CC BY
7
184
МАТЕРИАЛЫ V НАЦИОНАЛЬНОГО КОНГРЕССА ПО РЕГЕНЕРАТИВНОЙ МЕДИЦИНЕ
Внеклеточные везикулы представляют собой мембранные структуры, играющие важную роль в межклеточных коммуникациях, поскольку они обладают способностью транспортировать липиды, факторы транскрипции, мРНК и белки. Имеются данные об особой роли везикул в прогрессировании рака. Поэтому изучение влияния везикул на опухолевые сфероиды имеет важное значение. Целью данной работы является изучение влияния мембранных везикул, индуцированных цитохалазином В (иМВ), на сфероиды колоректального рака in vitro.
В этом исследовании для создания опухолевых сфероидов использовали клеточную линию колоректального рака (HCT-15). Клеточная линия глиобластомы (SNB-19) и мезенхимальные стволовые клетки, полученные из жировой ткани (МСК), были использованы для выделения МВ. Везикулы из SNB-19 (SNB-19 иМВ) и МСК (МСК иМВ) выделяли с использованием 10 мкг/мл цитохалазина В и серии последовательных центрифугирований. Добавление SNB-19 иМВ и иМВ МСК к сфероидам осуществляли в концентрациях 1, 2 и 5 мкг. Влияние SNB-19 иМВ и иМВ МСК анализировали с использованием проточной цитоме-трии, мультиплексного анализа и ПЦР в реальном времени.
После добавления МСК иМВ не было значительного изменения жизнеспособности клеток в сфероиде. Однако при добавлении иМВ SNB-19 в колоносферу наблюдалось дозозависимое повышение жизнеспособности клеток. Уровни мРНК OCT4 и Nanog повышались после добавления SNB-19 иМВ, но снижались после добавления иМВ МСК. Цитокиновый анализ показал значительные различия в 40 основных цитокинах в колонос-ферах с SNB-19 иМВ и МСК иМВ.
Таким образом, показано возможное влияние SNB-19 иМВ и МСК иМВ на опухолевые сфероиды. Необходимы дальнейшие исследования эффектов этого механизма. Данное исследование выполнено в рамках Программы стратегического академического лидерства Казанского федерального университета (ПРИ0РИТЕТ-2030) и при финансовой поддержке гранта Российского научного фонда 21-74-10021. Авторы подтверждают отсутствие конфликта интересов.
ТКАНЕВОЙ ЭКВИВАЛЕНТ ЭНДОКРИННОГО ОТДЕЛА ПОДЖЕЛУДОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ
А.С. Пономарева, Н.В. Баранова, А.О. Никольская, З.З. Гоникова, И.А. Милосердов, В.И. Севастьянов
ФГБУ НМИЦ трансплантологии и искусственных органов им. академика В.И. Шумакова Минздрава России, Москва, Россия
e-mail: a.s.ponomareva@gmail.com
Ключевые слова: тканевой эквивалент поджелудочной железы, островки Лангерганса, тканеспецифический биома-трикс, децеллюляризация.
Одним из направлений технологий тканевой инженерии и регенеративной медицины для лечения сахарного диабета 1 типа является создание тканевого эквивалента эндокринного отдела поджелудочной железы (ПЖ) на основе тканеспецифического биоматрикса (ДПЖ матрикса) из децеллюляризованной панкреатической ткани [1]. Сохранение в ДПЖ матриксе структурных, биохимических и биомеханических свойств нативного ВКМ при максимально полном удалении клеточного материала позволяет имитировать микроокружение, способствующее пролонгированной функции жизнеспособных островковых клеток in vitro и in vivo [2].
Цель работы: исследовать влияние ДПЖ матрикса на инсулинпродуцирующую функцию жизнеспособных островков Лангерганса (ОЛ) крысы и человека.
Материалы и методы. ДПЖ матрикс получали в результате децеллюляризации фрагментов ПЖ крысы (Vistar) и человека с применением поверхностно-активных веществ при различных режимах обработки панкреатической ткани. ОЛ крысы и человека выделяли, используя традиционную модифицированную методику с использованием коллагеназы, и культивировали в монокультуре (контрольные группы Ккр и Кч) и в присутствии ДПЖ матрикса (опытные группы Окр и Оч). Жизнеспособность ОЛ определяли методом флуоресцентного окрашивания витальным красителем, секреторную способность — методом иммуноферментного анализа (ИФА). Изменения концентраций инсулина в опытных группах оценивали относительно контрольных групп.
Результаты исследования. ОЛ, культивированные с ДПЖ матриксами, не проявляли признаков фрагментации и деградации, оставаясь жизнеспособными в течение всего срока наблюдения (7 суток) по сравнению с монокультурой ОЛ. Базальная концентрация инсулина в опытных группах Окр повышалась по сравнению с контрольной группой Ккр на 48,7%, 102,9% и 373,6% на первые, третьи и шестые сутки культивирования, соответственно. Базальная концентрация инсулина в опытных группах Оч на первые сутки культивирования возрастала на 39,5% по сравнению с контрольной группой Кч, а на четвертые и седьмые — на 55,3% и 68,1%, соответственно. Предварительные результаты экспериментов in vivo, полученные на малой выборке лабораторных животных, подтвердили функциональную эффективность тканевого эквивалента ПЖ на основе ДПЖ матрикса и ОЛ крысы при внутрибрюшинном введении.
Заключение. Выявлено позитивное влияние аллоген-ных тканеспецифических биоматриксов на жизнеспособность ОЛ. В экспериментах in vitro и in vivo показана принципиальная возможность создания тканевого эквивалента эндокринного отдела ПЖ.
Литература:
1. Damodaran R.G., Vermette P. et. al. J Tissue Eng Regen Med.
2018. V. 12 (5). Pp 1230-1237.
2. Sevastianov V.l., Baranova N.V., Kirsanova L.A. et. al. J Gene
Engg Bio Res. 2021. V. 3 (2). Pp 17-25.
СТРУКТУРНЫЕ ИЗМЕНЕНИЯ И ФОРМИРОВАНИЕ МЕЗОТЕЛИЯ НА ПОВЕРХНОСТИ АЦЕЛЛЮЛЯРНОГО МАТРИКСА ПРИ ИМПЛАНТАЦИИ НА ДЕСЕРОЗИРОВАННУЮ СТЕНКУ ЖЕЛУДКА КРЫСЫ
Ю.В. Пономарева1, Н.Н. Сарбаева1,
В.И. Белоконев2, М.Н. Милякова1, М.В. Королев3
1 ООО «АРТБИО», Самара, Россия
2 ФГБОУ ВО СамГМУ Минздрава России, Самара, Россия
3 ЧУОО ВО Медицинский университет «Реавиз», Самара, Россия
e-mail: artbio_com@mail.ru
Ключевые слова: децеллюляризация, ацеллюлярный дер-мальный матрикс, мезотелий, спаечная болезнь брюшной полости.
Для снижения числа осложнений (спаечной болезни, свищей, инкапсуляции), связанных с имплантацией
Гены & Клетки XVII, №3, 2022
