CC BY
29
2017, Т. 19, Специальный выпуск 2017, Vol. 19, Special Issue
Иммуномодуляторы эндогенной и экзогенной природы Immunomodulators of endogenous and exogenous nature
ВЛИЯНИЕ НАСТОЙКИ ЦИМИЦИФУГИ ДАУРСКОЙ НА ФАГОЦИТАРНУЮ АКТИВНОСТЬ МАКРОФАГОВ ПРИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЙ ИММУНОСУПРЕССИИ
Гармаев Д.Э.1, Хобракова В.Б.1, 2, Разуваева Я.Г.1, 2
1 Институт общей и экспериментальной биологии СО РАН, Улан-Удэ, Россия
2 Бурятский государственный университет, Улан-Удэ, Россия
Создание фармакологических средств для профилактики и лечения ряда заболеваний и патологических состояний человека, связанных с нарушением работы иммунной системы, является актуальной проблемой современной медицины. В изучении вопросов иммунокор-рекции главенствующей задачей является выбор наиболее оптимальных лекарственных средств, отвечающих требованиям современных стандартов. Перспективным направлением представляется поиск иммуномодуляторов среди средств растительного происхождения, которые имеют ряд преимуществ благодаря наличию в них комплекса биологически активных веществ, которые обеспечивают мягкое действие, низкую токсичность, способность к активации не только иммунной, но и нервной и эндокринной систем, возможность применения у лиц с сочетанными патологиями. Объектом настоящего исследования явилась настойка из корневищ с корнями цимицифуги даурской (Cimicifuga dahurica (Turcz.) Maxim). В народной медицине Приморья С. dahurica используется в виде порошка, настойки и жидкого экстракта при головных болях, начальных стадиях гипертонической болезни, при повышенной нервной возбудимости, истерии, бессоннице и др. Известно, что настойка С. dahurica оказывает седативное действие, ограничивая двигательную, ориентировочно-исследовательскую активность и рефлекторную возбудимость животных, а также увеличивая продолжительность наркотического сна.
Целью настоящего исследования явилось определение влияния настойки из корневищ с корнями цимицифуги даурской на фагоцитарную активность перитонеальных макрофагов при азатиоприновой иммуносупрессии.
Эксперименты проведены на мышах-самцах линии F1 (СВАхС57В1/6) массой 18-20 г. Действие исследуемого средства было изучено на интактных животных, а также животных, находящихся в состоянии иммунодепрессии, вызванной цитостатиком азатиоприном, который вводили контрольной группе животных в дозе 50 мг/кг перо-рально 1 раз в сутки в течение 5 дней. Настойку цимици-фуги даурской вводили интактным животным и мышам, подвергнутым иммуносупрессии, в дозе 1 мл/кг перо-рально 1 раз в день в течение 14 дней.
Состояние макрофагального звена иммунного ответа оценивали в реакции фагоцитоза перитонеальных макрофагов в отношении частиц коллоидной туши. Оптическую плотность лизата клеток перитонеального экссудата, отражающую количество туши, поглощенной перитонеальными макрофагами, определяли при длине волны 620 нм.
При исследовании влияния настойки цимицифуги даурской на фагоцитарную активность перитонеальных макрофагов интактных мышей в отношении частиц коллоидной туши установлено, что данное средство не вызывает значимого изменения фагоцитарного индекса по сравнению с данными в интактной группе. При введении данного средства животным с иммунодефицитом наблю-
дали увеличение фагоцитарного индекса в 1,4 раза по сравнению с данными в контрольной группе.
Эффективность исследуемого средства обусловлена совокупным действием комплекса биологически активных веществ, преимущественно, тритерпеноидами, фе-нолкарбоновыми кислотами, обладающими выраженными иммуномодулирующими свойствами.
Таким образом, полученные данные позволяют заключить, что настойка из корневищ с корнями цими-цифуги даурской способна ослаблять супрессивное действие азатиоприна на макрофагальное звено иммунитета, что позволяет рекомендовать его для дальнейшего изучения с целью создания новых растительных иммуномоду-лирующих препаратов.
СКРИНИНГ ИММУНОМОДУЛИРУЮЩИХ СВОЙСТВ И АНТИБАКТЕРИАЛЬНОЙ АКТИВНОСТИ ЦЕФАЛОСПОРИНОВЫХ АНТИБИОТИКОВ, МОДИФИЦИРОВАННЫХ МЕХАНИЧЕСКИМ ИЗМЕЛЬЧЕНИЕМ И СОРБЦИЕЙ НА ПОЛИМЕРНОМ НОСИТЕЛЕ
Гольдина И.А., Сафронова И.В., Душкин А.В., Гайдуль К.В.
