Спонтанная и индуцированная (in vitro) CD- дифференциация иммунофенотипов лимфоцитов и полиморфно-ядерных нейтрофилов больных с наружными свищами желудочно-кишечного тракта Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

BÍCHMK Украгнсъког жедичног стоматологгчног акадежШ

УДК 616.34-007.274-02+616-097

СПОНТАННАЯ И ИНДУЦИРОВАННАЯ (IN VITRO) CD- ДИФФЕРЕНЦИАЦИЯ ИММУН0ФЕН0ТИП0В ЛИМФОЦИТОВ И ПОЛИМОРФНО-ЯДЕРНЫХ НЕЙТРОФИЛОВ БОЛЬНЫХ С НАРУЖНЫМИ СВИЩАМИ ЖЕЛУДОЧНО-КИШЕЧНОГО ТРАКТА*

Люлько И.В., Косульников С.О.

Днепропетровская государственная медицинская академия, г. Днепропетровск

С целью изучения спонтанной и индуцированной (in vitro) в присутствии интерферона, CaCL2 и гидрокортизона дифференциации лимфоцитов и нейтрофилов обследовано 7 здоровых доноров и 17 больных с наружными свищами желудочно-кишечного тракта. С помощью моноклональных антител исследован субпопуляционный спектр лимфоцитов CD3, CD4, CD8, CD16, CD19, CD25, CD95(FAS) и CD95(FAS)- нейтрофилов, выделенных из крови больных с наружными свищами желудочно-кишечного тракта. Уровень CD3, CD4 экспрессии снижен, а CD8, CD16, CD95 (FAS) был выше у больных. Эффект спонтанной и индуцированной CD- дифференциации обсуждается. Установлено, что у больных с наружными свищами желудочно-кишечного тракта серьезные сдвиги в дифференциации клеток иммунной системы. Важной составной частью лечения является коррекция иммунной системы .

Ключевые слова: свищи желудочно-кишечного тракта, иммунитет, моноклональные антитела.

В сложном патогенезе хирургической инфек- возникновении апоптоза. Обнаружили увеличе-

ции у больных с наружными свищами желудочно-кишечного тракта, осложненными перитонитом и гнойно-некротическим поражением мягких тканей, развитием синдрома полиорганной недостаточности, ведущую роль играет вторичный иммунодефицит [2-5, 9,16,17,19,20]. Проводится изучение иммунных маркеров [5,13.15,20], как прогностических признаков при перитоните и абдоминальном сепсисе, отмечают [15], что апоптоз иммунных клеток не всегда влияет на летальность, однако ранний апоптоз лимфоцитов [17] и снижение пролиферации лимфоцитов [5] ассоциируется с плохим прогнозом исхода заболевания.

Энтеральная недостаточность, обусловленная нарушением микроциркуляции, развитием реперфузионного синдрома, изменения клеточного звена иммунитета, из-за обструкции кишки, наличия перитонита, отягощают состояние и приводят к развитию абдоминального сепсиса [2,3,20]

Исследователи отмечают разнородность данных и широкий диапазон значений параметров иммунитета, в зависимости от распространенности поражения и стадии заболевания [ 9, 1015, 17). Дискуссии подвергается вопрос о критериях применения замещающей и иммуномоде-лирующей терапии [1, 9, 10,12,13]

Такой интерес обусловлен прежде всего наличием теоретических предпосылок. По современным представлениям в основе формирования ПОН у больных в КС лежит синдром системной воспалительной реакции (ССВР) - Systemic Inflammatory Response Syndrome (SIRS) в английской редакции, который представляет собой неспецифический ответ организма на любое повреждающее действие, чаще всего на инфекцию [3, 4, 5, 6, 13, 17].

В модельных исследованиях in vitro и in vivo исследовали роль эндотоксемии при сепсисе в

ние количества апоптозных клеток среди лимфоцитов и эпителиальных клеток желудочно-кишечного тракта [2, 20]. Оценка особенностей дифференциации и апоптоза иммунно-компетентных клеток (ИКК) у больных с наружными свищами желудочно-кишечного тракта (НС ЖКТ) необходима для расшифровки патогенеза иммунодефицита, оптимизации лечения и прогнозирования заболевания.

