УДК: 619.612.017+547.1+546.289
Зшко Г.О., асистент © Сшвшська Л.Г., д-р. вет. наук, професор Лъв\всъкий нацюналънийутеерситет ветеринарногмедицини та бютехнологт ¡мет С.З. Тжицъкого
СТАН СИСТЕМИ ПОЛ-АОЗ У ТЕЛЯТ В УМОВАХ ТЕХНОЛОГ1ЧНОГО СТРЕСУ ТА ЗА ДП ПРЕПАРАТ1В СЕЛЕНУ I
ГЕРМАН1Ю
У статт1 наведено дат про взаемозв 'язок процеав пероксидного окиснення лтдгв та активност1 фермент1в антиоксидантного захисту в кров/ телят в умовах технолог1чного стресу. Встановлено збыъшення активност1 фермент1в ГПО / СОД, та зниження активност1 каталази на фот збыъшення концентрацИ ТБК-активних продуктгв. Комплексне застосування препарат1в Макадин 0,4 та Сел-Плекс сприяло тдвищенню активност1 антиоксидантного захисту телят.
Ключое1 слова: телята, глутатюнпероксидаза, супероксиддисмутаза, каталаза, ТБК-активт продукти, технолог1чнии стрес.
На сучасному етат розвитку тваринництва недостатньо уваги придшяеться профшактищ технолопчного стресу тварин, що е неминучим в умовах промислового ведения галузг Незалежно вщ етюлогп, стресовий стан оргашзму супроводжуються надлишковим утворенням активних форм оксигену (АФО) та активащею процеав пероксидного окиснення лшвдв (ПОЛ) [1].
ПОЛ - ф1зюлопчний ироцес, що виконуе регуляторну роль по вщношенню до темпу подшу кл1тини [2], швидкост1 росту, розвитку адаптацшних реакцш, синтезу стерощних гормошв, простагландишв, тромбоксашв, лейкотр1ешв \ т.д. [3]. Проте, враховуючи, що процеси ПОЛ належать до ушверсальних мехашзм1в пошкодження мембран, можна передбачити значш негативш змши в оргашзм1 за умов 1х надм1рно! активацп [4]. На даний час в л1тератур1 достатньо висв1тлеш загальнобюлопчш особливост1 процеав вшьнорадикального окиснення (ВРО) I ПОЛ, викликаних АФО, а також 1хня роль як неспециф1чно! патогенетично! ланки розвитку ряду захворювань I преморбщних (пограничних) сташв [4-7].
Активащя ПОЛ вщбуваеться в тих випадках, коли надм1рна генеращя АФО перевищуе ф1зюлопчш можливост1 антиоксидантних систем, або коли виникае первинна антиоксидантна недостатнють [8]. Тому, за дп технолопчного стресу на оргашзм тварин доцшьним е застосування препарат1в що володшть антиоксидантними властивостями [9-11].
© Зшко Г.О., Ствшська Л.Г., 2012
59
Мета роботи. Дослщити та обгрунтувати вплив селену, у склад1 препарату Сел-Плекс, \ германш, у склад1 препарату Максидш 0,4, на прооксиданно-антиоксидантну р1вновагу тварин за дп технолопчного стресу.
Матер1али 1 методи. Робота виконувалася в навчально-науковому виробничому центр! (ННВЦ) "Комаршвський" Городоцького району Льв1всько! области Господарство вважаеться благополучним щодо шфекцшних та швазшних захворювань. Об'ектом дослщження були 15 клшчно здорових телят, вжом 2,5 м1сящ, пщ1браних за принципом аналопв. Тварин було роздшено на три групи - контрольну (К) та 2 дослщш (Д1, Д2). На початку дослщу вс1 тварини утримувались у стшл1 та отримували щоденно по 2-3 л1три молока окр1м основного рацюну, що включав комбжорм, лугове сшо, сшаж, коренеплоди (морква, буряк кормовий).
