CC BY
6
10 материалы конференции «отечественные противоопухолевые препараты»
и пролиферативной активности опухолевых клеток, позволяет прогнозировать агрессивность злокачественного заболевания и способствовать оптимизации терапевтической тактики. Но расхождение пиков флуоресценции часто бывает непригодным для четкого количественного анализа из-за неинформативности опухолевого материала (до 40 %), поэтому оценка плоидности не стала рутинной лабораторной процедурой. Мы предположили, что для оценки прогноза агрессивности злокачественного новообразования можно избежать невыполнимой стадии анализа — количественной оценки плоидности и пролифера-тивной активности, и предложили анализировать опухоль по заведомо неблагоприятному показателю интегральной фракции анеуплоидных и пролиферирующих клеток.
Цель исследования. Оценка прогностической значимости количественного показателя интегральной фракции анеуплоидных и пролиферирующих клеток для предсказания эффективности 1-й линии химиотерапии рака яичников с включением препаратов платины и таксанов.
материалы и методы. Исследование проведено на 57 образцах серозного рака яичников с использованием красителя ДНК Hoechst H33258 и проточного цитофлуориметра. Пациентки были распределены на группы. Группа резистентных опухолей — 14 образцов пациенток, у которых безрецидивный период длился <6 мес. Условно чувствительная группа — 13 опухолевых образцов пациенток с безрецидивным периодом от 6 до 12 мес. Образцы 30 пациенток с безрецидивным периодом >12 мес составляли группу чувствительных опухолей. Обработку данных проводили с применением программного обеспечения FlowJo 7.6.1. и WinMDI 2.9.
результаты. Опухоли характеризовались гетерогенностью по исследованному показателю от 5 до 73 %, с показателем медианы — 27 %. Была выявлена достоверность различий между показателями интегральной фракции анеуплоидных и пролиферирующих клеток в группах чувствительных и резистентных опухолей (р = 0,0019). Статистически значимых различий не отмечено между группами чувствительных и условно чувствительных и между условно чувствительными и резистентными к химиотерапии опухолями (р = 0,135 и р = 0,15 соответственно). В течение 43 мес наблюдения в группе образцов с показателями фракции анеуплоидных и пролиферирующих клеток меньших медианы <27 % рецидив рака яичников диагностирован у 37 % (10 случаев из 27). Рецидивы у больных с показателями >27 % возникли в 23 (77 %) случаях из 30. Выявленные различия между кривыми Каплана—Мейера являются статистически значимыми (р = 0,0004).
Заключение. Благодаря простоте предложенного подхода к количественной оценке фракции анеуплоидных и пролиферирующих клеток эта характеристика рака яичников может быть использована для оптимизации химиотерапии.
Исследование поддержано грантами РФФИ № 15-04-06991 и 15-04-02172.
Т.А. Богуш1, М.И. Папулина2, О.М. Рябинина1, Ю.Б. Дьякова1, Д.В. Новиков1, Н.О. Вихлянцева1, А.Н. Гришанина1, Б.Е. Полоцкий1
сравнительная оценка экспрессии эстрогеновых рецепторов а и р в ткани немелкоклеточного рака легкого
ФГБУ«НМИЦ онкологии им. Н.Н. Блохина» Минздрава России, Москва, Россия; МГУ им. М.В. Ломоносова, Москва, Россия
введение. Эпидемиологические и статистические данные свидетельствуют о широком распространении немелкоклеточного рака легкого (НМРЛ) и неудовлетворительной выживаемости, что делает актуальным поиск новых подходов к лечению этого заболевания. К настоящему времени накоплены данные, которые подтверждают вовлечение эстрогенов в патогенез рака легкого. Таким образом, эстрогеновые рецепторы (ЭР) могут быть значимыми прогностическими маркерами. Изучение экспрессии ЭРа и ЭРр в ткани НМРЛ, взаимосвязи показателей экспрессии с гистологическим типом опухоли необходимы для оценки возможного применения гормональной терапии.
Цель исследования. Определить уровень экспрессии ЭРа и ЭРр в ткани НМРЛ, оценить взаимосвязь этих опухолевых маркеров, в том числе и при разных гистологических типах НМРЛ.
