CC BY
42
МЕДИКО-БИОЛОГИЧЕСКИЕ НАУКИ
УДК 615.03: 615.28: 615.036.8
ТЕРАПЕВТИЧЕСКАЯ ЭФФЕКТИВНОСТЬ МЕХАНОХИМИЧЕСКИ СИНТЕЗИРОВАННЫХ КОМПОЗИЦИЙ АНТИБИОТИКОВ И НАНОСТРУКТУРИРОВАННОГО ДИОКСИДА КРЕМНИЯ ПРИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОМ СЕПСИСЕ У МЫШЕЙ (CBA х C57Bl6)F1
Константин Валентинович ГАЙДУЛЬ1, Александр Петрович ЛЫКОВ2, Ольга Николаевна ЛАРИНА3, Ирина Александровна ГОЛЬДИНА1, Ирина Васильевна САФРОНОВА1, Сергей Александрович ГУСЬКОВ4, Вероника Ивановна ЕВСЕЕНКО4, Александр Валерьевич ДУШКИН4, Николай Захарович ЛЯХОВ4, Владимир Александрович КОЗЛОВ1
1 ФГБУ НИИ клинической иммунологии СО РАМН 630099, г. Новосибирск, ул. Ядринцевская, 14
2 ФГБУ НИИ молекулярной биологии и биофизики СО РАМН 630117, г. Новосибирск, ул. Тимакова, 2
3 ФГБУ «Новосибирская межобластная ветеринарная лаборатория» 630007, г. Новосибирск, ул. Серебренниковская, 5
4 ФГБУН Институт химии твердого тела и механохимии СО РАН 630128, г. Новосибирск, ул. Кутателадзе, 18
Изучена терапевтическая эффективность механически модифицированных с сорбцией на наноструктуриро-ванных частицах коллоидного диоксида кремния форм антибиотиков, по сравнению с их официнальными формами, на модели экспериментального сепсиса, индуцированного различными штаммами микроорганизмов у мышей (CBA х ^^^^ Показано, что применение механохимически полученных композиций антибиотиков и наноструктурированного коллоидного нано^Ю2 позволяет существенно увеличить выживаемость животных и выраженность системной воспалительной реакции, что свидетельствует о целесообразности использования данной модификации антибиотиков для повышения их терапевтической эффективности при экспериментальном сепсисе.
Ключевые слова: сепсис, наноструктурированные частицы диоксида кремния, механическое измельчение, антибиотики.
Рост заболеваемости, обусловленной микрофлорой, резистентной к антибактериальным препаратам, в том числе к наиболее широко применяемым в терапевтической практике це-
фалоспоринам, определяет необходимость разработки новых антибиотиков, способных преодолеть мультирезистентность микроорганизмов, либо модификации существующих с целью
Гайдуль К.В. - проф., ведущий научный сотрудник лаборатории регуляции иммунопоэза, e-mail: [email protected]
Лыков А.П. - к.м.н., ведущий научный сотрудник лаборатории физико-химической индикации иммунных процессов, e-mail: [email protected]
Ларина О.Н. - зав. бактериологической лабораторией, e-mail: [email protected] Гольдина И.А. - научный сотрудник лаборатории регуляции иммунопоэза, e-mail: [email protected] Сафронова И.В. - к.м.н., научный сотрудник лаборатории регуляции иммунопоэза, e-mail: [email protected] Гуськов С.А. - инженер группы механохимии органических соединений, e-mail: [email protected] Евсеенко В.И. - к.х.н., младший научный сотрудник группы механохимии органических соединений, e-mail: [email protected]
Душкин А.В. - д.х.н., рук. группы механохимии органических соединений, e-mail: [email protected] Ляхов Н.З. - член-кор. РАН, зав. лабораторией химического материаловедения, директор, e-mail: [email protected]
Козлов В.A. - академик РАМН, зав. лабораторией регуляции иммунопоэза, директор, e-mail: [email protected]
оптимизации их свойств [2-4]. Твердофазная механохимическая технология получения композиций лекарственных веществ с веществами-носителями продемонстрировала свою эффективность для повышения фармакологической активности и безопасности ряда лекарственных препаратов [5, 8]. Известно, что измельчение твердых веществ используется для изменения их физических и химических свойств, определяющих биологическую доступность, устойчивость и биологическую активность [1, 5, 8]. Так, образование молекулярных комплексов лекарственных веществ, в частности антибиотиков, в результате твердофазных химических реакций с различными носителями приводит к изменению растворимости, повышению стабильности лекарственного препарата в растворе, увеличению его биодоступности, что способствует повышению фармакологической эффективности [6, 7]. Наноструктурированный коллоидный диоксид кремния (нано-БЮ2) рассматривается как перспективный, характеризующийся биосовместимостью и биодеградируемостью материал, не обладающий цитотоксичностью, способный, пенетрируя клеточную мембрану, проникать внутрь клеток для создания на его основе композиций лекарственных препаратов [10, 11].