В последнее время активно проводятся исследования, направленные на изучение явления апоптоза [1, 4- 6, 8-11, 13-15, 16-20], установлен эффект при использовании антиоксидантов [18], применении пептидного комплекса поджелудочной железы при аллоксановом диабете в эксперименте in vivo [6].

Широко используются препараты, созданные на основе глюкокортикоидов для подавления воспалительных и гиперергических иммунных реакций с целью подавления пролиферативного ответа Т-лимфоцитов на активацию [8,14,16]. Поскольку отнюдь не все клетки чувствительны к действию иммуномодуляторов, возникает вопрос о возможности различной интерпретации клеткой однотипного сигнала [10,16,19]. Эндогенным условием развития апоптоза может быть повышение внутриклеточного уровня Са2+, которое моделируется действием кальциевых ио-нофоров [16 ].

В медицинской практике применяют препараты, содержащие кальций, в мембранах клетки функционируют структуры, обеспечивающие вход Са++ в цитоплазму, на В-л экспрессирова-ны рецепторы, формирующие канал для Са++, но механизмы действия Са++ на многие процессы изучены не достаточно. В частности, не известно, каким образом Са++ влияет на дифференциацию и апоптоз ИКК [7]. Неоднородность ответа организма на различные иммуномодуля-торы [1,10,16,19] свидетельствует об избира-

* Исследования выполнены в соответствии с планом научно-исследовательской работы кафедры госпитальной хирургии Днепропетровской государственной медицинской академии, госрегистрация № 0100и000048; финансирование - госбюджет.

Актуальт проблеми сучасно!" медицини

тельности действия препаратов на больных, поэтому исследование экзогенной индукции позволяет уточнить влияние рецепции сигнала, вызывающего развитие дифференциации клеток.

Цель исследования С целью расшифровки патогенеза развития вторичного иммунодефицита у больных с наружными свищами ЖКТ проведено сравнительное изучение спонтанной и индуцированной (in vitro) дифференциации иммунофенотипов лимфоцитов и полиморфно-ядерных нейтрофилов (ПЯН) здоровых лиц и больных с НС ЖКТ. Для получения информации о влиянии экзогенных факторов на дифференциацию ИКК проведено исследование в нагрузочных тестах in vitro при добавлении в среду культивирования лейкинтерферона, CaCL2 или гидрокортизона.

Материалы и методы

Работа проведена на базе областной клинической больницы им. И.И. Мечникова г. Днепропетровска. Оценка уровня иммунофенотипов лимфоцитов (Тл и Вл) и полиморфноядерных нейтрофилов (ПЯН) проведена у 7 практически здоровых людей и 17 больных НСЖКТ. Из них: с диагнозом функционирующая сигмостома - 7 пациентов; тонкокишечный свищ - 8; желудочный свищ - 1; свищ 12-перстной кишки -1. Женщин 5 (средний возраст - 61 ±8), мужчин - 12 (средний возраст 53,1± 6,4).

Фенотипирование лимфоцитов и ПЯН периферической крови больных проведено в тестах розеткообразования с эритроцитами, покрытыми монокпональными антителами (мАТ) к CD рецепторам, экспрессированным на клетках. (Производство Республики Беларусь, МЗРБ, Витебск, регистрационный №67-005,2000г). Исследовано влияние интерферона (IFN), CaCL2 и гидрокортизона на иммунокомпетентные клетки (ИКК) in vitro. (Лейкоцитарный человеческий IFN

(производство Харьков) в 1 ампуле 1000 ME; 10% CaCL2, Гидрокортизон 2,5% производство ЗАО БИОЛЕК, Харьков, Померки, Серия 160305). В среду культивирования препараты вводили в концентрации, достижимой в крови при введении средних терапевтических доз. Время инкубации клеток крови при добавлении в среду лейкинтерферона, хлористого кальция и гидрокортизона составило 30 мин при Т=37°С, в присутствии монокпональных антител - 25 мин.

Статистическая обработка материала проведена методом вариационной статистики с помощью критерия Стьюдента.

Результаты и их обсуждение

Оценивая абсолютное и относительное количество различных популяций Тл можно судить об иммунодефиците по Т- клеточному типу (CD3-3penbie Тл; CD4- Тл хелперы; CD8- Тл киллеры. Об активации иммунной системы по CD25 HLAII) свидетельствует переключение Тх1 на Тх2 ответ (снижение числа Тл и увеличение Вл). Естественные киллеры Tn-CD16- активируют антигензависимую, комплемент опосредованную цитотоксичность, способствуют развитию аутоиммунного ответа. CD95(Fas) - рецептор апоптоза клеток, готовых к "самоубийству" в присутствии лиганд.

