CC BY
30
циента является определение субпопуляций лимфоцитов, их количества. Для выделения лимфоцитов из периферической крови или других биологических жидкостей и биоптатов широко используется метод дифференциального центрифугирования в градиенте плотности фиколл-верографин. Для выделения лимфоцитов из суммарной фракции мононуклеаров используют способность моноцитов прочно прикрепляться к поверхности стекла или пластика. Современный метод - обработка смеси клеток антимоноцитарными антителами, с последующим их комплементзависимым лизисом. Наиболее точными и информативными современными методами определения фенотипа лимфоцитов являются метод проточной флюорометрии и метод с использованием соответствующих моноклональных антител. Кроме этого проточная флюоро-метрия позволяет выявить некоторые маркеры внутри цитоплазмы лимфоцитов, а также пролиферативную активность и цитотоксичность клеток. Недостаток метода - дороговизна прибора и многоступенчатость обработки образцов клеток. Более старый метод определения Т и В-лимфоцитов - метод розеткообразования с эритроцитами барана и мыши.
КЛЕТОЧНЫЙ СОСТАВ ЛИМФОИДНЫХ УЗЕЛКОВ ЖЕЛУДКА ПРИ ВОЗДЕЙСТВИИ СЕРОВОДОРОДНЫХ ВАНН Гусейнова С.Т.
Дагестанская государственная медицинская академия, кафедра анатомии человека Научный руководитель - д.м.н., проф. Т.С. Гусейнов Зав. кафедрой - д.м.н., проф. Т.С. Гусейнов
Целью работы является выяснить влияние сероводородных ванн, по сравнению с контролем, на лимфатическое русло и состав клеток мантии лимфоидных узелков желудка у белых крыс. Для выполнения задач нашего исследования мы использовали макро- и микроскопические методы. Опыты провели на 30 белых крысах (15 контрольные, 15 после приема сероводородных ванн). Гистологические срезы окрашивались по Ван Гизон, гематоксилин-эозином, выявление арги-рофильных волокон по Футу и т.д. Использовали статистическую обработку морфометрических результатов. Установлено, что при воздействии сероводородных ванн в мантии лимфоидных узелков увеличивается содержание малых лимфоцитов в 2,84 раза, возрастает количество незрелых и зрелых плазмоцитов в 1,16 раза, макрофагов в 1,4 раза. Частота деструктивных клеток при приеме сероводородных ванн учащается в 3 раза по сравнению с контрольными белыми крысами. Процент стромальных клеток (ретикулярные клетки и фибробласты) при приеме сероводородных ванн уменьшается почти в 2 раза при точечном подсчете клеток на единице площади. При приеме сероводородных ванн улучшаются не только клеточные показатели лимфоидных органов, но и повышается плотность гемо- и лимфомикроциркуляторного русел на 1 см2 в 1,4 раза, укорачивается расстояние между гемо- и микрокапиллярами с одной стороны и лимфоидными узелками с другой. Исходя из собственного материала, можно отметить, что сероводородные ванны стимулируют клеточные элементы, ответственные за клеточный и гуманитарный иммунитет, что следует учесть при профилактике и терапии гастритов, язвенной болезни желудка и т.д., при которых встречается недостаточность общей иммунной системы слизистых оболочек (ОИССО).
КОЛИЧЕСТВО КЛЕТОК ЛЕЙДИГА В МУЖСКИХ ПОЛОВЫХ ЖЕЛЕЗАХ ПРИ РАКЕ ПРЕДСТАТЕЛЬНОЙ ЖЕЛЕЗЫ РАЗНОЙ СТЕПЕНИ ДИФФЕРЕНЦИРОВКИ Давыдова Д.А.
