CC BY
24
Лггература
1. Науменко С. В. Cnoci6 тдвищення репродуктивно! здатност KHypiB / С. В. Науменко // Проблеми зооiнженерil га ветеринарно! медицини: з6. наук. праць ХДЗВА. - Харшв, 2007. - Вип. 15 (40), Ч. 2, Т. 1. - С. 270-274.
2. Науменко С. В. Ретинолдефщитна гшопотенщя у самщв га розробка способу профшактики / С.В. Науменко // Проблеми зооiнженерil та ветеринарно! медицини: зб. наук. праць ХДЗВА. - Харшв, 2009. - Вип. 19, Ч. 2, Т. 2. - С. 279-285.
3. Кошевой В. П. Проблеми ввдтворення овець i из та шляхи ix виршення / В. П. Кошевой, П. М. Скляров, С. В. Науменко; за заг. ред. В.П. Кошевого. - Х.-Д.: Гаматя, 2011. - С. 9-135
4. Ввдтворення сшьськогосподарських тварин: навчальний поабник // Г. Г. Харута, М. В. Вельбiвець, С. С. Волков та ш. - Бша Церква, 2011. - 328 с.
5. Целищев Л. И. Практическая ветеринарная андрология. - М., Колосс, 1982. - 176 с.
Стаття надшшла до редакцИ 17.09.2015
УДК 619:616.99;636.4
Пеленьо Р. А., к.вет.н. ©
Льб1еський национальный университет ветеринарног медицини та б1отехнологт 1мен1 С.З. Гжицького, вул. Пекарська, 50, м. Льв1в, 79050, Украгна ЗДАТН1СТЬ М1КРООРГАН1ЗМ1В ДИСТАЛЬНОГО В1ДД1ЛУ КИШЕЧНИКА ПОРОСЯТ ДО ФОРМУВАННЯ Б1ОПЛ1ВОК ЗА 1НВАЗ11 КИШКОВИМИ ПАРАЗИТАМИ
У статтг наведено результати дослгдження впливу кишкових паразитов на здаттсть мгкрооргатзмгв дистального вгддту кишечника формувати б1опл1вку. Встановлено, що твазй поросят асоц1ац1ею аскарисгв, трихурусгв та езофагостом зумовлюе вгроггдне зниження здатностг бюплгвкоутворення, у Lactobacillus spp. (р<0,01) та Eubacterium spp. (р<0,05), асоц1ац1ею паразитов у складг гзоспор, еймерш та балантидш - у Eubacterium spp. (р<0,001), Bifidobacterium spp. (р<0,01), Prevotella spp. (р<0,05), а аскарисами, еймер1ями та балантидгями - у Bifidobacterium spp., Eubacterium spp., Prevotella spp., Propionibacterium spp., Lactobacillus spp. (р<0,001) i лактозопозитивних негемолтичних штамiв E. coli (р<0,01), порiвняно iз мжрооргатзмами видтеними iз дистального вiддiлу кишечника нетвазованих поросят. Вiрогiдно вищi, порiвняно з контролем, показники коефщента бiоплiвкоутворення за асоцшованог нематодозног твазй були у Citrobacter spp., Klebsiella spp., Staphylococcus spp. (р<0,001), Candida spp. (р<0,01), за протозоозног - у Citrobacter spp., лактозонегативних гемолтичних штамiв E. coli, Klebsiella spp., Staphylococcus spp. (р< 0,001), Clostridium spр. (р<0,01) i E. coli (р<0,05), та за змшаног - у Citrobacter spp., лактозонегативних гемолтичних штамiв E. coli, Klebsiella spp., Staphylococcus spp. (р<0,001), Clostridium spр., Fusobacterium spp., E. coli, Candida spp. (р<0,01), Bacteroides spp., Peptostreptococcus spp., Enterococcus spp. (р<0,05).
Ключов'1 слова: умовно-патогенна мжрофлора, змшана iнвазiя, протозоозна iнвазiя, нематодозна iнвазiя, коефщент бiоплiвкоутворення, мжрофлора.
УДК 619:616.99;636.4
Пеленьо Р. А., к.вет.н.
