CC BY
17
УДК 616.731-07.23.008+612.045.11
Мукозопротекторна дiя пасти чорнищ при алоксановому дiабетi у щурiв
Ступак О. П.t, Левицький А. П.*, Скрипников П. МД Шдзельський М. Я."^ Дудченко М. О^
^Вищий державний навчальний заклад Украгни «Украгнсъка медична стоматологгчна академ1я» * Державна установа «1нститут стоматологи та щелепно-лицевог х1рургИ» Нацюналъног академи медичних наук Украгни
У слизовш оболонц язика щурiв на 7-й та 14-й дн пюля введення алоксану збтьшуеться вмют малонового дiальде-гiду, активнiсть еластази та знижуеться рiвень антиоксидантно-прооксидантного iндексу, що свщчить про розвиток запально-дистрофiчних процесiв у слизовш оболонцi порожнини рота. Встановлено також ютотне збiльшення ак-тивност уреази та значне зниження активност лiзоциму, що зумовлюе збiльшення ступеня дисбюзу. Паста чорницi, яка вводиться з кормом, у значнш мiрi усувае запальнi та дисбiотичнi явища у слизовш оболонцi язика у щурiв. Ключовi слова: алоксановий дiабет, дисбiоз, запалення, слизова оболонка язика, чорниця.
При цукровому дiабетi (ЦД) спостерпаеться розвиток запально-дистрофiчних процесiв у слизовш оболонцi порожнини рота (СОПР) [1] - [4], як обумовленi дисбiотичними явища-ми, що виникають як при експериментальному дисбiозi [5], [6], так i у хворих на цукровий дiа-бет 1 та 2 типу [7] - [9].
Вщомо, що ягоди чорнищ мютять значну кiлькiсть бiологiчно активних речовин [10]:
- хлорогенова кислота;
- антощани;
- кверцетин;
- вiтамiни Е та С;
- каротинощи та ш.
Встановлена лiкувально-профiлактична дiя чорнищ при експериментальному гепатит та дисбiозi [11].
Мета дослщження - вивчення захисно! дп пасти чорницi на стан слизово! оболонки язика (мукозопротекторна дiя) щурiв, у яких вщтво-рювали алоксановий дiабет.
Матер1али 1 методи дослщження. Експери-менти було проведено на 35 щурах лшп Вютар [самцi, 13 мiсяцiв, жива маса (260 ± 10) г], яких було подшено у 5 груп:
- 1 група - норма (штактш);
- 2 група - алоксановий дiабет, 7 дшв;
- 3 група - алоксановий дiабет, 7 дшв + паста чорнищ у дозi 8 г/кг щоденно;
- 4 група - алоксановий дiабет, 14-дшв;
- 5 група - алоксановий дiабет, 14 дшв + паста чорнищ у дозi 8 г/кг щоденно.
Паста чорнищ виробництва НВП «1нститут Текмаш», Херсон; сухо! речовини - 14,13 %.
Алокановий дiабет у щурiв вщтворювали шляхом одноразового внутршньочеревного введення алоксану в дозi 100 мг/кг маси тiла щура.
Мукозопротекторну дiю пасти чорницi (Уас-
1-4 2017 Дерматовенерология. Косметология. Сексопатология
сттт тугШш Ь.) оцiнювали за характером змiн рiвня бiохiмiчних маркерiв запалення [12], антиоксидантного захисту i дисбiозу у слизовш оболонщ язика щурiв.
В якост маркерiв запалення слугували кон-центращя малонового дiальдегiду (МДА) [12] та актившсть еластази [12], стан антиоксидантного захисту ощнювали за актившстю каталази [12] та рiвнем антиоксидантно-прооксидантного вдексу (АП1) [12].
Активнiсть уреази слугувала маркером м> кробного обшменшня щурiв, активнiсть лiзоци-му - показником стану неспецифiчного iмунi-тету; стушнь дисбiозу розраховували фермента-тивним методом за сшввщношенням вiдносних активностей уреази i лiзоциму [13].
Ус бiохiмiчнi показники визначали у гомоге-натi слизово! оболонки язика щурiв.