Изменения дифференциации иммунофенотипов лимфоцитов по CD рецепторам при контакте с различными лекарственными препаратами, можно расценивать как показатели активации иммунной системы, перенапряжения снижение ответа - гипергию - фазу иммунологического паралича [3-5, 8, 11,13,17].

В табл. 1 представлены результаты исследования уровня иммунофенотипов лейкоцитов у практически здоровых людей и влияния гидрокортизона, CaCL2 или IFN на их дифференциацию в эксперименте in vitro.

Иммуно-фенотипы исходные показатели% у здоровых M±m (N=7) после контакта in vitro с препаратом:

Гидрокортизон% M±m СаС1_2 % M±m Интерферон % M±m

CD3 50,8±0,98 25,3±0,61*4 51,4±1,27 48,8±0,54*4

CD4 35±1,5 25,5±0,9* 1 22,2±0,74*4 22,8±1,76*4

CD8 25,6±0,39 20±0,56* 4 31,2±1,4*î 30,2±1,23*î

CD16 24,4±1,1 21,6±1,074 37,2±3,05*î 21,2±0,62*4

CD19 28,6±0,94 27,7±1,9 45±1,82* î 25,4±0,94*4

CD25 17,4±0,75 21,5±1,0*Т 24,2±2,5* î 20,0±0,8* î

CD95 15,4±0,7 19±0,46* î 20,6±0,56*î 18,8±1,2* î

CD4/CD8 1,36 1,274 0,714 0,744

Примечание - * статистически достоверно по критерию Стьюдента Р<0,05

Анализданных, представленных в табл.1 свидетельствует, что у здоровых лиц гидрокортизон в условиях in vitro достоверно снижает количество иммунофенотипов Т-л CD3, CD4, CD8 и стимулирует экспрессию рецепторов к CD25 и

Сй95. Снижение индекса регуляции до 1,27 происходит за счет уменьшения субпопуляций ТлСй4 и Сй8. Иные особенности влияния на дифференциацию иммунофенотипов лимфоцитов здоровых лиц выявлено при инкубации в

Таблица 1.

Субпопуляционный состав иммунофенотиповлимфоцитов практически здоровых лиц и изменение дифференциации после

инкубации in vitro в присутствии гидрокортизона, CaCL2 или интерферона

BÎCHÈK Укртнсъксп медично1' cmoмamoлoггчнoï академШ

присутствии CaCL2: отмечено статистически достоверное снижение уровня CD4, но увеличение уровня иммунофенотипов Тл - CD8, CD16, т.е., повышается активность киллерных клеток и CD19, CD25 и CD95. Индекс регуляции иммунитета ИРИ снижен до 0,71 за счет уменьшения уровня Т-л хелперов (CD4) до (22,2±7,4)%; исходный- (35+1,5)% и повышения уровня Т-л киллеров (CD8) до (31,2+1,4)% ; исходный показатель - (25,6+0,39)%.

Добавление к среде культивирования лимфоцитов IFN сопровождается достоверным снижением уровня Тл CD3, CD4, CD16, CD19, но увеличением уровня Тл лимфоцитов CD8, CD25 и

Субпопуляционный состав ИККу больных с НС ЖКТ и измеь

CD95. ИРИ снижен до 0,74 за счет уменьшения лимфоцитов (CD4) хелперов и повышения уровня киллеров (CD8).

Общие закономерности изменений дифференциации лимфоцитов заключаются в снижение показателя ИРИ. Экспрессия CD95(Fas) рецептора, обеспечивающего готовность клеток к апоптозу, статистически достоверно усиливается под воздействием всех испытанных препаратов.

В табл. 2 представлены результаты исследования в эксперименте in vitro влияния гидрокортизона, CaCL2 и IFN на дифференциацию Т-л больных с НСЖКТ.

