CC BY
26
в отдаленные периоды (от нескольких дней до нескольких месяцев) от момента воздействия или приема токсиканта, когда исследование биожидкостей уже не имеет смысла. Установление фактов отдаленного приема ксенобиотиков или фактов приема ксенобиотиков в течение длительного времени возможно при решении двух основных задач:
1) наличия аналитического оборудования, позволяющего идентифицировать вещества с низкими пределами обнаружения;
2) исследования биологических объектов, в которых токсиканты сохраняются длительное время.
В настоящее время уровень развития аналитического оборудования, прежде всего гибридных хроматографиче-ских методов в сочетании с различными масс-спектрометрами (одноквадрупольными, тандемными, время-пролетными и т.д.) позволяет успешно решать самые сложные задачи по идентификации широкого спектра токсикантов.
Развитие аналитического оборудования создало базу для проведения исследований так называемых альтернативных объектов: волосы, ногти, сухие пятна крови, слюна. Интерес к анализу альтернативных объектов определяется, с одной стороны, интересами следствия:
1. неинвазивным отбором проб (возможность отбора проб вне условий медицинской организации), что очень важно при проведении следственных действий;
2. сохраняемость объектов исследований при комнатной температуре;
3. возможность транспортировки в другую лабораторию;
с другой стороны - особенностями токсикокинетики:
1. сохраняемость длительное время в живом организме;
2. возможность идентификации метаболитов, как доказательство контакта человека с токсикантом.
В судебно-химическом отделении СПб ГБУЗ «БСМЭ» активно развивается направление анализа альтернативных объектов исследования.
Вопрос анализа волос был подробно освящен нами в опубликованных статьях и докладах. Следует отметить, что в СПБ ГБУЗ «БСМЭ» за последние годы анализ волос с целью определения токсикантов стал рутинным исследованием: так, в 2016 г. было выполнено 2 исследования волос, в 2017 г.- 80 и в 2018 г.- 188. В три раза расширился спектр идентифицированных в волосах ксенобиотиков: в 2017 г. было определено 40 различных веществ, а в 2018 г. уже 120. Общее число случаев обнаружения различных ксенобиотиков возросло более чем в два раза - с 305 в 2017 г. до 870 в 2018 г.
Судебно-химические исследования проводятся в основном с целью идентификация и количественное определение важных с токсикологической точки зрения веществ для установления причины смерти. Для решения данной задачи предпочтительными объектами исследования являются биологические жидкости и биологические ткани, а также луковицы волос. Но анализ волос позволяет оценить длительность приема наркотиков (на протяжении нескольких месяцев), виды употребляемых веществ, что предоставляет врачу судебно-медицинскому эксперту дополнительную информацию для обоснования причины смерти. Например, при судебно-химическом исследовании крови мочи, печени и почки от гр. К были обнаружены: метадон, метаболит метадо-на БОБР, кофеин и никотин. При тестировании волос были определены: метадон, кокаин, бензоилэкгонин, норкокаин, кокаэтилен, фенобарбитал, диазепам, тра-мадол и О-дезметилтрамадол. Данный пример наглядно свидетельствует, что гр. К длительно время употреблял различные наркотические средства и психотропные ве-
щества, а на момент смерти являлся метадоновым наркоманом.
Следующим альтернативным объектом для ретроспективных судебно-химических исследований являются ногти. Ногти, также, как и волосы в основном состоят из кератина, способного образовывать комплексы с ксенобиотиками и удерживать их длительное время. Они имеют все те же особенности, как объект анализа, что и волосы: неинвазивный метод отбора, сохраняемость при комнатной температуре, возможность пересылки в другую лабораторию и т.д. Ногти растут в двух направлениям в длину и в высоту. Скорость роста ногтей составляет от 1,9 до 4,4 мм/месяц для ногтей на руках и от 0,9 до 2,1 мм/месяц для ногтей на ногах.
Возможность идентификации ксенобиотиков в ногтях составляет около 3-5 месяцев для ногтей рук и 8-14 месяцев для ногтей ног. Таким образом, ногти ног являются предпочтительным объектом для судебно-химических исследований, так как имеют наиболее широкое окно идентификации и меньше подвержены внешнему загрязнению через контакт с наркотическими и психотропными веществами.
