CC BY
63
Вятский медицинский вестник, №1, 2005
лигатура (для подвода сосуда), канюля (для выхода крови из сосуда). Методы: Для улучшения демонстрационных качеств и повышения учебной ценности готовых препаратов в сосудистое русло инъецируют подкрашенный красителем латекс. Метод проводится на лабораторной крысе под глубоким эфирным наркозом. Вскрывается брюшная полость и грудная клетка, обнажается сердце с прилежащими сосудами и сосуды бедра. Перед введением раствор латекса подогревают до температуры 40°С, периодически помешивая. Перед вводом смеси в артериальное русло, вставляют в бедренную артерию канюлю для отвода крови из кровеносной системы. Приготовленный раствор латекса и кармина вводят шприцем в левый желудочек по току крови (=0,008л), по мере заполнения русла латексом кровь вытекает через канюлю, таким образом, кровеносное русло заполняется раствором латекса. Раствор латекса с лазурью готовят также, как предыдущую смесь. Перед вводом смеси в венозное русло вставляют в бедренную вену канюлю для выведения крови из сосуда. Приготовленный раствор латекса и лазури вводят шприцем в нижнюю полую вену непосредственно перед входом в правое предсердие ретроградно (=0,008л). По мере заполнения русла латексом кровь будет вытекать из вставленной канюли. Полученный результат: при инъекции сосудистой системы - раздельно артериального и венозного русла, получают препарат сосудистого русла, обладающий высокими демонстрационными свойствами. На нём довольно хорошо выражена как артериальная, так и венозная сеть. Данный препараты могут быть использованы в учебном процессе на кафедре биологии.
ИЗМЕНЕНИЯ СЕТЧАТКИ И ЗРИТЕЛЬНОГО НЕРВА ПРИ КОМБИНИРОВАННОМ ВОЗДЕЙСТВИИ ИОНИЗИРУЮЩЕЙ РАДИАЦИИ И ВЫСОКОИНТЕНСИВНОГО СВЕТА Аникина Е.Ю., Потапов А.В., Варакута Е.Ю., Михуля Е.П., Жданкина А.А., Васильев Н.В.
Сибирский государственный медицинский университет, кафедра гистологии, эмбриологии и цитологии Научный руководитель - д.м.н., проф. С.В. Логвинов Зав. кафедрой - д.м.н., проф. С.В. Логвинов
В настоящей работе исследовали изменения сетчаток и зрительного нерва 20 беспородных белых крыс при комбинированном воздействии ионизирующей радиации (10 Гр) и высокоинтенсивного света (3500 лк, 2 сут). Сетчатки и зрительные нервы крыс фиксировали в 2,5% глютаральдегиде, постфиксировали в 2% растворе четырехокиси осмия и заливали в эпон. Проведенное исследование показало, что после окончания комбинированного облучения число деструктивно измененных ядер нейросенсорных клеток возрастает до 2,3+1,3% (контроль 0,15+0,01), плотность распределения ядер наружного ядерного слоя снижается до 3814+67 (контроль 4296+198), а число рядов ядер данного слоя уменьшается в 2,4 раза по сравнению с контролем (р<0,05). Анализ содержания гиперхромных нейронов внутреннего ядерного слоя показывает, что их количество воз-ростает до 3,33+0,92% (контроль 0,5±0,13%), а число пикноморфных нейронов данного слоя в 3 раза превышает контрольные значения. Изучение количества гиперхромных нейронов ганглионарного слоя свидетельст-вует о том, что их число в 5,2 раза больше контрольных значений (р<0,05), а содержание пикноморфных нейронов данного слоя достоверно не отличалось от контроля. Содержание гиперхромных и пикноморфных радиальных глиоцитов в 3 раза превышает контрольные значения (р<0,05), Число нервных проводников с дегенеративными изменениями осевых цилиндров достоверно не отличается от такового в контроле. Значимо в 5 раз по сравнению с контролем увеличивается количество нервных волокон с очаговой демиелинизацией. Очень часто изменения затрагивают как осевой цилиндр, так и миелиновую оболочку: содержание волокон зрительного нерва с одновременной дегенерацией данных структур в 10 раз превышает контрольные значения. Таким образом, возникающие после комбинированного воздействия деструктивные изменения сетчатой оболочки наиболее выражены в нейросенсорных клетах. Нейроны внутренних слоев
сетчатки относительно резистентные к изучаемомым факторам. Изменения зрительного нерва в большей степени касаются миелиновой оболочки, чем осевого цилиндра.