Львовский национальный университет ветеринарной медицины и биотехнологий имени С.З. Гжицкого, ул. Пекарская. 50, г. Львов, 79050, Украина СПОСОБНОСТЬ МИКРООРГАНИЗМОВ ДИСТАЛЬНОГО ОТДЕЛА КИШЕЧНИКА ПОРОСЯТ К ФОРМИРОВАНИЮ БИОПЛЕНОК ПРИ ИНВАЗИИ КИШЕЧНЫМИ ПАРАЗИТАМИ
В статье приведены результаты исследования влияния кишечных паразитов на способность микроорганизмов дистального отдела кишечника формировать
© Пеленьо Р. А., 2015
166
биопленку. Установлено, что инвазирование поросят ассоциацией аскарисов, трихурусов и эзофагостом приводит к достоверному снижению способности биопленкообразования в Lactobacillus spp. (р <0,01) и Eubacterium spp. (р <0,05), ассоциацией паразитов в составе изоспор, эймерий и балантидий - в Eubacterium spp. (р <0,001), Bifidobacterium spp. (р <0,01), Prevotella spp. (р<0,05), а аскарисамы, эймериями и балантидиями - в Bifidobacterium spp., Eubacterium spp., Prevotella spp., Propionibacterium spp., Lactobacillus spp. (р<0,001) и лактозоположительных негемолитических штаммов E. coli (р<0,01) по сравнению с микроорганизмами, выделенными из дистального отдела кишечника неинвазированих поросят. Вероятновыше, в сравнении с контролем, показатели коэффициента биопленкообразования при ассоциированной нематодозной инвазии были в Citrobacter spp., Klebsiella spp., Staphylococcus spp. (р <0,001), Candida spp. (р <0,01), при протозоозной - в Citrobacter spp., лактозонегативных гемолитических штаммов E. coli, Klebsiella spp., Staphylococcus spp. (р <0,001), Clostridium spр. (р <0,01) и E. coli (р <0,05), и при смешанной - в Citrobacter spp., лактозонегативных гемолитических штаммов E. coli, Klebsiella spp., Staphylococcus spp. (р <0,001), Clostridium spр., Fusobacterium spp., E. coli, Candida spp. (р <0,01), Bacteroides spp., Peptostreptococcus spp., Enterococcus spp. (р <0,05).
Ключевые слова: условно-патогенная микрофлора, смешанная инвазия, протозоозная инвазия, нематодозная инвазия, коэффициент биоплёнкообразования, микрофлора.
UDC 619:616.99;636.4
Peleno R.A.
Lviv National University of Veterinary Medicine and Biotechnologies named after S. Z. Gzhytskyj Pekarska str. 50 Lviv, 79050, Ukraine THE ABILITY OF MICROORGANISMS IN DISTAL INTESTINE OF PIGLETS BEFORE BIO FILMS FORMATION AT THE INVASION WITH
INTESTINAL PARASITES
The article deals with the results of the search of the intestinal parasites influence on the ability of microorganisms of distal intestine to form bio film. It was established that pigs invasion with association of roundworm, tryhuroz and esophagitis causes the reliable reduced ability of biofilm formation, in Lactobacillus spp. (p <0.01) and Eubacterium spp. (p <0.05), an association composed of parasites in the content of izospor, eymeria and balantidia - in Eubacterium spp. (p <0,001), Bifidobacterium spp. (p <0,01), Prevotella spp. (p <0.05), and roundworm, eymeria and balantidia - in Bifidobacterium spp., Eubacterium spp., Prevotella spp., Propionibacterium spp., Lactobacillus spp. (p <0.001) and lactose positive hemolytic strains of E. coli (p <0.01) compared to the microorganisms excreted from the distal intestine non-infested piglets. Probably higher compared with the control, coefficient of performance of bio film formation at associated nematodosiss invasion were in Citrobacter spp., Klebsiella spp., Staphylococcus spp. (p <0,001), Candida spp. (p <0.01) for protozoozic - in Citrobacter spp., lactose negative hemolytic strains ofE. coli, Klebsiella spp., Staphylococcus spp. (p <0,001), Clostridium spr. (p <0.01) and E. coli (p <0.05), and for mixed - in Citrobacter spp., lactose negative hemolytic strains of E. coli, Klebsiella spp., Staphylococcus spp. (p <0,001), Clostridium spr., Fusobacterium spp., E. coli, Candida spp. (p <0,01), Bacteroides spp., Peptostreptococcus spp., Enterococcus spp. (p <0,05) .
Key words: conditional pathogenic microflora, mixed invasion, protozoosis invasion, nematodosis invasion, coefficient of bio films formation, microflora.