Нижегородская государственная медицинская академия, кафедра патологической анатомии Научный руководитель - д.м.н. А.А. Артифексова Зав. кафедрой - д.м.н. А.А. Артифексова
Увеличение средней продолжительности жизни, а также рост заболеваемости раком предстательной железы (РПЖ) определяют актуальность проблемы данной патологии. Цель и задачи настоящего исследования состояли в сопоставлении данных гистологического исследования новообразований в предстательной железе, уровней ре-
цепторов андрогенов в опухолевых клетках и характеристик гормонпродуцирующих клеток (клеток Лейдига) в яичках. В группу сравнения вошли 42 мужчины в возрасте 65 - 78 лет с гистологически верифицированным диагнозом РПЖ. В контрольную группу - 9 мужчин такого же возраста с диагнозом узловой формы доброкачественной гиперплазии предстательной железы (ДГПЖ). Интерпретация гистологических данных проводилась в соответствии с градацией Глисона. Рецепторы андрогенов определялись в цитозольной фракции опухолевых клеток. Подсчет клеток Лейдига проводился в мазках из гомогенатов ткани семенников в пересчете на 1 г ткани. При этом получены следующие результаты. В исследуемой группе у 13 из 42 пациентов с РПЖ градация Глисона была менее 5, у остальных 29 - более 5. В первой подгруппе пациентов рецепторы андрогенов определялись в 5 случаях, среднее значение ракового антигена (РА) было равным 105,5±16,1 фмоль/мг, а количество клеток Лейдига (на 1 г ткани яичка) - 156,0±11,4. Во второй подгруппе пациентов (с градацией Глисона более 5) рецепторы андрогенов определялись в 7 случаях, среднее значение РА было равным 94,8±13,7 фмоль/мг, а количество клеток Лейдига -44,1±17,5. В контрольной группе (9 наблюдений) рецепторы андрогенов определялись в 5 случаях, а среднее значение РА и количество клеток Лейдига были 42,6±21,1 фмоль/мг и 97,6±7,9 соответственно. Таким образом, определяется зависимость степени дифференцировки опухоли и количества рецепторов андрогенов в цитозольной фракции опухолевых клеток. В то же время, гиперплазия клеток Лейдига чаще выявляется при высокодифферен-цированных аденокарциномах, а значит, может стать в ряде случаев косвенным доказательством наличия высо-кодифференцированной карциномы, особенно в случаях спорных диагнозов и невозможности определения РА.
ВЛИЯНИЕ ОЗОНА НА КОЛИЧЕСТВО И ОБЪЕМНУЮ ПЛОТНОСТЬ НЕПАРЕНХИМАТОЗНЫХ КЛЕТОК В ЦИРРОТИЧЕСКИ ИЗМЕНЁННОЙ ПЕЧЕНИ Ежов С.А., Филиппов Н.А.
Кировская государственная медицинская академия, кафедра медицинской биологии и генетики Научный руководитель, зав. кафедрой - проф. А.А. Косых
В настоящее время достаточно широко распространено сочетанное поражение паренхимы и стромы печени. Ведущими этиологическими факторами этих поражений является алкоголизм, профессиональные вредности, хронические сопутствующие заболевания. Установлено, что у 70-90% пациентов формируется постгепатитный цирроз. В связи с этим актуальной является задача поиска и разработки перспективных методов лечения цирротических изменений печени. Целью настоящей работы являлось изучение влияния озона на митотическую активность гепато-цитов и непаренхиматозных клеток в цирротически изменённой печени. В работе использовались белые крысы. Для моделирования цирротического поражения печени использовали двадцатикратные инъекции четырёххлори-стого углевода (СС14). Исследовалось действие различных доз озона в виде озонированного физиологического рас-твора(ОФР) (1 мкг/кг, 10 мкг/кг), который инъецировали животным внутрибрюшинно один раз в сутки. По окончании срока наблюдения, на вторые, третьи, десятые сутки и непосредственно после введения СС14, животных подвергали эвтаназии. Аналогично исследовали животных, пролеченных ОФР. Степень выраженности митотической активности гепатоцитов определяли в препаратах, окрашенных гематоксилином-эозином, подсчитывая при иммерсионном увеличении число митозов в поле зрения. Учитывалось не менее 100 полей зрения. В результате проведённых экспериментов показано, что у животных, не получавших лечение ОФР, наблюдалось снижение количества митозов в 3 раза по сравнению с контролем и группой животных пролеченных ОФР. Количество и объёмная плотность непаренхиматозных клеток в группе животных, получавших лечение ОФР к 10 суткам достигала аналогичных величин интактных животных. У экспериментальной группы эти величины существенно возросли к 10 сут-
Вятский медицинский вестник, №1, 2005
кам опыта. Также необходимо отметить уменьшение размеров непаренхиматозных клеток у животных экспериментальной группы, что является косвенным признаком цир-ротического поражения и практически не наблюдалось изменение размеров клеток в группе животных получавших терапию ОФР. Таким образом показано, что ОФР оказывает положительное влияние на митотическую активность гепатоцитов в цирротически изменённой печени и функциональное состояние непаренхиматозных клеток.
МОРФОЛОГИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ СТРОЕНИЯ ЛЕГОЧНЫХ ВЕН СЕРДЦА ЧЕЛОВЕКА Иванов В.А., Митрофанова Л.Б.
СПбГМУ им. акад. И.П. Павлова, кафедра анатомии человека Научный руководитель - д.м.н., проф. А.К. Косоуров Зав. кафедрой - д.м.н., проф. А.К. Косоуров
В современной отечественной и зарубежной литературе не ослабевает интерес к различным вариантам строения и впадения легочных вен (ЛВ) в левое предсердие (ЛП) сердца. Среди авторов нет единого мнения о количестве и гистологическом строении ЛВ, несущих кровь к сердцу от правого и левого легкого. В связи с этим, нами была определена цель данного исследования: изучить морфометрические особенности строения и количественное соотношение ЛВ сердца человека. Материалом для данного исследования послужили 16 сердец лиц обоего пола, умерших от различных причин в возрасте от 19 до 75 лет. Среди них было 10 мужчин и 6 женщин. В каждом конкретном случае, в стандартных условиях, определяли количество ЛВ от правого и левого легкого. С использованием быстротвердеющих пластмасс было изготовлено три коррозионных препарата ЛП сердца и впадающих в него правых и левых ЛВ. 13 препаратов ЛВ были изучены на гистологическом уровне. С этой целью были изготовлены тонкие срезы устья ЛВ, которые окрашивались по ван Гизон. В результате исследования было установлено, что в 7 случаях из 16, 2 вены впадало от левого легкого и 3 от правого, что составило 43,75% от общего числа исследований. Все препараты сердец были взяты у лиц мужского пола. В остальных случаях было установлено, что в 31,25% случаев (5 препаратов) в ЛП впадало по две ЛВ от каждого легкого. По одному случаю: 2 ЛВ от левого легкого и 1 от правого; 2 вены от левого легкого и 4 от правого; по 3 ЛВ от каждого легкого, а так же 3 ЛВ от левого легкого и 4 от правого. Эти случаи составили соответственно по 6,25% каждый. При изучении гистологических препаратов были описаны три оболочки ЛВ: внутренняя, средняя и наружная. Наибольший интерес, по нашему мнению, представляет средняя оболочка вены, которая представлена непрерывным слоем гладкомышечных клеток, окруженных соединительнотканными волокнами. Вероятнее всего, по этим структурам возможно проведение нервного импульса от одного предсердия к другому. При изменении данных элементов возможно нарушение ритма сердца, которое выражается фибриляцией предсердий.
ВЛИЯНИЕ ОЗОНА НА МИТОТИЧЕСКУЮ АКТИВНОСТЬ ГЕПАТОЦИТОВ В ЦИРРОТИЧЕСКИ ИЗМЕНЕННОЙ ПЕЧЕНИ Козвонин В.А.
