Сравнительная оценка противоопухолевой активности водного раствора цисплатина и его гидрогелевой формы в эксперименте in vivo Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

МАТЕРИАЛЫ КОНФЕРЕНЦИИ «ОТЕЧЕСТВЕННЫЕ ПРОТИВООПУХОЛЕВЫЕ ПРЕПАРАТЫ»

95

М.Ю. Ревтович1, Ю.П. Истомин1, А.И. Шмак1, П.М. Бычковский2, Т. Л. Юркштович2, С. О. Соломевич2, Н.В. Голуб2, Ф.Н. Капуцкий2, Е.Н. Александрова1 ИНТРАПЕРИТОНЕАЛЬНАЯ ХИМИОТЕРАПИЯ ПОЛИМЕР-ИММОБИЛИЗОВАННОЙ ФОРМОЙ ПРОСПИДИНА АСЦИТНОЙ ГЕПАТОМЫ ЗАЙДЕЛА 1ГУ «РНПЦ ОМР им. Н.Н. Александрова», агрогородок Лесной, Республика Беларусь; 2НИИФХПБГУ, Минск, Республика Беларусь

Введение. Диссеминация опухоли по брюшной полости рассматривается как распространенный, прогностически неблагоприятный опухолевый процесс. Применяемая на сегодняшний день интраперитонеальная химиотерапия характеризуется недостаточной эффективностью, поскольку не позволяет обеспечить пролонгацию противоопухолевой активности применяемых химиопрепаратов.

Цель исследования — изучить возможность применения макромолекулярной терапевтической системы фосфат декстрана (ФД) — проспидин (Пр) для лечения экспериментального канцероматоза на модели интраперитонеаль-но перевитой асцитной гепатомы Зайдела.

Материалы и методы. Исследование специфической активности препаратов проведено на 110 белых беспородных крысах (масса тела 184 ± 7 г) с перевитой внутрибрю-шинно гепатомой Зайдела (Институт цитологии РАН, Санкт-Петербург). Препараты Пр в виде водных растворов и гидрогелей (в дозах от 250, 500, 750, 1000 мг/кг в пересчете на цитостатик) вводили крысам однократно внутрибрю-шинно (в объеме 1,25 мл на 100 г массы тела животного). Кумулятивная выживаемость оценена по методу Каплана — Майера. Для оценки совместного влияния водного раствора Пр, его гидрогелевой формы и ФД на выживаемость использовался регрессионный анализ.

Результаты. При оценке кумулятивной выживаемости статистичеки значимые различия по сравнению с контролем были отмечены как для водных растворов Пр = 0,000216), так и для гидрогелевых форм Пр (р1о8_гал]! = 0,000001). Сравнительный анализ кумулятивной выживаемости в группах, пролеченных с использованием водных растворов Пр и эквивалентных по дозе Пр гидрогелевых форм, выявил преимущества использования последних, проявившиеся как увеличением выживаемости при сравнении ФД + Пр 250 мг/кг и Пр 250 мг/кг (р1о8_тпк = 0,024), так и тенденцией к увеличению выживаемости при сравнении ФД + Пр 500 мг/кг и Пр 500 мг/кг (р1о8_гш]! = 0,0671) и ФД + Пр 750 мг/кг и Пр 750 мг/кг (р1и1Л = 0,0802). Различий в кумулятивной выживаемости при использовании ФД + Пр 1000 мг/кг и Пр 1000 мг/кг нами отмечено не было (р1о8_гшк = 0,865). При сравнительной оценке снижения относительного риска (ОР) наступления летального исхода при применении водных растворов Пр и гидрогелей отмечено статистически значимое снижение ОР при использовании ФД + Пр 250 мг/кг (5,60 (1,16-27,06), р = 0,032) и ФД + Пр 500 мг/кг (> 1000 (> 1000- > 1000), р < 0,001) и тенденция в снижении ОР при использовании ФД + Пр 750 мг/кг (3,12 (0,85-11,44), р = 0,086). Для дозы 1000 мг/кг эффект снижения ОР отсутствовал (1,12 (0,28-4,44), р = 0,871).

Заключение. Полученные экспериментальные данные о положительном влиянии гидрогелевой формы Пр на те-

чение интраперитонеально перевитой гепатомы Зайдела свидетельствуют о возможности использования данного лекарственного средства при лечении диссеминирован-ных поражений брюшины и для профилактики перито-неальной диссеминации у радикально оперированных пациентов.

