CC BY
18
2.46.2015 œ.
ЭКСПЕРИМЕНТТ1К Ж9НЕ КЛИНИКАЛЫ^ ЗЕРТТЕУЛЕР
TYMIH SUMMARY
И.Л. КОПОБАЕВА, К.А. БОРОВСКАЯ, М.С. ВЕЛИКАНОВА I.L. KOPOBAYEVA, K.A. BOROVSKAYA, M.S. VELIKANOVA
УРЬЩТЬЩ К¥РСАК1Ш1Л1К ДАМУЫНЬЩ ТЕЖЕЛУ1МЕН PERINATAL OUTCOMES OF BIRTHS WITH INTRAUTERINE FETAL
БОСАНУДЬЩ ПЕРИНАТАЛДЬЩ НЭТИЖЕЛЕР1 GROWTH RETARDATION
KараFанды мемлекеттiк медицина vниверситетi, ,, , „ ...........................
Karaganda State Medical University, Karaganda, Kazakhstan
K1араFанды, Казахстан
Objective. To study perinatal outcomes of births in women
Максаты. ¥рыктын, шрсашшшш дамуынын тежелуi . , . . r , , , .
M ™ y y with intrauterine fetal growth retardation.
(¥К1ДТ) диагностикаланFан эйелдерге кемек кeрсетvдi ерте , , , . . ,. , . , , , , ,.
м м у м Methods. 130 histories of births and prenatal records of
vйымдастыру.
women with IFGR according to the data of Karaganda Regional
ЭДстерК KapafaHAbi каласынын. «ОПО» 2014 жылFы . , r , , . ,
Perinatal Center for 2014 were analyzed retrospectively.
урыктын курсаюшллЫ дамуы тежелген диагнозы i^bmfaH „ , , , . . , , ____,
y Results and conclusions of the study. IFGR occurs almost
эйелдердщ 130 ауру тарихы мен айырбас карталары алынды. ., , г . ,,. , ,.
with the same frequency in nulliparous and multiparous women. Зерттеудщ накты нэтижелерi мен корытындылары. . , , . , ,. . , , r
Gravidogram at the outpatient level is not a screening method for
¥рыцтын курсакшЫк дамуынын кездесу жиiлiгi aлFaш
босанушылар мен кайта босанушыларда бipдей. Емханалык
diagnosing intrauterine fetal growth retardation. Late diagnosis of IFGR leads to an incorrect pregnancy conducting and deprives ob-
декгейде гравидограмма урыктын. курсаюшЫк дамуына . . , , . , , . . , ,, . ,
stetricians and gynecologists to make a decision on the well-timed
скринингпк эдк болып табылмайды. Бул диагнозды кеш , ,. .........., г , . , , ,.
delivery. Children born as a result of premature birth have a diag-диагностикалау жYктiлiктi дурыс емес жYргiзуге жэне акушер- . r г , , , . г ,
nosis of IFGR more frequently, whereas a large proportion of chil-гинеколог дэр^ершщ дер кезiнде дурыс шешiм кабылдай , , . . , „
dren born at term refer to the "underweight for gestational age". алмауына экеледК , . . , , .
Key words: intrauterine growth retardation, premature
Мерзiмiнен бурын туылFан балалар арасында ¥К,ЩТ ^ ^¡^ gravidogram диагнозы жи кездеседi, ал жылдам босанумен туылFан балалар арасында гестация мезплше сай емес аз салмактылык кездеседi.
Нег'зг'! свздер: урыктын к,урсак,1ш1л1к дамуынын, тежелуi, мерз1м1нен ерте босану, гравидограмма.
