Научная статья на тему 'СРАВНИТЕЛЬНАЯ ОЦЕНКА МЕТОДОВ ОПРЕДЕЛЕНИЯ CL50, Limac И ВОЗНИКАЮЩИХ КОМБИНИРОВАННЫХ ЭФФЕКТОВ ПРИ СОВМЕСТНОМ И ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОМ ИНГАЛЯЦИОННОМ ВОЗДЕЙСТВИИ НА ОРГАНИЗМ ДВУХ И БОЛЕЕ ХИМИЧЕСКИХ ФАКТОРОВ'

СРАВНИТЕЛЬНАЯ ОЦЕНКА МЕТОДОВ ОПРЕДЕЛЕНИЯ CL50, Limac И ВОЗНИКАЮЩИХ КОМБИНИРОВАННЫХ ЭФФЕКТОВ ПРИ СОВМЕСТНОМ И ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОМ ИНГАЛЯЦИОННОМ ВОЗДЕЙСТВИИ НА ОРГАНИЗМ ДВУХ И БОЛЕЕ ХИМИЧЕСКИХ ФАКТОРОВ Текст научной статьи по специальности «Химические технологии»

CC BY
40
5
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.
Журнал
Гигиена и санитария
Scopus
ВАК
CAS
RSCI
PubMed
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

Похожие темы научных работ по химическим технологиям , автор научной работы — А.К. Маненко, О.П. Иванова, Н.А. Бирюкова

iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

Текст научной работы на тему «СРАВНИТЕЛЬНАЯ ОЦЕНКА МЕТОДОВ ОПРЕДЕЛЕНИЯ CL50, Limac И ВОЗНИКАЮЩИХ КОМБИНИРОВАННЫХ ЭФФЕКТОВ ПРИ СОВМЕСТНОМ И ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОМ ИНГАЛЯЦИОННОМ ВОЗДЕЙСТВИИ НА ОРГАНИЗМ ДВУХ И БОЛЕЕ ХИМИЧЕСКИХ ФАКТОРОВ»

4. Крупноформатные выставки привлекают большее внимание пациентов, чем малоформатные литовыставки, в условиях поликлиники. Они могут конструироваться на местах из плакатов, рисунков и различных подручных средств по определенному аспекту ЗОЖ либо проблеме. Выставка может состоять из 3 и более щитов, причем тематика их может меняться в зависимости от актуальности вопросов здравоохранения.

Малоформатная выставка — литовыставка — может иметь значение для людей, которым в силу индивидуальных особенностей требуется время и условия для самостоятельного изуче-

ния. Малая форма выставки удобна для использования в любых аудиториях.

Литература

1. Малинсшя И. П., Позднякова Р. 3. // Сов. здравоохр.—

1983.— № 5.— С. 27—31.

2. Малинская И. Н., Позднякова Р. 3. // Там же.— 1984.— № 12.—С. 38—43.

3. Удедов А. К. Общественная психология.— М., 1967.

Поступила 14.06.89

Методы исследований

КОЛЛЕКТИВ АВТОРОВ, 1991

УДК 613.632.4:615.285.7|-074

А. /С Маненко, О. П. Иванова, Н. А. Бирюкова

Lim

СРАВНИТЕЛЬНАЯ ОЦЕНКА МЕТОДОВ ОПРЕДЕЛЕНИЯ СЬ50, И ВОЗНИКАЮЩИХ КОМБИНИРОВАННЫХ ЭФФЕКТОВ ПРИ СОВМЕСТНОМ И ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОМ ИНГАЛЯЦИОННОМ ВОЗДЕЙСТВИИ НА ОРГАНИЗМ ДВУХ