материалы и методы. Для проведения исследования был использован хирургический биопсийный материал 113 пациентов (92 мужчин и 21 женщины). Оценку экспрессии ЭРа и ЭРр в опухолевой ткани проводили методом имму-нофлуоресцентного анализа с помощью проточной ци-тофлуориметрии. В работе использовали первичные и вторичные антитела АЬсат для ЭРа (клон SP1 и аЬ98510) и для ЭРр (клон 14С8 и аЬ98729). Количество специфически флуоресцирующих клеток (уровень экспрессии ЭРа и ЭРр, %) определяли с помощью теста Колмогорова-Смирнова, включенного в программу FlowJo 10.0.8. Статистическую обработку проводили с использованием пакета прикладных программ Statistica 6.0. Для оценки взаимосвязи показателей экспрессии применяли критерий корреляции Пирсона.
результаты. Экспрессия ЭРа и ЭРр выявлена во всех исследуемых образцах НМРЛ, со средним значением уровня экспрессии маркеров и стандартным отклонением 25,5 ± 9,7 и 44,0 ± 15,6 % соответственно ^ <0,0001). Уровень экспрессии ЭРр был выше показателя для ЭРа в 88 % случаев. Аналогичный результат получен при сравнении уровня экспрессии ЭРа и ЭРр при аденокарциноме и плоскоклеточном раке легкого: 28,0 ± 11, 7 % против 43,6 ± 14,9 % и 23,7 ± 6,7 % против 45,0 ± 15,3 % (^ <0,0001). Корреляционный анализ показал, что в группе пациентов с плоскоклеточным раком легкого определяется прямая очень слабая связь между уровнем экспрессии ЭРа и ЭРр (коэффициент Пирсона г = +0,28); коэффициент Пирсона в группе пациентов с аденокарциномой имеет большее значение (г = +0,38), что указывает на лучшую взаимосвязь показателей экспрессии.
Заключение. В ткани НМРЛ (как аденокарциномы, так и плоскоклеточного рака легкого) уровень экспрессии ЭРр почти в 2 раза превышает показатель для ЭРа. При этом
Спецвыпуск / том 17 / 2018
РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ
материалы конференции «отечественные противоопухолевые препараты» 11
корреляции между этими маркерами практически не вы- Заключение. Полученные по УПЖ данные могут ука-явлено. Таким образом, в отличие от рака молочной желе- зывать на возможность снижения токсического действия зы, ЭРр могут быть основной мишенью при проведении ЦФА в составе механокомпозита ЦФА/АГ. адъювантной гормональной терапии НМРЛ. Е.В. Бочаров1, Р. В. Карпова1, О.А. Бочарова1, Л.М. Борисова1, М.П. Киселева1, З.С. Шпрах1, В.Г. Кучеряну2, И.В. Казеев1, Н.А. Брусенцов1, С.Е. Миронова1, Е.Н. Медведева2, Н.А. Неверова2, В.А. Ильенко1, Е.С. Иноземцева1 В.А. Бабкин2 влияниЕ СУХоГо Экстракта исследование in vivo противоопухолевой мультифитоадаптогена на двигательную активности механокомпозитов (поведенческую) активность мышей арабиногалактана с циклофосфамидом высокораковой линии сва ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Блохина» 1ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Блохина» Минздрава Минздрава России, Москва, Россия; России, Москва, Россия; 2ИНЦ СО РАН, Иркутск, Россия 2ФГБНУ НИИОПП, Москва, Россия введение. Водорастворимый растительный полисаха- Цель исследования. Изучить профилактическое воз-рид арабиногалактан (АГ) характеризуется высокой био- действие сухого экстракта мультифитоадаптогена (МФА) логической активностью (иммуномодулирующей, гастро- на двигательную (поведенческую) активность мышей выи гепатопротекторной, гиполипидемической) и низкой сокораковой линии СВА, генетически предрасположенных токсичностью. Физико-химическими методами установ- к возникновению спонтанных гепатокарцином. лено, что механообработка известных лекарственных ве- материалы и методы. Работа проведена на мышах-ществ (ЛВ) с АГ устраняет ульцерогенность, существенно самцах CBA (сублиния CBA/LacY). Контрольные мыши повышает растворимость и биодоступность ЛВ, что позво- (1-я группа, n = 9) получали воду в качестве питья, опыт-ляет снизить