CC BY
18
ность дальнейшего обнаружения идентифицированных соединений при рутинном анализе. Ключевые слова: идентификация, ЖХ-МСп, ионная ловушка, времяпролетный масс-спектрометр, точные массы, новые психоактивные соединения, метаболиты, биологические объекты По сложившейся традиции, новыми психоактивными соединениями (НПС) называют синтетические продукты, появляющиеся и распространяемые на мировых рынках наркотиков по крайней мере, с середины 2000 гг. В ряде случаев эти соединения не могут считаться новыми во всех смыслах этого понятия, поскольку сообщения об их синтезе датированы серединой - концом прошлого века. Тем не менее, их активное распространение действительно представляет собой новое явление в истории человечества. Как правило, аналитические характеристики этих соединений неизвестны (или труднодоступны), а особенности биотрансформации как минимум, нуждаются в детальном исследовании. НПС, неизвестное аналитической лаборатории, не может быть обнаружено при проведении рутинных анализов.
Для проведения структурной идентификации НПС, встречающихся в практике отдела, нами применялись следующие методы:
• газовая хромато-масс-спектрометрия (включая подбор способа дериватизации для определения существования функциональных групп);
• жидкостная хромато-масс-спектрометрия с время-пролетным масс-спектрометром при определении точных масс (включая подбор хроматографических условий для уточнения особенностей структуры и вида функциональных групп);
• жидкостная хромато-масс-спектрометрия с масс-спектрометром типа «объемная ионная ловушка» для регистрации последовательных спектров и подтверждения структурных особенностей. Этот же метод использовался в дальнейшем для проведения рутинных анализов.
В период с 2015 г. и по настоящее время в биологических объектах, поступающих для исследования в отдел, были выявлены следующие НПС:
• синтетические опиоиды (ацетилфентанил, фуранил-фентанил, р-фторбутирилфентанил);
• галлюциногены фенилэтанаминового ряда (25В-ШОМе, 25С-ШОМе, 25М-ШОМе);
• фенэтиламины и катиноны (п-метиламфетамин, 4Б-РИР, МОБУР);
• синтетические каннабимиметики (АОВ-БИВШАСА, МОМВ-СИМ1СА, 5Б-МОМВ-Р1СА, ТМСР-СИМ1М).
Предположение об отравлении (одурманивании) каждым из перечисленных соединений всегда предполагало дальнейшее выявление его метаболитов, причем актуальность этих работ была особенно высокой в случае полного (синтетические каннабимиметики) или значительного (синтетические опиоиды и фенэтиламины) метаболизма исходных соединений. В подобных случаях - учитывая отсутствие (или очень малое содержание) исходного соединения в биологических объектах идентифицированные метаболиты позволяют делать уверенные заключения о структурных особенностях исходного соединения. Результатом проведения этих работ было включение характеристик выявленных аналитов в поисковые хромато-масс-спектрометрические библиотеки для дальнейшего обнаружения при проведении рутинных анализов.
ВЫВОДЫ
Появление и распространение НПС, приводящее к отравлениям и - в предельных случаях - к смерти, требует постоянной разработки диагностических мер, которые
ввиду профессиональной специфики отдела заключаются в поиске и структурной идентификации новых психоактивных соединений и их метаболитов в биологических объектах. Характеристики соединений, идентифицированных с достаточной степенью достоверности на основе хромато-масс-спектрометрических методов и обладающих приемлемыми структурными особенностями, включаются в поисковые библиотеки для дальнейшего автоматизированного обнаружения при рутинном анализе. Обобщенным результатом этих работ следует считать расширение аналитических возможностей отдела.