КОМПЛЕКСНАЯ КЛИНИКО-МОРФОЛОГИЧЕСКАЯ ОЦЕНКА ЛЕНТИГИНОЗНЫХ ПОРАЖЕНИЙ КОЖИ Белик О.С., Корякина В.А.
Санкт-Петербургская государственная медицинская академия им. И.И. Мечникова, кафедра пат. анатомии Научный руководитель - доц. Т.А.Новицкая Зав. кафедрой - проф. Н.М.Аничков
Современные тенденции клинико-морфологической диагностики злокачественных меланом направлены не выявление ранних этапов опухолевой прогрессии. Особое значение приобретает сравнительное исследование простого лентиго (ПЛ) и предзлокачественного меланоза (ПЗМ) с определением их отношения к развитию лентиго-меланомы (ЛМ). Исследовано 36 пигментных образований кожи от 36 больных (ж - 31, м - 5). Возраст 20-79лет, средний 68 лет. Локализация большинства опухолей - лицо (23 наблюдения). Размеры варьируют от 1,5см до 6см. Гистологически: ПЛ - 7 наблюдений, пЗм -5, ЛМ - 24, из них 13 - на фоне ПЗМ. ПЛ однотипны по размеру, характеру поверхности и пигментации, характеризуются постоянством акантоза, гиперпигментацией базального слоя, субэпидермальным фиброзом, отложениями свободного меланина, скоплениями макрофагов и меланофагов в дерме. ПЗМ характеризуется подчеркнутостью кожного рисунка, узелковыми утолщениями на поверхности, вариабельностью пигментации. В ПЗМ обнаружены различные формы эпидермальной мела-ноцитарной пролиферации и их сочетания с развитием характерных меланоцитарно-тканевых отношений, образованием крупных очагов из баллонных и веретеноклеточных структур. На протяжении многих лет существования пигментного пятна эти стадии могут чередоваться, трансформируясь в меланому in situ, которая ведет к развитию ЛМ. Дальнейшая прогрессия опухоли происходит в 2 направлениях: расширяется масштаб внутриэпидермальной мелано-цитарной пролиферации в сочетании с атипичной дисплази-ей, развивается инвазивная стадия. Особенности морфогенеза ПЛ, ПЗМ и ЛМ имеют диагностическое значение и коррелируют с биологической сущностью этих меланоцитарных поражений кожи. Раннее удаление прогрессирующих плоских, пигментных образований с широким их морфологическим исследованием создает основу для ранней диагностики ЛМ и предотвращения ее перехода в неблагоприятную узловую форму.
СУБПОПУЛЯЦИИ ЛИМФОЦИТОВ И МЕТОДЫ ИХ
ОПРЕДЕЛЕНИЯ
Бражник Д. И .
Кировская государственная медицинская академия, кафедра гистологии и эмбриологии Научный руководитель - к.м.н. С.А. Арасланов Зав. кафедрой - проф. В.Б. Зайцев
Лимфоциты - это единственные клетки организма, способные специфически распознавать собственные и чужеродные антигены и отвечать активацией на контакт с определенным антигеном. Малые лимфоциты делятся на 2 популяции, имеющие различные функции и продуцирующие разные белки. В-лимфоциты созревают в костном мозге. Они распознают антиген иммуноглобулиновыми рецепторами. При взаимодействии антигена с рецепторами В-лимфоциты дифференцируются в плазматические клетки, продуцирующие специфические для данного антигена антитела - иммуноглобулины. Среди В-лимфоцитов выделяют 2 субпопуляции: В-1 и В-2. Т-лимфоциты образуются в костном мозге, созревают в тимусе. На их поверхности находится антигенраспознающий рецептор (TCR). В результате позитивной и негативной селекции в кровоток поступают только такие Т-лимфоциты (CD4+ и CD8+), которые распознают собственные МНС и не распознают аутологичные пептиды в комплексе с собственными молекулами МНС. Взаимодействием В и Т-лимфоцитов обеспечивается специфический клеточный и гуморальный иммунитет. Одним из этапов оценки иммунного статуса па-
циента является определение субпопуляций лимфоцитов, их количества. Для выделения лимфоцитов из периферической крови или других биологических жидкостей и биоптатов широко используется метод дифференциального центрифугирования в градиенте плотности фиколл-верографин. Для выделения лимфоцитов из суммарной фракции мононуклеаров используют способность моноцитов прочно прикрепляться к поверхности стекла или пластика. Современный метод - обработка смеси клеток антимоноцитарными антителами, с последующим их комплементзависимым лизисом. Наиболее точными и информативными современными методами определения фенотипа лимфоцитов являются метод проточной флюорометрии и метод с использованием соответствующих моноклональных антител. Кроме этого проточная флюоро-метрия позволяет выявить некоторые маркеры внутри цитоплазмы лимфоцитов, а также пролиферативную активность и цитотоксичность клеток. Недостаток метода - дороговизна прибора и многоступенчатость обработки образцов клеток. Более старый метод определения Т и В-лимфоцитов - метод розеткообразования с эритроцитами барана и мыши.