УДК: 618.32:612.273.2-003.96
Н.В. КРАВЦОВА, Л.С. ДЗОЗ, Ж.А. УТЕШЕВА, З.О. БАЗЫЛБЕКОВА, Г.К. ТОХТАКУЛИНОВА
СУБПОПУЛЯЦИОННЫЙ ПРОФИЛЬ ЛИМФОЦИТОВ ПЕРИФЕРИЧЕСКОЙ КРОВИ У БЕРЕМЕННЫХ, РОЖЕНИЦ И РОДИЛЬНИЦ С ФЕТОПЛАЦЕНТАРНОЙ НЕДОСТАТОЧНОСТЬЮ
Научный центр акушерства, гинекологии и перинатологии, Кравцова Н.В. - д.м.н., ведущий научный сотрудник отделения лабораторных
исследований;
Дзоз Л.С. - к.б.н., член. кор. МАИН, старший научный сотрудник отделения лабораторных исследований;
Утешева Ж.А. - д.м.н., заведующая отделения лабораторных исследований; Базылбекова З.О. - д.м.н., заведующая отделения патологии беременных;
- специалист лабо1 исследований, e-mail: nat [email protected],
Тохтакулинова Г.К. - специалист лаборатории отделения лабораторных
Аннотация. Целью исследования явилось изучение субпопуляционного состава лимфоцитов периферической крови у беременных, рожениц и родильниц с фетоплацентарной недостаточностью по общелейкоцитарному гейту СД45+ методом прямой мембранной иммунофлюоресценции на проточном цитометре BD Facs СаПЬиг с применением панели моноклональных антител к поверхностным антигенам лимфоцитов: к СД3+СД19-, СД4+СД8-, СД8+СД4-, СД16+СД3+, СД56+СД3+, СД19+СД3-, СД3+HLA-DR+, СД3- HLA-DR+, СД25+СД3+, СД95+СД3+. Определяли ИРИ по соотношению
г. Алматы, РК
Актуальность. В основе плацентарной недостаточности
любой этиологии лежат нарушения плацентарного кровообращения,
включающие микроциркуляцию
и обменные процессы, которые взаимосвязаны и нередко
взаимообусловлены [1]. Особенно выраженные нарушения могут наблюдаться в иммунной системе мать-плацента-плод. Немаловажное значение при этом играют изменения количественных параметров
иммунной системы на разных этапах гестационного процесса [2]. Иммунорегуляторное действие
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫЕ И КЛИНИЧЕСКИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ 2.46.2015 х.
СД4+/СД8+ клеток, а также индекс апоптоза по СД95+/СД25+.
В результате проведенных исследований установлен характер изменений количественных параметров иммунной системы у беременных III триместра, рожениц и родильниц с фетоплацентарной недостаточностью. Выявлена разбалансировка показателей субпопуляционного состава лимфоцитов периферической крови, осуществляющих иммунный ответ. Полученные изменения указывают на нарушение иммунорегуляторных механизмов в системе мать-плацента-плод при фетоплацентарной недостаточности и необходимости проведения соответствующей коррекции.
Ключевые слова: беременность, роженицы, родильницы, фетоплацентарная недостаточность, субпопуляционный профиль лимфоцитов.
плаценты, изменение продукции ^ 30 родильниц с той же патологией. ^ Ре3улЬтаты исслед0вания.
гормонов влияют на функционирование Материалом исследования служила В результате исследования были
активированных Т-лимфоцитов, к СД3-HLA-DR+ - маркеру активированных В и НК клеток, к СД25+СД3+ - маркеру ранней активации, к СД95+СД3+ -маркеру апоптоза. Определяли ИРИ (иммуно-регуляторный индекс) по соотношению СД4+/СД8+ клеток, а также, индекс апоптоза по СД95+/ СД25+. Использовали коммерческие наборы реагентов, меченные FITS (СД3, СД4, СД8, СД16, СД19, СД25, СД95, HLA-DR), а также меченные РЕ (СД25, СД95) BD Biosciences (США).
