостью на поля орошения, мы провели многократные исследования почвы на зараженность ее бактериями тифо-паратифозной группы. Пробы почвы забирались с участкоз, засеянных огурцами, помидорами и морковью, в различные сроки полива.
Методика: Пробы почвы отбирали на глубине 5—30 ом. Стерильной ложкой вырывали ямку указанной глубины « на протяжении 30 ом (снизу вверх >по стенке) брали пробу в стерильную банку. Пробы немедленно доставлялись в лабораторию. Из средней пробы каждого образца почвы бралась навеска в количестве 20 г для приготовления болтушки из расчета 1 : 10 (за единицу принимается количество почвы в граммах). В течение 15 минут болтушка тщательно взбалтывалась и после 5-минутного отстаивания засевалась в количестве ОД—0,3 мл непосредственно на чашки с висмут-сульфитной средой. Вся дальнейшая методика была та же, что и при исследовании сточных вод.
В день полива было взято 126 анализов, через сутки после полива-— 86, через 3 суток после полива — 75, через 5 суток после полива — 75, через 7 суток после полива — 75 и через 10 суток после полива — 75; всего 512 анализов. Мы пользовались для исследования той же методикой, при помощи которой так успешно удавалось выделять бактерий тифо-паратифозной группы из сточной жидкости. Несмотря на это, все наши попытки обнаружить указанную микрофлору в почве не дали положительных результатов. 'Мы ни разу не выделили подозрительных микробов, которые по каким-либо свойствам могли бы быть отнесены к данной группе бактерий и заслуживали бы дальнейшего изучения.
Для еще большей уверенности в правильности применяемой нам*
методики и возможности объяснить отсутствие бактерий тифо-парати-фозной группы их гибелью в почве мы поставили опыты с искусственным заражением почвы в лабораторных условиях. Для этой цели была взята почва с полей орошения и облита сточной жидкостью, предварительно зараженной однодневной агаровой культурой паратифа В (заражение сточной жидкости было сделано из расчета 10 палочек паратифа В на каждый миллилитр сточной жидкости). После заражения почва была оставлена на открытом воздухе на 10 дней. Посевы почвы производились в течение этого времени в различные промежутки. Полученные результаты представлены в табл. 3.
Таблица 3
Время взятия проб Количество посевов Результаты исследования
40 Обнаружено 2 штамма палочки паратифа В
Через сутки после заражения .... 46
. 2 суток . . .... »3. „ . .... с; Я > V в .... 40 40 40 Бактерии тифо-парати-[ фозной группы не обнаружены
7 1» ' » » • •••• 46
.10....... 36
1Как видно из данных, приведенных в табл. 3, мы имели возможность выделить палочку паратифа В из почвы только в день ее заражения, в последующие дни открыть присутствие этого микроба в почве не удалось. Если мы имеем незначительное расхождение с некоторыми авторами в сроках выживаемости данной микрофлоры в почве, то это, по-видимому, объясняется степенью заражения и условиями, в которых находились зараженные образцы.
Проделанные 512 анализов образцов почвы полей орошения и поставленные опыты с искусственным заражением дают основание предполагать, что в почве наступает довольно быстрая гибель бактерий тифо-яаратифозной группы.
Следующим этапом нашей работы было исследование овощей с полей орошения. По литературным данным работы, проделанные в этом направлении, складываются: из исследования овощей, искусственно зараженных в условиях эксперимента, и из исследования овощей, взятых непосредственно с полей орошения. Результаты этих исследований следующие.
Работы Одесской бактериологической лаборатории, опубликованные в свое время Диатроптовым, при искусственном заражении овощей патогенной микрофлорой (холера) установили гибель последних через 1—2 часа на солнце и через сутки в тени. Коцын, Скородумов, Ромашина при многократных исследованиях овощей, взятых с полей орошения, не обнаружили бактерий тифо-паратифозной группы. Гиммельфарб и Перцовская, обнаружившие на овощах бактерии кишечно-тифо-пара-тифозной группы, сами называют их только подозрительными на патогенные.
Анализ литературных данных показывает, что не имеется убедительных экспериментальных данных, доказавших наличие тифо-паратифоз-ных бактерий на овощах с полей орошения.
Объектом для исследования овощей служил совхоз полей орошения. Поля этого совхоза орошаются канализационными водами. Полив овощных культур обеспечивается на площади 110 га И осуществляется по бороздам шириной 70 см. Посев овощей производится преимущественно на гребнях высотой около 10—12 см и шириной 50 см
При выборе ассортимента овощей для исследования мы остановились на огурцах, помидорах и моркови по тем соображениям, что все эти овощи находятся в несколько различных условиях выращивания на полях. Огурцы растут при непосредственном соприкосновении с поверхностными слоями почвы и поэтому при неправильном поливе могут загрязняться сточными водами. В противоположность им помидоры ¡растут при наименьшем контактировании с почвой и поэтому попадание на них сточной воды менее вероятно. Морковь мы взяли как представительницу корнеплодов, у которой съедобная часть находится в земле. Таким образом, для выбранных нами овощей условия возможности инфицирования патогенными бактериями при выращивании на полях орошения неодинаковы.