3 метою моделювання технолопчного стресу тваринам дослщних груп були змшеш умови год1вл1 та утримання. Вони були перегруповаш, а основний ращон замшили випасанням протягом св1тлового дня на пасовищг Телят 1-1 дослщно! групи (Д1) тшьки випасали, тод1 як тваринам друго! дослщно! групи (Д2) додатково перорально задавали селеновмкний препарат Сел-Плекс по 2 г на тварину щодня та вводили пщшюрно гермашевмкний препарат Максидш 0,4 в доз1 0,1 мл на 10 кг маси тша тварини дв1ч1 на добу протягом 3-х дшв. Тваринам контрольно! групи умови год1вл1 та утримання не змшювали (таб. 1).
Таблиця 1
Схема дослщження_
Контроль Перша дослщна Друга дослщна
Рацюн та утримання тварин без змш Змши умов год1вл1 та утримання
Випасання Випасання, Сел-Плекс - п/о, по 2 г на тварину щодня. Максидш-0,4 - п/ш, в доз1 0,1 мл/10 кг маси тша дв1ч1 на добу.
Тварин дослщжували клшчно. Для лабораторного анал1зу вщбирали кров до врашшньо! год1вл1 на початку дослщу, та на третш { сьомий дш дослщжень.
У сироватщ кров1 визначали вмют ТБК-активних продукта - за исЫуа1а М., МсИага М., 1978 в модифкацп Андреевой Л.И. и др., 1988 [12]. У цшьнш кров1 - актившсть фермента: каталази - за КоролюкМ.А. та ш., 1991 [13], супероксиддисмутази (СОД) - за Чевари С И. та ш., 1991 [14], глутатюнпероскидази (ГПО) - за Моин В.М., 1986 [15].
Результати дослщжень. На початку дослщжень показники щодо вмюту ТБК-активних продукта та фермента антиоксидантного захисту (СОД, каталаза, ГПО) не мали в1рогщно! р1знищ у кров1 телят контрольно! та дослщних груп (рис. 1, 2, 3, 4)
На третш день дослщжень встановлено, що вмкт ТБК-активних продукта у сироватщ кров1 телят збшьшився на 44,8 % (р<0,01) та 29,1 % (р<0,05) щодо
60
початку експерименту в сироватщ кров1 телят 1-1 та 2-1 дослщних груп вщповщно (рис. 1).
На сьомий день дослщжень цей показник залишався в1рогщно вищим (р<0,001) у 1-й груш на 43,3 % пор1вняно з початком дослщу, тод1 як у 2-й -зменшився I становив у середньому 3,90±0,26 ммоль/л.
У телят контрольно! групи р1вень ТБК-активних продукта не змшювався впродовж усього перюду експерименту (рис. 1)
6,00
5,00
4,00 3,00 2,00 1,00 0,00
ИЗ к
МД1 НД2
початок дослщжень
3-й день
7-й день
Рис.1 - Динам¡ка вмкту ТБК-активних продукте (ммоль/л) у кров1 телт
Вмюту ТБК-активних продукта придшяють важливе значения при дослщженш штенсивност1 процеав ПОЛ. Високий вмкт цих сполук у сироватщ кров1 тварин вказуе на прискорене утворення вшьних радикал1в та порушення цшсност1 мембран.
Основними шпб1торами процеЫв ВРО е спещал1зоваш ферменти - СОД, ГПО 1 каталаза. СОД - основний фермент першо! ланки АОЗ, що катал1зуе дисмутацш та знешкодження двох молекул супероксидного радикалу 0-2 з утворенням менш активного пероксид гщрогену. Останнш розкладаеться каталазою та пероксидазою з утворенням оксигену та води. Окр1м того субстратом для ГПО е гщропероксиди лшщ1в.
Анал1зуючи динамжу активное^ фермента АОЗ в кров1 телят у процеЫ дослщжень, слщ вщм1тити зростання активное^ СОД за дп технолопчного стресу. Актившсть ферменту на третш день дослщжень у кров1 тварин 1-! та 2-! дослщних груп в1рогщно збшьшилась на 44,8 % (р<0,01) та 59,2 % (р<0,01) пор1вняно з початком дослщу (рис. 2), I на 44,8 % (р<0,05) та 56,4 % (р<0,001) щодо контролю. На сьомий день дослщжень актившсть ферменту в кров1 телят 2-! дослщно! групи становила 2,59±0,13 МО/мгИЬ I була на 11,6 % бшьша, пор1вняно з тваринами 1-! дослщно! групи та на 42,3 % (р<0,05) шж у тварин контрольно! групи.