И БОЛЕЕ ХИМИЧЕСКИХ ФАКТОРОВ

Львовский медицинский институт

Одной из важнейших проблем гигиены является дальнейшее совершенствование методических основ регламентирования пестицидов, применяемых последовательно [1—3, 9, 10, 12, 21]. Для указанного варианта комбинированного действия существенную роль играет длительность временных интервалов между последовательными экспозициями в сопоставлении с длительностью циклических фаз реакций организма на однократное воздействие токсичного вещества [10, 11]. Ранее [12, 16] для унификации токсикологического эксперимента с последовательным введением смесей пестицидов был предложен прием — определение максимального времени (^тах) накопления вредного вещества в метаболических областях, которое является отправной точкой для последующего введения другого вещества. Описание зависимости время — концентрация [24] на примере-кинетики ГХЦГ, гранозана, карбофоса в печени позволило установить, что ГХЦГ максимально накапливается на 3-й сутки в течение 13,46 ч (область плато), гранозан — на 5-е сутки в течение 88,6 ч. Полученные величи-ны ^тах одного пестицида были использованы как отправные точки для последующего введения другого вещества, но с учетом динамичности процесса последующий пестицид вводили на уровне временной величины в области плато. Расчет величины LD50 смесей (в частях от LD5o каждого ингредиента) по методу [8, 13, 23], а также методом анализа по параметрам токсичности как по набору компонентов, так и по количественным соотношениям между ними с получением Ь^д по эквивалентным дозам и сумме удельных доз ингредиентов [11, 16, 25] при одновременном и последовательном введении per os показал, что при одновременном введении отмечаются самые разнообразные комбинационные эффекты, тогда как при последовательном — всегда или абсолютный, или относительный антагонизм [14—16]. В связи с этим возникла необходимость проверки указанных приемов при определении CL50, Limac и возникающих комбинированных эффектов при совместном и последовательном ингаляционном воздействии пестицидов на организм.

Нами проведены эксперименты, аналогичные вышеизложенным, при однократном 4-часовом изолированном ингаляционном воздействии 3 % гранозана, 12 % ГХЦГ, 30 % карбофоса; одновременном воздействии смесей гранозан + ГХЦГ,

гранозан + ГХЦГ -}- карбофос и последовательном ингаляционном воздействии тех же смесей с учетом Ттах; гранозан ->- через Ттах = 5 сутГХЦГ; гранозанчерез Ттах= = 5 сут ГХЦГ через Ттах = 3 сут -*■ карбофос. Для удобства создания в затравочных камерах смесей пестицидов с постоянным соотношением компонентов использовали специально разработанную систему для образования гидроаэрозолей. В комплект системы входит круглодонная колба, в дно которой впаяна стеклянная трубка с форсункой, состоящей из двух трубок различного диаметра, и капельницы, герметично спаянных между собой. Колба и форсунка соединены гибкой полиэтиленовой трубкой с зажимом, регулирующим подачу жидкости. Система проста по конструкции, надежна в работе' позволяет создавать заданные регулируемые концентрации в затравочных камерах и .монодисперсный аэрозоль, регулируемый по величине частиц.

Контроль концентраций в камерах проводили в соответствии с [18—20]. Каждую из трех концентраций испытывали на 10 животных при изолированном, одновременном и последовательном воздействии. Одна из концентраций приводила к гибели более 50 % животных, другая — менее 50 % животных, а третья являлась промежуточной.

СЬбо смесей при одновременном и последовательном воздействии оценивали, пользуясь методикой анализа комбинированного действия смесей веществ с постоянным соотношением компонентов [11, 23, 25]. 1лтас определяли на белых крысах при однократном 4-часовом ингаляционном воздействии 3 концентраций с отличием в 5 раз от соответствующей СЬ50 (при изолированном, совместном и последовательном воздействии), параллельно— каждого из 3 веществ в отдельности (10 крыс на концентрацию и 10 — контрольная группа, всего 100 животных на 3 пестицида); смеси веществ при одновременном ингаляционном воздействии — гранозан —

+ ГХЦГ, гранозан + ГХЦГ + карбофос (всего 60 животных на 2 смеси); смеси веществ при последовательном воздействии: воздействие гранозана (4 ч)->- через Гтах 5 сут->- воздействие ГХЦГ (4 ч) через Гтах 3 сут воздействие карбофоса (4 ч) — всего использовано 60 животных на 2 смеси. 1Лтас вычисляли как вероятностную величину СЕ-Го1" (пороговая) и СЕ50 (подпороговая) по градированным эффектам (активность холинэстеразы эритроцитов, содержание БН-групп цельной

крови) и интегральным показателям [22], апробированным нами на различных пестицидах [4—7].

В сравнительном плане величины LD50 и CL50, Limac смесей при одновременном и последовательном воздействии были проверены по формуле Л. Уэбба, предложенной [17] для обеспечения аддитивности раздельных эффектов компонентов комбинаций.

