CC BY
65
лонового альдегида, диеновых конъюгатов, ослабляется система антиоксидантной защиты. Коррекция глутаргином положительно влияет на морфо-функциональное состояние гепатоцитов, улучшаются биохимические показатели крови.
Ключевые слова: гепатоцит, гистохимия, биохимия, пестицид 2,4-Д, глутаргин.
alaninaminotrans-ferase and alkaline phosphatase, malone aldehyde, dien conjugates has increased. The antioxidant system has grow weak. Glutargin has positive influences on hepatocytes, the biochemical indexes has improved.
Key words: hepatocytes, histochemistry, biochemistry, pesticide 2,4-D, glutargin.
УДК 576.31.636.3.
СТРОЕНИЕ ЛИМФАТИЧЕСКИХ УЗЛОВ У ОВЕЦ
Данная работа является фрагментом научной тематики «Разработать и внедрить в производство современные методы лечения и профилактики болезней незаразной этиологии и изучить влияние факторов внешней среды на адаптационную способность овец».
Организм животных - это целостная биологическая система, которая находится в постоянном взаимодействии с окружающей средой. Нарушения условий содержания, кормления, повышенная загрязненность, воздействие стрессов негативно сказываются на общем состоянии животных. Под действием патогенных факторов ухудшается обмен веществ, а также выведение из организма продуктов метаболизма. Все эти факторы приводят к снижению продуктивности, резистентности и могут быть причиной заболевания животных.
Современные исследования органов кроветворения и иммунной защиты у новорожденных продуктивных животных проводятся в основном на базе кафедры гистологии, цитологии и эмбриологии Национального аграрного университета (г. Киев) [1], проблемной лаборатории ветеринарной неонатологии (г. Симферополь) [2, 3, 4, 5], государственного агроэкологического университета (г.Житомир) [6], Харьковской государственной зооветеринарной академии [10] а также Луганского национального аграрного университета [7].
Возрастающее отрицательное действие антропогенных факторов, использование различных технологических приемов выращивания и содержания продуктивных животных, исключающих условия эволюционно сложившегося биоценоза, определяют получение приплода с различной степенью пренатального развития [2]. Организм новорожденных животных характеризуется структурными изменениями, определяющими характер количественных (гипотрофия) и качественных (гипопластия) процессов, что в последующем отражается на жизнеспособности в неонатальном периоде [3]. При этом в наибольшей мере происходит нарушение морфофункционального становления иммунокомпетентных структур.
В настоящее время принято выделять систему реактивности организма, в состав которой входят органы, осуществляющие восприятие всех внешних и внутренних сигналов, а также интеграцию функций органов и систем организма [8]. Эту систему представляют органы иммунной защиты, эндокринные железы, нервная система с ее периферическим сенсорным аппаратом. Они объединяются в единую нейро-эндокринно-иммунную систему, поскольку их деятельность взаимно согласована и зависима. При каждом виде воздействия выявляются характерные черты преимущественной заинтересованности тех или иных органов иммунной системы или их компонентов, в частности, компонентов лимфатических узлов, степень выраженности изменений в которых зависит от силы и специфичности действующего фактора.
Исследование лимфатических узлов у овец проводилось при инфицировании животных вирусом лейкоза крупного рогатого скота [6], а также при различной степени двигательной активности животных [9] и экспериментальной гипериммунизации [10].
До настоящего времени, в научной литературе встречаются лишь единичные сообщения о структурных изменениях тканевых компонентов органов кроветворения у молодняка продуктивных животных.
Целью работы было изучение влияния рационов с разным энергетическим уровнем на строение лимфатических узлов у тонкорунных овец.
Материал и методы исследования. Для решения поставленной цели в условиях физиологического двора Института животноводства УААН провели научно -хозяйственный опыт. Работа выполнена в рамках договора о творческом сотрудничестве. Условия кормления выдерживали в соответствии с методикой проведения опыта [11]. Для его организации в ДПДГ „Гонтаровка" ИЖ УААН Волчанского района Харьковской области отобрали 30 баранчиков породы «прекос». Общая продолжительность подготовительного периода и карантина составила 30 суток, главного - 92 суток. В подготовительный период опыта баранам скармливали рацион, принятый в хозяйстве, а после его завершения сформировали методом аналогов по возрасту и живой массе две группы по 15 голов в каждой и перевели их на опытный рацион.