Целью данного исследования была оценка терапевтической эффективности композиций различных групп антибиотиков с нанострукту-рированным коллоидным диоксидом кремния, модифицированных механохимически, при экспериментальном сепсисе у мышей.
МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ
Модификация антибактериальных препаратов осуществлялась путем механической обработки смеси антибиотика и коллоидного диоксида кремния (энтеросорбент «Полисорб», Россия) в шаровой ротационной мельнице (энергонапряженность 1§) в массовом соотношении антибиотика и нано-БЮ2 30 : 1 с целью изменения физико-химических свойств и антибактериальной активности антибиотика путем формирования механокомпозитов [1, 5]. При выборе массовых соотношений антибиотика и нано-БЮ2 принималось во внимание, что увеличение относительного количества нано-БЮ2 при внутривенном введении приводило к закупориванию сосудов экспериментальных животных нерастворившимися крупными (более 10 мкм) частицами. С другой стороны, уменьшение количества диоксида кремния не обеспечивало получения достаточного для проявле-
ния терапевтического эффекта количества мелкодисперсных (менее 5 мкм) частиц нано-SiO^
Электронные микрофотографии диоксида кремния получали на электронных микроскопах JEOL-2000 (Япония) и HITACHI ТМ-100 (Япония). Гранулометрический состав водных суспензий исходного диоксида кремния и его композиций с антибиотиками определяли на лазерном гранулометре Micro-Sizer 201 (Россия). Концентрации водных растворов антибиотиков определялись методом ВЭЖХ на хроматографе Agilent 1200 (США) стандартным методом.
Для оценки степени сорбции навеску композиции антибиотика и диоксида кремния, рассчитанную для получения раствора с концентрацией исследуемого антибиотика 100 г/л, суспендировали в 5 см3 дистиллированной воды и центрифугировали в течение 30 мин при скорости 12 000 об/мин. Затем надосадочную жидкость осторожно сливали, осадок ресуспен-дировали в таком же количестве дистиллированной воды. Концентрацию антибиотика, де-сорбировавшегося в водную фазу, определяли методом ВЭЖХ. Затем процедуру осаждения и суспендирования повторяли. Количество сорбированного антибиотика рассчитывали на основании суммарного определения количества антибиотика, десорбировавшегося из диоксида кремния.
Биологические эксперименты проводились на мышах (CBA х C57Bl6)Fj в соответствии с «Правилами работ с использованием экспериментальных животных» (Приложение к приказу Министерства здравоохранения СССР от 12.08.1977 г. № 755). Животных содержали в условиях вивария в клетках по 10 особей при естественном освещении, на стандартном пищевом рационе и свободном доступе к воде. Для индукции генерализованного сепсиса мышам (по 10 животных в каждой группе) внутривенно в боковую вену хвоста вводили, в зависимости от условий эксперимента, 24-часовую культуру Pseudomonas aeruginosa (P. aeruginosa) ATCC № 27853 (5 х 108 КОЕ/ мышь), Staphylococcus аигеш (St. аигеш) ATCC № 25923 (1 х 1010 КОЕ/мышь) или Echerichia coli (E. coli) ATCC № 25922 (8 х 108 КОЕ/мышь) [11]. Доза микроорганизмов, вызывающая генерализованный септический процесс, на основании положительных результатов посевов крови мышей на стерильность через сутки от момента индукции сепсиса, была определена в серии предварительных экспериментов. Через 24 ч от начала эксперимента в течение 3 сут ежедневно внутривенно 1 раз в сутки вводили мышам
контрольной группы по 0,25 мл 0,9 % раствора хлорида натрия, а животным опытных групп -по 2,5 мг/мышь официнальной или модифицированной форм исследуемых антибиотиков в таком же объеме. Учет выживаемости мышей проводился ежедневно, начиная со 2-х по 8-е сутки эксперимента включительно. На 8-е сутки от момента индукции сепсиса у мышей контрольной и опытных групп, получавших офи-цинальные и модифицированные формы фос-фомицина, меропенема и цефотаксима, подсчитывали количество лейкоцитов периферической крови. Проведено 3 серии опытов.
