плотность растворов при 364 нм в кювете толщиной слоя 3 мм. Градуировоч-ный график строят, пользуясь серией стандартов. Концентрацию серной кислоты (в мг/м3) подсчитывают по формуле:
„ (а + ¿> 4- с) -1000, Л "
где а— содержание Н2504 (в мг) в 1-й пробирке, Ь — во 2-й, с — в 3-й пробирке, У0 — объем аспирированного воздуха, пересчитанный к градусу Цельсия и 760 мм рт. ст.
ЛИТЕРАТУРА. Б а б к о А. К., Пятницкий И. В. Количественный анализ. М., 1956, с. 612. — КольтгофИ. М. и др. В кн.: Объемный анализ М., 1961, т. 3, с. 328.
Поступила I/VII 1974 г.
УДК 614.76:576.895.11-078
Р. Э. Чобанов, Н. Г. Дашкова
СРАВНИТЕЛЬНАЯ ОЦЕНКА ЭФФЕКТИВНОСТИ СОВРЕМЕННЫХ САНИТАРНО-ГЕЛЬМИНТОЛОГИЧЕСКИХ МЕТОДОВ ИССЛЕДОВАНИЯ ПОЧВЫ
Азербайджанский научно-исследовательский институт медицинской паразитологии и тропической медицины им. С. М. Кирова, Баку
Успешная борьба с геогельминтозами и профилактика их вызывают необходимость организации постоянного контроля за загрязненностью почвы яйцами геогельминтов, в которой происходит их накопление и развитие. Почва считается главным фактором передачи при геогельминтозах. Поэтому расширение санитарно-геогельминтологических исследований, в частности исследований почвы, является одной из основных задач санитарной гельминтологии. В СССР для исследования почвы с 1948 г. применяется метод 3. Г. Васильковой и В. А. Гефтер. Однако ввиду своей значительной трудоемкости и дефицитности применяемого оборудования, а также недостаточной эффективности он не соответствует современным практическим требованиям. В связи с этим в последние годы был предложен ряд новых методов, отличающихся простотой и большей эффективностью.
Мы провели сравнительную оценку эффективности и трудоемкости новых методов исследования почвы с целью выбора среди них наиболее эффективного и доступного практическим органом здравоохранения. Для выполнения этой работы были выбраны наиболее перспективные, по нашему мнению, новые методы: В. А. Гефтер и Е. Ф. Родионовой; Н. А. Рома-ненко; В. А. Лугины. Ниже приводится краткое описание этих методов.
Метод H.A. Романенко. В центрифужную пробирку емкостью 250 мл вносят 50 г почвы, добавляют 150 мл воды и тщательно перемешивают. Затем смесь центрифугируют 3 мин (до 1000 об/мин), сливают воду и добавляют к почве 150 мл насыщенного раствору азотнокислого натрия, снова перемешивают и центрифугируют то же время. После центрифугирования в пробирку доливают (до края) раствор азотнокислого натрия до образования выпуклого мениска, покрывают предметным стеклом (размером 10x6 мм) и отстаивают 10—15 мин. В процессе отстаивания яйца всплывают и прилипают к предметному стеклу. Через 10—15 мин стекло снимают и микроскопируют. На место снятого предметного стекла ставят другое, что обычно повторяют 4 раза. Эффективность метода, по данным автора, в среднем равна 73 %.
Метод В. А. Гефтер и Е. Ф. Родионовой. Тщательно смешивают 100 г почвы с 300 мл воды и выливают смесь в делительную воронку (емкостью 1,2 л) с краном, укрепленную в штативе Бунзена; нижняя часть воронки соединяется с пылесосом при помощи резиновой
Сравнительная эффективность методов исследования почвы
Автор метода Число исследованных проб Число проб, содержавших яйца гельминтов Число обнаруженных янц гельминтов Число Яи'1 гельмннтоь в среднем в 100 г почвы
абс. % всего аскарид власоглавов прочих
В. А. Гефтер и 98 76 77,5—4,2 2330 1119 1085 126 23,8— 1,7
Е. Ф. Родйоновой
Н. А. Романенко 98 73 74,5—4,4 1034 531 449 54 21.1=4= .8
В. А. Лугины 98 54 55,1—5,1 166 94 58 14 13,6=!= 1.5
трубки. Кран воронки открывают строго одновременно с включением пылесоса. После продувания воздухом в течение 5 мин смесь из делительной воронки выливают в несколько крупных центрифужных пробирок и центрифугируют в течение 5 мин, после чего воду сливают. Дальнейшее исследование осадка проводят аналогично методу Н. А. Романенко. Эффективность метода, по данным авторов, в среднем равна 73,8 %.
