CC BY
14
Summary
EFFECTS OF REPLACING HORMONOTHERAPY ON THE DEGREE OF MYOCARDIAL DAMAGE CAUSED BY EPINEPHRINE IN
FEMALE RATS
Khara M. R., Pelykh V.Ye.
Key words: myocardium, necrose, gonadectomy, replacing hormonotherapy.
The research is aimed to study the effect of replacing hormonotherapy on the degree of the metabolic and structural changes in the ventricular myocardium under designed necrotic process in female rats with removed gonads. Necrotic damages were stimulated by intramuscular injection of epinephrine, 1 mg/kg body wt / In the ventricular myocardium we studied the lipid peroxidation activity by the contents of malonic dialde-hyde, diene and trienoic conjugates. It has been found out the development of necrotic process in the myocardium of gonadectomized rats is accompanied with more intensive accumulation of lipid peroxidation products and more numerous percentage of necrotized cardiomyocytes in comparison with the animals having gonads. Combined replacing hormonotherapy with hexestrol and progesterone provides more significant cardioprotective effect in case of hyperepinephrinemia than monotherapy by hexestrol only that is proved by the minimal differences in the absolute values of lipid peroxidation indices and the percentage of necrotic cardiomyocytes. It promotes the same necrotic process in the heart which is recorded in animals with preserved gonads.
УДК 612.015.11-02:616.314.1-018.73]-055.8-0.92.9
СТАТЕВ1 В1ДМ1НН0СТ1 СТАНУ ПЕРЕКИСН0Г0 0КИСНЕННЯ Л1П1Д1В У СЛИ30В1Й ПАР0Д0НТА Г0НАДЕКТ0М0ВАНИХ ЩУР1В
Хара М.Р., Росоловська С. О.
Терноптьський державний медичний университет ¡меж 1.Я. Горбачевського
В експериментах на щурах було вивчено вплив гонадектомп на активтстъ перекисного окис-нення л{тд{в (ПОЛ) залежно вг'д статл. Стан ПОЛ в кров{ та слизовш пародонта оцтювали за вмжтом ДК, ТК та МДА, ефективтстъ антиоксидантного захисту ~ за активтстю катала-зи, СОД (кров, слизова пародонта), вмястом церулоплазмту (кров). Тварин спостеркали через 8 тижтв теля двоб{чног гонадектомп. Ветановили, що гонадектом{я викликае бшъш ттенсивне в самщв накопичення в кров{ продукт{в ПОЛ, незважаючи на бшъшу активтстъ у них систем антиоксидантного захисту. За таких умов в слизовш пародонта в{дбуваетъся зменшення концентрации малонового диальдег{ду та зменшення активност{ супероксидисмутази, що бшъшою м{рою характерне для гонадектомованих самок. Це св{дчитъ про р{зну роль андрогетв та ест-рогетв у регуляци систем ПОЛ та антиоксидантного захисту слизовог пародонта.
Ключов1 слова: гонадектомт, стать, слизова пародонта, перекисне Вступ
За даними ВООЗ поширенють захворювань пародонту е високою серед Bcix вкових труп населения, проте основний прирют показника спо-стер1гаеться у 35-44 роки. Серед загальних фактор1в, що створюють передумову для цього, е порушення гормонально'!' функци гонад [1, 2, 3]. Дослщженнями останнього десятир1ччя пщ-тверджена висока розповсюдженють генералн зованих захворювань пародонта та Тх зв'язок ¡з супутньою патолопею. В юпнщ1 та експеримент1 nacTime за все анал1зу пщдаеться проблема гормонального дисбалансу у жшок. Це дозволило встановити, що захворювання на генерал1зова-ний пародонтит виникають пщ час гормонально'!' перебудови pi3Horo походження: статевого до-зр1вання [3], передменопаузального та менопау-зального nepiofliB [4], овар1ектомП' [5]. Проте Bi-домо, що андрогени також суттево впливають на кюткову тканину, сприяють утворенню кюток за рахунок пщвищення синтезу ¡нсулшопод1бного фактора росту I i збтьшення ктькосп рецепто-piB до ¡нсулшопод1бного фактора росту II на
окиснення лодш
остебластах [6]. Вивчення впливу дефщиту анд-рогежв на стан зубощелепноТ системи також мае велике значения в д1агностиц1 захворювань пародонта. Проте сьогоды немае переконливих даних про мехажзм впливу недостатносп андро-гежв на стан слизовоТ пародонта. А дослщжен-ня, яю б вщображали гендерж вщмшносп у стаж тканин пародонта за умов гормонального дисбалансу в доступних джерелах малочисельж \ не охоплюють весь спектр знань з даноТ проблеми.