Разный уровень доступной для обмена энергии в сухом веществе рационов кормления подопытных животных создавали за счет изменений части концентрированных кормов. Так, в I группе этот показатель находился на уровне 9,6 МДж ДОЕ/ кг сухого вещества (уменьшенный) (контроль), а во II группе -10,2 МДж ДОЕ/ кг сухого вещества корма (повышенный) (подопытные животные). В конце эксперимента в каждой группе были забиты по 3 животных.
Материалом гистологического исследования послужили паховые лимфатические узлы. Образцы фиксировали в 10% растворе нейтрального формалина, подвергали стандартной гистологической проводке и заливали в парафин. Парафиновые срезы толщиной 5-10 мкм окрашивали гематоксилин-эозином. Светооптическое исследование структурных компонентов лимфатических узлов проводили с помощью микроскопа «Olympus». Электронно-микроскопическое исследование лимфатических узлов проводилось в лаборатории электронной микроскопии Харьковского института радиобиологии.
Для этого кусочки паховых лимфатических узлов размером 1 мм3 погружали в глутаральдегидный фиксатор по Карновскому (Karnowsky M.) на 24 часа, затем помещали в 1% тетроксид осмия по Палладе (Palade G.) на 1 час. После дегидратации в этаноле возрастающей концентрации и абсолютном ацетоне, материал заливали смесью эпоксидных смол (эпон - аралдит). Полимеризацию проводили в течение 36 часов при 600 С. Ультратонкие срезы изготавливали на ультрамикротоме УМТП-4 Сумского ВО «Электрон» (Украина), контрастировали в растворе уранилацетата и цитрате свинца по Рейнольдсу (Reynolds E.) и просматривали в электронном микроскопе ЭМ-125.
Результаты исследований и их обсуждение. На гистологических срезах большая часть паховых лимфатических узлов у животных представлена корковым веществом, граница между корковым и мозговым веществом чёткая. Корковое вещество лимфатических узлов содержит лимфатические узелки, паренхима лимфатического узла между лимфатическими узелками составляет корковое плато и является совместно с паракортикальной зоной Т-зависимым регионом лимфатического узла. Центральная светлая часть лимфатического узелка - герминативный центр и окружающая его мантийная зона («корона») являются В-зависимыми участками лимфатического узла. Основная часть мозгового вещества образована чётко различимыми мякотными тяжами, ориентированными в направлении ворот (рис.1).
При электронно-микроскопическом исследовании коркового вещества лимфатического узла обнаружена типичная клеточная картина. Наиболее часто встречаются светлые лимфоциты. Поверхность лимфоцитов относительно гладкая и образует лишь небольшое количество коротких выростов неправильной формы. Такая форма может быть следствием их небольшой подвижности в данной зоне. В ядрах содержатся овальные и сферические ядрышки.
Глыбки хроматина довольно равномерно распределены в нуклеоплазме. Пристеночный хроматин присутствует в значительном количестве, образуя сплошной слой со стороны внутренней мембраны кариолеммы.
Рис.1. Участок пахового лимфатического узла овцы породы «прекос», 1- корковое вещество, 2 - паракортикальная зона, 3 - мозговое вещество.
Рис.2. Участок коркового вещества лимфатического узла контрольных животных. 1- ядро лимфоцита, 2- цитоплазма лимфоцита. Ув. х8000.
Рис.3. Участок коркового вещества лимфатического узла контрольных животных. 1- ядро тканевого базофила, 2-цитоплазма тканевого базофила, 3- гранулы в цитоплазме тканевого базофила, 4- стенка капилляра, 5- . Ув. х8000.
Рис.4. Корковое вещество лимфатического узла подопытных животных.1 - ядро лимфоцита, 2- цитоплазма лимфоцита, 3 - множественные митохондрии в цитоплазме лимфоцита, 4- митоз лимфоцита. Ув. х8000.
Рис.5. Участок коркового вещества лимфа-тического узла подопытных животных. 1- нейтро-фил, 2- светлый лимфоцит, 3- тёмный лимфоцит, 4- недифференцированная клетка. Ув. х8000.
Рис.6. Корковое вещество лимфатического узла подопытных животных. 1- ядро лимфоцита, 2-цитоплазма, 3 - ядро, характерное для начала развития апоптотического процесса. Ув. х8000.
В цитоплазме лимфоцитов в ряде случаев видны клеточный центр и комплекс Гольджи, гранулярная эндоплазматическая сеть, как правило, развита слабо, митохондрий мало (рис.2). Среди типичных лимфоцитов встречается незначительное количество тканевых базофилов. Кроме того, отмечается наличие кровеносных сосудов, заполненных преимущественно эритроцитами (рис.3).