61
3,00 2,50 2,00 1,50 1,00 0,50 0,00
□ К
0Д1 НД2
початокдослщжень
3-й день
7-й день
Рис. 2 - Актившсть супероксиддисмутази (МО/мг НЬ) в кров! телят
Аналопчш змши вщм1чеш при дослщженш ГПО (рис. 3). На третш день дослщжень актившсть ГПО у кров1 тварин 1-1 та 2-1 дослщних груп зросла на 24,8 % (p<0,01) та 33,9 % (р<0,001) вщповщно щодо початку дослщу. В подальшому актившсть ГПО зменшувалась. На сьомий день дослщжень нами встановлено в1рогщне зниження цього показника на 15,6 % (р<0,05) у телят 1-1 дослщно! групи, та тенденцш до зменшення у 2-й груш тварин на 7,0 % пор1вняно з трет1м днем.
Збшьшення активное^ ГПО поряд з пщвищенням вмкту ТБК-активних продукта свщчить про накопичення гщропероксид1в в оргашзм1 тварин. У той час застосування тваринам селеновмюних препарата дозволяе пщтримувати вмют ГПО на високому р1вш та нормал1зувати процеси ПОЛ.
300,0
250,0 200,0 150,0 100,0 50,0
0,0
НК
□ Д1 НД2
початокдосл1джень
3-й день
7-й день
Рис. 3 - Актившсть глутатшнпероксидази (мкМ/хв*гНЬ) в кров1 телят
Актившсть каталази на третш день дослщжень у кров1 телят 1-1 та 2-1 дослщних груп зменшилася на 22,5 % (р<0,01) та 17,0 % (р<0,01) вщповщно пор1вняно з контролем. На кшець дослщжень м1ж показниками тварин
62
контрольно! та 2-! дослщно! труп не було в1рогщно! р1знищ (р<0,1), проте в кров1 телят 1-! дослщно! групи актившсть каталази залишалася низькою I була в1рогщно (р<0,01) на 18,2 % меншою пор1вняно з початком дослщу (рис. 4).
чР,
1000,0 900,0 800,0 700, 0 600,0 500,0 400,0 300,0 200,0 100,0 0,0
початок 3-й день 7-й день
дослвджень
Рис. 4 - Актившсть каталази (мкМ/хв*гЫЪ) в кров! тварин
У телят контрольно! групи актившсть фермента антиоксидантного захисту не змшювалася впродовж усього перюду експерименту (рис. 2, 3, 4)
При дп стресових чинниюв на фош активаци процеЫв ПОЛ збшьшуеться актившсть фермента антиоксидантного захисту, що мае компенсаторний характер. Проте, у молодняку, особливо при тривалш I комплекснш ди стресор1в, антиоксидантна система не в змоз1 повшстю нейтрал1зувати активш форми оксигену та гщропероксиди лшвдш. Це призводить до порушення цшсност1 кл1тинних мембран, зниження резистентност1 оргашзму та виникнення захворювань.
При застосуванш препарата селену та германш телятам в умовах технолопчного стресу поряд з1 збшьшенням активное^ антиоксидантних фермента спостершаеться зниження концентраци ТБК-активних продукта, що евщчить про !хнш позитивний вплив на прооксиданно-антиоксидантну р1вновагу.
Висновки.
1. У процеа змши год1вл1 та утримання, що викликають стрес у телят, спостершаеться порушення прооксиданно-антиоксидантно! р1вноваги, що проявляеться збшьшенням вмкту ТБК-активних продукта та компенсаторною активащею фермента антиоксидантного захисту I е одним ¿з чинниюв виникнення хвороб молодняку.
2. Застосування препарата селену та германш сприяе вщновленню порушень системи ПОЛ-АОЗ, та може бути рекомендованим з метою профшактики захворювань шлунково-кишкового тракту в телят.
63
Л1тература
1. Бражникова М.Ф. Перекисное окисление липидов и патоморфология легких животных при остром перегревании / М.Ф. Бражникова // Свободные радикалы, антиоксиданты и здоровье животных: материалы междунар. науч.-практ. конф. - Воронеж: ВГУ, 2004. - С. 24-27.