Мета досл1джснни
Вивчення впливу гонадектомп на активнють процеав лтопероксидаци в слизовш пародонта щур1в р1зно'|' статк
Матср1ал 1 методи досладження
Дослщи провели на 17 самцях 0) \ 16 самках ($) статевозртих нелшшних бтих щур1в, яких утримували на звичайному рацюж в1вар1ю. Уах тварин подшили на 4 групи: 1 групу складали контрольж (51, 2-гу - контрольж 3-тю - гонаде-ктомоваж (51, 4-ту - гонадектомован1 Двоб1чну
* (Публ'жащя в!до6ражае результати виконання фрагменту планово)' комплексноГ науково-docnidHoi роботи «Медико-¡нформацшне досл!дження експериментальноГ патологи eHympiuiHix органа при pi3Hux функцюнальних умовах та i'i корекцп», шифр держреестрацп 0107U114462)
гонадектомш (ГЕ) проводили з використанням тюпенталового наркозу. Тварин спостер1гали через 8 тижшв гпсля оперативного втручання. У кров1 та слизовш вивчали активнють перекисно-го окиснення лтщ1в (ПОЛ) за вмютом малонового д1альдепду (МДА), д1енових (ДК) та тр1енових (ТК) кон'югат1в [7], активнють АОС - за активню-тю каталази (КАТ) [8], супероксиддисмутази (СОД) [9] та вмютом церулоплазмшу (ЦП) [10]. Уа експерименти проводили з дотриманням правил бюетики.
Показники перекисного окиснення л/мд/в та антиоксидан
Результати та 1х обговорення Анал1з показниш, яю вщображали активнють ПОЛ та АОС в кров1 (табл. 1) та слизовш паро-донта (табл. 2) показали, що в трупах контролю достов1рна р1зниця м1ж 3 та $ була лише за вмн стом ДК та активнютю КАТ. Так в кров1 $ вмют ДК був вищий на 69,8 %, а в слизовш пародонта - на 31,8 %, активнють КАТ в слизовш пародонта була меншою, шжу <3, У 5,6 рази.
Таблиця 1.
о захисту кров/' гонадектомованих щур1в р/зно)' стат! (М±т)
Групи тварин Контрольш Гонадектомоваш
Показники Стать в- п=8; п=7 в- п=9; п=9
ДК в' 0,53±0,03 5,63±0,43 *
(ум. од ./мл) ¥ 0,90±0,03 # 4,16±0,35 *
ТК в 0,91 ±0,72 4,56±0,18 *
(ум. од ./мл) ¥ 1,05±0,07 4,29±0,31 *
МДА в 3,93±0,22 10,93±0,38 *
(мкмоль/л) ¥ 4,62± 0,25 10,18±0,39 *
КАТ в 0,165±0,010 0,306±0,009 *
(мкат/л) ¥ 0,170±0,010 0,060±0,001 * #
СОД в 0,192±0,017 0,042±0,002 *
(%) ¥ 0,232±0,018 0,179±0,009*#
ЦП в 17,2±1,2 14,5±1,0
мг/л ¥ 20,0± 2,3 10,9±0,2 *#
Прим1тка. * - достов1рна в1дммнють показнишв в межах одшеТ стат1 (р<0,05); # - достов1рна в1дммн1сть показнишв у тварин р1зно)'стат1 (р<0,05)
Таблиця 2.