Результаты и их обсуждение. Приводим пример расчета CL5o методом 3 точек. Гранозан: х=30, 50, 90 мг/м3, ¿/=20, 50, 80 %, х— 170, i/=150, а= (80—20)/ (90—30) = 1, Ь= = (150—Ы70)/3=—6,67; у= \х—6,67 — уравнение концентрация — эффект. Отсюда * (CL50) = (50+6,67) /1=56,67 мг/м3; х' (С Li б) = (16+6,67) /1 = 22,67 мг/м^х" (CL84)= (84+6,67)/ 1=90,67 мг/м3; т= (90,67—22,67)/V60=8,78; mt= 8,78-2,05= = 18,01; CL50=56,67 (38,66—74,68) мг/м3. Аналогично для ГХЦГ при х=250, 600, 1300 мг/м3 и ¿/=16, 50, 90 % имеем уравнение зависимости концентрация — эффект у— 0,0704*+ + 1,49 и CL50=689,06 (433,2—944,89) мг/м4, для карбофоса при л:=20, 40, 80 мг/м3 и у= 20, 50, 90 %, уравнение зависимости концентрация — эффект у= 1,16л:—0,8 и CL50= = 43,79 (41,95—45,63) мг/м3.

Расчет CL50 для смеси гранозан -\-ГХЦГ (белые крысы при одновременном воздействии) методом анализа комбинированного действия смесей с постоянным соотношением компонентов. CL5o гранозана 56,67 мг/м3, ГХЦГ 689,66 мг/дм3. Испытаны 3 концентрации на 30 белых крысах (по 10 животных в группе): 2/з СЦо гранозана (37,78 мг/м3)+2/з CL5o ГХЦГ (459,37 мг/м3); 1 CL50 гранозана (56,67 мг/м3) + 1 CL50 ГХЦГ (689,06 мг/м3); 1,5 CL50 гранозана (85 мг/м3) +1,5 CL50 •ГХЦГ (1033,74 мг/м5). Концентрациям Х\ смеси — 497,15 мг/м3, хч смеси

745,73 мг/м , Хз смеси

1118,74 мг/м соответ-

ствуют эффекты 30, 60, 90 % (3, 6, 9 погибших животных из 10 в каждой группе). Решаем уравнение прямой, проходящей через 3 точки: а= (90—30)/(1118,74—495,15)=0,0962; 6= = (180—0,0962-2361,62) /3=—15,74. Уравнение концентрация — эффект смеси при одновременном воздействии компонентов имеет вид: ¿/=0,0962х—15,74. Отсюда л (CL50 смеси) =

= (50+15,74)/0,0962=683,37 мг/м3, х' (CL,6 смеси) = (16+ + 15,74)/0,0962=329,94 мг/м3, (CL84 смеси)= (84+15,74)/

0,0962=1036,798 мг/м"; т= 1036,798—329,94/^60 = 91,32; т/=91,32-2,05= 187,22. СЬ50=683,37 (496,15—870,6) мг/м3. Общая масса — СЬ5о гранозана + СЬ5о ГХЦГ=36,67+689,06=

= 745,73 мг/м3, процент компонентов в общей массе: гранозана 745,73—100; 56,67 — х=7,6; ГХЦГ 745,73—100, 689,06— х, х=92,4, СЬ50 смеси — 683,37 мг/м3. Удельные концентрации компонентов в смеси: гранозана 683,37 — 100 %, X — 7,6 %,

Х=51,95 мг/м3 (С,); ГХЦГ 683,37 — 100 %, X — 92,4%,

** - •

^=631,43 мг/м (С2). Зависимость концентрация — эффект компонентов: гранозан — £=1С—6,67=1-51,96—6,67= = 45,25 %, ГХЦГ—Е=0,0704С2+1,49=0,0704-631,43+1,49= = 45,94 %. еЕ=45,28+45,94=91,22 %. Зависимость концентрация— эффект смеси Е=0,0962С—15,74; отсюда — 91,22= =0,0962С—15,74. Ск смеси (эквивалентная)=91,22+15,74/ 0,0962=1111,88 мг/м*; /Скд=683,37 (496,15

870,59) /1111,88

=0,61(0,45—0,78). Так как /Скд верхняя доверительная граница /Скд гонизм относительный.

1, то это антагонизм; если 1, а еЕ<100 %, то анта-

Аналогично были получены величины СЬ50 различных смесей при одновременном и последовательном ингаляционном воздействии.