Метод В. А. Л у г и н ы. Почва в количестве 12,5 г обрабатывается в центрифужной пробирке емкостью 25 мл с 15 мл 5 % раствора щелочи и 10 стеклянными бусинками. После удаления щелочи к осадку прибавляют 20 мл раствора азотнокислого аммония, перемешивают стеклянной палочкой и центрифугируют 2 мин (2000 об/мин). Поверхностный слой жидкости аккуратно сливают по стеклянной палочке в стакан, закрывают его счетной пластинкой и микроскопируют. Для полного учета количества и состояния яиц в пробе почвы необходимо 3—4 раза отцентрифугировать и слить поверхностный раствор азотнокислого аммония в один стакан. Эффективность метода, по данным автора, равна 93,5 "о.
Для определения эффективности 3 описанных выше методов мы обработали по 98 проб одной и той же почвы, собранной в интенсивном очаге аскаридоза и трихоцефалеза. Результаты представлены в табл. 1.
По экстенсивным и интенсивным показателям обнаружения яиц гельминтов в пробах почвы методы В. А. Гефтер и Е. Ф. Родйоновой, и Н. А. Романенко оказались одинаково эффективными (Р>0,05) и заметно эффективнее, чем метод В. А. Лугины (Р<0,01).
В связи с одинаковой эффективностью первые 2 метода,,несмотр я на различие исследуемых навесок проб почвы (100 и 50 г соответственно), имеют ряд преимуществ перед методом В. А. Лугины. Во-первых, время, затрачиваемое на исследование одной пробы методом В. А. Гефтер и Е. Ф. Родйоновой, равняется 2—21/г ч, а по методу Н. А. Романенко не превышает Р/2 ч (по методу В. А. Лугины около 1 ч). Во-вторых, продувание почвы воздухом (по методу В. А. Гефтер и Е. Ф. Родйоновой), требующее дополнительно применение пылесоса, не отличается от обыкновенного механического перемешивания почвы стеклянной палочкой (по методу Н. А. Романенко). Поэтому метод Н. А. Романенко наиболее целесообразен для широкого использования при санитарно-гельминтологических исследованиях почвы и должен заменить трудоемкий и недостаточно эффективный метод 3. Г. Васильковой и В. А. Гефтер; по данным Л. П. Савченко и соавт., эффективность метода 3. Г. Васильковой и В. А. Гефтер меньше эффективности метода В. А. Гефтер и Е. Ф. Родйоновой.
В связи с этим мы решили более тщательно экспериментально изучить метод Н. А. Романенко, чтобы установить, какой процент выявления яиц обеспечивает этот метод из различных типов почвы, учитывая, что выявляе-мость яиц при прочих равных условиях зависит от типа исследуемой почвы (Д. Г. Тимошин и Н. Т. Кияшко; Т. Г. Филипченло и Ф. А. Байрит).
Выделяемость яиц аскарид и власоглава из различных типов почв при использовании метода
Н. А. Романенко
Тип почвы Яйиа аскарид Яйца власоглавов
абс. % поправочный коэффициент абс. % поправочный коэффициент
Песок 666 78,3— 1,4 1,28 596 70,1 — 1,6 1,43
Аллювиально-лугово- 619 72,8— 1,5 1,37 515 60,6— 1,7 1,65
лесная
Серозем 612 72,0^:1,5 1,39 532 62,6— 1,7 1,60
Горно-лесная коричне- 570 67,1— 1,6 1,49 497 58,52:1,7 1,71
вая
Горно-лесная бурая 551 64,8^1,6 1,54 493 58,0i 1,7 1,72
Желтозем 474 55,8±1,7 1,79 439 51,6— 1,7 1,94
Каштановая 448 52,7— 1,7 1,90 434 51,l=tl,7 1,96
Чернозем 395 46,5±1,7 -1 2,15 369 43,4— 1,7 2,30
Примечание. Число опытов каждого типа почвы —30; всего внесено яиц аскаридов и власоглавов по 850.
Это в свою очередь позволило бы рассчитать поправочные коэффициенты, посредством которых можно определять истинную загрязненность различных типов почв яйцами гельминтов (А. Н. Брудастов).
Всего для изучения нами было взято и исследовано 8 типов почв, наиболее распространенных в Азербайджанской ССР и встречающихся на значительной территории разных районов Советского Союза. С каждым типом почвы мы ставили 3 варианта опытов по 10 серий в каждом. В 1-м варианте в каждую из 10 проб почвы весом 50 г вносили по 10 яиц аскарид и власоглава, во 2-м и 3-м вариантах — соответственно по 25 и 50 яиц указанных гельминтов. Всего в пробы почвы в 1-м, 2-м и 3-м вариантах было внесено по 100, 250 и 500 яиц аскарид и власоглава. Постановкой в такой последовательности вариантов опытов мы хотели также выяснить, не меняется ли эффективность метода Н. А. Романенко в зависимости от интенсивности содержания яиц гельминтов в почве. Поправочные коэффициенты или коэффициенты улавливания для каждого типа почвы находили путем деления числа внесенных в почву яиц на число обнаруженных при анализе.
Результаты исследования проб почвы показали (табл. 2), что с увеличением количества внесенных в почву яиц процент их выявляемости несколько повышается. Однако эти различия в основном статистически незначимы (Я>0,05).