Матер1али та методи дослщження. У Табл. 1 наведено результати визначення рiвня маркерiв запалення у слизовш оболонщ язика щурiв з алоксановим дiабетом.
Згiдно з результатами проведених досл> джень, при моделюваннi цукрового дiабету у щурiв збiльшуеться рiвень МДА у 2-3 рази i у значно меншiй мiрi - актившсть еластази.
Використання пасти чорнищ достовiрно (р < 0,001) знижуе вмют малонового дiальде-гiду вже на 7-й день експерименту цукрового дiабету, тодi як активнiсть еластази достовiрно знижуеться лише на 14 день.
Отриманi данi свiдчать про розвиток запально-дистрофiчних процесiв у слизовш оболонщ язика щурiв, а також про наявшсть у ягiд чорнищ мукозопротекторно! властивостi.
У Табл. 2 представлен результати визначення активносп антиоксидантного ферменту каталази та рiвня антиоксидантно-прооксидантного
Таблиця 1 - Вплив пасти чорнищ на рiвень маркерiв запалення на слизову оболонку язика щурiв з алок-сановим дiабетом
№№ з/п Групи Малоновий д1альдепд, ммоль/кг Еластаза, мк-кат/кг
1 Норма (тают) 6,08 ± 0,29 52 ± 2
2 ЦД 1 типу, 7 дшв 12,86 ± 0,28 р < 0,001 60 ± 4 р > 0,05
3 ЦД 1 типу, 7 дшв + + паста чорнищ 7,62 ± 0,24 р < 0,05 р1 < 0,001 56 ± 4 р > 0,3 р, > 0,3
4 ЦД 1 типу, 14 дшв 16,58 ± 0,41 р < 0,001 64 ± 4 р < 0,05
5 ЦД типу 1, 14 дшв + + паста чорнищ 10,69 ± 0,13 р < 0,001 р1 < 0,001 53 ± 3 р > 0,7 р1 < 0,05
ПРИМ1ТКИ:
р - вiрогiднiсть вщмшностей до показник1в 1 групи; р1 - вiрогiднiсть вiдмiнностей до показниюв 2 групи.
iндексу - штегрального показника стану про-оксидантних та антиоксидантних систем слизово! оболонки порожнини рота у щурiв.
Зпдно з отриманими результатами дослщжен-ня, активнiсть каталази при наявностi цукрового дiабету типу 1 у щурiв практично не змiнено, проте антиоксидантно-прооксидантний iндекс знижуеться достовiрно (р < 0,001), особливо - на 14 день експерименту завдяки значному зростан-ню вмiсту малонового дiальдегiду.
Застосування пасти чорнищ достовiрно збiльшуe антиоксидантно-прооксидантний ш-декс у щурiв, проте не повертае його до показ-никiв норми, що свiдчить про порушення балансу антиоксидантно-прооксидантних систем при цукровому дiабетi у бiк збiльшення вшьно-
радикального окиснення.
У Табл. 3 представлено результати визначен-ня активностей уреази (маркера загального м> кробного обшменшня) та лiзоциму (показника неспецифiчного iмунiтету).
Розвиток цукрового дiабету 1 типу у щурiв викликае розвиток загального мшробного об-сiменiння, що призводить до його достовiрного збiльшення, що свщчить про зрiст загально! чи-сельностi мiкроорганiзмiв у слизовiй оболонщ порожнини рота у щурiв. Одшею з причин цього може бути зниження активностi лiзоциму (на 14 день експерименту майже вдвiчi). Застосування пасти чорнищ знижуе активнiсть уреази i збшь-шуе активнiсть лiзоциму у щурiв, проте досто-вiрно (р < 0,001) - лише на 14 й день експерименту вщтворення цукрового дiабету1 типу.
Можливо, наявнiсть алоксанового цукрового дiабету типу 1 у щурiв вимагае бшьш тривалого (а можливо, постшного) вживання пасти чорни-цi для нормалiзацi! мiкробiоценозу у слизовiй оболонщ порожнини рота у щурiв.