2. Костромитинов Н.А. Состояние свободнорадикльного окисления липидов у собак разных пород и возраста / Н.А. Костромитинов, Е.А. Суменкова // Свободные радикалы, антиоксиданты и здоровье животных: материалы междунар. науч.-практ. конф. - Воронеж: ВГУ, 2004. - С. 72-77.
3. Дьякова С.П. Взаимосвязь перекисного окисления липидов с некоторыми гематологическими и биохимическими покзателями крови ярок разных пород / С.П. Дьякова // Свободные радикалы, антиоксиданты и здоровье животных: материалы междунар. науч.-практ. конф. - Воронеж: ВГУ, 2004. - С. 3135.
4. Рябов Г.А. Окислительный стресс и эндогенная интоксикация у больных в критических состояниях / Г.А. Рябов, Ю.М. Азимов, И.Н Пасечник, В.В. Крылов и др.// Вестник интенсивной терапии. - 2002. - № 4. - С. 4-7.
5. Постоенко В. Окислювально-антиоксидантна система в opraHÍ3MÍ телят в норм! та при патологи / В. Постоенко, Д. Засекш // Вет. медицина Украши. - 2004. - № 2. - С. 16-19.
6. Борисевич В. Вшьш радикали i перекисне окиснення лшвдв в патогенез! хвороб тварин / В. Борисевич, Б. Борисевич, В. Борисевич (молодший) // Вет. медицина Украши. - 2006. - № 1. - С. 15-17.
7. Фукс П.П. Роль перекисного окислешя липидов в онтогенезе синдрома диареи у телят в раннем возрасте / П. П. Фукс, Ю. В. Никитчешо, В. Д. Петряник, Э.П. Петренчук и др.. // Вет. медицина: м1жв. тематич. наук. зб. -XapKiB, 1997. Вип. 73. - С. 27-32.
8. Halliwell B. Oxidants and human disease: some new concepts / B. Halliwell // Fed. Am. Soc. Exp. Biol. J. - 1987. - Vol. 1. - P. 358-369.
9. Underwood E.J. The Mineral Nutrition of Livestock, 3 rd Edition. / E.J. Underwood N.F. Suttle // N.Y. USA. CABI Books. 2001. - 614 p.
10. Duff G. C. Recent advances in management of highly stressed, newly received feedlot cattle / G. C. Duff, M. L. Galyean // J. Anim. Sci. - 2007. - Vol. 85. - P. 823-840.
11. Биологическая активность соединений германия / Э.Я Лукевиц, Т.К. Гар, Л.М. Игнатович, В.Ф. Миронов. - Рига: Зинатне. 1990. - 191 с.
12. Андреева Л.И. Модификация метода определения перекисей липидов в тесте с тиобарбитуровой кислотой / Л.И. Андреева, Л.А. Кожемякин, А.А. Кишкун // Лаб. дело. - 1988. - № 11. - С.41-43.
13. КоролюкМ.А. Метод определения активности каталазы / М.А. Королюк, Л.И. Иванова, И.Г. Майорова, В.Е. Токарев // Лаб. дело. - 1991. - № 12. - С. 9-10.
64
14. Чевари C.H. Определение антиоксидантних параметров крови и их диагностическое значение в пожилом возрасте / С.Н. Чевари, Т.А. Андян Я.И. Штренгер // Лаб. дело. - 1991. - №1 0. - С.9-13.
15. Моин В. М. Простой и специфический метод определения глутатионпероксидазы в эритроцитах / В.М. Моин // Лаб. дело. - 1986. - № 12. -С.16-19.
Sammary L. Slivinska, H. Zinko
Lviv National University of Veterinary Medicine and Biotechnology named after
S.Z. Gzhytskyj
The article presents data about correlation of processes of peroxide oxidation of lipids with the activity of ferments of the antioxidant protection in blood of calves under technological stress. The increase of glutathione peroxidase, superoxide dismutase activity and malonic dyaldehid concentration, and catalase activity decrease is established. Complex application of Maxidin 0,4 and Sel-Plex contributed to increasing of antioxidant protection.
Рецензент - д.вет.н., професор Гуфрш Д.Ф.
65