КЛЕТОЧНЫЙ СОСТАВ ЛИМФОИДНЫХ УЗЕЛКОВ ЖЕЛУДКА ПРИ ВОЗДЕЙСТВИИ СЕРОВОДОРОДНЫХ ВАНН Гусейнова С.Т.
Дагестанская государственная медицинская академия, кафедра анатомии человека Научный руководитель - д.м.н., проф. Т.С. Гусейнов Зав. кафедрой - д.м.н., проф. Т.С. Гусейнов
Целью работы является выяснить влияние сероводородных ванн, по сравнению с контролем, на лимфатическое русло и состав клеток мантии лимфоидных узелков желудка у белых крыс. Для выполнения задач нашего исследования мы использовали макро- и микроскопические методы. Опыты провели на 30 белых крысах (15 контрольные, 15 после приема сероводородных ванн). Гистологические срезы окрашивались по Ван Гизон, гематоксилин-эозином, выявление арги-рофильных волокон по Футу и т.д. Использовали статистическую обработку морфометрических результатов. Установлено, что при воздействии сероводородных ванн в мантии лимфоидных узелков увеличивается содержание малых лимфоцитов в 2,84 раза, возрастает количество незрелых и зрелых плазмоцитов в 1,16 раза, макрофагов в 1,4 раза. Частота деструктивных клеток при приеме сероводородных ванн учащается в 3 раза по сравнению с контрольными белыми крысами. Процент стромальных клеток (ретикулярные клетки и фибробласты) при приеме сероводородных ванн уменьшается почти в 2 раза при точечном подсчете клеток на единице площади. При приеме сероводородных ванн улучшаются не только клеточные показатели лимфоидных органов, но и повышается плотность гемо- и лимфомикроциркуляторного русел на 1 см2 в 1,4 раза, укорачивается расстояние между гемо- и микрокапиллярами с одной стороны и лимфоидными узелками с другой. Исходя из собственного материала, можно отметить, что сероводородные ванны стимулируют клеточные элементы, ответственные за клеточный и гуманитарный иммунитет, что следует учесть при профилактике и терапии гастритов, язвенной болезни желудка и т.д., при которых встречается недостаточность общей иммунной системы слизистых оболочек (ОИССО).
КОЛИЧЕСТВО КЛЕТОК ЛЕЙДИГА В МУЖСКИХ ПОЛОВЫХ ЖЕЛЕЗАХ ПРИ РАКЕ ПРЕДСТАТЕЛЬНОЙ ЖЕЛЕЗЫ РАЗНОЙ СТЕПЕНИ ДИФФЕРЕНЦИРОВКИ Давыдова Д.А.