Исследование лимфатических узлов после применения высокоэнергоёмких видов кормов показало, что в лимфоцитах коркового вещества отмечается существенное увеличение количества митохондрий с разрастанием эндоплазматической сети. Митохондрии чаще всего имеют округлую или овальную форму и хорошо сохранившиеся кристы. Увеличение количества митохондрий, по-видимому, связано с активизацией энергетических процессов в клетке, возможно необходимых для обеспечения повышенного синтеза протеинов, а также ускорения метаболических процессов. Ядра многих срезов клеток отличаются неровными контурами, в части из них обнаруживаются ядрышки. Все указанные изменения со стороны органелл свидетельствуют о повышенном клеточном метаболизме. Применение высокоэнергоёмких кормов так же сопровождается увеличением количества пролиферирующих клеток, делящихся способом митоза, характерной особенностью которых является наличие расширенных канальцев эндоплазматической сети вблизи плазмолеммы (рис.4).
В лимфатических узлах подопытных животных чаще, чем в контроле, встречаются тёмные лимфоциты (рис.5). В целом, клеточная картина отличается значительным полиморфизмом: встречаются нейтрофилы, эозинофилы, тканевые базофилы, увеличено количество макрофагов, а также плазмоцитов. Увеличение числа плазматических клеток в частях узла, примыкающих к его синусам, которое мы наблюдали при изучении полутонких срезов органа, свидетельствует о нормальной реакции лимфоидной ткани на раздражители. Следовательно, полиморфизм клеточных популяций может быть залогом эффективного иммунного ответа.
Апоптоз для лимфатических узлов является обычным явлением, однако выявить и зарегистрировать его удается только при определенных условиях. В частности, использование условий поставленного эксперимента способствует увеличению апоптоза в лимфоцитах лимфатического узла баранов породы прекос (рис.6).
1. Лимфатические узлы овец породы прекос отличаются высокой чувствительностью к воздействию внешних факторов на организм.
2. Применение в рационе сухих кормов различной энергетической ёмкости приводит к изменениям структуры паховых лимфатических узлов у баранов на ультрамикроскопическом уровне.
Перспективы дальнейших исследований в даном направлении. В дальнейших публикациях планируется осветить особенности гистологического строения паховых лимфатических узлов баранов разных пород.
1. Хомич В.Т., Мельник В.В. 1^кроструктура грудо-шийних лiмфатичних вузлiв, кл^инний склад 1х паренхiми у свшських качок//Укр. морфолопчний альманах. - 2008. - Т.6, №1. - С.209.
2. Криштофорова Б.В., Максаков В.Я. Проблеми продуктивного тваринництва в умовах наростаючо'Г дм антропогенних факторiв // Вюник аграрной науки, 1998. № 6.-С.31-34.
3. Криштофорова Б.В. Смоляк В.В. Особенности тканевых взаимоотношений в некоторых иммунокомпетентных органах неонатальных телят // Науковий вюник НАУ.- 1999.-№16.-С.113-117.
4. Криштофорова Б.В., Гаврилин П.Н. Структурно-функциональные взаимоотношения тканевых компонентов органов кроветворения у телят молочного периода.- Межвщомчий тематичний науковий збiрник.- №78 (II), Харкив.-2000.-С.104-110.
5. Криштофорова Б.В., Лемещенко В.В., Грабчак Ж.Г. Структурно-функциональные особенности органов кроветворения и иммунной защиты у зрелорождающих новорожденных млекопитающих и птиц // Таврический медико-биологический вестник.-2002, Том 5.-С.109-110.
6. Горальський Л.П. Морфофункцюнальы змши в iмунних органах овець, Ыфкованих вiрусом лейкозу велико'' рогато'' худоби //Науковий вюник НАУ.-№16.-1999.-С.42-45.
7. Кацы Г.Д., Коюда Л.И. Методы оценки защитных систем организма млекопитающих.- Луганск.- 2003.-95с.
8. Данилов Р.К., Клишов А.А., Боровая Т.Г. Иммунный комплекс организма //Гистология.- Санкт-Петербург.- 2003.-С. 218-229.
9. Фомина Н.М. Возрастные и адаптивные особенности органов лимфоидной системы телок в условиях различной степени двигательной активности //Морфофункциональные основы формирования в онтогенезе адаптивных возможностей организма человека и животных.- Москва.-1991.- С. 89-95.