.•Сравнительная оценка типов комбинированных эффектов бинарных, тройных смесей пестицидов с постоянным соотношением компонентов при одновременном и последовательном воздействии представлена в табл. 1. Из табл. 1 видно, что если при одновременном воздействии смесей отмечаются различные типы комбинированных эффектов, абсолютного антагонизма (тройная смесь), относительного антагонизма (бинарная смесь), то при последовательном (на Ттах предыдущего пестицида) всегда четко отмечается абсолютный антагонизм, т. е. токсичность смесей уменьшается.

Полученные величины среднесмертельных концентраций были использованы на последующих этапах токсикометрии для определения Ышас (по СЕЙ)1" и СЕ50) смесей при одновременном и последовательном воздействии.

Вероятностная оценка эффективных (СЕзо") и подпорого-вых (СЕ50) концентраций гранозана, ГХЦГ, карбофоса и их бинарных и тройной смесей при одновременном и последовательном ингаляционном воздействии (по влиянию на активность холинэстеразы ткани мозга — 3-й сутки после однократного ингаляционного воздействия) позволила выразить зависимость градированного эффекта от концентрации в виде функции Е=}(С) и придать необходимый вероятностный смысл подпороговым и эффективным концентрациям (табл. 2).

Как следует из табл. 2, при однократном ингаляционном воздействии гранозан, ГХЦГ и карбофос оказывают выраженное влияние на активность холинэстеразы ткани мозга, вызывая статистически значимое по сравнению с контролем угнетение ее. Характерно, что одновременное ингаляционное воздействие смесей гранозан + ГХЦГ и гранозан + ГХЦГ+ + карбофос вызывает относительный антагонизм по снижению активности холинэстеразы. А^д по СЕ50 — 0,53 и 0,48 соответственно и абсолютный антагонизм на уровне пороговых

концентраций УСКД по СЕбо" — 0,64 и 0,70. При последовательном ингаляционном воздействии относительный антагонизм переходит в стойкий абсолютный как на уровне СЕ50, так и на уровне СЕбо1". Верхняя доверительная граница Ь1шас, выраженная в виде СЕ50, одновременно является нижней довери-

— пороговой концентрации как при

mm

тельной границей СЕ50 одновременном, так и при последовательном воздействии; для перехода к ЫшсН по результатам определения итас следует исходить из значения нижней доверительной границы СЕ50.

Расчет Ккд смесей на смертельном уровне полностью применим и для расчета /<кдЬ1шас по СЕ^о и СЕЙ1".

Используя данные экспериментов, покажем на примере смеси гранозан + ГХЦГ, что результаты токсикометрии при раздельном, совместном и последовательном ингаляционном воздействии, полученные на основе анализа линейных процессов, при решении уравнений прямых с угловым коэффициентом [13, 15, 16, 25] обеспечивают аддитивность раздельных эффектов компонентов комбинаций, так как полученные раздельные эффекты непересекаемы и потому их сумма составит величину ожидаемого гипотетического суммарного эффекта.

Как явствует из табл. 2, наибольшая концентрация гранозана при определении Ытас 11,33 мг/м3 вызывает угнетение

Таблица 1

Сравнительная оценка типа комбинированных эффектов бинарных, тройных смесей пестицидов с постоянным соотношением

компонентов при одновременном и последовательном ингаляционном воздействии в острых опытах

Смесь

Одновременное воздействие

CL50 смеси, мг/м3

Ск

смеси

эквива- Ккд Е

лентная,

мг/м3

тип комбинирован ного действия*

Последовательное воздействие

CL50

смеси, мг/м3

ск

смеси эквивалентная, мг/м3

К

кд

тип комбинирован ного действия

Гранозан+ГХЦГ Гранозан+ ГХЦГ +карбофос

683,37 1111,88 0,61 1172,29 3343,0 0,35

100 100

OA АА

787,19 1369,48 0,57 2177,29 12294,7 0,17

100 100

АА АА

Примечание. Здесь и в табл. 2: А — антагонизм, С — суммация, ОА — относительный антагонизм, АА — абсолютный

Таблица 2

Пороги острого действия (по СЕ§о и СЕдо"), коэффициенты и тип комбинированного действия по активности фермента холинэстеразы в ткани мозга при одновременном и последовательном ингаляционном воздействии бинарных и тройной смесей

Вещество или смесь

E=f(C) (концентрация, мг/м )

СЕ so (С — мг/м3)

Ккд и тип комбинированного действия

CEgy»

(С — мг/м3)

ККЛ и тип комбинированного действия

Гранозан

ГХЦГ

Карбофос

У= Ь'

У=

Ь'

У=

Гранозан + ГХЦГ

Гранозан + ГХЦГ + кар бофос

У= Ь'

У=

V

Гранозан + ГХЦГ

iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.

