CC BY
33
они лишь фенотипически подобны тем или иным клеткам печени крыс? Для того, чтобы ответить на этот вопрос мы провели окрашивание антителами к HSA — специфическому антигену гепатоцитов человека и АФП человека — маркеру гепатобластов человека и показателю их секреторной активности. И обнаружили экспрессию обоих маркеров клетками печени крыс на всех исследованных сроках, что свидетельствует не только об их происхождении из трансплантированных клеток пуповинной крови, но и говорит о зрелости этих клеток и их функциональной активности.
Заключение. Трансфекция не изменяет биологических свойств стволовых клеток и их способности дифференцироваться в основные клеточные типы печени. Трансплантированные клетки пуповинной крови, трансфицированные геном GFP, мигрируют из селезенки в печень, сохраняют способность к экспрессии клонированного гена и участвуют в регенерации печени.
Таким образом, полученные результаты позволяют на основе разработанных нами методических подходов выработать принципиально новую схему клеточной и генотерапии наследственных заболеваний (таких как болезнь Вильсона — Коновалова, дефицит —1 -антитрипсина, гемохроматоз, гликогенозы и т.д.), связанных с нарушением экспрессии генов в печени, когда в качестве материала для трансплантации будут использованы аутогенные генетически «вылеченные» стволовые клетки пуповинной крови.
Л.А. Бабийчук, В.И. Грищенко, П.М. Зубов,
О.Л. Зубова, В.В. Рязанцев, Л.В. Бабийчук,
О.В. Кудокоцева, С.А. Любчич Структурно-функциональное состояние и жизнеспособность ядросодержащих клеток пуповинной крови после криоконсервирования*
Институт проблем криобиологии и криомедицины НАН Украины, Харьков, Украина
L.A. Babyichuk, V.l. Grishchenko, P.M. Zubov, Ü.L. Zubova,
V.V. Ryazantsev, L.V. Babyichuk, Ü.V. Kudokovtseva,
S.A. Lyubchich
The structure, fonctions and viability
of the umbilical cord blood nuclear cells after
cryoconservation
Разработаны новые эффективные методы выделения и криоконсервирования ядросодержащих клеток из пуповинной крови, которые позволяют сохранять количественный и качественный состав ядросодержащих клеток (в том числе и стволовых гемопоэтических) после выделения, и демонстрируют достаточно высокий уровень сохранности структурно-функциональных свойств и жизнеспособности CD45+ и CD34+ клеток после криоконсервирования.
* Статья опубликована полностью в рубрике «Оригинальные исследования».
Н.Л. Блатт1, М.Э. Ялвач2, А.К. Шафигуллина3,
И.И. Салафутдинов1, А.П. Киясов3, А.А. Ризванов1 2 3 Влияние Плуроника Р85 на экспрессию мРНК гена остеонектина при остеогенной дифференцировке мезенхимных стволовых клеток человека in vitro
1 ФГДОУВПО «Казанский [Приволжский} федеральный университет», Казань, Россия
2 Департамент генетики и биоинженерии.
Университет Едитепе, г. Стамбул, Турция
3 ГОУ ВПО «Казанский государственный медицинский университет», Казань, Россия [email protected]
N.L. Blatt1, М.Е. Yalvac2, А.К. Shafigullina3, l.l. Salafutdinov1,
А.Р. Kiyasov3, A.A. Rizvanov123 Effect of Piuronic P85 on osteonectin mRNA expression level during osteogenic differentiation of human mesenchymal stem cells in vitro
Полимерные наноносители привлекают внимание исследователей в качестве векторов для доставки лекарственных средств. Один из перспективных классов полимеров — неионные полиэфирные блок-сополимеры (Плуроники). Достигнут значительный прогресс в области применения Плуроников для доставки лекарственных средств. Известно, что Плуроники обладают широким спектром биологического действия. Один из перспективных полимерных наноносителей — Плуро-ник Р85, триблок-сополимер этилен оксида CEO) и пропилен оксида (PO) Е026-Р040-Е026. Показано, что Плуроник Р85 ингибируют механизмы множественной лекарственной резистентности (MDR), повышая эффективность противораковой терапии. Кроме того, недавно было показано, что внутримышечное введение мышам Плуроника Р85 совместно с плазмидной ДНК существенно повышало эффективность прямой генной терапии.
Несмотря на достигнутый прогресс, влияние Плуроников на биологические свойства стволовых клеток человека остается малоизученным. Взаимодействие Плуроников в составе разрабатываемых лекарственных препаратов со стволовыми клетками организма может оказывать опосредованное влияние на регенерационный потенциал организма.
Цель работы: исследовать влияние неионного блок-сополимера (Плуроника) Р85 на экспрессию мРНК гена остеонектина при остеогенной дифференцировке муль-типотентных мезенхимальных стромальных клеток (ММСК) человека in vitro.
Материал и методы. ММСК выделили из третьего моляра человека (зуб мудрости). Непрорезавшиеся третьи моляры человека (3 шт.) удалили хирургическим методом у здоровой пациентки (20 лет) в профилактических целях. Пульпу зуба извлекли в асептических условиях, разрезали на мелкие кусочки стерильным скальпелем и поместили в культуральную среду —МЕМ с добавлением 10% эмбриональной сыворотки коров, пенициллина-стрептомицина. После 10 сут. инкубации при +37°С во влажной атмосфере с содержанием 5% С02, клетки образовывали монослой. Культуральную среду меняли каждые 2 сут. В экспериментах использовали клетки 4^5 пассажа.
Для остеогенной дифференцировки клетки высевали на 6-луночные плашки в концентрации 3000 клеток/см2. На следующий день к клеткам добавляли Плуроник Р85 (Basf) в конечной концентрации 0,01% (вес/ объём). После инкубации в течение 24 ч культуральную
Клеточная трансплантология и тканевая инженерия Том V, 1У< 3, 2010