Показники перекисного окиснення л/мд/в та антиоксидантного захисту в слизовш пародонта гонадектомованих щур1в р!з-
но'1 стат/' (М±т)
Групи тварин Контрольн1 Гонадектомоваш
Показники Стать в- п=8; п=7 в- п=9; 9- п=9
ДК в' 0,22±0,01 0,17±0,01 *
(ум. од ./мл) ¥ 0,29±0,01 # 0,37±0,01 *#
ТК в 0,43±0,02 0,16±0,01 *
(ум. од ./мл) ¥ 0,41 ±0,02 0,38±0,01 #
МДА в 0,968±0,004 0,112±0,005 *
(мкмоль/л) ¥ 0,960±0,026 0,093±0,004 * #
КАТ в 0,952±0,010 1,074±0,008 *
(мкат/л) ¥ 0,170±0,010 # 0,060±0,004 * #
СОД в 1,442±0,109 0,177±0,001 *
(%) ¥ 1,413±0,142 0,117±0,013 * #
Прим1тка. * - достов1рна в1дммнють показнишв в межах одшеТ рин р1зно)'стат1 (р<0,05)
Суттеве зниження вмюту статевих гормошв, спричинене гонадектом1ею, викликало достов1рш змши уах дослщжуваних параметр1в. У кров1 вщбулося накопичення продукте ПОЛ. Зокрема, концентрац1я ДК в $ зросла в 10,6 рази, у $ - в 4,6 рази, концентрац1я ТК в 3 збтьшилася в 5 раз1в, а в $ - в 4,1 рази, концентрац1я МДА у $ зросла в 2,8 рази, а в $ - в 2,2 рази. Незважаю-чи на те, що законом1рнють встановлених змш не залежала вщ стат1, и ¡нтенсивнють була бн льшою в гонадектомованих Реакц1я АОС на вщсутнють гонад виявила чижу залежнють вщ стат1 тварин. Так у кров1 3 активнють КАТ збтьшилася на 85,5 %, СОД зменшилася в 4,6 рази, вмют ЦП достов1рно не змшився. В кров1 $ активнють КАТ зменшилася в 2,8 рази, СОД - на 29,6 %, вмют ЦП - на 83,5 %, що вщображало суттеву депреаю АОС, враховуючи функцюна-льну роль КАТ та ЦП в кровк
стат/ (р<0,05); # - достов1рна в1дммн1сть показнишв у тва-
Пор1вняльний анал1з наведених показниш <3 \ $ показав, що активнють КАТ та вмют ЦП у $ був менший вщповщно в 5,1 рази та на 33,0 %, а активнють СОД - в 4,3 рази бтьшою. Встанов-лена вщмшнють показуе р1зш мехашзми адапта-цм метабол1чних систем у <3 та $ щур1в пюля ви-далення гонад. Очевидно, ¡нтенсившше нагро-мадження продукте ПОЛ в кров1 <3 викликае на-пругу системи ферментативноТ та не ферментативной' ланок АОС за умов р1зкого зниження р1в-ня андрогешв. Зменшення ж активносп АОС кров1 $ е свщченням и виснаження, ймов1рно, через дефщит антиоксидантних властивостей естрогешв.
Динамка показниш у слизовш пародонта та-кож показала ч1тку залежнють вщ стат1 тварин. Зокрема, зниження р1вня статевих гормоыв спричинило у (51 зменшення вмюту ДК на 29,4 %, ТК - в 2,7 рази, МДА - в 8,6 рази. У слизовш па-
родонта $ спостер1гали збтьшення вмюту ДК на 27,6 %, вщсутн1сть динамки вмюту ТК та змен-шення вмюту МДА в 10,3 рази. За таких умов реакц1я АОС проявилася в 3 збтьшенням акти-вност1 КАТ на 12,8 % i депреаею активное^ СОД у 8,1 рази. У $ активнють КАТ зменшилася в 2,8 рази, а СОД - в 12,1 рази. В умовах значного дефщиту статевих гормошв концентрац1я ДК та ТК в слизовш $ була бтьшою, ыж у S, в 2,2 та 2,4 рази вщповщно, а МДА - меншою на 20,4 %. 1 Активн1сть обох ферметчв АОС виявилася та-кож нижчою у $ LqypiB, зокрема КАТ - в 17,9 рази, а СОД - в 1,5 рази. 2.