Гранозан + ГХЦГ + кар бофос

У=

Ь'

У= У

-59,4x4-81,57 78,61; ¿/'=84,53 -15,56^+77,55 73,71; ¿>"=81,05 —52,95*+70,77

1,99 (1,79+2,29)

27,54 (16,224-47,36)

3,56 (2,754-4,57) Одновременное воздействие

-11,52^+89,18 8,51 (1,154-13,80) 86,79; Ь"=9 3,05

—9,51х+90,52 9,77 (2,754-36,30) 85,07; 6^=95,81

0,53 АО

0,48 АА

Последовательное воздействие

—9,33^+91,68 7,76 (3,724-17,38) 88,42; ¿>"=95, 06

0,40 АА

—7,83х+87,31 46,77 (16,984-100,0) 84,30; ¿?"= 90,32

0,43 АО

2,56 (2,29+2,85) 93,33 (47,864-141,13) 5,72 (4,574-7,20)

21,88 (13,804-47,86)

134,89 (36,304-478,63)

23,44 (17,384-63,10)

239,88 (100,04-575,43)

0,64 АА

0,70 АА

0,52 АА

0,68 АА

активности холинэстеразы Ткани мозга до 168,4=4=4 ммоль/ (кг-ч) (—66,22 %) по сравнению с исходной нормированной

величиной активности фермента в контроле 290,1 ±7,2 (100 %), концентрация ГХЦГ 137,8 мг/м3 — до 137,81 ммоль/ (кг-ч) (—75,88 %), концентрация смеси гранозан + ГХЦГ 136,67 мг/м3 — до 1444=5 ммоль/(кг-ч) (—50,37 %). Используя рассуждения авторов [17], если раздельный эффект гранозана равен —66,22 %, то оставшаяся величина активности после воздействия первого компонента составит: Г+е| = = 100—66,22=33,78 или 0,33. После воздействия ГХЦГ имеем следующее остаточное значение показателя 1+ег: 100—75,88= = 24,12 или 0,24. Вычисляем ожидаемый суммарный эффект: 0,33-0,24—1=—0,92, т. е <1 — антагонизм. Аналогичные результаты получены для промежуточной (27,33 мг/м3) и наименьшей (5,46 мг/м3) концентраций смеси гранозан+ГХЦГ при одновременном воздействии. Необходимо отметить, что указанный способ неприменим для оценки комбинированных эффектов при последовательном воздействии, так как учитывает аддитивность раздельных эффектов компонентов комбинации, которые одинаковы независимо от типа воздействия. Расчет Ккд по СЕзо, СЕбо" с оценкой преобладающего типа комбинированного действия — относительного и абсолютного антагонизма — по способу [14—16, 25] при одновременном и последовательном воздействии более информативен по сравнению со способом [17].

Выводы. 1. Величины СЬбо, полученные при одновременном и последовательном воздействии с учетом /Скд, свидетельствуют, что в первом случае могут наблюдаться самые разнообразные типы ¿комбинированных эффектов, а во втором — абсолютный антагонизм, механизм которого должен объясняться комплексно в тесной связи между кумуляцией, химическими и физиологическими процессами, участвующими в реализации комбинированного ингаляционного воздействия смесей.

2. итас бинарной и тройной смесей пестицидов при одновременном и последовательном ингаляционном воздействии, вычисленные как вероятностные величины СЕЗо1" и СЕ50 по градированным эффектам угнетения активности холинэстеразы ткани мозга, подтверждают тип комбинированного действия — усиление антагонизма при последовательном воздействии, отмечаемое при определении среднесмертельных концентраций.

3. Техника расчета /Скд (по эквивалентным концентрациям и сумме эффектов удельных концентраций ингредиентов) смесей на смертельных уровнях полностью применима для расчета /СкдУтас смесей по СЕбо и СЕ$>'П. Для перехода к ЫтсН по результатам определения порогов острого действия следует

исходить из значения доверительной границы СЕ50, как имеющей вероятностный смысл.