иммунной системы матери в целом, периферическая
I
кровь женщин. получены следующие данные. В зависят от сроков беременности и ^ Исследование субпопуляционного ^ таблице 1, 2, 3 приведены осыстыью могут варьировать в широких пределах. состава лимфоцитов выявляли по показатели
Беременность
сопровождается общелейкоцитарному уменьшением массы тимуса на фоне методом прямой
гейту
субпопуляционного СД45+ состава лимфоцитов в периферической
мембранной крови беремен
гипертрофии селезенки и региональных иммунофлюоресценции
по отношению к матке лимфатических ^ проточном цитометре BD Facs Calibur с ^ первой таблицы по3волил выявить, узлов [3]. В I и II
III триместра, на рожениц и родильниц с ФПН. Анализ
триместрах применением панели моноклональных что
иммунологические параметры
изменяется соотношение СD4+/СD8+ антител к поверхностным антигенам у беременных с ФПН существенно за счет снижения содержания СD4+- лимфоцитов: к СД3+СД19- -маркеру отличались от аналогичных данных, лимфоцитов, в I триместре уменьшается зрелых Т-лимфоцитов,
СД4+СД8- выявленных в группе контроля.
количество мононуклеарных
клеток
маркеру хелперно-индукторных
Это
касалось достоверного
и растёт количество В-клеток. К концу Т-клеток, к СД8+СД4- - маркеру увеличения количества зрелых беременности количество В-клеток ^ су п р е ссо р н о-цитото кс и ч е с к их || Т-(СД3+СД19-),
снижается [4].
I
В-
(СД19+СД3-)
Т-лимфоцитов, к СД16+ СД3+ и к лимфоцитов, нарастания количества
Количество Т-клеток в крови СД56+СД3+
маркеру натуральных натуральных
киллерных
нормализуется после родов. Продукция | киллерных клеток СД16+ и СД56+ | СД16+СД3+ и СД56+СД3+ фенотипов, антител усиливается на ранних сроках фенотипов, к СД19+ СД3- - маркеру увеличения количества активированных беременности и подавляется на поздних ^ В-лимфоцитов, к СД3+HLA-DR+ - маркеру ^ СД3+HLA-DR+ и СД3-HLA-DR+ клеток,
сроках, что отражает определенную
Таблица 1. Субпопуляционный профиль лимфоцитов периферической крови у
иммуносупрессию иммунной системы беременных с фетоплацентарной недостаточностью (Штриместр)
матери, однако беременность не
иммунодефицитное поскольку сохранен
состояние,
антигенспецифический клеточный и
гуморальный иммунный ответ [5].
В связи с этим, целью исследования явилось изучение субпопуляционного состава лимфоцитов периферической
: I
крови у беременных, рожениц родильниц с фетоплацентарной
недостаточностью (ФПН).
Материалы и исследования.
методы
Исследования 30 беременных с фетоплацентарной н едостаточностью при сроке беременности 38-41
проведены у
неделя (III триместр), 30 рожениц и
Наименование субпопуляций лимфоцитов периферической крови (%) Группы беременных
ФПН (n=30) Контроль (n=30)
1 2 3
Т-лимфоциты (СД3+СД19-) 69,01 ± 0,91* 60,91 ± 0,46
Т-хелперы (СД4+СД8-) 39,54 ± 040 40,01 ± 0,46
Т-цитотоксич (СД8+СД4-) 26,02 ± 0,26 26,34 ± 0,063
1\1К КЛЕТКИ (СД16+СД3+) 19,83 ± 0,49* 10,36 ± 0,19
Т-киллеры (СД56+СД3+) 9,30 ± 0,28* 5,79 ± 0,030
В-лимфоциты (СД19+СД3-) 20,59 ± 0,02* 13,08 ± 0,49
Т-активирован.(СД3+HLA-DR+) 15,42 ± 0,02* 10,76 ± 0,20
В-активир. и 1\1К (СД3^А^+) 22,63 ± 0,020* 12,04 ± 0,20
Маркер ранней активации (СД25+СД3+) 0,45 ± 0,02* 8,0 ± 0,12
Маркер апоптоза (СД95+СД3+) 1,29 ± 0,02* 7,21 ± 0,03
Индекс апоптоза (СД95+/СД25+) 3,02 ± 0,19* 0,90 ± 0,01
ИРИ (СД4+/СД8+) 1,52 ± 0,01 1,52 ± 0,30
^ Примечание:* - р< 0,05 относительно контроля
Медицинский журнал Западного Казахстана
95
2.46.2015 х.