Таблица 2

их дифференциации после инкубации in vitro в присутствии гидрокортизона, CaCL2 или интерферона

Иммуно-фенотип: в% исходные показатели у больных % M±m (n =17) Уровень ИКК больных после контакта in vitro с препаратом:

Гидрокортизон % M±m (n =17) CaCL2 % M±m (n =17) Интерферон % M±m (n =17)

CD3 44.5i1.9241 31,2±1,0*4 34,02±1,7S*4 23,6±07*4

CD4 33± 1,394 2S.4± 1.2*4 27,0±1,6*4 21,6±0,6*4

CDS 34,711,35t1 29.4± 1.35*4 2S± 1,0*4 26,2±3,6*4

CD16 26,4±0,9f 22,4±0,944 19,2±1,S 26,2±1,0

CD19 29,3±1,4f 26,6±1,694 26,0±1,69*4 26,4±1,374

CD25 2811,53 t1 30,6±1,36t* 21,2±1,06*4 26,6±0,964

CD95 30,712,7t1 33,6±1,5t 23,6±1,6*4 27,6±1,72*4

CD4/CDS 0,95 0,96 0,96 0.S2

Примечание:1 различия достоверны по сравнению с нормой

Отмечено снижение количества зрелых CD3-лимфоцитов и хелперов CD4- Тх; увеличивается количество TnCD8 -киллеров и TnCD25. CD95 (Fas) рецептор обнаружен у (30,7+2,7)% лимфоцитов, что в 2 раза больше показателя у практически здоровых людей (табл.1). Характер изменений дифференциации клеток иммунной системы иммунофенотипов CD3,CD4,CD8 Т-лимфоцитов больных в присутствии гидрокортизона, CaCL2 или IFN характеризуется угнетением дифференциации в отличие от реакции лимфоцитов здоровых лиц (табл.1), у которых CaCL2 индуцирует увеличение количества клеток Т-лимфоцитов с маркерами CD8, CD16, CD16, CD19, CD25, CD95(Fas). В отличие от ответа лимфоцитов здоровых лиц, у больных отмечено падение уровня Тл киллеров и цитоток-сических лимфоцитов (CD8, CD19-активированных лимфоцитов), CD25-лимфоцитов с рецептором у ИЛ-2 лимфоцитов (естественных киллеров) и Т-л CD95 (Fas) клеток - апоптозных, готових к "самоубийству" лимфоцитов в присутствии лиганд TNF.

Выявлено 2 типа патогенеза снижения ИРИ в эксперименте in vitro c при исследовании индуцирующего влияния гидрокортизона, CaCL2 и интерферона на дифференциацию иммунофенотипов лимфоцитов здоровых лиц : 1. CD4¿ CD8¿ (гидрокортизон); 2-й тип- CD4¿ CD8|( CaCL2 и интерферон).

В отличие от реакции у здоровых людей,

п.1)

лимфоциты больных с НС ЖКТ отвечают на исследуемые препараты только снижением уровня дифференциации, по первому типу: CD4^ CD8^. Установлен факт снижения уровня экспрессии рецепторов Fas-CD95 в присутствии CaCL2 и интерферона у больных, что может свидетельствовать о снижении способности к адаптации сенсибилизированных клеток в условиях длительной антигенной нагрузки. Реакция на экзогенное индуцирование in vitro Тл у здоровых лиц и у больных различна. Патогенез этих особенностей объясняется сенсибилизацией Тл бактериальными антигенами, продуктами распада собственных тканей в течение длительного периода у больных с НС ЖКТ, в результате перенапряжения иммунной системы способность к адаптации снижена, т.е. стадии гипергии[ [3-5, 8, 11,13,17].

При исследовании эпителия тонкого кишечника у больных сепсисом и в экспериментах на животных обнаружили возрастание числа клеток, подвергшихся апоптозу. Это является одним из факторов, способствующих транслокации бактерий из кишечника в кровоток и возникновению SIRS [2,3, 19].

Особенности дифференциации фенотипов лимфоцитов больных при контакте с различными лекарственными препаратами, можно расценивать как показатель перенапряжения иммунной системы в результате длительного антигенного раздражения. Пораженный кишечник рас-

Актуальт проблеми сучасно! медицини

сматривают как "не дренированный абсцесс".

Тяжесть интоксикации при воспалительных заболеваниях оценивается и по количеству ней-трофилов с маркерами CD95 и морфологическим признакам дегенерации нейтрофилов [8].