На Рис. 1 показано, як змшюеться стан дис-бiозу слизово! оболонки язика щурiв з алокса-
4
3,5
¡Г 3
« 2,5 ч: 2
.О
■л 1,5
>
б 1 0,5 0
■
7дшв 14дшв
Тривалiсть експерименту
Пд|абет Пд|абет + чорниця
Рисунок 1. Вплив пасти чорнищ на стутнь дисбюзу у слизовш оболонщ язика щур1в з алоксановим д1а-бетом (норма - 1).
Таблиця 2 - Вплив пасти чорнищ на актившсть каталази та антиоксидантно-прооксидантний щдекс слизово!
оболонки язика щур1в з алоксановим д1абетом
з/п №№ Групи Каталаза, мкат/кг Антиоксидантно-прооксидантний 1ндекс, од.
1 Норма (1нтактн1) 3,40 ± 0,11 5,59 ± 0,21
2 Цукровий д1абет 1 типу, 7 дшв 3,25 ± 0,17 р > 0,3 2,53 ± 0,13 р < 0,001
3 Цукровий дiабет 1 типу, 7 дшв + паста чорнищ 3,55 ± 0,09 р > 0,1 р1 > 0,05 4,66 ± 0,30 р < 0,05 р1 < 0,001
4 Цукровий д1абет 1 типу, 14 дшв 3,30 ± 0,16 р > 0,3 1,99 ± 0,10 р < 0,001
5 Цукровий дiабет 1 типу, 14 дшв+ паста чорнищ 3,41 ± 0,11 р > 0,9 р, > 0,3 3,19 ± 0,20 р < 0,001 р1 < 0,001
ПРИМ1ТКИ: р - в1ропдшсть в1дм1нностей до показник1в 1 групи;
р1 - в1рог^дн1сть в1дм1нностей до показнишв 2 групи.
Дерматовенерология. Косметология. Сексопатология 1-4 2017
Таблиця 3 - Вплив пасти чорнищ на активнють уреази i лiзоциму у слизовш оболонцi язика щурiв з
алоксановим дiабегом
№№ з/п Групи Уреаза, мк-кат/кг Л1ЗОЦИМ, од/кг
1 Норма (штактш) 0,97 ± 0,08 136 ± 18
2 Цукровий дiабет 1 типу, 7 дшв 1,33 ± 0,11 р < 0,05 109 ± 15 р > 0,1
3 Цукровий дiабет 1 типу, 7 дшв + паста чорнищ 1,18 ± 0,08 р > 0,05 Л > 0,1 117 ± 14 р > 0,1 р, > 0,3
4 Цукровий дiабет 1 типу, 14 дшв 1,83 ± 0,38 р < 0,05 77 ± 7 р < 0,05
5 Цукровий дiабет 1 типу, 14 дшв + паста чорнищ 1,28 ± 0,09 р < 0,05 р1 > 0,05 128 ± 17 р > 0,4 р1 < 0,01
ПРИМ1ТКИ: р - вiрогiднiсгь вiдмiнносгей до показник1в 1 групи;
р1 - вiрогiднiсгь вщмшностей до показникiв 2 групи.
новим д1абегом. Показник сгупеня дисбюзу розраховано за ферменгагивним методом проф. А. П. Левицького [13] за сшввщношенням вщ-носних активностей уреази га л1зоциму.
Зпдно з результатами проведених дослщжень, доведено, що при цукровому д1абет1 у щур1в у слизовш оболонщ порожнини рота розвиваеть-ся дисбюз, який прогресуе з термшом розвитку цукрового д1абету. Застосування пасти чорнищ достов1рно (р < 0,001) знижуе стушнь дисбюзу лише на 14-й день цукрового д1абету типу 1.
Таким чином, проведеш нами дослщження показали, що цукровий дiабег викликае ураження слизо-во! оболонки ротово! порожнини, про що свщчить: - шдвищення р1вня маркер1в запалення (малонового д1альдег1ду i еластази);
-зниженняантиоксидантно-прооксидантного вдексу.