Научно-исследовательский институт фундаментальной и клинической иммунологии, Новосибирск, Россия
Введение. Создание антибиотиков в форме наноча-стиц, сорбированных на полимерных носителях, с целью повышения их эффективности, является перспективным направлением современной фармакологии. Ряд антибиотиков группы цефалоспоринов обладает иммуномодули-рующими свойствами различной степени выраженности, осуществляющимися как прямыми, так и опосредованными механизмами воздействия на иммунокомпетентные клетки. Установлено прямое влияние цефалоспоринов на нейтрофилы и макрофаги, а также опосредованное, через выделение продуктов распада бактериальной клетки, усиление фагоцитарных реакций, стимуляция хемотаксиса фагоцитов к очагу инфекции, повышение продукции ГМ — КСФ, подавление продукции провоспалительных цитокинов иммунокомпетентными клетками.
Цель. Выявление иммуномодулирующих свойств и антибактериальной активности модифицированных форм цефуроксима, цефотаксима и цефоперазона in vitro.
Материалы и методы. Механическая модификация официнальных форм антибиотиков (ОАО «Биосинтез, Россия) осуществлялась в высокоинтенсивных шаровых мельницах с одновременной иммобилизацией их на полимерном носителе — декстране 40кД (Sigma). Рентге-нофазовый анализ композиции проводили на дифрак-тометре ДРОН — 3 (Россия), с использованием СиКа-излучения при скорости вращения счетчика 2 град/мин. Гранулометрический состав водных суспензий исходного и модифицированного порошка исследовали на лазерном гранулометре Micro-Sizer 201 (Россия) [2].
Пролиферативную активность мононуклеарных клеток крови (МНК) здоровых лиц оценивали in vitro, стандартным методом, по включению радиоактивной метки. Определение антимикробной активности антибиотиков — минимальной ингибирующей дозы (МИК), проводилось методом двукратных серийных разведений в мясо-пептонном бульоне, содержащем изучаемые препараты
«Дни иммунологии в СПб 2017» Immunology Days in St. Petersburg 2017
Медицинская Иммунология Medical Immunology (Russia)/Meditsinskaya Immunologiya
в концентрациях от 128 до 0,03 мкг/мл. За МИК принимали наименьшую концентрацию антибиотика, подавляющую видимый рост микроорганизма. Использовали следующие контрольные штаммы бактерий: Pseudomonas aeruginosa ATCC № 27853 F-51, Staphylococcus aureus ATCC № 25923 F-49, Escherichia coli ATCC № 25922 F-50. Статистическая обработка данных проводилась с использованием программы Statistica 7.0 (StatSoft, USA).
Результаты и обсуждение. В результате механохими-ческой обработки смеси антибиотиков и декстрана ее частицы уменьшались до размеров наночастиц (40-100 нм) и формировали рыхлые агрегаты размером 5-50 мкм. Доля частиц антибиотиков наноразмерного диапазона после механохимической модификации составляла 25%.
Нативный и механически модифицированный дек-стран 40 кД не обладал ни антибактериальной, ни имму-номодулирующей активностью. Оценка пролиферации МНК выявила увеличение спонтанной пролиферации МНК под действием модифицированного цефоперазо-на с 291(244; 337) до 1302(1192; 1401) имп/мин, p < 0,05, (Ме (25%; 75%), тогда как цефуроксим и цефотаксим не изменяли данного параметра. Механическая модификация цефоперазона и цефотаксима приводила также к повышению их антибактериальной активности, о чем свидетельствовало уменьшение МИК с 32,0 мкг/мл до 8,0 мкг/мл у цефотаксима и с 64,0 до 4,0 мкг/мл у цефо-перазона в отношении изученных штаммов микроорганизмов in vitro. Предполагаемым механизмом повышения эффективности модифицированных антибиотиков является увеличение их биодоступности за счет большей растворимости, стабильности во внешней среде и более равномерного распределения внутри клетки.
Заключение. Механохимическая модификация цефоперазона с сорбцией на декстране 40кД приводит к увеличению его иммуномодулирующих свойств и антибактериальной активности in vitro, на основании изменения параметров спонтанной пролиферации иммунокомпе-тентных клеток и минимальной ингибирующей концентрации антибиотика, подавляющей рост контрольных штаммов микроорганизмов.
ВЛИЯНИЕ ФАРМАЦЕВТИЧЕСКОЙ СУБСТАНЦИИ ИЗ СЫРЬЯ COLURIA GEOIDES (ROSACEAE) НА ПРОЛИФЕРАЦИЮ ИММУННЫХ КЛЕТОК
Дутова С.В., Карпова М.Р.