Як видно з наведених даних, найбтьш чутли-вим до нестач1 статевих гормоыв як естрогешв, так i андрогешв, виявився метабол1зм, 3 пов'язаний з утворенням МДА. Це може усклад-нити кшцевий метабол1зм полшенасичених жир-них кислот та порушити утворення важливих 4 бюрегулятор1в кровооб1гу та репараци тканин, якими е ейкозанощи [11]. Аналопчна законом1р-н1сть стосуеться СОД. Значний дефщит актив- 5. ност1 даного ферменту може бути наслщком пригшчення КАТ, що особливо було вираженим
У?- 6-
Пщсумовуючи отримаш результати, можна стверджувати про наявнють ч1тких статевих вщ-мшностей в адаптацП' оргашзму та, зокрема, 7 слизовоТ пародонта до вщсутносп гонад за уча-CTi систем ПОЛ та антиоксидантного захисту, що 8 свщчить про р1зну роль андрогешв та естрогешв у регуляци даних процеав. ^
Висновок
Дефщит статевих гормошв, викликаний гона- ю. дектом1ею, мае наслщком нагромадження в кро-Bi продукте перекисного окиснення лтщ1в, що и. cyrreBiLue виявляеться в самц1в, незважаючи на бтьшу активн1сть у них систем антиоксидантного захисту. Гонадектом1я спричинюе зменшення
Реферат
ПОЛОВЫЕ ОТЛИЧИЯ СОСТОЯНИЯ ПЕРЕКИСНОГО ОКИСЛЕНИЯ ЛИПИДОВ В СЛИЗИСТОЙ ПАРОДОНТА ГОНАДЭКТОМИРОВАННЫХ КРЫС Хара М.Р., Росоловская C.A.
Ключевые слова: гонаэектомия, пол, слизистая пародонта, перекисное окисление липидов.
В экспериментах на крысах было изучено влияние гонадэктомии на активность перекисного окисления липидов (ПОЛ) в зависимости от пола. Состояние ПОЛ в крови и слизистой пародонта оценивали по содержанию ДК, ТК и МДА, эфективность антиоксидантной защиты - по активности каталазы, СОД (кровь, слизистая пародонта), содержанием церулоплазмина (кровь). Животных наблюдали через 8 недель после двухсторонней гонадэктомии. Установили, что гонадэктомия вызывает более интенсивное у самцов накопление в крови продуктов ПОЛ, несмотря на большую активность у них систем антиоксидантной защиты. При таких условиях в слизистой пародонта происходит уменьшение концентрации малонового диальдегида и уменьшение активности супероксидисмутазы, что в большей мере характерно для гонадэктомированых самок. Это свидетельствует о разной роли андрогенов и эстрогенов в регуляции систем ПОЛ и антиоксидантной защиты слизистой пародонта.
Summary
SEX DIFFERENCES IN LIPID PEROXIDATION IN THE PERIODONTIUM MUCOUS MEMBRANE OF GONADECTOMIZED RATS Khara M.R, Rosolovska S.O.
Keywords: gonadectomy, sex, mucous membrane, periodontium, lipid peroxidation.
The research was aimed to study the effect of gonadectomy on the activity of lipid peroxidation (LPO) in rates depending on their sex. LPO condition in the blood and periodontium mucous membrane was esti-
B слизовш пародонта концентрацм малонового диальдепду та депреаю активносп суперокси-дисмутази, що бтьшою Mipoio характерне для гонадектомованих самок. Це свщчить про pi3Hy роль андрогешв та естрогешв у регуляци систем ПОЛ та антиоксидантного захисту слизовоТ пародонта.