ОРГАНИЗАЦИОННЫЕ И МЕТОДИЧЕСКИЕ АСПЕКТЫ ПРОВЕДЕНИЯ СУДЕБНО-ХИМИЧЕСКИХ И ХИМИКО-ТОКСИКОЛОГИЧЕСКИХ ИССЛЕДОВАНИЙ ОБЪЕКТОВ БИОЛОГИЧЕСКОГО ПРОИСХОЖДЕНИЯ В СУДЕБНО-ХИМИЧЕСКОМ ОТДЕЛЕ ГБУЗ МО «БЮРО СМЭ» Н. А. Крупина
ГБУЗ МО «Бюро СМЭ», Москва Представлены возможности судебно-химической лабораторной службы ГБУЗ МО «Бюро СМЭ», организационная составляющая и аналитическая стратегия в исследовании лекарств и наркотиков, включая некоторые новые психоактивные вещества в объектах биологического происхождения. Ключевые слова: организация работы, судебно-хи-мические исследования, химико-токсикологические исследования, посмертная токсикология, методология
По данным за 2018 год более 60 % умерших в Московской области были направлены на судебно-медицинское исследование (59 712 случаев).
В 98 % случаев биологические объекты были направлены на судебно-химическое исследование, в том числе с целью исследования наркотических и лекарственных веществ - 6547 случаев. Второе место после алкоголя по результатам исследования аутопсийного биоматериала занимают лекарственные вещества, как отдельно, так и в различных комбинациях с наркотическими веществами и алкоголем. Очень широк спектр определяемых лекарственных веществ. Среди лекарственных веществ, преобладают снотворные вещества (806 положительных результатов) и производные бензодиазепина (709 положительных результатов). На третьем месте - наркотические средства (2746 случаев с положительным результатом). Среди наркотиков преобладают опиаты (883 случая с положительным результатом).
Помимо этого, в судебно-химических структурных подразделениях выполняют исследования более, чем из 100 медицинских организаций - ГБУЗ Московской области - по направлениям врачей. Так, в 2018 году были выполнены химико-токсикологические исследования более чем по 34000 случаям, из них с целью обнаружения наркотических и лекарственных веществ - 17 345 случаев. В 2018 году на втором месте после этилового спирта по результатам исследования биоматериала от живых лиц -наркотические средства (7602 обнаружения различных наркотических средств), из них подавляющее количество составляют каннабиноиды (2783 положительных случая), средства амфетаминового ряда (1971 положительный случай), затем опиаты (1552 положительных случая), затем прочие наркотики, в т.ч. новые психоактивные вещества и опиоиды (1237 случаев), затем кокаин (59 положительных случаев). А на третьем месте - лекарственные вещества, в том числе преобладают снотворные (673 случая с положительным результатом), производные бензодиазе-пина (604 случая с положительным результатом), антиде-
прессанты (299 случаев с положительным результатом), производные фенотиазина (111 случаев с положительным результатом) и прочие лекарственные средства (5101 положительный результат).
Изучение специальной литературы, передового опыта зарубежных лабораторий и наш многолетний опыт выполнения исследований позволил сформулировать методологические подходы к стандартизации методов исследования наркотических и лекарственных веществ в объектах биологического происхождения. Понимание возможностей различных методов позволило разработать стратегию для надежного скрининга и подтверждения лекарств и наркотиков, оценить и выбрать подходящие методики судебно-химических и химико-токсикологических исследований.
Аналитическая стратегия строится с учетом поставленных целей и зависит от предоставленных объектов, информации об обстоятельствах смерти. Обычно, это использование нескольких методов с раздельным скринингом, подтверждением и количественным определением (иммунные, хроматографические с различными детекторами). В стратегию включены разработка и валидация методик для новых, впервые и редко встречающихся веществ, а также их включение в существующую аналитическую схему.
В секционных докладах за круглым столом будут охарактеризованы стандартные процедуры скрининга и подтверждения наркотических, лекарственных веществ и их метаболитов в объектах биологического происхождения, применяемые в крупнейшей судебно-химической лабораторной службе в Российской Федерации, которая ежегодно занимается не только случаями судебно-химических исследований объектов биологического происхождения по направлениям врачей - судебно-медицинских экспертов Московской области, но и выполняет химико-токсикологические исследования объектов биологического происхождения от живых лиц.