М.Ю. Ревтович1, П.М. Бычковский2, Т.Л. Юркштович2, Ю.П. Истомин1, С.О. Соломевич2, Н.В. Голуб2, Ф.Н. Капуцкий2, А.И. Шмак1, Е.Н. Александрова1 СРАВНИТЕЛЬНАЯ ОЦЕНКА ПРОТИВООПУХОЛЕВОЙ АКТИВНОСТИ ВОДНОГО РАСТВОРА ЦИСПЛАТИНА И ЕГО ГИДРОГЕЛЕВОЙ ФОРМЫ В ЭКСПЕРИМЕНТЕ IN VIVO

1ГУ«РНПЦ ОМР им. Н.Н. Александрова», агрогородок Лесной, Республика Беларусь; 2НИИ ФХП БГУ, Минск, Республика Беларусь

Введение. Несмотря на достаточно большой опыт проведения интраперитонеальной химиотерапии в мире, вопросы пролонгации противоопухолевого действия химио-препаратов, вводимых в брюшную полость, не решены окончательно. Одним из перспективных направлений является создание комбинированных препаратов на основе биодеградируемых гелей.

Цель исследования — оценить в сравнительном аспекте противоопухолевую активность водного раствора ци-сплатина (ЦП) и его гидрогелевой формы на модели ас-цитной гепатомы Зайдела.

Материалы и методы. Исследование специфической активности препаратов проведено на 56 белых беспородных крысах (масса тела 184 ± 7 г) с перевитой внутрибрю-шинно гепатомой Зайдела (Институт цитологии РАН, Санкт-Петербург). Препараты ЦП в форме водных растворов и в виде гидрогелей в комбинации с фосфатом декс-трана (в дозах 3,0; 5,5; 8,0 мг/кг в пересчете на цитостатик) вводили крысам однократно внутрибрюшинно (1,25 мл на 100 г массы тела животного). Кумулятивная выживаемость оценена по методу Каплана — Майера. Для оценки снижения относительного риска (ОР) летального исхода от прогрессирования опухолевого процесса при применении исследуемых препаратов использовали непараметрическую модель пропорциональных рисков Кокса.

Результаты. Интраперитонеальное применение ЦП 3 мг/кг и его гидрогеля оказалось эквивалентным в плане влияния на выживаемость экспериментальных животных (p1og_mnk = 0,908), что обусловлено медленным высвобождением ЦП из гидрогеля при данной концентрации ЦП. При сравнительной оценке кумулятивной выживаемости при использовании растворов ЦП и его гидрогелей 5,5 и 8,0 мг/кг отмечено увеличение выживаемости при использовании гидрогелей (p1og_r¡mk = 0,000729 и Р1о8_гш]! = 0,00433 соответственно). Применение раствора ЦП 3,0 мг/кг привело к снижению ОР гибели животного от прогрессирования опухолевого процесса в сравнении с группой контроля в 8 раз (8,37 (95 % доверительный интервал (ДИ) 2,09-33,49),p = 0,003) и было эффективнее в сравнении с гидрогелем ЦП 3 мг/кг (ОР 0,29 (0,05-1,79), р = 0,183). Применение гидрогеля ЦП 5,5 мг/кг статистически значимо снижало риск гибели животного в 11,6 раза в сравнении с группой контроля (95 % ДИ

96

МАТЕРИАЛЫ КОНФЕРЕНЦИИ «ОТЕЧЕСТВЕННЫЕ ПРОТИВООПУХОЛЕВЫЕ ПРЕПАРАТЫ»

1,1—124,1) и было эффективнее раствора ЦП 5,5 мг/кг (ОР 1,10 (0,37—3,27), р = 0,861). Использование гидрогеля ЦП 8,0 мг/кг характеризовалось тенденцией влияния на риск наступления летального исхода от прогрессирования опухолевого процесса (ОР 4,88 (95 % ДИ 0,86-27,61), p = 0,07331), в то время как использование раствора ЦП 8,0 мг/кг не влияло на данный показатель (ОР 0,71 (0,25-2,05), р = 0,532).

Заключение. Полученные экспериментальные данные свидетельствуют об ингибирующем эффекте исследованных гидрогелевых форм ЦП при их интраперитонеальном применении на рост и прогрессирование асцитной гепатомы Зайде-ла, что является основанием для продолжения исследований.

О.Ю. Рыбалкина12, Е.П. Зуева1, Л.Н. Зибарева2, А.А. Бадулина2, Т. Г. Разина1, Е.Н. Амосова1, К.А. Лопатина1,2, Е.А. Сафонова1, Е.П. Федорова1 ЭКДИСТЕРОИДЫ В ДОПОЛНИТЕЛЬНОЙ ТЕРАПИИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫХ ОПУХОЛЕЙ ФГБНУ«НИИФиРМ им. Е.Д. Гольдберга», Томск; 2НИ ТГУ, Томск

Введение. Применение цитостатиков сопровождается высокой токсичностью в отношении активно пролифери-рующих клеточных популяций организма, в частности системы гемопоэза, поэтому актуальным является поиск препаратов, снижающих токсические проявления специфического лечения и/или повышающих его эффективность. Перспективными в качестве средств дополнительной терапии опухолевых заболеваний могут быть экдистероидсодержащие лекарственные растения, ярким предствителем которых является род Silene, обладающие широким спектром фармакологической активности и отсутствием токсичности.