Важливим чинником тдтримання постшносп внутршнього середовища макрооргашзму е заселення травного тракту мшрооргашзмами i И вщносна стабшьшсть. Неповнощнна годiвля, дiя еколопчних i сезонних чинниюв,
167
застосування антибактерiальних препарата i незршсть iMyHHoi' системи у молодих тварин е основними причинами мшробюлопчних порушень у кишечнику i формування осередюв хрошчно1 шфекцп зумовлено1 умовно-патогенними мшрооргашзмами [4]. Сприяючим чинником виникнення та розвитку шфекцшних хвороб е кишковi паразити. За !х впливу вщбуваеться поступове пригнiчення ферментативно! активносп нормофлори, витiснення li представникiв умовно-патогенними та патогенними бактерiями, розвиваеться синдром ендогенно! штоксикацп тощо [2].
Вщомо, що мiкрофлора травного тракту у кишечнику перебувае у двох формах: перша - знаходиться в просвт кишки, або ii ще називають планктонною i друга - пристшкова, яка колонiзyе слизову оболонку [3, 7]. У кшщ ХХ столггтя сформувалось уявлення про особливу форму оргашзацп мiкрофлори, що покривае поверхш слизових оболонок. Це добре оргашзоваш асощаци мiкроорганiзмiв, як формують так званi бiоплiвки, члени спшьноти яких е збалансованi за видовим складом, функщональним розподiлом i перебувають у високогiдратованомy екзополiсахаридно-мyциновомy матрикш, що забезпечуе !м тривалий час виживання в органiзмi за рахунок уникнення деструктивное' ди захисних пристосувань макрооргашзму [5, 8].
Саме тому, проведення дослщжень пов'язаних iз вивченням впливу кишкових паразитiв на здатнють мiкроорганiзмiв, якi населяють кишечник, утворювати бiоплiвкy е актуальними, а одержат результата мають важливе як теоретичне, так i практичне значення.
Мета дослщження. Метою роботи було вивчити влив асощаци нематод, найпростiших i змшано1 протозоозно-нематодозно1 швазп на здатнють мiкроорганiзмiв дистального вiддiлy кишечника поросят формувати бiоплiвкy.
Матерiал i методики. У експериментах in vitro використовували мшрооргашзми, як були видiленi з мшробоценозу дистального вiддiлy кишечника штанктих поросят i поросят уражених асощащями кишкових паразитiв. За результатами копроскотчних дослiджень вмiстy прямо1 кишки за принципом аналопв було сформовано 4 дослщш групи по вiсiм тварин у кожнш: I група (контрольна) - поросята не уражеш кишковими паразитами; II група - поросята швазоваш асощащею найпростiших (балантидп+еймери^зоспори); III група -поросята iнвазованi асощащею нематод (аскариси+трихуруси+езофагостоми); IV група - поросята уражеш змшаною протозоозно-нематодозною iнвазiею (аскариси+еймерп+балантидп). При формyваннi груп враховували штенсивнють швазп (II) гельмiнтами та найпроспшими, яку визначали методом McMaster [1]. Так, кiлькiсть ооцист балантидш в 1 г калу була 683,9±53,9, еймерiй та iзоспор -597,1±54,2, яець аскарисiв - 570,1±17,1, трихyрyсiв - 138,0±15,4 та езофагостом -177,6±9,5 екземплярiв.
Для вивчення здатностi мiкроорганiзмiв формувати бiоплiвки та визначення 1'х щшьносп використовували стерильнi одноразовi пластиковi чашки Петр^ Внесену у чашки Петрi в об'емi 1,0 см3 добову культури мiкроорганiзмiв у концентрацп 105 КУО/см3, витримували 3 год. за юмнатно1 температури, потiм додавали 5,0 см3 МПБ та шкубували за t° 30 °С протягом 24-48 год. Пюля шкубацп чашки триразово вщмивали фосфатним буфером, висушували та фшсували yтворенi бiоплiвки 96° етиловим спиртом протягом 10 хв. По^м фарбували розчином 0,1 % кристатчного фюлетового протягом 10 хв., знову промивали фосфатним буфером i висушували. У чашки додавали 2,5 см3 96° етилового спирту
168
i добре ïx вщмивали. Вим1рювали оптичну густину змитого розчину спирту спектрофотометрично за довжини xBrai 570 нМ [5].