■ ИСПОЛЬЗОВАНИЕ АЛКАНОВЫХ ИНДЕКСОВ УДЕРЖИВАНИЯ ДЛЯ ОБРАБОТКИ МАСС-СПЕКТРАЛЬНЫХ ДАННЫХ ПРИ ОБНАРУЖЕНИИ КОНТРОЛИРУЕМЫХ И ЛЕКАРСТВЕННЫХ СОЕДИНЕНИЙ В БИОЛОГИЧЕСКИХ
ОБЪЕКТАХ МЕТОДОМ ГХ-МС_
А. М. Григорьев
ГБУЗ МО «Бюро СМЭ», Москва Повышение достоверности и надежности газового хромато-масс-спектрометрического анализа биологических объектов возможно только при наиболее полном учете возможностей метода. В условиях практической лаборатории это подразумевает учет хроматографического удерживания с помощью унифицированных величин - алкановых индексов, присутствующих в качестве идентификационных параметров в поисковых библиотеках. Ключевые слова: идентификация, ГХ-МС, индексы, биологические объекты, библиотеки Назначение современного судебно-химического и химико-токсикологического анализа (СХА и ХТА) биологических объектов предполагают необходимость определения многих тысяч ксенобиотиков и их производных, попадающих в организм человека и являющихся причиной расстройств здоровья и смерти. Газовая хромато-масс-спектрометрия (ГХ-МС) как метод анализа сложных смесей распространена в РФ и фактически является стандартным методом в области СХА и ХТА как ввиду простоты и относительной дешевизны, так и вследствие
наличия доступных поисковых библиотек, позволяющих обнаруживать значительное число тематических соединений в автоматизированном режиме.
Высокую достоверность методам хромато-масс-спек-трометрии придает возможность идентификации ана-литов на основе двух независимых параметров: удерживания и масс-спектра. С рядом оговорок, масс-спектр может считаться параметром, стандартизированным по причине существования исторически сложившихся схем регистрации. Однако, стандартизация удерживания затруднена как минимум, ввиду наличия разных способов измерения. Поскольку (даже при использовании неподвижных фаз воспроизводимого химического состава) существенным вкладом в хроматографическое удерживание является случайно или намеренно изменяемая геометрия хроматографических колонок и состояния газо- и тер-морегулирующей системы хроматографа, то становится очевидным, что параметр удерживания должен быть относительным.
В настоящее время распространены два способа измерения относительного удерживания: фиксируемые времена, предлагаемые фирмой Agilent Technologies и алкано-вые индексы. Полагаем, что главными преимуществами индексов, выгодно отличающими их от фиксируемых времен, следует назвать:
• значительное количество измеренных величин, накопленных хроматографистами за почти 60 лет со времени появления;
• наличие во многих библиотеках (в том числе NIST Mass Spectral Library, Mass Spectra of Designer Drug, Mass Spectral Library of Drugs, Poisons, Pesticides, Pollutants, and their Metabolites и пр.);
• возможность расчета по структурным характеристикам аналитов (NIST);
• возможность оценочных пересчетов при изменении хроматографических условий.
Определение индексов удерживания и их использование при автоматизированной идентификации анали-тов выполняется с помощью известных систем обработки газовых ион-хроматограмм (Automated Mass Spectral Deconvolution and Identification System и AIPSIN). Для получения наиболее достоверных результатов, присутствующие в библиотеках значения индексов должны быть корректированы с учетом применяемого хроматографи-ческого метода.
ВЫВОДЫ
Алкановые индексы удерживания - необходимый параметр идентификации аналитов на фоне сложной биогенной матрицы. Обладая рядом преимуществ по сравнению с другими параметрами удерживания, индексы позволяют повысить достоверность газового хро-мато-масс-спектрометрического анализа биологических объектов.
A VETERINARIAN'S SUICIDE BY INTRAVENOUS
SELF-INJECTION WITH T61-A SUBSTANCE
USED IN ANIMAL EUTHANASIA_
B. Malinescu1, M. Costescu2, D. Radu2, G. Costea3, M. Ceausu2, C. Stefanescu\ M. Dragu3
illfov Medico-Legal Service-Bucharest, Romania 2«Mina Minovici» National Institute of Legal Medicine-Bucharest, Romania 3Buzau Medico-Legal Service-Buzau, Romania Keywords: T61, euthanasia agent, hard suicide T61 is a solution used for animal euthanasia, a mixture of 3 substances: embutramide (opioid analgesic), mebezonium