Данные представлены в виде медианы и границ нижнего и верхнего квартилей показателя выживаемости мышей (%), достоверность различий рассчитывали по х2-критерию сопряженности и принимали при значениях р < 0,05.
РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
В экспериментах была изучена антимикробная активность Р-лактамных антибиотиков це-фалоспоринового ряда I поколения (цефазоли-на), II поколения (цефокситина), III поколения (цефтазидима, цефтриаксона и цефотаксима), монобактамов (азтреонама), карбапенемов (ме-ропенема), производного фосфоновой кислоты фосфомицина, а также их механохимически полученных композиций с аморфным коллоидным диоксидом кремния.
Структурные характеристики получаемых композиций. Использованный нами материал коллоидного аморфного диоксида кремния на основании данных анализа электронных микрофотографий состоял из округлых наночастиц размером 20-100 нм, образующих рыхлые агрегаты размером 5-100 мкм, которые в водной среде частично разрушались. При механохими-ческом получении композиций с антибиотиками происходило дальнейшее уменьшение размеров агрегатов.
При оценке распределения по размерам частиц исходного коллоидного диоксида кремния и полученной механохимически композиции с антибиотиком на основании изучения гранулометрического состава водных суспензий исходного диоксида кремния и его композиций с антибиотиками было установлено, что в композициях, полученных механохимически, удается существенно (почти в 50 раз) увеличить массовую долю и количество мелких (менее 3-5 мкм) фракций частиц нано^Ю2.
Иммобилизация антибиотиков частицами диоксида кремния. Мы провели оценку количества антибиотиков, сорбированных на нано-
SiO2. Было экспериментально определено, что более 95 % сорбированных антибиотиков удается «извлечь» уже за два цикла осаждения/ суспендирования.
Так как степень сорбции антибиотиков не зависела от времени механохимической обработки при получении композиций (от 0,5 до 4 ч), мы выбирали минимально возможный период измельчения - в пределах 0,5-2 ч. При увеличении массовых соотношений антибиотика в механохимически полученных композициях антибиотика и нано^Ю2 от 10 : 1 до 40 : 1 степени сорбции также были приблизительно одинаковыми и составляли 53 % для композиции цефтазидима, 85 % - цефтриаксона, 56 % - це-фотаксима, 73 % - цефоперазона, 40 % - фос-фомицина (при массовом соотношении антибиотика и нано^Ю2, равном 30 : 1). Относительно неизменная степень сорбции и легкость высвобождения сорбированных антибиотиков, по нашему мнению, указывают на объемный механизм сорбции за счет эффекта мезопористости использованного материала нано^Ю2, т. е. свидетельствуют о концентрационном накоплении антибиотика в порах частиц коллоидного диоксида кремния.
Таким образом, в результате механохими-ческой модификации формируются твердые дисперсии - «плотные» агрегаты частиц компонентов смешанного состава. При этом на границе раздела фаз происходит сорбция молекул антибиотиков на поверхности твердой фазы диоксида кремния, вероятно, за счет кулоновских взаимодействий или образования водородных связей между полярными группами молекул антибиотиков и поверхностных гидроксильных групп SiO2. Независимо от возможного механизма сорбции механохимическая обработка позволила многократно увеличить массовую и количественную долю малоразмерных фракций частиц нано^Ю2 и тем самым повысить количество антибиотика, сорбированного наиболее биологически активными микро- и нанораз-мерными частицами.
При изучении терапевтической эффективности модифицированных антибиотиков нами были проведены предварительные исследования по определению дозы исследуемых штаммов бактерий, которая при внутривенном введении лабораторным животным вызывала бы гибель от сепсиса не менее чем в 70 % случаев в течение периода наблюдения. Для индукции сепсиса Е. соН доза 8 х 108 КОЕ/мышь, которая без антибиотикотерапии вызывала гибель животных в 90 % случаев в течение недели, была выбрана как оптимальная. Для индукции сеп-
сиса у мышей P. aeruginosa была выбрана доза 5 х 108 КОЕ/мышь, а для St. аureus - доза 1010 КОЕ/мышь. Эти количества исследованных микроорганизмов без применения антибиотиков в течение периода наблюдения вызывали гибель животных от генерализованного сепсиса в 80 % случаев.