ЭКСПЕРИМЕНТТ1К Ж9НЕ КЛИНИКАЛЫ^ ЗЕРТТЕУЛЕР
Таблица 2. Субпопуляционный профиль лимфоцитов периферической крови у рожениц с фетоплацентарной недостаточностью
Наименование субпопуляций лимфоцитов периферической крови (%) Группы рожениц
ФПН (n=30) Контроль (n=30)
1 2 3
Т-лимфоциты (СД3+СД19-) 56,84 ± 0,31* 65,3 ± 0,20
Т-хелперы (СД4+СД8-) 40,89 ± 0,23* 43,17 ± 0,24
Т-цитотоксич (СД8+СД4-) 29,40 ± 0,5* 27,2 ± 0,40
1\1К КЛЕТКИ (СД16+СД3+) 22,28 ± 0,51* 11,3 ± 0,02
Т-киллеры (СД56+СД3+) 10,26 ± 0,33* 0,10 ± 0,01
В-лимфоциты (СД19+СД3-) 23,19 ± 0,31* 13,9 ± 0,31
Т-активирован.(СД3+HLA-DR+) 14,5 ± 0,18* 11,38 ± 0,21
В-активир. и 1\1К (СД3-Н1А^+) 22,83 ± 0,33* 13,01 ± 0,10
Маркер ранней активации (СД25+СД3+) 0,80 ± 0,01* 7,74 ± 0,11
Маркер апоптоза (СД95+СД3+) 0,90 ± 0,05* 7,51 ± 0,02
Индекс апоптоза (СД95+/СД25+) 0,83 ± 0,05* 0,97 ± 0,02
ИРИ (СД4+/СД8+) 1,39 ± 0,02 1,59 ± 0,015
Примечание:* - р< 0,05 относительно контроля Таблица 3. Субпопуляционный профиль лимфоцитов периферической крови у родильниц с фетоплацентарной недостаточностью
Наименование субпопуляций лимфоцитов периферической крови (%) Группы родильниц
ФПН (n=30) Контроль (n=30)
1 2 3
Т-лимфоциты (СД3+СД19-) 66,69 ± 0,66 67,10 ± 0,45
Т-хелперы (СД4+СД8-) 35,93 ± 0,25* 47,2 ± 1,25
Т-цитотоксич (СД8+СД4-) 22,33 ± 0,27* 26,9 ± 1,21
1\1К КЛЕТКИ (СД16+СД3+) 15,93 ± 0,05 * 12,0 ± 0,54
Т-киллеры (СД56+СД3+) 6,67 ± 0,13* 4,13 ± 0,26
В-лимфоциты (СД19+СД3-) 19,02 ± 0,52* 8,3 ± 0,45
Т-активирован.(СД3+HLA-DR+) 9,62 ± 0,13 9,04 ± 0,44
В-активир. и 1\1К (СД3-Н1А^+) 18,72 ± 0,24* 10,3 ± 0,21
Маркер ранней активации (СД25+СД3+) 0,66 ± 0,02* 0,097 ± 0,01
Маркер апоптоза (СД95+СД3+) 0,77 ± 0,05* 5,14 ± 0,23
Индекс апоптоза (СД95+/СД25+) 1,09 ± 0,08* 0,71 ± 0,01
ИРИ (СД4+/СД8+) 1,62 ± 0,01* 1,75 ± 0,03
Примечание:* - р< 0,05 относительно контроля
как показателя усиления иммунного лимфоцитов практически оставалось на
I
ответа на чужеродные антигены одном уровне с контролем. гистосовместимости второго класса (р< В группе рожениц (таблица 2)
0,05). В то же время регистрировалось с ФПН в сравнении с контрольной
„
снижение количества Т-лимфоцитов, группой
изменения
параметров
несущих маркер ранней активации иммунной системы выражались в
СД25+ и маркер апоптоза СД95+ в уменьшении количества зрелых Т-сравнении с контролем, что приводило (СД3+СД19-), Т-хелперных (СД4+СД8-)
числа клеток
к нарастанию индекса апоптоза СД95+/ лимфоцитов, увеличении
киллерных
§
СД25+ и указывало на нарушения натуральных
процессов пролиферации и апоптоза СД16+СД3+ и СД56+СД3+ фенотипов,
при ФПН у беременных (р<0,05). ИРИ, а в нарастании количества В-клеток
так же количество иммунорегуляторных антителопродуцентов (СД19+СД3-), хелперно-индукторных (СД4+СД8-) цитотоксических
цитотоксических
СД8+СД4-
(СД8+СД4-) лимфоцитов, увеличения количества
активированных QA3+HLA-DR+ и СД3-HLA-DR+ клеток, уменьшения уровня Т-лимфоцитов, несущих маркеры ранней активации СД25+ и Fas-рецептора СД95+, опосредующего апоптоз (р<0,05). Индекс апоптоза СД95+/СД25+ был ниже (р< 0,05). Данные указывают на разбалансировку показателей иммунитета в родах в группе рожениц с ФПН.