Для судебно-химических (химико-токсикологических) исследований могут быть направлены как срезы ногтей, так и спилы с внешней поверхности ногтя.
В практике нашего отделения проводились исследования срезов ногтей, по стандартным методикам пробопод-готовки с использованием газового хроматографа с одно-квадрупольным масс-спектрометром.
Масса предоставленных на анализ ногтей составляла от 0,0335 до 0,2 г.
Результаты анализа волос и ногтей от одного человека показали хорошую сходимость результатов. Так, при исследовании волос от гр. А. были обнаружены метадон и его метаболит БОБР, мефедрон, МДМА, МДДМА, ме-тиламфетамин, норэфедрин и амфетамин. При анализе ногтей - метадон и его метаболит БОБР, МДМА, МДДМА, амфетамин.
ВЫВОДЫ
Ногти, как и волосы, имеют большой потенциал для определения запрещенных и лекарственных средств. Дальнейшие исследования в области соотношения концентрации ксенобиотиков в ногтях и других биологических матрица (например, кровь, моча, волосы), а также изучения влияния различных факторов на сохраняемость веществ в ногтях позволит значительно расширить объем информации для интерпретации результатов судебно-хи-мических (химико-токсикологических) исследований.
СТРУКТУРНАЯ ИДЕНТИФИКАЦИЯ НОВЫХ ПСИХОАКТИВНЫХ ВЕЩЕСТВ И ИХ ПРОИЗВОДНЫХ В ПРАКТИКЕ СУДЕБНО-ХИМИЧЕСКОГО ОТДЕЛА ГБУЗ МО «БЮРО СМЭ»
А. М. Григорьев
ГБУЗ МО «Бюро СМЭ», Москва Диагностика отравления новыми психоактивными соединениями, распространяемыми на современных рынках наркотиков, не может быть выполнена при отсутствии структурных, фармакологических и аналитических характеристик этих соединений. Для снижения значимости этого затруднения в судебно-химическом отделе проводятся работы, направленные на структурную идентификацию новых наркотиков и их метаболитов и базирующиеся на применении методов хромато-масс-спектроме-трии. Результатом этих работ является возмож-
ность дальнейшего обнаружения идентифицированных соединений при рутинном анализе. Ключевые слова: идентификация, ЖХ-МСп, ионная ловушка, времяпролетный масс-спектрометр, точные массы, новые психоактивные соединения, метаболиты, биологические объекты По сложившейся традиции, новыми психоактивными соединениями (НПС) называют синтетические продукты, появляющиеся и распространяемые на мировых рынках наркотиков по крайней мере, с середины 2000 гг. В ряде случаев эти соединения не могут считаться новыми во всех смыслах этого понятия, поскольку сообщения об их синтезе датированы серединой - концом прошлого века. Тем не менее, их активное распространение действительно представляет собой новое явление в истории человечества. Как правило, аналитические характеристики этих соединений неизвестны (или труднодоступны), а особенности биотрансформации как минимум, нуждаются в детальном исследовании. НПС, неизвестное аналитической лаборатории, не может быть обнаружено при проведении рутинных анализов.
Для проведения структурной идентификации НПС, встречающихся в практике отдела, нами применялись следующие методы:
• газовая хромато-масс-спектрометрия (включая подбор способа дериватизации для определения существования функциональных групп);
• жидкостная хромато-масс-спектрометрия с время-пролетным масс-спектрометром при определении точных масс (включая подбор хроматографических условий для уточнения особенностей структуры и вида функциональных групп);
• жидкостная хромато-масс-спектрометрия с масс-спектрометром типа «объемная ионная ловушка» для регистрации последовательных спектров и подтверждения структурных особенностей. Этот же метод использовался в дальнейшем для проведения рутинных анализов.
В период с 2015 г. и по настоящее время в биологических объектах, поступающих для исследования в отдел, были выявлены следующие НПС:
• синтетические опиоиды (ацетилфентанил, фуранил-фентанил, р-фторбутирилфентанил);
• галлюциногены фенилэтанаминового ряда (25В-ШОМе, 25С-ШОМе, 25М-ШОМе);
• фенэтиламины и катиноны (п-метиламфетамин, 4Б-РИР, МОБУР);
• синтетические каннабимиметики (АОВ-БИВШАСА, МОМВ-СИМ1СА, 5Б-МОМВ-Р1СА, ТМСР-СИМ1М).