Здатнють мшрофлори кишечника формувати бiоплiвку ощнювали за величиною коефщента бiоплiвкоутворення (КБПУ), який е спiввiдношенням оптичноï щiльностi дослiджуваноï культури (дослiд) до оптичноï щшьносп поживного бульйону (контроль) i виражали в одиницях (од.). Високий КБПУ свщчить про кращу здатнiсть мiкроорганiзмiв формувати бiоплiвки та ïx вищу щiльнiсть.
Одержанi результати пiддавали статистичнш обробцi, яку проводили методом варiацiйноï статистики з визначенням середнix значень величин i середньо!' похибки. Вiрогiднiсть вiдмiнностей мiж середнiми значеннями тд час проведення аналiзу оцiнювали, використовуючи критерiï Стьюдента (t). Вiдмiннiсть мiж величинами вважали вiрогiдною, коли ймовiрнiсть рiзницi становила р<0,05.
Результати дослщжень. Дослiдження мiкроорганiзмiв, iзольованиx iз дистального вiддiлу кишечника дослiджуваниx груп поросят, показало що усi культури володши здатнiстю утворювати бiоплiвки. Проте, вони рiзнилися мiж собою за коефщентом бiоплiвкоутворення. У таблицi 1 представлеш данi КБПУ облiгатниx анаеробiв, видiлениx iз дистального вiддiлу кишечника поросят, уражених рiзного виду iнвазiею.
Таблиця 1
Показники коефiцieнта бiоплiвкоутворення облiгатних aHaepo6iB, видiлених i3 дистального вщдщу кишечника поросят, за pi3Horo _ виду швазн, (од., n=8)_
Р1д м1крооргашзм1в Контроль Вид швази
Протозоозна Нематодозна Змшана
Bifidobacterium spp. 7,1±0,5 5,1±0,4** 6,3±1,2 4,5±0,4***
Bacteroides spp. 4,6±0,3 5,2±0,6 5,3±0,5 6,0±0,5*
Clostridium spр. 2,8±0,2 4,0±0,3** 3,6±0,2 4,3±0,4**
Eubacterium spp. 5,5±0,4 3,4±0,4*** 4,1±0,5* 2,1±0,2***
Fusobacterium spp. 1,0±0,2 1,5±0,2 1,1±0,2 1,7±0,1**
Peptostreptococcus spp. 1,4±0,1 1,6±0,2 1,5±0,1 1,9±0,2*
Prevotella spp. 3,4±0,2 2,8±0,2* 2,9±0,3 2,3±0,2***
Propionibacterium spp. 3,9±0,3 3,1±0,3 3,6±0,4 2,1±0,2***
Примтка: * - р<0,05; ** - р<0,01; *** - р<0,001 З наведених у таблиц даних видно, що о6лiгатнi анаеробш мiкроорганiзми видiленi вiд тварин контрольно! групи за КБПУ розмютилися вщ найвищого до найнижчого у такому порядку: Bifidobacterium spp., Eubacterium spp., Bacteroides spp., Propionobacterium spp., Prevotella spp., Clostridium spр., Peptostreptococcus spp. i Fusobacterium spp.
За асоцшовано! протозоозно!, нематодозно! i змшано! швазп встановлено зниження КБПУ у мiкроорганiзмiв роду Bifidobacterium spp., Eubacterium spp., Prevotella spp. i Propionibacterium spp. та зростання у родiв Bacteroides spp., Clostridium spр., Fusobacterium spp. i Peptostreptococcus spp., порiвняно iз мшрооргашзмами видiленими вiд не швазованих тварин. Зниження КБПУ, порiвняно iз контролем, у Bifidobacterium spp. за протозоозно! швазп становило 28,2%, за нематодозно! - 11,3 i за змшано! швази - 36,6%. У Eubacterium spp. рiзниця становила вщповщно 38,2, 25,5 i 51,8%, у Prevotella spp. - 17,7, 14,7 i 32,4% i Propionobacterium spp. - 20,5, 7,7 i 46,2%.