4. Величины CL50 и Limac при совместном ингаляционном воздействии, полученные на основе анализа линейных процессов при решении уравнения прямой с угловым коэффициентом, совпадают с данными расчета по формуле, обеспечивающей аддитивность раздельных эффектов компонентов комбинации при оценке кобминационных эффектов смесей при последовательном воздействии.

Литература

1. Барселянц Г. Б. // Российская респ. науч. конф. по вопросам гигиены: Материалы.— Новосибирск, 1972.— С. 63— 64.

2. Демиденко И. М. // Гигиена применения, токсикология пестицидов и клиника отравлений.— Киев, 1968.— С. 718— 723.

3. Дмитриева О. В. // Гиг. и сан.— 1974.— № 9.— С. 107— 109.

4. Иванова О. П., Маненко А. К. 11 Там же.— 1986,— № 4.— С. 32—35.

5. Иванова О. П., Маненко А. /С. // Там же.— № 7.— С. 75—78.

6. Иванова О. П., Чура Д. А., Маненко А. К. 11 Там же.— № П.— С. 21—24.

7. Иванова О. П., Маненко А. К. 11 Там же.— 1988.— № 2.— С. 11 — 14.

8. Каган Ю. С. // Там же.— 1973.— № 12.— С. 90—91. "9. Касымов Р. А. // Там же.— 1987.— № 8.— С. 69—70.

10. Кацнельсон Б. А., Новиков С. М. // Там же.— 1986.— № 8.— С. 59—63.

11. Кацнельсон Б. А. и др. Постановка экспериментальных исследований по изучению характера комбинированного действия химических веществ с целью разработки профилактических мероприятий.— М., 1987.

12. Маненко А. К. // Применение математических методов для оценки и прогнозирования реальной опасности накопления пестицидов во внешней среде и организме.— Киев, 1976.— С. 26—28.

13. Маненко А. К. 11 Гиг. и сан.— 1982.— № 8.— С. 70—72.

14. Маненко А. К. 11 Современные вопросы токсикологии и гигиены применения пестицидов и полимерных материалов.— Киев, 1985.— С. 102.

15. Маненко А. К. // Гиг. и сан.— 1988.—№> 4.—С. 87—89.

16. Маненко А. КИванова О. П. // Там же.— № 11.— С. 55—58.

17. Сватков В. И., Мудрый И. В. // Там же.— № 5.— С. 72—72.

18. Методические указания по определению микроколичеств пестицидов в продуктах питания, кормах и внешней среде.— М., 1983.— Вып. 1.

19. Технические условия на методы количественного определения вредных веществ в воздухе.— М., 1971.

20. Технические условия на методы определения вредных веществ в воздухе.— М., 1972.

21. Турецкая Э. С., Маненко А. ККравец-Беккер А. К. 11 Гигиена населенных мест.— Киев, 1976.— С. 141 —143.

22. Штабский Б. М., Красовский Г. И., Кудрина В. Н., Жол-дакова 3. И. 11 Гиг. и сан.— 1979.— № 9.— С. 41—45.

23. Штабский Б. М., Гжегоцкий М. И., Гжегоцкий М. Р. и др. // Там же.— 1980.— № 10.— С. 49—51.

24. Штабский Б. М., Шатинская И. Г. // Количественные аспекты химических воздействий в онкологии.— Л., 1985.— С. 21—22.

25. Штабский Б. М., Федоренко В. И. // Гиг. и сан.— 1987.— № 9..— С. 60—63.

Поступила 28.02.89

КОЛЛЕКТИВ АВТОРОВ, 1991

УДК 614.35:615.462.099

М. Д. Бресткина, С. Д. Сойнов, Э. И. Семененко, И. В. Ивлиева, И. В. Скоромное, Л. А. Кутепова

ПРИМЕНЕНИЕ БИОТЕСТИРОВАНИЯ НА ГИДРОБИОНТАХ ДЛЯ ОЦЕНКИ КАЧЕСТВА

СЫРЬЯ ПРИ ПРОИЗВОДСТВЕ ПОЛИМЕРНЫХ МАТЕРИАЛОВ

МЕДИЦИНСКОГО НАЗНАЧЕНИЯ

ВНИИ медицинских полимеров, Москва

Широкое применение полимерных материалов в изготовлении разнообразных изделий медицинского назначения, контактирующих с организмом, требует тщательной проверки их возможного отрицательного влияния на человека.