Кировская государственная медицинская академия, кафедра медицинской биологии и генетики Научный руководитель, зав. кафедрой - проф. А. А. Косых
Изучалось влияние озона, вводимого интраперитонеально, на митотическую активность гепатоцитов в печени крыс с циррозом, вызванным введением 64-х инъекций четыреххлористого углерода (СС14). В эксперименте исследовалось действие различных доз озона, вводимого в виде озонированного физиологического раствора ОФР (1мкг/кг, 10 мкг/кг, 100 мкг/кг). Животных забивали на 10 сутки после завершения манипуляций. Степень выраженности митотической активности гепатоцитов определяли при окраске препаратов по Фельгену, подсчитывая на иммерсионном увеличении число митозов на 100 полей зрения (п/з). В гепатоцитах контрольной группы здоровых животных количество митотически делящихся гепатоцитов составило 0,266 ± 0,118 на 100 п/з. При циррозе на высоте пато-
логии - 4,555 ± 0,6, но затем исходно высокие показатели снижаются в 4 раза к 10-му дню эксперимента - 1,166 ± 0,307 (р<0,05 в сравнении с нормой). При использовании ОФР в дозе 1 мкг/кг количество митозов снижалось по сравнению с исходным уровнем патологии на 27% (3,333 ± 1,585) , но, тем не менее, превышало значение контроля на 10-е сут. почти в 3 раза (при р>0,05). Введение ОФР в дозе 10 мкг/кг стимулировало митотическую активность гепатоцитов в меньшей степени (2,333 ± 0,333), чем применение ОФР в дозе 1 мкг/кг, но и в данном случае число делящихся клеток было в 2 раза больше, чем у животных циррозного контроля на 10-е сут. При этом показатель достоверно отличался как от нормы, так и от значений, полученных у животных на протяжении всего срока наблюдения. Применение ОФР в дозе 100 мкг/кг к 10-м сут. приводило к наиболее выраженному (3,8 ± 1,356), в 3,5 раза превышающего циррозный контроль на тот же срок, митотическо-му ответу. Однако индивидуальные значения числа митозов различались на 30 % от средней величины, поэтому достоверных отличий с контрольными животными получено не было, но митотическая активность была значительной и достоверно выше нормы. Таким образом, можно сделать вывод, что введение животным с циррозом печени ОФР стимулирует регене-рационные процессы в органе, усиливая митотическую активность гепатоцитов по сравнению с группами контроля. При этом наиболее достоверные результаты получены при использовании дозы 10 мкг/кг.
КЛИНИКО-АНАТОМИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ ГЛИОМ ГОЛОВНОГО МОЗГА В ПРОГНОСТИЧЕСКОМ АСПЕКТЕ Колотов К.А.
Кировская государственная медицинская академия, кафедра патологической анатомии
Научный руководитель - д. м.н., проф. А.Е. Колосов Зав. кафедрой - д.м.н., проф. А.Е. Колосов
Цель: Изучить операционный материал больных глиомами головного мозга и выявить клинико-морфологические особенности различных их вариантов. Задачи: 1) проанализировать истории болезни пациентов с глиомами головного мозга и описать гистологическую характеристику этих опухолей с благоприятным и агрессивным клиническим течением; 2) провести гистохимическое исследование биопсийного и операционного материала в прогностическом аспекте; 3) сравнить полученные собственные данные со сведениями, почерпнутыми из литературы. Материалы: истории болезни прооперированных больных с протоколами операций, анкеты с отдаленными результатами лечения, биоптаты и операционный материал, протоколы секций. Методы: биопсийный и операционный материал обобщен визуально и гистологически по микропрепаратам, окрашенным общими микроскопическими методами, а также представлено резюме показателей экспрессии онкобелков, специфических для глиом, и интенсивности процесса апоптоза опухолевых элементов. Результаты: глиомы составляют 42,6% внутричерепных новообразований. По данным литературы, название «глиома» является определением, обобщающим неоплазмы глиогенетического ряда, являющиеся производными первичного медуллярного эпителия и продуктов его клеточной дифференцировки. Глиомы чаще встречаются в возрасте 4060 лет, в два раза больше поражаются мужчины. Длительность болезни в среднем от 8 до 11 месяцев. Они обычно занимают лобную долю большого полушария. На разрезе при злокачественных глиомах патологический участок пестрый, дряблый, без четких границ. Гистологически опухоль состоит из мелких клеток, бедных цитоплазмой, с круглым или овальным ядром, богатым хроматином, типичен полиморфизм гли-альных структур, наличие глигокена и делящихся форм. Метастазы находятся в пределах головного мозга и имеют идентичное строение. Метастазирующие типы глиом вошли в особую группу, которая представляла собой глиомы низкодифферен-цированного полиморфноклеточного вида с быстрым инфильтрирующим ростом в соседние отделы головного мозга и ранним рецидивом заболевания. Хирургическое лечение пациентов дополняется лучевым воздействием и лекарственными препаратами. Иммуногистохимически доступно освещение экспрессии белков лекарственной устойчивости и апоптоза в глиомах, а также рассчитать апоптозный индекс. Для формирования лекарственной устойчивости глиальных бластом наи-