169
На rai зниження коефщента бiоплiвкоутворення корисно! мшрофлори, за впливу на оргашзм поросят кишкових паразита, нами встановлено зростання вказаного показника, порiвняно iз контролем, у мiкроорганiзмiв роду Bacteroides spp., Clostridium spр., Fusobacterium spp. та Peptostreptococcus spp. Так, зростання КБПУ у бактерш роду Bacteroides spp. за протозоозно! швазп становило 13,0%, за нематодозно! - 15,2% i за змшано! - 30,4%. У мiкроорганiзмiв роду Clostridium spр. зростання становило вщповщно 42,9, 28,6 i 53,6%, у роду Fusobacterium spp. - 50,0, 10,0 i 70,0% i роду Peptostreptococcus spp. - 14,3, 7,1, та 35,7%.
Очевидно, що вiрогiдно вищ^ вщносно контролю, значення коефщента бiоплiвкоутворення у Clostridium spр. (р<0,01) за асоцшовано! протозоозно! та у Bacteroides spp. (р<0,05), Clostridium spр. (р<0,01), Fusobacterium spp. (р<0,01) i Peptostreptococcus spp. (р<0,05) за змшано! протозоозно-нематодозно! швазп пiдвищуе !х шанси на колонiзацiю бiотопу дистального вщдшу кишечника, в порiвняннi з Clostridium spр., Bifidobacterium spp., Eubacterium spp., Prevotella spp. i Propionobacterium spp., що може бути причиною виникнення дисбюзу та розвитку патологiй шлунково-кишкового тракту шфекцшно! етюлоги.
Вплив швазп поросят кишковими паразитами на коефщент бiоплiвкоутворення МАФАнМ iзольованих iз дистального вщдшу кишечника представлено у табл. 2.
Таблиця 2
Показники коефщента бiоплiвкоутворення МАФАнМ, видiлених i3
дистального вiддiлу кишечника поросят, за pi3Horo виду швазп', (од., n=8)
Pig MiKpoopram3MiB Контроль Вид швази
Протозоозна Нематодозна Змшана
Citrobacter spp. 1,1±0,1 3,8±0,4*** 2,7±0,2*** 4 9±0 4***
Enterobacter spp. 3,4±0,4 3,6±0,3 3,4±0,4 3,7±0,5
Enterococcus spp. 2,4±0,3 3,2±0,4 2,9±0,2 3,3±0,3*
E. coli spp. 8,9±0,2 10,1±0,5* 9,1±0,3 10,7±0,6**
E. coli gaKT. «+» reM «-» 5,2±0,5 4,0±0,3 4,8±0,4 3,2±0,3**
E. coli gaKT. «-» reM «+» 3,7±0,4 6,1±0,3*** 4,3±0,4 7,5±0,5***
Klebsiella spp. 1,3±0,2 5,0±0,3*** 4,7±0,2*** 5,6±0,5***
Lactobacillus spp. 6,1±0,5 4,7±0,5 4,1±0,3** 3,9±0,2***
Staphylococcus spp. 1,1±0,1 3,4±0,4*** 3,9±0,2*** 4,8±0,5***
Streptococcus spp. 2,2±0,5 2,9±0,3 2,8±0,2 3,8±0,3
Candida spp. 2,7±0,3 3,4±0,3 3,8±0,2** 3,9±0,3**
Примтка: * - р<0,05; ** - р<0,01; *** - р<0,001
Аналiзуючи наведенi данi видно, що найвищий КБПУ серед дослiджуваних мезофшьних аеробних та факультативних анаеробних мiкроорганiзмiв, iзольованих iз дистального вiддiлу кишечника поросят вшьних вiд гельмiнтiв, був у культур E. coli spp. (8,9±0,2 од.) i Lactobacillus spp. (6,1±0,5 од.), а найнижчим - у культур Citrobacter spp. i Staphylococcus spp. (1,1±0,1 од.). Кшьюсна перевага серед дослщжуваних мiкроорганiзмiв належала бактерiям роду E. coli spp., з яких 58,4% становили лактозопозитивш негемолггичш штами. Однак, зростання КБПУ E. coli spp. вщбулося за рахунок вiрогiдного збiльшення (р<0,001) здатносп утворювати бiоплiвку лактозонегативними гемолiтичними штамами. Так, за асоцшовано! протозоозно! швазп це зростання становило 64,9%, а за змшано! - 102,7%. Найвищий показник здатносп формувати бiоплiвку лактозопозитивними негемолггичними штамами був за змшано! нематодозно-протозоозно! iнвазi! i ця рiзниця, порiвняно iз контролем, становила 38,5% та була вiрогiдною (р<0,01).