действующую дозу ЛВ с сохранением тера- ные животные (2-я группа, n = 9) — 10 % раствор МФА певтического эффекта. с питьевой водой в течение 1-го месяца постнатального Цель исследования. Предполагая, что механокомпози- онтогенеза, включая завершающий период дифференци-ты циклофосфамида (ЦФА) с АГ будут менее токсичны, ровки ткани печени. МФА — стандартизованный препарат, чем сам ЦФА, проведено изучение противоопухолевой включает компоненты 40 растительных водно-спиртовых активности 2 образцов механокомпозитов (ЦФА/АГ) на экстрактов, в том числе адаптогенов женьшеня, элеутеро-перевиваемой эпидермоидной карциноме легкого Льюис кокка, родиолы розовой, а также соединения фенольной (LLC) мышей. природы (флавоноиды, тритерпеновые гликозиды и др.), материалы и методы. Исследования выполнены на обладает антимутагенными, антиоксидантными, иммуно-мышах-самцах гибридах Fl (C57B1/6 х DBA/2) массой модулирующими, нейропротекторными свойствами. Для 20—25 г. LLC перевивали подкожно в правую подмышеч- определения двигательной активности животных приме-ную область. Лечение начинали через 48 ч после перевив- няли автоматизированный аналог теста «открытое поле» ки. Два образца механокомпозитов: ЦФА/АГ с молеку- с использованием системы Opto-Varimex-3 (Columbus лярной массой (ММ) 16645 Да и ЦФА/АГфр Instruments, США). Оценивали следующие параметры: го-(фрагментированный, ММ 8380 Да) в соотношении ризонтальную двигательную активность (пройденный ЦФА/АГ 1 : 10, изучались в дозе 50/500 мг/кг, исходные путь, см); вертикальную двигательную активность (число образцы АГ и АГфр в дозе 500 мг/кг в сравнении с ЦФА стоек); время передвижения животных (с); время без дви-в дозе 50 мг/кг при ежедневном пероральном введении жения (время «отдыха», с); число мелких движений (гру-в течение 5 дней. Образцы растворяли в воде до концен- минг, умывание, обнюхивание, лизание, грызение); скорость трации 30 мг/мл. Критериями эффективности считали движения животных. Средний возраст мышей на момент торможение роста опухоли (ТРО, %) и увеличение продол- определения показателей составил для контрольной груп-жительности жизни (УПЖ, %) подопытных мышей пы 22,7 ± 0,5 мес, для опытной группы — 23,1 ± 0,6 мес, по сравнению с контрольными. то есть был практически одинаков. Статистический анализ результаты. В течение 4 дней после окончания лече- результатов проводили с использованием программы ния противоопухолевая активность ЦФА/АГ была выше Statistica 6.0. (ТРО = 95—69 %), чем у ЦФА/АГфр (ТРО = 88—65 %). результаты. Величина пройденного пути у контроль-При введении исходных образцов АГ и АГфр мышам с LLC ных мышей составляла 1000,8 ± 52,0 см. Величина прой-противоопухолевого эффекта не обнаружено. Анализ по- денного пути у опытных мышей была достоверно выше лученных результатов показал, что более активный из ме- и равна 1230,1 ± 88,5 см, р12 = 0,04). Аналогичные резуль-ханокомпозитов ЦФА/АГ проявил достоверно менее вы- таты были получены и для других параметров двигательной раженное в сравнении с ЦФА противоопухолевое действие: активности. Время без движения в контрольной группе ТРО = 95—52 % на 11-е сутки и ТРО = 93—81 % на 19-е животных составило 83,8 ± 6,1 с. В опытной группе без сутки после окончания лечения соответственно. ЦФА/АГ движения самцы оставались более короткое время: 66,4 ± в 2 раза увеличивал продолжительность жизни мышей 5,3 с, р12 = 0,04). Число стоек у мышей контрольной груп-с LLC (УПЖ = 17 %) по сравнению с применением ЦФА пы определено как 11,1 ± 1,0. В опытной группе животные (УПЖ = 8 %) при минимальном критерии эффективно- выполняли стойки в среднем большее число раз (14,6 ± 1,2; сти УПЖ >25 %. p12 = 0,04). Мелкие движения животных контрольной
Спецвыпуск / том 17 / 2018 РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ
