CC BY
35
СРАВНИТЕЛЬНАЯ ОЦЕНКА ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТИ ЦНС ОРГАНИЗМА ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫХ ЖИВОТНЫХ К ВОЗДЕЙСТВИЮ НЕКОТОРЫХ ПСИХОТРОПНЫХ ПРЕПАРАТОВ НА ФОНЕ ХРОНИЧЕСКОЙ АЛКОГОЛЬНОЙ ИНТОКСИКАЦИИ В ХРОНОФАРМАКОЛОГИЧЕСКОМ ЭКСПЕРИМЕНТЕ
Е.В. Филиппова, канд. мед. наук, ассистент Н.В. Изможерова, д-р мед. наук, заведующая кафедрой Л.П. Ларионов, д-р мед. наук, профессор О.В. Коломиец, ассистент
Уральский государственный медицинский университет (Россия, г. Екатеринбург)
DOI: 10.24411/2500-1000-2019-11845
Аннотация. В хронофармакологическом эксперименте рассмотрено действие трех препаратов в комбинациях на поведение экспериментальных животных, подвергнутых хронической алкогольной интоксикации. Выявлено снижение порога чувствительности к электрическому раздражению и длительности агрессивной реакции на фоне применения депримирующих средств и повышение данных показателей при комбинации данных препаратов с антиоксилантом. Показано десинхронизирующее дейтвие антиоксиданта на поведенческие реакции лабораторных животных в течение двух суток, что свидетельствует о выраженном адаптационном влиянии.
Ключевые слова: хронофармакология, хронический алкоголизм, Феназепам, Дроперидол, Мексиприм.
Хроническая алкогольная интоксикация характеризуется высокой степенью осложнений со стороны сердечнососудистой, нервной систем, печени и желудочно-кишечного тракта [1]. Лечение сопутствующих заболеваний не будет эффективным без избавления пациента от абстинентного синдрома, возникающего при прекращении употребления алкоголя [2]. На сегодняшний день имеется недостаток эффективных методов фармакотерапии и исследований в рамках данной проблемы [3]. В показаниях к применению антиоксидантных препаратов указан алкогольный абстинентный синдром с преобладанием неврозоподобных и вегетативно-сосудистых расстройств, однако данная группа препаратов не используется в клинической практике при лечении данного заболевания, в связи с чем существует дефицит официальной информации об эффективности этих препаратов [4]. Согласно официальным источникам, Этилметил-гидроксипиридина сукцинат (Мексиприм®) повышает резистентность организма к воздействию экстремальных факторов, в том числе к электрошоку и кисло-родзависимым патологическим состояни-
ям [5]. Действие препарата проявляется в снижении проявлений абстинентного синдрома [6], одним из проявлений которого является повышенная агрессия.
В ходе эксперимента нами было рассмотрено действие двух препаратов на поведенческие реакции крыс для наиболее эффективного подбора оптимальных комбинаций препаратов, применяемых в лечении больных с алкогольной зависимостью и купировании абстинентного синдрома.
Цель исследования: выявить особенности чувствительности центральной нервной системы в виде оценки реакций агрессии лабораторных крыс к действию депримирующего и антиоксидантного препаратов, а также их комбинации, на фоне хронической алкогольной интоксикации путем хронофармакологического эксперимента.
Исследование одобрено локальным этическим комитетом ФГБОУ ВО УГМУ Минздрава России (19.02.2017 г.). Статистическая обработка полученных экспериментальных данных проводилась с использованием пакета программ Statistica 10.0. Для анализа данных использовалась проверка типа распределения данных с помо-
щью теста Шапиро-Уилка и непараметрические тесты: для зависимых выборок -критерий Вилкоксона; для независимых выборок - и-критерий Манна-Уитни. Уровень значимости в указанном исследовании прини-мался при значении р < 0,5. Для исследования параметров биологического ритма использовались компьютерные программы для косинор - анализа «Cosmor» 3.1, «Асго» 3.5, разработанные профессором университета Бойсе (США) К Яейпей! [7]. Уровень значимости принимался при значении р < 0,5.