170
За асоцшовано! протозоозно!, нематодозно! i змшано! iнвазiй поросят встановлено зниження КБПУ, вiдносно контролю, у бактерш роду Lactobacillus spp., вщповщно на 23,0, 32,8 i 36,1% i зростання здатностi до бiоплiвкоyтворення у мiкроорганiзмiв роду Citrobacter spp., Enterobacter spp., Enterococcus spp., E. coli spp., Klebsiella spp., Staphylococcus spp., Streptococcus spp. i Candida spp. При цьому, за змшано! швазп поросят КБПУ виявився вiрогiдно вищим, у бактерш роду Citrobacter spp., Klebsiella spp., Staphylococcus spp. (р<0,001), E. coli spp., Candida spp. (р<0,01) i Enterococcus spp. (р<0,05). За асоцшовано! протозоозно! швазп рiзниця була вiрогiдною у родiв Citrobacter spp. (р<0,001), E. coli spp. (р<0,01), Klebsiella spp. (р<0,001) i Staphylococcus spp. (р<0,001), i за нематодозно! - у Citrobacter spp. (р<0,001), Klebsiella spp. (р<0,001), Staphylococcus spp. (р<0,001) i Candida spp. (р<0,01).
Нео6xiдно вiдмiтити, що за асоцiйовано! протозоозно! iнвазi! КБПУ у Citrobacter spp. виявився вищим на 40,7%, у Enterobacter spp. - на 5,9%, Enterococcus spp. - на 10,3%, E. coli spp. - на 12,1%, Klebsiella spp. - 6,4%, Streptococcus spp. - на 3,6%, та нижчим на 14,7% у Staphylococcus spp. i 11,8% у Candida spp., порiвняно iз аналопчними родами мiкроорганiзмiв, iзольованими iз дистального вщдшу кишечника поросят уражених асощащею нематод.
Вищi значення коефщента бiоплiвкоyтворення представникiв умовно-патогенно! мiкрофлори свiдчить про !х персистенцiю у дистальному вiддiлi кишечника поросят уражених кишковими паразитами, що приводить до iмyнниx порушень, розладiв процесiв о6мiнy речовин i проявляеться характерною симптоматикою.
Висновки.
1. Ураження поросят асоцiацiею нематод, найпроспших та змiшаною нематодозно-протозоозною iнвазiею зумовлюе зниження коефiцiентy 6iоплiвкоyтворення у мiкроорганiзмiв роду Bifidobacterium spp. вiдповiдно на 28,2, 11,3 та 36,6%, Eubacterium spp. - 38,2, 25,5 i 51,8%, Prevotella spp. - 17,7, 14,7 i 32,4% i Propionobacterium spp. - 20,5, 7,7 i 46,2%, та зростання даного показника у бактерш роду Bacteroides spp. - 13,0, 15,2 i 30,4%, Clostridium spр. - 42,9, 28,6 i 53,6%, Fusobacterium spp. - 50,0, 10,0 i 70,0% i Peptostreptococcus spp. - 14,3, 7,1, 35,7%.
2. Серед МАФАнМ видшених iз дистального вщдшу кишечника поросят швазованих протозоозною, нематодозною та змшаною iнвазiею КБПУ Lactobacillus spp. знижуеться вщповщно на 23,0, 32,8 i 36,1%, вщносно КБПУ Lactobacillus spp видшених iз дистального вщдшу кишечника поросят контрольно! групи, в той час, як вiрогiдно зростае здатнють до бiоплiвкоyтворення умовно-патогенних мiкроорганiзмiв, а саме: за змшано! швазп - у Citrobacter spp., Klebsiella spp., Staphylococcus spp. (р<0,001), E. coli, Candida spp. (р<0,01) i Enterococcus spp. (р<0,05), за протозоозно! - у Citrobacter spp. (р<0,001), E. coli (р<0,01), Klebsiella spp. (р<0,001) i Staphylococcus spp. (р<0,001), i за нематодозно! -у Citrobacter spp. (р<0,001), Klebsiella spp. (р<0,001), Staphylococcus spp. (р<0,001) i Candida spp. (р<0,01).
3. За протозоозно! швазп, порiвняно iз нематодозною, КБПУ виявився вищим у Citrobacter spp. на 40,7%, у Enterobacter spp. на 5,9%, у Enterococcus spp. на 10,3%, у E. coli на 12,1%, у Klebsiella spp. на 6,4% i у Streptococcus spp. на 3,6% та нижчим на 14,7% у Staphylococcus spp. i 11,8% у Candida spp.