Л1тература
1. Бтокпицька Г.Ф. KnÍHÍK0-6Í0XÍMÍ4H¡ особливост1 захворювань тканин пародонту в жшок, KOTpi перебувають у менопауз! p¡3HOÍ етюлоги / Г.Ф.Бтокпицька, Г.В.Погребняк // Матер1али наук,-практ. конф. "Сучасш проблеми терапевтичноТ стоматолош". -К., 2004. -С.43-44.
2. Хоменко Л. О. Взаемозв'язок гормональних дисфункцш та захворювань тканин пародонта у д1вчаток / Л. О. Хоменко, О. I. Остапко // Новини стоматологи. - 1998. - № 4 (17). - С.41-45.
3. Поворознюк В. В. Вплив статевого та ф1зичного розвитку на структурно-функцюнальний стан kíctkoboí тканини i тканин пародонта у д1вчаток пре- та пубертатного B¡Ky / В. В. Поворознюк, Т. В. Орлик, Е. Д. Клочко // Проблеми остеологи. - 1999. - Т.2, №2. - С.42-47.
4. Богдан A.C. Структурно-функцшальний стан пародонта та опорного скелета у жшок у пре- та пост менопауз! / Богдан A.C. // Матер1али I (VIII), з'Тзду Асоц1ацп стоматолопв Укра'ши (30 листопада - 2 грудня 1999 р.).-К., 1999.-С.173-174.
5. Македон А.Б. Морфологические изменения слизистой оболочки полости рта крыс, вызванные овариоэктомией и коррекция ЕКСО / А.Б. Македон, И.Н. Моисеев, В.Я. Скиба, B.H. Почтарь // BÍCHHK стоматологи. - 2003. - № 4. - С.5-9.
6. Queiroz-Junior С.М. Role of systemic and local administration of selective inhibitors of cyclo-oxygenase 1 and 2 in an experimental model of periodontal disease in rats / C.M.Queiroz-Junior, C.M.Pacheco, K.L.Maltos [et al.] // J. Periodontal Res. - 2009. - № 44 (2). - P.153-160.
7. Методы биохимических исследований / под ред. М.И Прохоровой. - Л. : Изд-во ЛГУ, 1982. - 272 с.
8. Королюк М.А. Метод определения активности каталазы / М.А. Королюк, Л.И. Иванова, И.Г. Майорова [и др.] // Лаб. дело. -1988.-№1.-С.16-19.
9. Чевари С. Роль супероксиддисмутазы в окислительных проце-сах клетки и метод определения ее в биологическом материале / С.Чевари, И.Чаба, И.Сокей // Лабораторое дело. - 1985. - № 11.- С.678-681.
Колб В.Г. Вивчення активност1 церулоплазмшу в KpoBi. - Клиническая биохимия / В.Г.Колб, В.С.Камишников // Минск: Беларусь, 1976.-С.219-220.
Кулинский В.И. Активные формы кислорода и оксидативная модификация макромолекул: польза, вред и защита / В.И. Кулинский //1999. - http://www.pereplet.ru/obrazovanie/stsoros/696.html
mated by DC, TC and MDA content, the efficiency of the antioxidant protection by the catalase activity, SOD (blood, periodontium mucous membrane), by ceruloplasmin content in blood. Animals were observed in 8 weeks after the bilateral gonadectomy. It has been found out that the gonadectomy caused more intensive accumulation of LPO products in the blood in males, despite of greater activity of their antioxidant protective systems. Under such conditions there was diminishing of malic dialdehyde concentration and the decrease in the activity of superoxide dismutase in periodontium mucous membrane, that to a greater extent in is typical for gonadectomized female rats. It proves the different role of androgens and estrogens in the regulation of LPO systems and antioxidant protection in the periodontium of mucous membrane.