На основании спектра антибактериальной активности [2, 3] на модели сепсиса у мышей, индуцированного P. aeruginosa, была исследована терапевтическая эффективность цефтази-дима, меропенема, азтреонама и фосфомицина. При сепсисе, вызванном St. аureus, исследовали эффективность цефтриаксона, цефотаксима, цефокситина, цефазолина и фосфомицина. Для терапии сепсиса, индуцированного E. соИ, был использован цефтриаксон.
Было установлено, что при лечении экспериментального сепсиса, индуцированного E. соИ модифицированным цефтриаксоном, выживаемость мышей достигает 90,0 % (90,0 %; 90,0 %) и статистически значимо превышает аналогичный показатель в контрольной группе - 10,0 % (0,0 %; 10,0 %), а также в группе мышей, получавших лечение официнальной формой данного антибиотика - 50,0 % (40,0 %; 60,0 %).
Результаты, представленные на рис. 1, демонстрируют, что выживаемость мышей при сепсисе, индуцированном St. аитш, на фоне терапии модифицированными формами различ-
I 4°" я 20-
1 2 3 4 5 6 Группы мышей
■ ФР Щоф Пмф
Рис. 1. Выживаемость мышей (CBA х C57Bl6)F1 при индукции сепсиса St. aureus. 1 — контрольная группа; 2 — цефтриаксон; 3 — цефотаксим;
4 — цефокситин; 5 — цефазолин; 6 — фосфоми-цин. Здесь и на рис. 2, 3 фр — физиологический раствор; оф — официнальная форма препарата; мф — модифицированная форма препарата; обозначены статистически значимые (p <0,05) отличия от величины соответствующего показателя: * — контрольной группы, ** — группы животных, которым вводили официнальную форму препарата; n = 30 в каждой группе
100-,
* 80"
Й -
g 60-Я
а "
| 40-
я 20-
1 2 3 4 5
Группы мышей
■ ФР □ оф Пмф
Рис. 2. Выживаемость мышей (CBA х C57Bl6)F1 при индукции сепсиса P. aeruginosa. 1 — контрольная группа; 2 — цефтазидим; 3 — меропенем; 4 — азтреонам; 5 — фосфомицин
ных групп антибиотиков достигает 80-100 %. Так, терапия модифицированным цефтриаксо-ном и цефазолином приводит к повышению выживаемости мышей в сравнении с животными контрольной группы, а также с группой мышей, которым проводили лечение официнальными формами данных антибиотиков (p < 0,05). Отсутствие статистически значимых различий в группах животных, которым вводили другие исследованные антибиотики (цефотаксим, це-фокситин, фосфомицин), объясняется тем, что использованный штамм St. aureus был высокочувствителен к ним, о чем свидетельствуют высокие показатели выживаемости экспериментальных животных при терапии официнальны-ми формами данных антибиотиков.
Обнаружено, что при сепсисе, индуцированном P. aeruginosa, терапия модифицированными цефтазидимом и меропенемом приводит к возрастанию выживаемости животных по сравнению с мышами как контрольной группы, так и групп, которым вводили официнальные формы этих антибиотиков (рис. 2).
Таким образом, при экспериментальном сепсисе у мышей, индуцированном различными штаммами микроорганизмов, выявлено увеличение терапевтической эффективности модифицированных форм цефтазидима, меропене-ма, цефтриаксона, цефазолина, по сравнению с официнальными формами этих антибиотиков.