В группе родильниц с ФПН, обследованных на 3-4 сутки после родов, в сравнении с контрольными данными (таблица 3) в периферической крови регистрировалось уменьшение количества иммунорегуляторных
СД4+СД8- и СД8+СД4- лимфоцитов, снижение числа СД95+СД3+ клеток (р<0,05) и отсутствие изменений количества зрелых СД3+СД19-лимфоцитов. В тоже время тестировано увеличение количества натуральных киллерных клеток обеих фенотипов, В-клеток антителопродуцентов
и их активации по HLA-DR+ антигену, увеличение количества активированнных СД25+СД3+
лимфоцитов и индекса апоптоза (р<0,05). ИРИ был достоверно ниже данных группы контроля.
Обсуждение полученных
данных. Таким образом, исследование субпопуляционногосоставалимфоцитов периферической крови у женщин с ФПН, обследованных в указанные периоды (беременные III триместра, роженицы, родильницы) в сравнении с аналогичными данными, полученными у женщин при физиологическом течении беременности, родах и послеродовом периоде, выявило разбалансировку иммунных параметров, обусловленных ФПН. В отличии от нормы во всех группах обследованных при ФПН регистрировалось увеличение
количества натуральных киллерных клеток СД16+ и СД56+ фенотипов, осуществляющих киллинговый
эффект; нарастание количества В-клеток антителопродуцентов
(СД19+СД3-); увеличение количества Т- и В-лимфоцитов с HLA-DR+ антигеном (беременные, роженицы)
и
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫЕ И КЛИНИЧЕСКИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
2.46.2015 œ.
и только В- (родильницы); снижение фетоплацентарной недостаточностью. С.А. Кабылова, Г.Ж. Кайлюбаева, Г.Н.
количества клеток, несущих маркеры Выявлена разбалансировка показателей Баймусанов [и др.] // Матер. VII съезда
ранней активации СД25+ и апоптоза субпопуляционного состава акушер-гинекологов Казахстана. -
СД95+ (беременные, роженицы) и лимфоцитов периферической крови, Павлодар, 2006. - С.82-83.
СД95+ (родильницы), увеличение осуществляющих иммунный ответ. 3. Касабулатов, Н.М.
количества клеток с СД25+ маркером Полученные изменения указывают Плацентарная недостаточность,
(родильницы); нарастание общего на нарушение иммунорегуляторных акушерство, беременность и роды //
количества зрелых Т-лимфоцитов механизмов в системе мать-плацента- http://medinfa.rU/article/4/116514. -
(беременные), снижение их числа плод при фетоплацентарной 2009.
(роженицы), не меняющееся количество недостаточности и необходимости 4. Ломунова, М. А. Клетки
(родильницы); отсутствие изменений проведения соответствующей трофобласта плаценты человека: пути
количества иммунорегуляторных коррекции. их созревания и взаимодействие с
СД4+СД8+ Т-лимфоцитов у беременных, Список литературы: иммунной системой / М.А. Ломунова,
снижение их числа у родильниц и 1. Данилова, О.С. Интранаталь- В.Ю. Талаев // Иммунология. - 2007. -
разнонаправленность результатов в ное состояние плода при хронической № 1. - С. 49-58.