При инкубации с препаратами различного механизма действия (гидрокортизон, CACL2, IFN) в эксперименте in vitro (при отсутствии влияния клеточного и гуморального окружения) достоверно снижается экспрессия рецепторов CD, обеспечивающих взаимодействие ПЯН в иммунном ответе. Особое внимание привлекает увеличение уровня ПЯН с рецептором CD95. В норме уровень CD95 нейтрофилов не превышает (10-20)% у больных с НС ЖКТ - (64,8±3,32)% , после контакта с гидрокортизоном падает до (33,3+1,15)% , - СаО_2 (32,6+2,58)% и IFN - до (24,6+3,04)% .Эти изменения соответствуют ги-пергической реакции иммунитета, при истощении резервов организма, иммунодефицитном состоянии, объясняются состоянием аутоинтоксикации [1,8, 16].

При таких показателях степень интоксикации оценивается как сильная интоксикация (от 41 до 80% FAS-CD95 нейтрофилов) [8]. Лигандом молекулы CD95 является TNF, количество которого значительно возрастает при гнойно-воспалительных заболеваниях, с высокой частотой развивающихся при НС ЖКТ. Увеличение процента нейтрофилов с рецептором CD16, связывающих FcIgG, стимулируют активность нативных киллеров, участвующих в удалении некротизированных клеток и клеток организма человека, несущих антигены возбудителя (патогена).

Полученные результаты подтверждают высказывания [4,8] о том, что при симптомах системного воспаления назначение иммуномодулято-ров и, в том числе интерферона, опасно, т.к. нормально функционирующая иммунная система сама максимально активизирует работу и искусственная стимуляция может привести к срыву ее работы, истощению резервов.

Результаты исследования апоптотической активности нейтрофилов согласуются с данными, полученными при исследовании влияния корти-костероидов на апоптозную программу клеток [1]. Нейтрофилы, вступившие на путь апоптоза теряют способность к стимул-индуцированной активности, респираторному взрыву, секреторной дегрануляции. После фазы мобилизации всех систем при выраженном эндотоксикозе наступает дисфункция органов, которая ведет к полиорганной недостаточности Отмечено при этой стадии прогрессирующее развитие вторичного иммунодефицита - иммунодефект, имму-нопаралич [1,3,4,8,11,13,14,16,17]. Течение хирургического сепсиса рассматривается с позиций уровня апоптоза нейтрофилов в условиях воспалительной реакции. Активированные нейтрофилы продуцируют значительное количество цитокинов. Оценка уровня CD95 ПЯН - "рецеп-

торов смерти"на нейтрофилах не выявлено различий по характеру изменений между воздействием гидрокортизона, CACL2 и IFN. Апоптиче-ская перестройка сопровождается снижением функциональной активности, прежде всего к рецептор-зависимым стимулам.

Таким образом, наряду с оценкой иммунного статуса по состоянию лимфоцитов, для оценки резервных возможностей организма могут быть учтен характер изменения рецептора CD95 ПЯН при воздействии экзогенных факторов.

Выводы:

1.У больных с наружными свищами желудочно-кишечного тракта выявлены глубокие нарушения в клеточном составе иммунной системы Тл и ПЯН: снижение уровня зрелых Тл (CD3); увеличение клеток KnnnepoB(CD8, CD 16); рост уровня апоптоза, снижение индекса регуляции иммунной системы - ИРИ.

2. Выявлены различия в дифференциации CD иммунофенотипов лимфоцитов у больных со свищами ЖКТ и здоровых людей. В нагрузочных тестах in vitro установлено 2 типа патогенеза снижения показателя (ИРИ) CD4/CD8 у здоровых лиц: I. TnCD4^TnCD8^ (гидрокортизон); II-й тип - TnCD4^Tn CD8|( CaCL2 и интерферон). Тл больных отвечают на исследуемые препараты только снижением уровня Тл, по первому типу: TnCD4^ и TnCD8^, что свидетельствует об истощении адаптационного резерва. Тест может быть рекомендован для оценки иммунного статуса при подготовке больного к плановой операции.

3.Экспрессия CD95(Fas) рецептора, обеспечивающего готовность клеток к апоптозу, статистически достоверно усиливается под воздействием всех испытанных препаратов у практически здоровых лиц, но снижается у больных со свищами ЖКТ в присутствии CaCL2 и интерферона, что свидетельствует о снижении способности к адаптации, гипергической фазе заболевания.

4. Разнонаправленное действие иммуномоду-ляторов и лекарств свидетельствует о необходимости учитывать иммунный статус при лечении и подготовке больного к проведению реконструктивных плановых операций.

Литература

1. Апоптоз нейтрофилов при моделировании патологии различного генеза. Даурова Ф.Ю., Пасечник A.B., Льянова Д.К. и др. //Аллергология и иммунология. - 2003.-Т.4, №2.-С.74-75.

2. Беленький В.П. Изменение показателей иммунитета у больных с острой спаечной непроходимостью кишечника и возможности ее коррекции //Клш1чна xipyprifl.- 2000.-№3.- С.23-24.

3. Гаин Ю.М., Леонович С.И., Алексеев С.А. Синдром энте-ральной недостаточности при перитоните: теоретические и практические аспекты, диагностика и лечение.-Минск, 2000.- 265с.

4. Гнойный перитонит: патофизиология и лечение /под ред.акад. А.Я. Цыганенко - Харьков: «Контраст», 2002.-280с.

BiCHHK Украгнсъког медичног стоматологгчног академШ

10.

11

12.

Замятин П.Н. прогнозирование исхода сепсиса у больных при полиорганной недостаточности у пострадавших с политравмой //Сепсис. Патогенез, д1агностика та тера-п1я.- XapKiB. -2004.- С. 103-104.

Кайдашев И., Беркало Н., Рябенко В. Антиапоптотичес-кое действие пептидного комплекса поджелудочной железы при аплоксановом диабете //ГЛки.-2003.-№10.-С.75-77.

Клиническая биохимия /Под ред. В.А.Ткачука.-М.:ГЭОТАР /МЭД, 2002.- 360 с.

Лебедев K.A., Понякина И.Д. Иммунная недостаточность (выявление и лечение).-М.: Медицинская книга, Н. Новгород: Издательство НГМД, 2003. - 443с. Лупальцов В.И. Иммунный фактор в возникновении гнойно-септических осложнений острого аппендицита //Кл1н1чна xipyprà.-2003.-№4-5.-C.24. Миминошвили О.И, Ярощак C.B., Украинский В.В. Тактические вопросы в лечении абдоминального сепсиса. Сепсис. Патогенез, д1агностика та терап1я.- 36. Наук. пр .-XapKiB. -2004.- С.154-155.

Парахонский А.П., Абарбарчук А.И. Характеристика иммунных нарушений у больных с гнойно-хирургической инфекцией //Аллергология и иммунология.-2003.- T.4, №2.- С.150.

Пути оптимизации тактики диагностики и интенсивной терапии хирургического сепсиса Гюльмамедов Ф.И., Не-стеренко А.Н., Гюльмамедов П.Ф. и др. Сепсис. Патоге-

Реферат

13.

14.

15.

16.

17.

18.

19.

20.

нез, д1агностика та терап1я.- 36. Наук. пр .- Харк1в.-2004.-С.84-85.

Семенов В.Н., Пасечник И.Н. Апоптоз и его роль в патогенезе критических состояний // Вестник интенсивной те-рапии.-2004.- №1.- С.1-9.

Хаитов P.M., Игнатьев Г.А., Сидорович И.Г. Иммунология: ученик.-М.: Медицина, 2000.-432с. Чуклш C.M., Переяслов A.A. Роль апоптоз при cencnci //Матер1али науково-практичноТ' конференцп. Сепсис. Патогенез, д1агностика та терап1я.-Харк1в.-2004.- С.235-235. Ярилин A.A. Апоптоз. Природа феномена и его роль в целостном организме //http://www.eyenews.ru / 20012004.

Early Circulating Lymphocyte Apoptosis in Human Septic Shock Is Associated with Poor Outcome. Le Tulzo Yves; Pangault, Céline; Gacouin, Arnaud et al. //Shock.-2002.-V. 18 (6). - P. 487- 494.

Hensley K., Robinson K.A., Gabbita S.P. et al. Reactive oxygen species, cell signaling, and cell injury // Free Radic. Biol. Med. -2000. - Vol. 28. - P. 1456-1462. Hotchkiss R.S., Tinsley K.W., Swanson P.E., Karl I.E. Endo-thelial cell apoptosis in sepsis // Crit. Care Med. - 2002. -Vol. 30. - (suppl. 5) - P. S225-S228.