Так как выраженность системной воспалительной реакции является одним из показателей тяжести септического процесса [2, 3], мы изучали данный параметр при сепсисе, индуцированном P. aeruginosa и St. aureus. При исследовании выраженности системного воспа-
чо 80-
о4-
А ~
I 60-
25-
09
I
Я"
S " "g 15в
о " g
20-
10-
I 5:
1 2 3 4 5
Группы мышей
■ ФР Щоф Пмф
Рис. 3. Количество лейкоцитов в периферической крови (109/л) мышей (CBA х C57Bl6)F1 при индукции сепсиса P. aeruginosa и St. aureus. 1 — контрольная группа (здоровые мыши); 2 — сепсис P. aeruginosa, фосфомицин; 3 — сепсис P. aeruginosa, меропенем; 4 — сепсис St. aureus, фосфомицин; 5 — сепсис St. aureus, цефокситин
ления, оцениваемого по количеству леикоцитов периферической крови, было установлено, что в периферической крови животных с экспериментальным сепсисом, индуцированном и P. aeruginosa, и St. aureus, выявляется статистически значимое увеличение количества лейкоцитов по сравнению с исходными значениями. На 8-е сутки от момента индукции сепсиса у животных, которым вводили модифицированный фосфомицин (сепсис P. aeruginosa), меропенем (сепсис P. aeruginosa), цефокситин (сепсис St. aureus), содержание лейкоцитов в крови было ниже, чем у мышей, получавших официналь-ные формы данных антибиотиков (рис. 3). Эти результаты свидетельствуют о меньшей выраженности воспалительной реакции при использовании измельченных и сорбированных на наноструктурированных частицах коллоидного диоксида кремния форм антибиотиков, то есть о более благоприятном течении септического процесса на фоне лечения модифицированными формами антибиотиков. Полученные в нашем исследовании данные об эффективности антибиотиков, измельченных и сорбированных на наноструктурированных частицах нано-БЮ2, согласуются с представленными в литературе данными о более высоком антимикробном потенциале гентамицина в комплексе с микроструктурированным золь-гелевым матриксом полиэтиленгликоля и диоксида кремния [11]. Примененная нами технология механохими-ческого получения композиций антибиотика и нано-БЮ2 позволяет многократно увеличить долю мелкодисперсных, наиболее биологичес-
ки активных частиц нано-SiO^ которые являются носителями активного вещества, в данном случае - антибиотика.
Таким образом, показано, что механохими-чески полученные композиции антибиотиков и наноструктурированного коллоидного нано-SiO2 при тестировании на модели экспериментального сепсиса у мышей (CBA х C57Bl/6)Fj, индуцированного P. aeruginosa, St. aureus или E. coli, обладают, на основании показателей выживаемости животных и выраженности системной воспалительной реакции, более высокой терапевтической эффективностью по сравнению с их официнальными формами. Следовательно, данный метод модификации антибиотиков позволяет оптимизировать их свойства и является перспективным для модификации антибактериальных препаратов с целью увеличения их терапевтической эффективности.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
1. Душкин А.В. Возможности механохимичес-кой технологии органического синтеза и получения новых материалов // Химия в интересах устойчивого развития. 2004. 12. (3). 251-274.
Dushkin A. V. Features of mechanochemical technology of organic synthesis and new materials // Khimiya v interesakh ustoychivogo razvitiya. 2004. (3). 251-274.
2. Иванов Д.В., Егоров А.М. Распространение и механизмы резистентности микроорганизмов, продуцирующих бета-лактамазы // Биомедицинская химия. 2009. 55. (1). 50-60.
Ivanov D.V., Egorov A.M. Distribution and mechanisms of resistance of microorganisms, producing beta-lactamases // Biomeditsinskaya khimya. 2009. (1). 50-60.
3. Лазарева И.Б., Игонин А.А. Актуальные вопросы фармакотерапии сепсиса и септического шока // Лечащий врач. 2004. (4). 11-14.
Lazareva I.B., Igonin A.A. Actual questions of pharmacotherapy of sepsis and septic shock // Le-chaschiy vrach. 2004. (4). 11-14.
4. Сидоренко С.В., Яковлев С.В. Инфекции в интенсивной терапии. М.: Бионика, 2003. 208 с.
Sidorenko S.V., Yakovlev S.V. Infections in the intensive care. M.: Bionika, 2003. 208 p.
5. Ляхов Н.З., Григорьева Т.Ф., Баринова А.П., Ворсина И.А. Механохимический синтез органических соединений и композитов с их участием // Успехи химии. 2010. 79. (3). 218-233.
Lyakhov N.Z., Grigorieva T.F., Barinova A.P., Vorsina I.A. Mechanochemical synthesis of organic compounds and composites with their participation // Uspekhi khimii. 2010. (3). 218-233.
6. Душкин А.В., Метелева Е.С., Толстико-ва Т. Г. и др. Механохимическое получение и фармакологическая активность водорастворимых
комплексов арабиногалактана и лекарственных веществ // Изв. РАН. Сер. хим. 2008. (6). 12741282.
Dushkin A.V., Meteleva E.S., Tolstikova T.G. et al. Mechanochemical synthesis and pharmacological activity of water-soluble complexes of arabinogalactan and drugs // Rus. Chem. Bul. 2008. (6). 1299-1307.
7. Гайдуль К.В., Гольдина И.А., Сафроно-ва И.В. и др. Сравнительное исследование имму-ноактивных и антибактериальных свойств на-тивного и механически модифицированного цефотаксима // Вестн. Уральской мед. академич. науки. 2009. (2/1). 202-203.