При контакте полимерного материала с биологически активной средой в нее могут мигрировать из полимерной матрицы потенциально токсичные низкомолекулярные вещества различного строения и происхождения. Это и составные части композиции, и разнообразные добавки, и продукты деструкции, образующиеся при переработке, хранении и эксплуатации изделий [3, 6].

Отсутствие в настоящее время достоверной корреляции между токсичностью полимерного материала и условиями его синтеза и переработки приводит к необходимости проведения контрольных токсикологических исследований на разных стадиях создания медицинских изделий из полимерных материалов. Если учесть продолжительность и сложность токсикологических исследований на теплокровных животных, то становится понятной обоснованность поисков возможности экспресс-токсикологической оценки полимерных материалов медицинского назначения.

В настоящей работе предпринята попытка применения гид-робионтов инфузорий спиростом и пресноводных гидр для оценки качества сырья при изготовлении пластифицированного по-ливинилхлорида (ПВХ-пластиката). Высокая чувствительность этих тест-объектов к токсичным применениям в воде, используемой в качестве модельной среды, позволяет в короткое время (до 2 сут) дать предварительную оценку токсичности изделия. Особенно важно применение биотестирования на гид-робионтах на стадии выбора материала, поскольку оно характеризуется высокой экономичностью и простотой выполнения, к тому же в отличие от широко применяемых в настоящее время методов биотестирования на теплокровных животных не требует дорогостоящей аппаратуры, специальных помещений и высокой квалификации персонала.

Нами рассмотрена возможность применения методов биотестирования в случае оценки качества ПВХ-пластиката медицинского назначения. ПВХ-пластикат, наиболее часто используемый в медицинской практике, является многокомпонентным материалом, включающим ПВХ-смолу, пластификатор диоктилфталат (ДОФ), стабилизаторы — стеараты кальция и цинка, антиокислитель — эпоксидированное соевое масло и другие соединения, которые при эксплуатации изделия могут мигрировать в контактные среды, приводя к токсическому эффекту.

Целью настоящей работы являлось исследование влияния чистоты стеаратов кальция и цинка на качество ПВХ-пластиката. Для испытаний были изготовлены 10 партий образцов, которые различались тем, что при их изготовлении были

использованы разные по качеству партии стеарата кальция и цинка. Полученные данные приведены в табл. 1.

Для получения вытяжек образцы пластиката помещали в дистиллированную воду при температуре 70 °С на 1 сут. Отношение площади поверхности образца пластиката к объему воды (S/v) составляло 1:1, т. е. образцы пластиката с общей поверхностью 100 см2 настаивали в 100 мл воды. По окончании настаивания экстракт сливали и исследовали описанными ниже методами.

Определение показателя бихроматной окисляемости проводили по методике, принятой в качестве единой для оценки качества медицинской продукции из полимерных материалов в странах—членах СЭВ [4].

Спектральные характеристики поглащения вытяжки в области 220—360 нм определяли на спектрофотометре «Specord UV-Vis» в ультрафиолетовом диапазоне.

Показатель pH определяли на рН-метре марки рН-262.

Гемолитическую активность водных втяжек оценивали по общепринятой методике определения гемолитического действия полимерных материалов и изделий из них in vitro. При этом в исследуемую вытяжку, содержащую хлористый натрий из расчета 9 мг/л, добавляли взвесь эритроцитов, термостатирова-ли при 37 °С, после чего сравнивали оптическую плотность исследуемого раствора с оптической плотностью контроля (10 % эритроцитарная взвесь в 0,9 % растворе NaCl) и раствора со 100% гемолизом [5].

В качестве тест-объектов использовали лабораторные культуры инфузорий-спиростом и пресноводных гидр. За критерий оценки токсичности водных вытяжек из ПВХ-пластиката приняты показатели двигательной активности (ДА) спиростом и темп регенерации гидр.

Таблица 1

Содержание основного вещества (в %) в стеаратах кальция и цинка

Кя образца Стеарат кальция Стеарат цинка •

1 73 88

2 59 88

3 83 88

4 48 88

5 55 88

6 88 86

7 88 81,5

8 88 86,7

9 88 78,8

10 88 88

83

I

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.