Нижегородская государственная медицинская академия, кафедра патологической анатомии Научный руководитель - д.м.н. А.А. Артифексова Зав. кафедрой - д.м.н. А.А. Артифексова
Увеличение средней продолжительности жизни, а также рост заболеваемости раком предстательной железы (РПЖ) определяют актуальность проблемы данной патологии. Цель и задачи настоящего исследования состояли в сопоставлении данных гистологического исследования новообразований в предстательной железе, уровней ре-
цепторов андрогенов в опухолевых клетках и характеристик гормонпродуцирующих клеток (клеток Лейдига) в яичках. В группу сравнения вошли 42 мужчины в возрасте 65 - 78 лет с гистологически верифицированным диагнозом РПЖ. В контрольную группу - 9 мужчин такого же возраста с диагнозом узловой формы доброкачественной гиперплазии предстательной железы (ДГПЖ). Интерпретация гистологических данных проводилась в соответствии с градацией Глисона. Рецепторы андрогенов определялись в цитозольной фракции опухолевых клеток. Подсчет клеток Лейдига проводился в мазках из гомогенатов ткани семенников в пересчете на 1 г ткани. При этом получены следующие результаты. В исследуемой группе у 13 из 42 пациентов с РПЖ градация Глисона была менее 5, у остальных 29 - более 5. В первой подгруппе пациентов рецепторы андрогенов определялись в 5 случаях, среднее значение ракового антигена (РА) было равным 105,5±16,1 фмоль/мг, а количество клеток Лейдига (на 1 г ткани яичка) - 156,0±11,4. Во второй подгруппе пациентов (с градацией Глисона более 5) рецепторы андрогенов определялись в 7 случаях, среднее значение РА было равным 94,8±13,7 фмоль/мг, а количество клеток Лейдига -44,1±17,5. В контрольной группе (9 наблюдений) рецепторы андрогенов определялись в 5 случаях, а среднее значение РА и количество клеток Лейдига были 42,6±21,1 фмоль/мг и 97,6±7,9 соответственно. Таким образом, определяется зависимость степени дифференцировки опухоли и количества рецепторов андрогенов в цитозольной фракции опухолевых клеток. В то же время, гиперплазия клеток Лейдига чаще выявляется при высокодифферен-цированных аденокарциномах, а значит, может стать в ряде случаев косвенным доказательством наличия высо-кодифференцированной карциномы, особенно в случаях спорных диагнозов и невозможности определения РА.
ВЛИЯНИЕ ОЗОНА НА КОЛИЧЕСТВО И ОБЪЕМНУЮ ПЛОТНОСТЬ НЕПАРЕНХИМАТОЗНЫХ КЛЕТОК В ЦИРРОТИЧЕСКИ ИЗМЕНЁННОЙ ПЕЧЕНИ Ежов С.А., Филиппов Н.А.
Кировская государственная медицинская академия, кафедра медицинской биологии и генетики Научный руководитель, зав. кафедрой - проф. А.А. Косых
В настоящее время достаточно широко распространено сочетанное поражение паренхимы и стромы печени. Ведущими этиологическими факторами этих поражений является алкоголизм, профессиональные вредности, хронические сопутствующие заболевания. Установлено, что у 70-90% пациентов формируется постгепатитный цирроз. В связи с этим актуальной является задача поиска и разработки перспективных методов лечения цирротических изменений печени. Целью настоящей работы являлось изучение влияния озона на митотическую активность гепато-цитов и непаренхиматозных клеток в цирротически изменённой печени. В работе использовались белые крысы. Для моделирования цирротического поражения печени использовали двадцатикратные инъекции четырёххлори-стого углевода (СС14). Исследовалось действие различных доз озона в виде озонированного физиологического рас-твора(ОФР) (1 мкг/кг, 10 мкг/кг), который инъецировали животным внутрибрюшинно один раз в сутки. По окончании срока наблюдения, на вторые, третьи, десятые сутки и непосредственно после введения СС14, животных подвергали эвтаназии. Аналогично исследовали животных, пролеченных ОФР. Степень выраженности митотической активности гепатоцитов определяли в препаратах, окрашенных гематоксилином-эозином, подсчитывая при иммерсионном увеличении число митозов в поле зрения. Учитывалось не менее 100 полей зрения. В результате проведённых экспериментов показано, что у животных, не получавших лечение ОФР, наблюдалось снижение количества митозов в 3 раза по сравнению с контролем и группой животных пролеченных ОФР. Количество и объёмная плотность непаренхиматозных клеток в группе животных, получавших лечение ОФР к 10 суткам достигала аналогичных величин интактных животных. У экспериментальной группы эти величины существенно возросли к 10 сут-