Gaidul K.V., Goldina I.A., Safronova I.V. et al. Comparative investigation of immunoactive and antibacterial properties of native and mechanically modified cefotaxim // Vestn. Ural'skoy med. academich. nauki. 2009. (2/1). 202-203.
8. Dushkin A. V. Mechanochemical synthesis of organic compounds and rapidly soluble materials // High-energy ball milling. Mechanochemical processing of nanopowders. Oxford: Woodhead Publishing Ltd., 2010. 249-273.
9. Seleem M.N., Munusamy P., Ranjan A. et al. Silica-Antibiotic hybrid nanoparticles for targeting intracellular pathogens // Antimicrob. Agents Chemother. 2009. 53. 4270-4274.
10. Slowing 1.1., Vivero-Escoto J.L., Wu C.W., Lin V.C. Mesoporous silica nanoparticles as controlled release drug delivery and gene transfection carriers // Adv. Drug. Deliv. Rev. 2008. 60. 1278-1288.
11. Miyazaki S., Okazaki K., Tsuju M., Yama-guchi K. Pharmacodynamics of S-3578, a novel Cephem, in murine lung and systemic infection models // Antimicrob. Agents Chemother. 2004. 48. 378-383.
THE THERAPEUTIC EFFICIENCY OF MECHANOCHEMICALLY SYNTHESIZED COMPOSITIONS OF NANOSTRUCTURED PARTICLES OF SILICIUM DIOXIDE AND ANTIBIOTICS AT EXPERIMENTAL SEPSIS IN (CBAxC57Bl6)F1 MICE
Konstantin Valentinovich GAIDUL1, Aleksandr Petrovich LYKOV2, Olga Nikolaevna LARINA3, Irina Aleksandrovna GOLDINA1, Irina Vasilievna SAFRONOVA1, Sergey Aleksandrovich GUS'KOV4, Veronica Ivanovna EVSEENKO4, Aleksandr Valerievich DUSHKIN4, Nikolai Zakharovich LYAKHOV4, Vladimir Aleksandrovich KOZLOV1
1 Institute of Clinical Immunology SB RAMS, 630099, Novosibirsk, Yadrintsevskaya str., 14 2Institute of Molecular Biology and Biophysics SB RAMS, 630117, Novosibirsk, Timakov str., 2 3Novosibirsk Interregional Veterinary Laboratory, 630007, Novosibirsk, Serebrennikovskaya str., 5 4Institute of Solid State Chemistry and Mechanochemistry SB RAS, 630128, Novosibirsk, Kutateladze str., 18
The therapeutic efficiency of officinal forms of antibiotics mechanochemically modified by sorption on nanostruc-tured particles of silicium dioxide in comparison with their officinal forms on the model of experimental sepsis, induced by different strains of bacteria in (CBAxC57Bl6)Fj mice, has been studied. It has been shown that the application of these antibiotic compositions and nanostructured colloid nano-SiO2 allows considerably increasing animals" survival rate and intensity of system inflammatory reaction. This testifies to the expediency of using of the modification of antibiotics for the enhancement of their therapeutic efficiency at experimental sepsis.
Key words: sepsis, nanostructured particles of silica dioxide, mechanical grinding, antibiotics.
Gaidul K.V. - professor, leading researcher of immunopoiesis regulation laboratory, e-mail: [email protected] Lykov A.P. - candidate of medical sciences, leading researcher of physical-chemical indication of immune processes laboratory, e-mail: [email protected]
Larina O.N. - head of the bacteriological laboratory, e-mail: [email protected] Goldina I.A. - researcher of immunopoiesis regulation laboratory, e-mail: [email protected] Safronova I.V. - candidate of medical sciences, researcher of immunopoiesis regulation laboratory, e-mail: [email protected]
Gus'kov S.A. - engineer of organic compounds mechanochemistry group, e-mail: [email protected] Evseenko V.I. - candidate of chemical sciences, junior researcher of organic compounds mechanochemistry group, e-mail: [email protected]
Dushkin A.V. - doctor of chemical sciences, head of organic compounds mechanochemistry group, e-mail: [email protected]
Lyakhov N.Z. - corresponding member of RAS, director, e-mail: [email protected] Kozlov V.A. - academician RAMS, director, head of immunopoiesis regulation laboratory, e-mail: [email protected]
