CC BY
23
СРАВНИТЕЛЬНЫЙ АНАЛИз ГЕННОЙ ЭКСПРЕССИИ ПОТЕНЦИАЛЬНЫХ ОНКОМАРКЕРОВ В ОПУХОЛЕВОЙ ТКАНИ желудка и нормальном желудочном эпителии
В.В. ВОЛКОМОРОВ1, Е.С. ГРИГОРЬЕВА2, М.М. ЦЫГАНОВ2, М.А. БУЛДАКОВ2, Ю.А. БУКУРОВА3, А.А. ИВАНОВА2, Г.С. КРАСНОВ3
ГОУ ВПО «Томский государственный университет»1,
НИИ онкологии СО РАМН, г. Томск2,
Институт молекулярной биологии им. В.А. Энгельгардта РАН, г. Москва3
Актуальность. Рак желудка (РЖ) является одним из наиболее распространенных онкологических заболеваний в мире и занимает лидирующие позиции по показателям смертности, поскольку диагностируется, как правило, на поздних стадиях заболевания. Актуальны исследования по выявлению специфических белковых маркеров, которые можно было бы определять в сыворотке крови на ранней стадии РЖ. Такие белки должны отвечать следующим условиям: иметь кратно более высокий уровень экспрессии в опухолевой ткани по сравнению с нормальной и секретироваться в биологические жидкости организма. Выявление белков, экспрессия которых значительно меняется при формировании рака желудка, с одной стороны, позволит уточнить представления о его патогенезе, с другой - идентифицировать сывороточные маркеры, полезные для ранней диагностики и/или мониторинга больных после проведенного лечения. Ранее по результатам анализа генетических баз (NCBI, EMS) и проведения 2D протеомного анализа были выявлены гены и белки, экспрессия которых предположительно специфично повышена в опухолях желудка по сравнению с нормальным желудочным эпителием. Для подтверждения полученных данных предпринято сравнение уровня экспрессии этих генов в опухолевой и нормальной тканях желудка.
Целью исследования явилось сравнение уровней экспрессии генов GPRC5A, CEACAM6, PI3, SOD2, STK31, NEK6 и INHBA в парных образцах опухолей желудка и нормального желудочного эпителия.
Материал и методы. В исследование включено 45 больных РЖ, получавших лечение в
НИИ онкологии СО РАМН. Материалом исследования служила тотальная РНК, выделенная из парных образцов ткани РЖ и нормального эпителия желудка. Оценку экспрессии исследуемых генов проводили при помощи обратной транскрипции и ПЦР в режиме реального времени по отношению к гену-рефери ACTB.
Результаты. При сравнении уровней экспрессии исследуемых генов в нормальной ткани и в опухоли было показано статистически значимое повышение уровня экспрессии гена 1ЖНВА в опухолевой ткани. Средний уровень экспрессии в опухоли составил 0,015 ± 0,003 и в нормальной ткани - 0,005 ± 0,001 (р=0,00001). Экспрессия данного гена была повышена в 56,6% случаев, кратность изменения варьировала от 2,4 до 219 раз. Следует отметить, что результаты анализа уровня экспрессии относительно АСТВ практически не отличались от таковых, когда анализ производили относительно другого ген-рефери - GAPDH. Мы оценили зависимость изменения экспрессии от возраста, пола, клинико-патологических характеристик опухолевого процесса (гистотип, размер опухоли, вовлечение лимфатических узлов). Повышение экспрессии гена 1ЫНВА отмечалось как в опухолях диффузного (0,011 ± 0,002) так и интестинального (0,018 ± 0,005) типов (р=0,03 и р=0,0001 соответственно; повышение в 63 % и 79 % образцов). Существенное повышение уровня экспрессии гена 1ЫНВА было выявлено уже на ранних стадиях процесса при размере опухолей Т1-Т2 (0,017 ± 0,007), повышение отмечалось в 69 % образцов, при Т3-Т4 оно составило 0,013 ± 0,002 и наблюдалось в 58 % случаев. Кроме того, было выявлено, что в опухолях интестинального типа, по сравнению с