Хакасский государственный университет им. Н.Ф. Катанова, Абакан, Россия
Сибирский государственный медицинский университет, Томск, Россия
В качестве одного из основных направлений иммуно-стимуляции и иммуномодуляции рассматривается влияние на экспансию иммунокомпетентных клеток (Караулов А.В., Калюжин О.В., 2013). Описана корреляция между их пролиферацией и эффективностью иммунного ответа (Добродеева Л.К. и соавт., 2014).
В процессе доклинического изучения иммунотроп-ных свойств эфирномасличных растений сибирской флоры была разработана фармацевтическая субстанция (субстанция Cg) из сырья C. geoides, обладающая иммуностимулирующим и иммунокорригирующим эффектом.
Исследуемую субстанцию (Cg) получали методом перколяции 40% этанолом, стандартизовали по выхо-
ду экстрактивных веществ (2,83±0,052%) и содержанию т-кумаровой кислоты (не менее 8,5%). В качестве препарата сравнения использовали настойку эхинацеи пурпурной (Е). Экспериментальную модель иммуно-депрессии у мышей создавали однократным введением (вн/бр.) циклофосфана в максимально переносимой дозе (250 мг/кг).
Курсовое введение (5 дней) мышам-самкам линии CBA/CaLac субстанции Cg в дозе 50 мг/кг приводило к достоверному увеличению абсолютного числа лейкоцитов в образцах периферической крови в 1,2 раза (7,20 (6,80^7,95) х 109/л) в сравнении с контролем (6,10 (4,25^6,70) х 109/л). В группе животных, получавших препарат сравнения, — в 1,8 раза (10,83 (8,73^13,65) х 109/л). Число спленоцитов селезенки не изменялось.
В условиях экспериментального иммунодефицита под влиянием субстанции Cg отмечали достоверное увеличение массы селезенки в 1,3 раза (до 0,097 (0,091^0,120) г) в сравнении с контролем (0,074 (0,066^0,097) г); а также числа спленоцитов селезенки в 1,7 раза (до 117,63 (100,56^119,50) х 106 /орган) в сравнении с контролем (69,25 (66,50^85,00) х 106 /орган). Причем число спленоцитов селезенки под влиянием субстанции Cg достоверно не отличалось от показателя животных контрольной группы без иммунодефицита (126,15 (101,30^180,15) х 106/орган). То есть, субстанция Cg оказывала иммуно-корригирующее действие при иммунодефиците, направленное на пролиферацию иммунных клеток. Введение животным настойки эхинацеи не оказало достоверного влияния на оцениваемые показатели.
Подобный эффект описан для водно-спиртового экстракта Эхиносол, который в гораздо большей дозе (300 мг/кг) способствует достоверному увеличению в пе-ритонеальном экссудате животных количества моноцитов (на 32%) и лимфоцитов (на 83%) (Исайкина Н.В. и др., 2008). Выявленные эффекты исследуемой субстанции Cg проявляются в гораздо меньшей дозе.
СОВРЕМЕННЫЕ ПОДХОДЫ К ЭКСПЕРТНОЙ ОЦЕНКЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ДОКЛИНИЧЕСКИХ И КЛИНИЧЕСКИХ ИССЛЕДОВАНИЙ ПРЕПАРАТОВ ИММУНОГЛОБУЛИНОВ ЧЕЛОВЕКА НОРМАЛЬНОГО ДЛЯ ПОДКОЖНОГО ВВЕДЕНИЯ
Иванов В.Б., Кудашева Э.Ю., Мосягин В.Д., Олефир Ю.В., Бондарев В.П., Борисевич И.В.
ФГБУ«Научный центр экспертизы средств медицинского применения» Министерства здравоохранения РФ, Москва, Россия
Потребность в препаратах иммуноглобулинов человека нормального (ИГЧН) в нашей стране и за рубежом остается высокой и постоянно возрастает. Препараты ИГЧН входят в перечень жизненно необходимых и важнейших лекарственных препаратов, применяются в различных областях практической медицины при первичных и вторичных иммунодефицитах, аутоиммунных и инфекционных заболеваниях.
В Российской Федерации зарегистрированы 14 препаратов ИГЧН для внутривенного введения (из них 9 зарубежного производства), в том числе 1 зарубежный препарат ИГЧН (Гамунекс®-С) в лекарственной форме «раствор для инфузий», предназначенный для внутривенного и подкожного введения. Подкожный путь введения лекарственного