В основ! цих процешв може бути розвиток дисбюзу, чому сприяють як шдвищений вмют у кров1 (1 тканинах) глюкози, так i зниження р1в-
Л1ТЕРАТУРА
1. Орехова А. Ю., Силина Э. С., Демченко Т. В., Цыбульская Н. В. Особенности клинических проявлений патологии слизистой оболочки полости рта у больных сахарным диабетом (обзор литературы). Пародонтология. 2003. № 4 (29). С. 14 - 18.
2. Безкоровайна М. З., Якимець М. М. 1сто-ричш та сучасш погляди на морфолого-функцюнальний стан слинних залоз, слини, зуб!в i пародонта на тт цукрового дiабету. Здобутки ктшчно! i експериментально! ме-дицини. 2006. № 2. С. 17 - 21.
3. РайанМ. А., ЫльямсР., Гросси С. [и др.]. Сахарный
диабет и воспалительные процессы в полости рта. Пародонтология. 2006. № 4 (40). С. 62 - 65.
4. Балахонов Л. В., Непомнящих Л. М., Айда-
ня неспецифiчного iмунiтету, на що вказуе зниження активносп л1зоциму.
Бюлопчно активш речовини, яю е в ягодах чорнищ, зокрема пол1Фснольш сполуки, знижують р1всиь глюкози, тдвищують активнють л1зоциму, знижують мшробне обамешння i тим самим зсу-вають явища запально-дистрофiчного характеру у слизовш оболонщ, тобто виявляють мукозопро-текторну акгивнiсть [10]. Це дае певш пiдстави для рекомендацп використовувати пасту чорнищ в якосп додаткового лiкувально-профiлактичного засобу у хворих на цукровий дiа6ет.
Висновки
1. При алоксановому дiабетi у слизовш оболонщ язика щур1в розвиваються запальнi та дисбютичш процеси.
2. Вживання пасти чорнищ здшснюе муко-зопротекторну дда, що дае певш шдстави реко-мендувати 11 для використання у комплексному л^ванш хворих на цукровий дiабет.
гулова С. В. [и др.]. Структурные реакции слизистой оболочки полости рта при диабетической пародонтологии. БЭБИМ. 2006. Т. 142, № 11. С. 581 - 584.
5. Левицький А. П., Щсельський Ю. В. Розвиток дисбюзу i запалення у слизовш оболонщ кишечника щур1в з експериментальним цукро-вим дiабетом. Одеський медичний журнал. 2011. № 2 (124). С. 7 - 9.
6. Ступак Е. П., Николишин А. К., Макаренко О. А., Селиванская И. А. Развитие дисбиоза и воспаления в десне крыс с аллоксановым дiабетом. Вюник стоматологи. 2012. № 6 (спецвыпуск). С. 127.
7. Почтарь В. Н., Скиба А. В., Македон А. Б. [и др.]. Биохимические изменения слюны у
1-4 2017
Дерматовенерология. Косметология. Сексопатология
больных сахарным диабетом II типа. Вюник стоматологи. 2007. № 5. С. 14 - 18.
8. СтупакЕ. П., РоссахановаЛ. Н. Коррекция микро-
биоценоза полости рта у больных кандидозным стоматитом на фоне сахарного диабета. Вюник стоматологи. 2008. № 5-6. С. 28 - 33.
9. Mutoh T., Honda E., Matsumoto K. et al. Study
of oral microflora on diabetes mellitus patients. J. Dent. Res. 2000. Vol. 75, Srec. is. - P. 2013.
10. Левицький А. П., Осипенко С. П., Цисель-ский Ю. В. [и др.]. Гепатопротекторные свойства пасты из плодов черники при экспериментальном токсическом гепатите и кишечном дисбиозе. Фгготерашя. Часопис. 2009. № 3. С. 26 - 29.
11. Левицький А. П., Вит В. В., Цисельский
МУКОЗОПРОТЕКТОРНОЕ ДЕЙСТВИЕ ПАСТЫ ЧЕРНИКИ ПРИ АЛЛОКСАНОВОМ ДИАБЕТЕ У КРЫС
Ступак Е. П., Левицкий А. П., Скрипников
П. Н., Нидзельский М. Я., Дудченко Н. А.