Материалы и методы исследования. Исследование проведено на 220 белых половозрелых лабораторных крысах (виварий ФГБОУ ВО УГМУ Минздрава России, г. Екатеринбург) - самцах чистой линии с массой 250-400 г, содержащихся в условиях лабораторного вивария с круглосуточным доступом к воде и корму. Группам животных, включенных в исследование, кроме контрольной группы, для моделирования хронической алкогольной интоксикации вместо воды в поилки заливали 12% водный раствор этилового спирта в течение 20 дней [7]. Препараты, использовавшиеся в ходе исследования: Бромдигидро-хлорфенилбензодиазепин, в дальнейшем Феназепам®, (раствор для внутривенного и внутримышечного введения 1 мг/мл; ампула 1 мл; производитель: Эллара ООО, Россия); Эмоксипина сукцинат, в дальнейшем Мексиприм® (раствор для внутривенного и внутримышечного введения 50 мг/мл; ампула 2 мл; производитель: Московский эндокринный завод, Россия). Препараты вводили крысам внутрибрю-шинно в течении 10 дней по 1 мл 0,3% растворов (дозы были подобраны в соответствии с используемыми в клинике из перерасчета на поверхность тела животного) [5]. После проведения насыщения препаратами крысам проводили тест раздражения электрическим током, предназначенной для измерения реакции агрессии под действием лекарственных препаратов в ответ на физический фактор раздражения [7]. Крысы помещались в клетку, дно которой проводит ток. С пульта управления давалось напряжение, начинающееся от 10 V, постепенно нараставшее до уровня, когда крысы проявляли агрессию по
отношению друг к другу (сцепление животных в стойке на задних лапах). Фиксировали показатель напряжения тока, вызывавшего агрессивную реакцию, в вольтах и длительность стойки в секундах. Эксперимент повторяли каждые 4 часа в течение двух суток. Все крысы были поделены на 6 групп, по 2 пары, путем стратифицированной рандомизации (стратификация по полу, возрасту и весу). Всего, в течение двух суток, исследовали 6 пар животных, поочередно помещаемых в электрическую установку, интервал для каждой пары 16 часов, в соответствии с протоколами ведения хронобиологических исследований [8]. Принципом постановки животных в пару было обязательное условие их проживания в разных клетках, при этом во время последующего помещения животных в экспериментальную установку пары ротировались для исключения привыкания.
Группы сравнения:
1. Интактные крысы (контрольная группа) в количестве 24 (на стандартном режиме содержания, без введения алкоголя и лекарственных средств);
2. Животные с моделированным хроническим алкоголизмом в количестве 34 (предоставление 12%-ного раствора этанола в течение 20 дней);
3. Животные с применением Мекси-прима® на фоне модели хронического алкоголизма в количестве 32 (предоставление 12%-ного раствора этанола в течение 20 дней и последующее внутрибрюшинное введение Мексиприма® в течение 10 дней)
4. Крысы с применением Феназепама® на фоне хронической алкоголизации (36 экземпляров);
5. Крысы с применением Феназепама® и Мексиприма® на фоне хронической алкоголизации (32 животных).
Результаты исследования и их обсуждение. Проведенные экспериментальные исследования показали, что изучаемые психотропные препараты, оказывают значимое воздействие на биологические ритмы организма животных, подвергнутых хронической алкогольной интоксикации (рис. 1). При проведении косинор-анализа по данным, полученным при эксперименте, были построены косинусоиды предполагаемых биологических ритмов.
Сравнительная характеристика длительности агрессивной реакции животных
\
\X — 4
f
17:00 21 00 1:00 5:00 900 13:00 17:00 2100 1 50 SlOO
Часы помещения животных в экспериментальную камеру (время <л~гок)
'йнтактные —я— 12%спир1 (Фемазепам) * -■— 12Чспирт(Ф«л«епам+Мелсиприм)* "-раО.Об
Рис. 1. Сравнительная характеристика длительности агрессии у животных, принимавших Феназепам® и комбинацию Феназпам®+Мексиприм® на фоне хронической алкогольной интоксикации. (Цвет косинусоиды соответствует цвету группы исследуемых животных)
В ходе эксперимента выявлена способность Мексиприма стабилизировать состояние нервной системы при хронической алкоголизации и приеме депримирующих средств, о чём свидетельствует повышение величины напряжения, вызывающего агрессивную реакцию. Таким образом, Мек-сиприм® оказывает прямое физиологическое влияние на чувствительность лабораторных животных к электрическому раздражению, понижая их агрессивную готовность и приближая поведение к нормальному (у интактных животных).
Эффект Феназепама® оказался хронос-пецифическим (рис. 1), так как степень изменения длительности агрессивной реакции крыс в разные часы суток существенно не различалась. Феназепам® не изменил структуру ритма агрессии крыс, хотя величина мезора становится достоверно ниже интактной группы (на 42%), а также группы, получавшей комбинацию Феназе-пама® с Мексипримом® на фоне хронической алкоголизации, (на 25%). Добавление Мексиприма® к Феназепаму® у крыс на фоне хронической алкогольной интоксикации привело к десинхронизации периодов между положительными (акрофазами) и отрицательными (батифазами) экстремумами, которые начинают составлять 13 часов, что свидетельствует о его адаптоген-ном влиянии и противодействии синхро-
низирующему эффекту Феназепама®, как депримирующего препарата, что хорошо прослеживается при проведении косинор-анализа.