группе рожениц. фетоплацентарной недостаточности: 5. Сухих, Г.Т. Иммунология
Выводы. В результате проведенных автореф. ... канд. мед. наук: 14.00.01. - беременности / Г.Т. Сухих, Л. Ванько.
исследований установлен характер М., 2001. - 24 с. М.: Изд. РАМН, 2003. - 400 с.
изменений количественных параметров 2. Кабылова, С.А. Комплексный
иммунной системы у беременных III подход к проблеме лечения
триместра, рожениц и родильниц с фетоплацентарной недостаточности /
TYMIH SUMMARY
Н.В. КРАВЦОВА, Л.С. ДЗОЗ, УТЕШЕВА, N.V. KRAVTSOVA, L.S. DZOZ, Zh.A. UTESHEVA,
З.О. БАЗЫЛБЕКОВА, Г.К. ТОХТАКУЛИНОВА Z.O. BAZYLBEKOVA, G.K.TOKHTAKULINOVA
ФЕТОПЛАЦЕНТАРЛЫК ЖЕТ1СПЕУШ1Л1Г1 БАР ЖУКТ1, SUBPOPULATION PROFILE OF PERIPHERAL BLOOD
БОСАНАТЫН ЖЭНЕ БОСАНГАН ЭЙЕЛДЕРДЕГ1 LYMPHOCYTES IN PREGNANT, PARTURIENT AND POSTPARTUM
ПЕРИФЕРИЯЛЫК К.АН ЛИМФОЦИТТЕР1НЩ WOMEN WITH FETOPLACENTAL INSUFFICIENCY
СУБПОПУЛЯЦИЯЛЫК П1Ш1Н1
Scientific center of Obstetrics, Gynecology and Perinatology,
АкушерлЫ, гинекология жэне перинатология Fbmbii^ Almaty, Kazakhstan
орталы^ы, Алматы, Казахстан , . , , , r ......
The article presents research results of monoclonal antibodies
Лимфоциттердщ жоFарFы антигендерге моноклоналды panel to surface antigens of lymphocytes: CD3+CD19-, CD4+CD8-,
антиденелердщ панелше: СД3+СД19-, СД4+СД8-, СД8+СД4-, CD8+CD4-, CD16+CD3+, CD56+CD3+, CD16+, CD56+, CD19+ CD3-
СД16+ СД3+, СД56+СД3+, СД16+, СД56+, СД19+ СД3-, СДЗ+HLA- , CD3+HLA-DR+, CD3- HLA-DR, CD25+CD3+, CD95+CD3+, it was
DR+, СД3- HLA-DR, СД25+СД3+, СД95+СД3+ ЖYргiзген зерттеу determined the immuno-regulatory index and apoptosis index,
нэтижесшде фетоплацентарлыц жеткпеушмлт бар Ill - the character of changes of quantitative parameters of immune
триместрдеп ЖYKтi, босанатын жэне босанFан эйелдердеп system in third trimester pregnancy, parturient and postpartum
иммундыц ЖYЙен¡н1 сандыц параметрлершщ езгеру women with fetoplacental insufficiency. The study identified the
сипаты аныцталды. Иммундыц жауапты ЖYзеге асыратын imbalance indicators subpopulation composition of peripheral
перифериялыц цан лимфоциттершщ субпопуляциялыц blood lymphocytes carrying out the immune response. The
АлынFан езгерктер, фетоплацентарлыц жетiспеушiлiк жэне the mother-placenta-fetus system in case of placental insufficiency
сэйкес коррекция ЖYргiзу цажет кезiнде ана-плацента-урыц and needs for appropriate correction.
ЖYЙесiнде иммундыц-реттеушшк механизмдердiн бузылуын Key words: pregnant, parturient, postpartum women,
ке рсетедi. fetoplacental insufficiency, subpopulation profile of lymphocytes.
Нег'зг'! свздер: ЖYктi, босанатын эйел, босанган эйел, фетоплацентарлык жетСпеушЛк, лимфоциттердщ субпопуляциялык пiшiнi.
цурамы керсеттштершщ тен,гер1маздт айцындалды. changes indicate a violation of immunoregulatory mechanisms in
МеЗииинскии журнал ЗапаЗного Казахстана
97