Наибольший процент яиц аскарид (78,3) и власоглавов (70,1) был выделен из песка, наименьший (соответственно 46,5 и 43,4) — из чернозема. Поэтому поправочные коэффициенты, рассчитанные для каждого типа почвы, имеют различные цифровые ?начения. Использование этих коэффициентов позволяет довольно точно определять истинную загрузку почвы яйцами аскарид и власоглавов — наиболее широко распространенных гельминтов в СССР. Для этого необходимо определить тип исследуемой почвы, а затем умножить число обнаруженных яиц при анализе на поправочный коэффициент для этого типа почвы и для яиц данного вида гельминтов.
Выводы
1. При исследовании одной и той же почвы эффективность методов В. А. Гефтер и Е. Ф. Родионовой и Н. А. Романенко оказалась одинаковой, но при этом второй в отличие от первого не требует дополнительного оборудования — пылесоса для продувания почвы воздухом. Эффективность метода В. А. Лугины оказалась меньше, чем 2 первых.
2. Выделяемость яиц аскарид и власоглавов, искусственно внесенных в почву, при использовании метода Н. А. Романенко при прочих равных условиях зависит от типа исследуемой почвы.
3. Посредством умножения поправочных коэффициентов, рассчитанных для 8 типов почвы, на найденное количество при анализе методом Н. А. Романенко яиц аскарид и власоглавов можно определить истинную загрязненность исследуемого типа почвы яйцами указанных гельминтов.
ЛИТЕРАТУРА. БрудастовА. Н. Труды Узбекского научно-исслед. ин-та экспериментальной мед. паразитологии и гельминтологии. Ташкент, 1969, т. 6, с. 72. — В а с и л ь к о в а 3. Г., Г е ф т е р В. А. Мед. паразитол., 1948, № 2, с. 139. — ГефтерВ. А., Родионова Е. Ф. Там же, 1968, № 6, с. 727. — ЛугинаВ. А. Там же, с. 730. — Романенко Н. А. Там же, № 6, с. 728. — Савченко Л. П., Б у ц Ф. И., Полова Л. М. Там же, 1972, № 3, с. 363. — Тимошин Д. Г., К и -я ш к о Н. Т. Труды Ин-та мед. паразитологии и тропической медицины им. Е. И. Мар-циновского. М., 1959, с. 571. — Фил и'п ч е н к о Т. Г., Б а й р и т Ф. А. В кн.: Вопросы краевой эпидемиологии и гигиены. Фрунзе, 1969, с. 155.
Поступила 27/XI 1973 г.
УДК 613.287:613.27:646.151-07«
Р. В. Швейкина
ОПРЕДЕЛЕНИЕ ЙОДА В МОЛОКЕ
Свердловский сельскохозяйственный институт
Сравнительное изучение методов определения йода — объемного йодо-метрического, фотометрического — с предварительной экстракцией хлороформом, толуолом, кинетического цериймышьяковистого, нитритно-ро-данидного и хроматографического (М. 3. Вылегжанин; М. М. Дмитричен-ко; М. А. Драгомирова; Г. Ф. Проскурякова и соавт.) показало, что наибольшей чувствительностью обладают кинетические методы, которые дают возможность определять нанограммовые количества йода, это позволяет значительно сократить размеры проб, что в свою очередь сказывается на уменьшении времени, затрачиваемого на предварительную обработку материала. Для контроля содержания йода в продуктах питания необходимы точные чувствительные методы определения. В связи с этим мы применили для определения йода в молоке кинетический метод, основанный на реакции окисления роданида калия нитритом натрия в присутствии азотной кислоты:
гСЫБ- + 31МО~ + ЗКО^" + 2Н+ = 2СЫ~ + 250^~ + 6ЫО + 2НгО.
Эта реакция катализируется йодид-ионом. Чем больше находится в реакционной смеси йодида, тем больше скорость реакции, которая регистрируется по изменению окраски. При смешивании растворов роданида калия, нитрита натрия, железо-аммонийных квасцов в азотной кислоте и йодида калия появляется красная окраска, обусловленная образованием роданида железа. По мере окисления роданида окраска бледнеет и тем быстрее, чем больше присутствует йодида калия, катализирующего реакцию. Чувствительность метода составляет 1 иг/мл.
Используемые реактивы: 1. 30 и 3% растворы карбоната калия; 2. 0,006М раствор роданида калия; 3. 0,3 М раствор нитрита натрия; 4. 0,2 М раствор железо-аммонийных квасцов в 2Ы растворе азотной кислоты.
Методика состояла в следующем. В тигель наливали определенный объем молока (1 мл), добавляли 0,1 мл 30 % раствора карбоната калия и ставили в сушильный шкаф. После высушивания тигли переносили в муфель и пробы озоляли при температуре 480° в течение 30 мин, после охлаждения смачивали золу тремя каплями воды и снова высушивали в шкафу и далее повторяли озоление в муфеле. После полного сжигания тигли переносили в эксикатор. Из охлажденных тиглей остаток переносили в центрифужные