диффузным, наблюдается значимое превышение уровня экспрессии гена PI3: 0,042 ± 0,0080 против 034 ± 0,012 (p=0,049) (экспрессия повышена в 50 % и 32 % случаев соответственно). Однако по среднему уровню экспрессии этого гена в опухолях по сравнению с нормальной слизистой не получено значимых различий. Повышенная экспрессия гена INHBA в опухолях различных локализаций описана в литературе. При этом в клинических исследованиях различных злокачественных новообразований гипперэкспрессию этого гена в клетках опухоли на ранних стадиях в основном связывают с неблагоприятным прогнозом течения заболевания. Известно, что продукт данного гена - активин А, который образуется при гомодимеризации двух субъединиц INHBA, участвует в регуляции секреции гипофизом фолликулотропина Показано, что активин А при воздействии in vitro на клетки рака желудка линии SNU-16 индуцировал апоптоз и ингибировал активность теломеразы, что не согласуется с клиническими данными о плохом прогнозе при его гиперэкспрессии. Возможно, это объясняется тем, что в малигнизированных
клетках в условиях роста опухоли в организме хозяина могут не работать 1ЛНВА-зависимые механизмы ингибиции апоптоза и активности теломеразы.
Выводы. Повышение уровня экспрессии гена 1ЖИВА в опухолях желудка по сравнению с уровнем в нормальной ткани, начиная с ранних стадий РЖ, и сведения о способности белка секретироваться во внеклеточное пространство свидетельствуют о перспективности его дальнейшего исследования как потенциального маркера для ранней диагностики рака желудка. Тот факт, что наблюдается повышение уровня экспрессии гена Р13 в опухолях интестинального типа, по сравнению с опухолями диффузного типа, указывает на перспективность оценки его информативности как дифференциального маркера этих двух гистологических типов опухолей желудка.
Работа выполнена при поддержке ФЦП «Научные и научно-педагогические кадры инновационной России», Госконтракт №02.749.11.0769 и Международного научно-технического центра (# 3909).
ЭКСПРЕССИЯ РЕЦЕПТОРОВ К ПОЛОВЫМ ГОРМОНАМ ПРИ РАЗНЫХ ФОРМАХ ПРОГРЕССИИ ИНВАЗИВНОГО ПРОТОКОВОГО РАКА МОЛОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ
С.В. ВТОРУШИН12, М.В. ЗАВЬЯЛОВА12, Н.С. ТЕЛЕГИНА2, О.В. САВЕНКОВА1
НИИ онкологии СО РАМН, г. Томск1 ГОУ ВПО «Сибирский государственный медицинский университет Минздравсоцразвития России», г. Томск2
Актуальность. Экспрессию рецепторов к половым гормонам считают одним из наиболее информативных прогностических критериев при раке молочной железы. Считается, что снижение экспрессией рецепторов к эстрогенам и, особенно, к прогестерону является неблагоприятным фактором прогноза, ассоциированным с более частым отдаленным метастазированием. На практике часто приходится встречаться с изолированными или сочетанными формами опухолевой прогрессии. Интересным представлялась перспектива изучить экспрессию рецепторов к половым гормонам при разных формах прогрессии и при их сочетании.
Цель исследования. Изучить особенности экспрессии рецепторов к эстрогенам и к прогестерону при разных формах прогрессии инвазивного протокового рака молочной железы.
Материал и методы. Исследовался операционный материал от 79 больных уницентриче-ским инвазивным протоковым раком молочной железы стадии Т1-3К0-3М0, без предоперационного лечения. Средний возраст - 57,2 ± 11,2 года. Операция выполнялась в объеме мастэктомии или секторальной резекции молочной железы. После операции все больные по показаниям получали химио-, лучевую или гормонотерапию. Срок наблюдения за больными составил