УДК 616.833-0.89.85-003.93:|615.31:577.115.3
ЛИП0ФЛАВ0Н ПОВЫШАЕТ РЕГЕНЕРАЦИЮ НЕРВНЫХ ВОЛОКОН В УСЛОВИЯХ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЙ МОДЕЛИ ТРАВМЫ ПЕРИФЕРИЧЕСКОГО НЕРВА
Храпай Е.В.
Национальный медицинский университет им. А.А.Богомольца, Киев.
При травмах периферических нервов принято использование микрохирургической техники, что способствует процессам регенерации нервных волокон, но при тяжелых травмах не всегда удается достичь желаемого результата. Фармакологическая коррекция регенерационных процессов в травмированных нервах может способствовать восстановлению регенерирующих волокон и улучшить жизнь больных данной категории. Исходя из этого, целью работы явилось изучение характера процессов де- и регенерации в травматически поврежденном нерве у крыс, а также влияние лекарственного средства Липофлавона на процессы восстановления нервных волокон. Липофлавон - препарат, который представлен липосомальной формой кверцетина. Мы использовали Липофлавон как более эффективную форму доставки лекарственного средства к терапевтическим мишеням при травматическом повреждении нервных волокон. Вопросы применения кверцетина в экспериментальной патологии нервной системы ранее не рассматривались. Разработанная в Украине липосомальная форма кверцетина, используемая при многих заболеваниях и экспериментальных патологических состояниях, оказалась очень эффективной. Исследования проведены на белых крысах самках весом 180-220 г. Липофлавон ("Биолек", Харьков, Украина) вводили параневрально в дозе 0.1 мг/кг в течение первых десяти дней с момента воспроизведения полной невротомии. Спустя 12 недель у животных произвели забор материала для дальнейшего гистологического и ультраструктурного исследования. Срезы изготавливали на крио-томе и импрегнировали в азотнокислом серебре. Для изучения фармакологического эффекта исследуемых препаратов использовали морфометрические показатели: плотность нервных волокон и угол их отклонения от оси травмированного нерва. Исследования показали, что Липофлавон в дозе 0.1 мг/кт имеет выраженный лечебный эффект при травмировании периферического нерва в экспериментальных условиях. Увеличивается количество нервных волокон и активность регенерации. Позитивный эффект Липофлавона можно связывать с тем, что липосомальная форма, как продукт нанотехнологических разработок, имеет высокую тропность к клеточным мембранам. Такая форма препарата ускоряет прорастание и миелинизацию нервных волокон. Это связано с антиоксидантными свойствами, которые демонстрирует кверцетин. Даже при коротких сроках введения Липофлавон дает выраженный эффект.
Ключевые слова: регенерация, периферический нерв, биофлавоноид, липосома, антиоксидант, травма.
Вступление
Известно, что использование микрохирургической техники при травмах периферических нервов способствует процессам регенерации нервных волокон, но при тяжелых травмах не всегда удается достичь желаемого результата. Поэтому фармакологическая коррекция регенерационных процессов в травмированных нервах может способствовать восстановлению регенерирующих волокон и улучшить жизнь больных данной категории. Исходя из этого целью работы явилось изучение характера процессов регенерации в травматически поврежденном нерве крыс, а также влияние лекарственного средства липофлавона на процессы восстановления нер-
вных волокон [1-3]. Липофлавон - препарат, который представлен липосомальной формой кверцетина. Флавоноиды защищают нервные клетки от окислительного стресса, активируют эндогенные антиоксидантные системы защиты, снижают розвитие воспалительного процесса и повышают рост нейритов [4,5]. Разработанная в Украине липосомальная форма кверцетина, используемая при многих заболеваниях и экспериментальных патологических состояниях, оказалась очень эффективной.
Мы использовали липофлавон как более эффективную форму доставки лекарственного средства к терапевтическим мишеням при травматическом повреждении нервных волокон.