Лггература
1. Васильева З. Г. Методы гельминтологических исследований / З. Г. Васильева. - М.: Медгиз, 1995. - 238 с.
2. Козлов С. С. Синдром эндогенной интоксикации у детей, больных смешанными кишечными паразитозами / С. С. Козлов, М. Д. Ахмедова, Н. А. Захидова // Медицинская паразитология и паразитарные болезни. - 2010. - № 1. - С. 17-19.
171
3. Кухтин М. Д. Мшробш бюптвки - явище юнування та захисту MiKpoopraHi3MiB / М. Д. Кухтин // Вет. мед. Украши, 2009. - № 10. - С. 20-21.
4. Романова Ю. М. Биопленки патогенных бактерий и их роль в хронизации инфекционного процесса. Поиск средств борьбы с биопленками / Ю. М. Романова, Л. В. Диденко, Э. Р. Толордава, А. Л. Гинцбург // Вестн. РАМН. - 2011. - №10. - С. 3139.
5. Свдашенко О. I. Бюптвка як особлива форма оргашзацп бактерш та И роль в шфекщйних процесах / О. I. Свдашенко, О. С. Воронкова, О. А. Орокваша, А. I. Вшшков // Вюник проблем бюлоги i медицини. - Выпуск № 3 (103) / том 2 / 2013. - С.36-40.
6. Stepanovic S. A modified microtiter-plate test for quantification of staphylococcal biofilm formation / S. Stepanovic, D. Vurovic, I. Duric, B. Savic // J. Microbiol. Methods. -2000. - Vol. 40. - P. 175-179.
7. Costerton J. W. Biofilm in implant infections: its production and regulation / Costerton J. W., Montanaro L., Aciola C.R // Int. J. Artif. Organs. - 2005. - № 28. - Р. 10621068.
8. Miller M. Quorum sensing in bacteria / M. Miller, B. Bassler // Annu Rev. Microbiol. - 2001. - Vol. 55. - P. 165-199.
Стаття надшшла до редакцИ 17.09.2015
УДК 619:615:5.
nepir Ж. М., к. вет. н., ст. н. с. (E-mail:[email protected]) Ккщв О. С., н. с., Кабанець А. С., м. н. с. ©
Державный науково-досл1дний контрольный институт ветеринарных npenapamie та кормових добавок, м. Львiв, Украгна
ВИЗНАЧЕННЯ КЛАСУ ГОСТРО1 ТОКСИЧНОСТ1 ПРЕПАРАТУ
«БРАВЕКТО» КЛАСИЧНИМ ТА АЛЬТЕРНАТИВНИМ ТЕСТАМИ
У стaттi наведено результати порiвняльного визначення пaрaмeтрiв гострог токсичностi препарату «Бравекто» за допомогою класичного та альтернативного (визначення класу гострог токсичностi) мeтодiв.
Принцип альтернативного (европейського) методу визначення гострог токсичностi грунтуешься на поетапнш процeдурi з використанням мШмальног кiлькостi тварин на кожному етат до^джень, що дозволяе зробити висновок щодо класифжацИ до^джуваног речовини з вiднeсeнням його до одного з розрядiв клайв токсичностi, як визначаються фжсованим DL50 порогових значень.
Установлено, що DL50 препарату «Бравекто» за класичним методом визначення пaрaмeтрiв гострог токсичностi складае 2666,7 мг/кг, а альтернативним — 2500 мг/кг при внутрШньошлунковому введены бшим щурам. Толерантна доза препарату, яка не спричиняла зaгибeлi бтих щурiв за одноразового введення становила 2000 мг/кг.
Альтернативний метод визначення класу гострог токсичностi згiдно OECD тест № 423:2001 1ДТ е eкономiчно вигiднiшим i гумантшим, бо при цьому не мае нeобхiдностi визначення летального результату i для до^ду використовуеться мШмальна юльюсть тварин. На до^дження за класичним методом було витрачено 48 лабораторних тварин, а за альтернативного — всього 6 тварин.
Ключов1 слова: ОЕСД, 1СН, тест №423, класичний метод, альтернативний метод, гостра пероральна токсичтсть, передлетальний стан, фжсована доза, толерантна доза, бравекто, щури.
© Пери- Ж. М., Ккщв О. С., Кабанець А. С., 2015
172