Наблюдается подъем мезора у крыс с алкогольной интоксикацией на комбинации Феназепама® и Мексиприма® относительно крыс с алкогольной интоксикацией без применения Мексиприма®. Также наблюдается смещение акрофаз по цир-кадному ритму у крыс, подвергнутых хронической алкогольной интоксикации, принимавших комбинацию Феназепама® и Мексиприма®, приближая их к показателям интактной группы, в сравнении с ак-рофазами группы животных на одном Фе-назепаме®. У группы животных после приема Феназепама® на фоне хронической алкогольной интоксикации прослеживается практически полное отсутствие волнового ритма (кроме первого экстремума в 21:00ч., который, в свою очередь, может быть связан с переносом животных в новую локацию и активацией адаптогенных реакций организма), и его нахождение на примерно одном уровне в течении суток [9].
Выводы:
1. 10-тидневный курсовый прием препарата Феназепам способствует достоверному снижению длительности проявления агрессивной реакции у группы животных,
подвергнутых хронической алкоголизации, назепама® по сравнению с группой, при-по сравнению с интактной группой нимавшей комбинацию Феназе-(р<0,05), кроме того, обнаружено сниже- пам®+Мексиприм® без наличия корреля-ние мезора ритма у группы после приема ции по времени суток (р<0,05); препарата на 42% (р<0,05); 3. У исследуемой группы после приема
2. Установлено снижение порога чувст- Феназепама® произошло нарушение вол-вительности к элетрическому току и по- нового суточного ритма, что проявилось в вышение агрессивной готовности у груп- наличии лишь одного экстремума в тече-пы алкоголизированных крыс на фоне Фе- ние исследуемого времени.
Библиографический список
1. Верткин А.Л. Особенности клинического течения и фармакотерапии алкогольной болезни печени, сердца и головного мозга у больных с соматической патологией // A^. Верткин, A.C Скотников, Е.Ю. Тихоновская, A.A. Скворцова // Medical Journal Лечащий врач. - [Электронный ресурс]. - Режим досутпа: http://www.lvrach.ru/2009/07/10445B01/ (04.03.2015)
2. Гофман А.Г. Клиническая наркология. - 2012.
3. Агибалова Т.В. Федеральные клинические рекомендации по диагностике и лечению синдрома зависимости // Т.В. Aгибалова, В.Б. Aльтшулер, M.A. Винникова. - 2014.
4. Мостбауер Г.В. Aлкогольная кардиомиопатия. Лекция // Therapia. - 2010. - № 1 (43).
- С. 22-26.
5. Регистр Лекарственных Средств России, 2017. - [Электронный ресурс]. - Режим досутпа: https://www.rlsnet.ru/tn_index_id_36387.htm
6. Костенко Е. В. Опыт применения антиоксидантной терапии (мексиприм) при лечении больных в раннем восстановительном периоде ишемического инсульта полушарной локализации // Е.В. Костенко, Л.В. Петрова, KA. Зайцев // Русский медицинский журнал.
- 2010. - Т. 18, № 22. - С. 1-5.
7. Волчегорский И.А. Экспериментальное моделирование и лабораторная оценка адаптивных реакций организма. - Челябинск, 2016.
В. Арушанян Э.Б. Хронофармакология на рубеже веков. - Ставрополь, 2005. - 575 с.
9. Death highest in heart failure patients admitted in January, on Friday, and overnight // European Society of Cardiology (ESC) - 2013. - [Электронный ресурс]. - Режим досутпа: http://www.sciencedaily.com (15.03.2015).
COMPARATIVE EVALUATION OF THE CENTRAL NERVOUS SYSTEM SENSITIVITY OF AN EXPERIMENTAL ANIMAL ORGANISM TO THE EXPOSURE OF SOME PSYCHOTROPIC DRUGS BACKGROUND OF CHRONIC ALCOHOL INOXICATION IN CHRONOPHARMACOLOGICALLY EXPERIMENTALLY
E.V. Filippova, Candidate of Medical Sciences, Assistant
N.V. Izmozherova, Doctor of Medical Sciences, Head of Department
L.P. Larionov, Doctor of Medical Sciences, Professor
O.V. Kolomiets, Assistant
Ural State Medical University
(Russia, Ekaterinburg)
Abstract. In the chronopharmacological experiment, the effect of three drugs in combinations on the behavior of experimental animals subjected to chronic alcohol intoxication was considered. A decrease in the threshold of sensitivity to electrical stimulation and the duration of the aggressive reaction against the background of the use of depriming agents and an increase in these indices with a combination of these preparations with an antioxidant have been revealed. A decrease in the threshold of sensitivity to electrical stimulation and the duration of the aggressive reaction against the background of the use of depriming agents and an increase in these indices with a combination of these preparations with an antioxidant have been revealed.
Keywords: chronopharmacology, chronic alcoholism, Phenazepam, Droperidol, Mexiprim.