Высшее государственное учебное заведение Украины «Украинская медицинская стоматологическая академiя»
Государственное учреждение «Институт стоматологии и челюстно-лицевой хирургии» Национальной академии медицинских наук Украины
В слизистой оболочке языка крыс на 7-й и 14-й дни после введения аллоксана повышается содержание малонового диальдегида, активность эластазы и снижается уровень антиоксидантно-прооксидантного индекса, что свидетельствует о развитии воспалительно-дистрофического процесса в слизистой оболочке ротовой полости. Установлено также существенное увеличение активности уреазы и значительное снижение активности лизоцима, что предопределяет увеличение степени дисбиоза. Паста черники, вводимая с кормом, в значительной степени устраняет воспалительные и дисбиотические явления в слизистой оболочке языка у крыс.
Ключевые слова: аллоксановый диабет, слизистая оболочка языка, воспаление, дисбиоз, черника.
Ю. В. [и др.]. Влияние черники на состояние сетчатки глаза крыс при экспериментальном гепатите на фоне кишечного дисбиоза. Пато-лопя. 2009. Т. 6, № 3. С. 78 - 81.
12. Левицький А. П., Деньга О. В., Макаренко О. А. [и др.]. Биохимические маркеры воспаления тканей ротовой полости: Методич. рекоменд. Одесса, 2010. 16 с.
13. Пат. № 43140 Украта, МПК (2009) G01N 33/48. Спошб оцшки ступеня дисбюзу (дис-бактерюзу) оргашв i тканин / Левицький А. П., Деньга О. В., Селiванська I. О. [та ш.]; заявник та патентовласник Державна уста-нова «1нститут стоматологи» АМН Украши -№ u 200815092; заявл. 26.12.2008; опубл. 10.08.2009, Бюл. № 15.
MUCOSOPROTECTIVE EFFECT OF THE BLUEBERRY PASTE UNDER ALLOXANE DIABETES IN RATS
Stupak O. P., Levitsky A. P., Skripnikov
P. M., Niedzielsky M. Ya., Dudchenko М. O.
Higher State Educational Establishment of Ukraine "Ukrainian Medical Stomatological Academy" State institution "Institute of Stomatology and Maxillofacial Surger/' National Academy of Medical Sciences of Ukraine
In the tongue mucosa of rats on the 7th and 14th days after the alloxane injection, the malonic dialdehyde content and elastase activity have increased, and the level of antioxidant-and-prooxidant index has decreased, being evidence of the inflammatory process development in the oral mucosa. It has also been found the significant increase of the urease activity and significant decrease of the lysozyme activity predetermining increase of the disbiosis degree. The blueberry paste having been introduced with feed largely eliminates the inflammatory and dysbiotic phenomena in the tongue mucosa. Key words: alloxane diabetes, blueberry, dysbiosis, inflammation, tongue mucosa.
Ступак Елена Павловна - кандидат медицинских наук, доцент кафедры последипломного образования врачей стоматологов ВГУЗУ «Украинская медицинская стоматологическая академия». Левицкий Анатолий Павлович - доктор биологических наук, профессор, член-корреспондент Национальной академии аграрных наук Украины, заслуженный деятель науки и техники Украины, заместитель директора по науке Государственного учреждения «Институт стоматологии и челюстно-лицевой хирургии Национальной академии медицинских наук Украины».
Скрипников Петр Николаевич - доктор медицинских наук, профессор, заведующий кафедрой последипломного образования врачей-стоматологов ВГУЗУ «Украинская медицинская стоматологическая академия».
Нидзельский Михаил Яковлевич - доктор медицинских наук, профессор, заведующий кафедрой последипломного образования врачей стоматологов-ортопедов ВГУЗУ «Украинская медицинская стоматологическая академия».
Дудченко Николай Алексеевич - доктор медицинских наук, профессор, заслуженный деятель науки и техники Украины, профессор кафедры внутренних болезней и медицины неотложных состояний с кожными и венерическими болезнями ВГУЗУ «Украинская медицинская стоматологическая академия». polso_umsa@mail.ru
Дерматовенерология. Косметология. Сексопатология 1-4 2017