Husain K.D., Coopersmith C.M. Role of intestinal epithelial apoptosis in survival // Curr. Opin. Crit. Care - 2003. - Vol. 9. - P. 159-163.

СПОНТАННА I 1НДУКОВАНА (IN VITRO) CD- ДИФФЕРЕНЦ1АЦ1Я 1ММУНОФЕНОТИП1В Л1МФОЦИТ1В I ПОЛ1МОРФНО-ЯДЕРНИХ НЕЙТРОФ1Л1В ХВОРИХ 3 ЗОВН1ШН1МИ НОРИЦЯМИ ШЛУНКОВО-КИШКОВОГО ТРАКТУ Люлько И.В., Косульников С.О.

Ключов1 слова: нориц1 шлунково-кишкового тракту, ¡муытет, монокпональн1 антитта.

3 метою вивчення спонтанноТ i ¡ндукованоТ (in vitro) в присутносл ¡нтерферона, CaCL 2 i пдрокортизона диференц1ацп л1мфоци-TiB i нейтроф1тв обстежено 7 здорових донор1в i 17 хворих з зовн1шн1ми норицями шлунково-кишкового тракту. В реакц1ях з мо-ноклональними антит1лами досл1джено субпопуляцмний спектр л1мфоцит1в CD3, CD4, CD8, CD16, CD19, CD25, CD95(FAS) и CD95(FAS)- нейтроф1л1в, як1 вид1лен1 ¡з кров1 хворих з зовн1шн1ми норицями шлунково-кишкового тракту. Р1вень CD3, CD4 екс-npecii понижено, a CD8, CD16, CD95 (FAS) у хворих вище. Ефект спонтанноТ та ¡ндукованоТ CD- диференц1ацп обговорюсться. Встановлено, що у хворих з зовн1шн1ми норицями шлунково-кишкового тракту серйозы зсуви в диференц1аци кл1тин ¡мунноТ сис-теми. Важливою складовою частиною лкування е корекц1я ¡мунноТ в1дпов1д1.

УДК 616.711.8-006.2-089

ХИРУРГИЧЕСКОЕ ЛЕЧЕНИЕ БОЛЬНЫХ С НАГНОИВШИМИСЯ ЭПИТЕЛИАЛЬНЫМИ КОПЧИКОВЫМИ ХОДАМИ

Османов P.P., Османов Р.И., Хацкилевич B.C.

Институт неотложной хирургии АМН, г. Харьков

Представлены результаты лечения 148 больных с абсцедирующими эпителиальными копчиковыми ходами (ЭКХ). Показана целесообразность двухэтапного хирургического лечения больных с абсцедирующими ЭКХ: снижение пред- и послеоперационного койкодня, возможность проведения бактериологического исследования раневой микрофлоры на чувствительность к антибиотикам в предоперационном периоде. Использование во время второго этапа хирургического лечения диатермокоагуляции позволяет избежать риска возникновения лигатурных свищей в дальнейшем.

Ключевые слова: эпителиальный копчиковый ход, двухэтапное лечение, койкодень.

Проблема лечения больных с нагноившимися эпителиальными копчиковыми ходами (ЭКХ) не теряет своей актуальности на протяжение ряда лет. Частота встречаемости данной патологии по данным ряда авторов колеблется в пределах 4 - 12,5% [1,4,5], что составляет немалую долю в потоке пациентов с проктологическими болезнями в поликлинической и стационарной практике. Необходимость радикального хирургического лечения не вызывает сомнений [1,2,3,4,5], однако этапность, сроки и объем вмешательства, способ закрытия операционной раны широко обсуждаются в специальной периодической ли-

тературе. Ряд авторов предлагают иссечение абсцедирующих ЭКХ в ургентном порядке, сразу по проведению необходимого комплекса кпини-ко-лабораторного обследования [3,4]. Некоторые специалисты рекомендуют предварительное вскрытие и дренирование гнойного очага с последующим иссечением ЭКХ в «холодном» периоде [1,3,4]. Мнения по поводу способа закрытия раневого дефекта тоже разнятся. К рассмотрению предлагаются различные варианты: подшивание кожных краев к дну раны [6], ушивание раны швами на прокладках [4], различные варианты кожной пластики [2], ушивание со