Предположение об отравлении (одурманивании) каждым из перечисленных соединений всегда предполагало дальнейшее выявление его метаболитов, причем актуальность этих работ была особенно высокой в случае полного (синтетические каннабимиметики) или значительного (синтетические опиоиды и фенэтиламины) метаболизма исходных соединений. В подобных случаях - учитывая отсутствие (или очень малое содержание) исходного соединения в биологических объектах идентифицированные метаболиты позволяют делать уверенные заключения о структурных особенностях исходного соединения. Результатом проведения этих работ было включение характеристик выявленных аналитов в поисковые хромато-масс-спектрометрические библиотеки для дальнейшего обнаружения при проведении рутинных анализов.
ВЫВОДЫ
Появление и распространение НПС, приводящее к отравлениям и - в предельных случаях - к смерти, требует постоянной разработки диагностических мер, которые
ввиду профессиональной специфики отдела заключаются в поиске и структурной идентификации новых психоактивных соединений и их метаболитов в биологических объектах. Характеристики соединений, идентифицированных с достаточной степенью достоверности на основе хромато-масс-спектрометрических методов и обладающих приемлемыми структурными особенностями, включаются в поисковые библиотеки для дальнейшего автоматизированного обнаружения при рутинном анализе. Обобщенным результатом этих работ следует считать расширение аналитических возможностей отдела.
ОРГАНИЗАЦИОННЫЕ И МЕТОДИЧЕСКИЕ АСПЕКТЫ ПРОВЕДЕНИЯ СУДЕБНО-ХИМИЧЕСКИХ И ХИМИКО-ТОКСИКОЛОГИЧЕСКИХ ИССЛЕДОВАНИЙ ОБЪЕКТОВ БИОЛОГИЧЕСКОГО ПРОИСХОЖДЕНИЯ В СУДЕБНО-ХИМИЧЕСКОМ ОТДЕЛЕ ГБУЗ МО «БЮРО СМЭ» Н. А. Крупина
ГБУЗ МО «Бюро СМЭ», Москва Представлены возможности судебно-химической лабораторной службы ГБУЗ МО «Бюро СМЭ», организационная составляющая и аналитическая стратегия в исследовании лекарств и наркотиков, включая некоторые новые психоактивные вещества в объектах биологического происхождения. Ключевые слова: организация работы, судебно-хи-мические исследования, химико-токсикологические исследования, посмертная токсикология, методология
По данным за 2018 год более 60 % умерших в Московской области были направлены на судебно-медицинское исследование (59 712 случаев).
В 98 % случаев биологические объекты были направлены на судебно-химическое исследование, в том числе с целью исследования наркотических и лекарственных веществ - 6547 случаев. Второе место после алкоголя по результатам исследования аутопсийного биоматериала занимают лекарственные вещества, как отдельно, так и в различных комбинациях с наркотическими веществами и алкоголем. Очень широк спектр определяемых лекарственных веществ. Среди лекарственных веществ, преобладают снотворные вещества (806 положительных результатов) и производные бензодиазепина (709 положительных результатов). На третьем месте - наркотические средства (2746 случаев с положительным результатом). Среди наркотиков преобладают опиаты (883 случая с положительным результатом).
Помимо этого, в судебно-химических структурных подразделениях выполняют исследования более, чем из 100 медицинских организаций - ГБУЗ Московской области - по направлениям врачей. Так, в 2018 году были выполнены химико-токсикологические исследования более чем по 34000 случаям, из них с целью обнаружения наркотических и лекарственных веществ - 17 345 случаев. В 2018 году на втором месте после этилового спирта по результатам исследования биоматериала от живых лиц -наркотические средства (7602 обнаружения различных наркотических средств), из них подавляющее количество составляют каннабиноиды (2783 положительных случая), средства амфетаминового ряда (1971 положительный случай), затем опиаты (1552 положительных случая), затем прочие наркотики, в т.ч. новые психоактивные вещества и опиоиды (1237 случаев), затем кокаин (59 положительных случаев). А на третьем месте - лекарственные вещества, в том числе преобладают снотворные (673 случая с положительным результатом), производные бензодиазе-пина (604 случая с положительным результатом), антиде-