10. Фоменко Г.Н., Горбатенко В.П. Морфофункциональная характеристика лимфатических узлов овец при экспериментальной гипериммунизации // Науковий вюник НАУ.-№16.-1999.-С.180-183.
11. Корх 1.В. Продуктивнють баранов харшського внутршньо породного типу овець породи прекос за рiзного рiвня годiвлi // Збiрник наукових праць ЛНАУ.- 2008.-№86.-С.343-347.
БУДОВА Л1МФАТИЧНИХ ВУЗЛ1В У ОВЕЦЬ Ладиш 1.О.
В po6oTi наведено результати електронно-MiKpocKoni4Horo дослiдження пахових лiмфа-тичних вузлiв баранiв породи прекос. Вста-новлено, що використання у рацюш тварин кормiв з рiзною енергоeмнiстю вiдображаeться на клiтинному складi дослiдженого органа.
Кпючовi слова: лiмфатичнi вузли, рацiон, електронна мiкроскопiя.
THE STRUCTURE OF SHEEP's LYMPH NODES Ladysh I.O.
The result of electron microscopic researches of groin lymphatic nodes in the prekos breed rams are presented in the article. It is established that using feed with different energy value in the seeding nation of animals effects on cell composition of studied organ.
Key woods: lymphatic nodes, ration, electron microscopy.
УДК: 611.821-018:615.9:546.49:612.084:615.246
МОРФОЛОПЧН! ЗМ1НИ Л1МФАТИЧНОГО ВУЗЛА ЩУР1В ЗА УМОВ М1КРОМЕРКУР1АЛ1ЗМУ ТА ВИКОРИСТАННЯ АНТИДОТНО1 I МЕТАБОЛ1ЧНО1 ТЕРАПП
Проблема забруднення навколишнього середовища токсичними речовинами е одн1ею з актуальних у сучаснм медицин!. Ртуть, нав1ть у невеликих дозах (м1кромеркур1ал1зм), е небезпечним х1м1чним фактором для ос1б, експонованих на виробництвах, I для населення, що проживае поблизу таких пщприемств або у великих промислових мютах [6, 8, 9]. За даними багатьох учених сол1 важких метал1в, особливо ртут1, пригычують 1мунну систему, що проявляеться в зменшенн к1лькост1 1мунокомпетентних кл1тин, поряд з1 значним зниженням Тх функц1ональноТ активност1 [1, 7].
Таким чином, дослщження, спрямован1 на пщвищення ефективност1 проф1лактики та л1кування Ытоксикацп, спричиненоТ малими дозами сполук ртут1, е актуальними [4, 5].
Вщомо, що органи 1мунного захисту, як1 становлять одну з регуляторних систем оргаызму, в1д1грають важливу роль в пато- I саногенез1 при р1зних патолог1чних процесах. Вивчено морфолопчний субстрат реактивних зм1н тимусу та селез1нки за умов д1Т малих доз ртут1 та застосування антидотних I метабол1чних препарат1в [2, 3]. М1ж тим, дан1 про зм1ни в л1мфатичних вузлах за умов м1кромеркур1ал1зму в л1тератур1 в1дсутн1.
Метою роботи було встановлення зм1н у скпад1 л1мфоТ'дноТ популяци паренх1ми л1мфатичного вузла п1д впливом малих доз сполук ртул в хрон1чному експеримент1 та п1д впливом комб1нац1й препарат1в «Унтол» I «Мтдронат» та «Тютриазол1н» I «Мтдронат».
Матерiал i методи дослiдження. Експериментальн1 досл1дження проведен! на 70 бтих щурах л1н1Т Вютар масою 150-200 г, що були розподтеы на 7 сер!й. У першм серп показники, що дослщжувались, вивчали на ¡нтактних тваринах (контрольна сер1я). У друг1й сер1Т - при введены хлориду ртут1 в доз1 1/10о ЛД50 внутр1шньочеревним шляхом у к1лькост1 10 введень протягом 2 тижн1в (короткотривала 1нтоксикац1я). У трет1й сер1Т - при введены хлориду ртут1 в доз1 1/100 ЛД50 внутр1шньочеревним шляхом у к1лькост1 50 введень протягом 10 тижн1в (довготривала 1нтоксикац1я). У четверт1й серп здмснювали короткотривалу 1нтоксикац1ю з наступним застосуванням препарат1в «Ун1т1ол» I