Методика. Смыв с овощей, ¡полученный с соблюдением правил стерильности, отфильтровывался через мембранные фильтры, которые затем помещались на чашки Петри с висмут-сульфитным агаром. Осадок смыва засевался непосредственно на чашки с данной средой. Всего нами было исследовано 580 образцов различных оео-щей (табл. 4).
Таблица 4
Овощи Место взятия пробы Количество образцов Количество овощей в кг -! Результаты исследования ,
Огурцы Помидоры Морковь Открытый грунт » » 197 193 190 21 28 29 Бактерии тифо-' паратифозной группы не обнаружены
Итого . . . 580 78
Как видно из табл. 4, ни разу не удалось обнаружить бактерии тифо-паратифозной группы. Считаем нужным подчеркнуть, что при пользовании мембранными фильтрами мы имели 'возможность брать для исследования почти весь смыв с овощей. Этим самым мы увеличивали возможность выделения данной группы бактерий в 50, а иногда и в 100 раз по сравнению со сточной жидкостью (при исследовании сточной жидкости мы брали для исследования посевов из каждого литра жидкости 5—10 мл материала). Тем не менее обнаружить бактерий тифо-паратифозной группы нам не удалось.
Выводы
1. В сточной жидкости, идущей для полива полей орошения, нами выделены бактерии тифа и паратифа В, причем: а) бактерии тифа обнаруживаются только в момент выделения их из инфекционного очага (в нашем конкретном случае инфекционной больницы); по дальнейшему пути следования сточной воды обнаружить их не удалось; б) бактерии паратифа В были выделены из сточной жидкости по всему пути следования ее до разводящего канала, расположенного непосредственно на полях орошения.
2. В пробах почвы, взятых с грядок и борозд полей орошения, бактерий тифо-паратифозной группы не обнаружено.
3. При искусственном заражении почвы бактериями паратифа В в лабораторных условиях последние не обнаруживаются через 24 часа.
4. На овощах, взятых с полей, орошаемых сточной жидкостью, бактерии тифо-паратифозной группы не обнаружены.
5. Проверенная нами методика — висмут-сульфитная среда для выделения бактерий тифо-паратифозной группы — является наиболее на-
дежной для обнаружения тифо-парагифозных бактерий. Пользуясь ею, мы успешно выделяли интересующих нас бактерий из сточной жидкости по всему избранному нами ути. Многочисленные же исследования почвы и овощей с полей орошения не дали положительных находок ти-фо-паратифозных бактерий.
Проф. И. Е. Минкевич
О кишечной палочке как патогенном начале1
Из Ленинградского научно-исследовательского санитарно-гигиенического института
Еще в 1894 г. Г. Н. Габричевский писал, что «учение о В. coli commune как болезнетворном начале представляет одну из интересных страниц в патологии человека».
В его собственных экспериментах на морских свинках убедительно было показано Патогенное действие кишечной палочки и им же было ясно сформулировано указание на две возможности возникновения колиинфекций — экзогенную и эндогенную. С тех пор в изучении этой проблемы многое было сделано нашими соотечественниками Юрловский, Мясников, Радзиевский, Медовиков, Горовиц-Власова, Златогоров, Доброхотова и др.). Однако дальнейшее более широкое и углубленное изучение этой проблемы представляется совершенно необходимым.
Хотя бактерии группы coli по своим биологическим свойствам далеко не обладают полнотой характеристики патогенных видов и, как известно, в организме человека и животных в норме ведут образ жизни комменсалов кишечника, однако при наличии различных моментов, снижающих устойчивость организма (массивная заражающая доза, несовершенство защитных механизмов раннего детского возраста, нарушенное и недостаточное питание, предшествующие инфекции и др.), они, несомненно, могут проявить свое патогенное действие. При этом, естественно, в качестве болезнетворных начал выступают те из штаммов кишечной палочки, у которых по сравнению с другими наиболее выражены токсические или инвазионно-агрессивные свойства, или те и другие в их сочетании.
Мы концентрируем здесь внимание на роли кишечной палочки при поражениях желудочно-кишечного тракта: пищевых отравлениях, дис-пептических и токсико-септических заболеваниях грудных детей и при энтероколитах взрослых; здесь еще далеко не все ясно и имеется много поводов для дискуссий.
Само собой разумеется, что при кишечных инфекциях следует учитывать в первую очередь общеизвестное и первенствующее этиологическое значение патогенных бактерий групп салмонелла и шигелла, и вопрос о причинном значении бактерий группы кишечной палочки может возникать только лишь после исключения участия в патологических процессах тифозно-паратифозных или дизентерийных возбудителей.
Несомненно также и то, что бактерии группы coli из числа условно-патогенных видов не являются единственными факторами кишечных расстройств, так как достаточно хорошо известно, что их могут также вызывать бактерии из групп proteus, Morgagni, Pseudomonas и др.
В утверждении патогенного значения кишечной палочки при пищевых отравлениях большая заслуга принадлежит советским исследова-
1 Доложено 8.IV.1949 г. на республиканской научной сессии санитарно-гигиенических институтов РСФСР в Москве.