Цель исследования — изучение влияния экстрактов S. colpophylla и S. viridiflora на развитие карциномы легких Льюис (Lewis lung carcinoma, LLC) у мышей и эффективность лечения циклофосфаном (ЦФ), оценка их действия на периферическую кровь на фоне цитостатической терапии.

Материалы и методы. LLC перевивали внутримышечно по 5 х 106 клеток. ЦФ вводили мышам однократно вну-трибрюшинно в дозе 125 мг/кг на 10-е сутки развития опухоли. Экстракты S. colpophylla и S. viridiflora, предоставленные лабораторией фитохимии Сибирского ботанического сада НИ ТГУ, вводили per os в дозах 50 и 100 мг/кг в течение 12 сут. В конце эксперимента (21-е сутки) определяли массу опухоли, вычисляли процент торможения ее роста, частоту метастазирования, подсчитывали количество и площадь метастазов в легких. Показатели периферической крови на 3-и сутки после введения ЦФ определяли с помощью гематологического анализатора «Muchic 18vet» (Cormay, Франция). При обработке результатов использовали непараметрические критерии Вилкоксона, Манна — Уитни и углового преобразования Фишера.

Результаты. Обнаружено, что введение ЦФ оказало достоверное ингибирующее влияние на развитие метастазов. Добавление в схему лечения ЦФ экстракта S. colpophylla в дозах 50 и 100 мг/кг вызвало повышение противоопухолевого эффекта терапии, при этом торможение роста опухоли составило 49 и 46 % соответственно. Аналогичные эффекты наблюдались при сочетанном назначении мышам экстракта S. viridiflora в дозах 50 и 100 мг/кг с ЦФ. При оценке действия

экстрактов на периферическую кровь обнаружено, что цито-статик оказал ингибирующее действие на клетки периферической крови мышей с LLC. Включение экстрактов в схему химиотерапии не изменило ингибирующего влияния ЦФ на клетки миелоидного и эритроидного ростков кроветворения, однако повысило содержание тромбоцитов в 2 раза в периферической крови животных с LLC (p < 0,05).

Заключение. Включение экстрактов S. colpophylla и S. viridiflora в схему химиотерапии приводит к повышению противоопухолевого действия ЦФ, а также препятствует развитию тромбоцитопении в периферической крови животных с LLC.

О. О. Рябая1-2, А.А. Малышева1, А. В. Егорова2, Ю.А. Хоченкова1, Е.В. Степанова1, Д.А. Хоченков1 ИНГИБИРОВАНИЕ АУТОФАГИИ ПОТЕНЦИРУЕТ ЦИТОТОКСИЧНОСТЬ ТЕМОЗОЛОМИДА IN VITRO НА КЛЕТОЧНЫХ ЛИНИЯХ МЕТАСТАТИЧЕСКОЙ МЕЛАНОМЫ

ФГБУ «РОНЦим. Н.Н. Блохина» Минздрава России, Москва; 2ГБОУ ВПО «РНИМУим. Н.И. Пирогова» Минздрава России, Москва

Введение. В последние десятилетия большое внимание уделяется лечению метастатической меланомы (ММ) кожи, но несмотря на достигнутые успехи, прогноз течения болезни остается неблагоприятным (средняя выживаемость пациентов с ММ кожи в мире составляет 8—10 мес). Активно изучаются новые комбинации и пути лечения. Ингибирование процесса аутофагии, позволяющего опухолевым клеткам преодолевать неблагоприятные условия, во многих доклинических исследованиях показало положительный эффект на регрессию опухолей и увеличение продолжительности жизни пациентов.

Цель исследования — изучить влияние ингибиторов аутофагии (хлорокина (CQ) и LY-294002) на цитотоксич-ность темозоломида (TMZ) на клеточных линиях ММ кожи in vitro.

Материалы и методы. Были использованы клеточные линии ММ кожи, полученные от пациентов РОНЦ им. Н.Н. Блохина. Цитотоксичность оценивали МТТ-тестом, иммуноцитохимически, уровень апоптоза определяли методом двойного окрашивания аннексином V/пропидий йодидом с помощью проточной цитометрии. Исследование аутофагии проводили посредством вестерн-блоттинга и трансфекцией микро-рибонуклеиновой кислоты (миРНК) к белку Beclin 1 клеточных линий либо при использовании ингибиторов аутофагии CQ и LY-294002.

Результаты. Для исследования влияния CQ на цито-токсичность TMZ последний был взят в нетоксических концентрациях (100—200 мкМ). МТТ-тестом показано, что CQ усиливает действие TMZ, приводя к увеличению гибели клеток ММ в среднем на 20 %, клетки с мутацией в кодоне v600 гена B-RAF были более чувствительны к комбинации CQ и TMZ. Анализ запуска апоптоза после 24-часовой инкубации с препаратами показал, что уровень апо-птоза не зависел от статуса гена B-RAF: TMZ (500 мкМ) в монорежиме вызывал гибель 3—8 % клеток. Однако под действием CQ возрастало количество апоптотических клеток до 17,5 ± 2,9 % у B-RAFv600 клеток, а у B-RAF"1 их уро-