CC BY
59
Медицинская иммунология 2001, Т. 3, № 4, стр 557-562 © 2001, СПб РО РААКИ
Краткие сообщения
ПОКАЗАТЕЛИ КЛЕТОЧНОГО И ГУМОРАЛЬНОГО ИММУНИТЕТА БОЛЬНЫХ ХРОНИЧЕСКИМ ГЕПАТИТОМ С ПРИ ЛЕЧЕНИИ ИНТЕРФЕРОНОМ-сс
Маммаев С.Н.
Кафедра пропедевтики внутренних болезней, гастроэнтерологии и гепатологии Московской медицинской академии им. И.М. Сеченова
Резюме. Изучена экспрессия антигенов CD3, CD4, CD8, CD 16, CD25 и CD 19 на лимфоцитах периферической крови больных хроническим гепатитом С (ХГС) до и после 12-недельного курса терапии интерфероном-а (IFN-а). У нелеченых больных обнаружили достоверное (р<0,05) уменьшение процента клеток, экспрессирующих антигены CD4, CD 16 и CD25, тогда как процент лимфоцитов CD8+ (р>0,05) и CD19+ (р<0,05) был увеличен по сравнению с контролем. Через 3 мес. от начала терапии IFN-a отмечено достоверное повышение экспрессии CD4 (р<0,05) и CD25 (р<0,01) на лимфоцитах крови у 80 и 85% больных ХГС соответственно по сравнению с показателями до лечения. На фоне эффективного лечения выявлено достоверное (р<0,05) снижение содержания CD8"-лимфоцитов. Экспрессия CD 19 на лимфоцитах уменьшилась, но оставалась повышенной по сравнению с контролем. Полученные результаты свидетельствуют о недостаточности клеточного иммунного ответа у больных ХГС. Динамика субпопуляционного состава Т-лимфоцитов на фоне эффективного лечения IFN-a свидетельствует о важной роли Т-клеточного звена иммунитета в механизмах противовирусной защиты при хронической HCV-инфекции.
Ключевые слова: хронический гепатит С, Т-и В-лимфоциты, CD3, CD4, CD8, CD16, CD19, CD25, апоптоз, интерферо-нотерапия
Mammaev S.N.
PARAMETERS OF HUMORAL AND CELLULAR IMMUNITY
IN IFN-a TREATMENT OF CHRONIC HEPATITIS С
Abstract. We have studied the expression of CD3, CD4, CD8, CD16, CD25 and CD19 on peripheral blood lymphocytes of patients with chronic hepatitis С before and after 12-week course of IFN-a therapy. In patients who received no IFN-a treatment the significant decrease (p<0.05) in CD4, CD 16 and CD25 expression was revealed. Besides that, in this group of patients the percentage of lymphocytes expressing CD8 (p>0.05) and CD 19 (p<0.05) increased, comparing to the control. Three months after the beginning of IFN-a treatment course we found out the significant increase in CD4 (p<0.05) and CD25 (p<0.01) expression on peripheral blood lymphocytes in 80% and 85%o of patients with chronic hepatitis C, respectively, in comparison with the same parameters before treatment. By the end of effective therapy the significant decrease (p<0.05) in CD8+-lymphocytes level was observed. Quantity of lymphocytes expressing CD 19 decreased, but still exceeded the control. The obtained data indicate insufficiency of the cellular immune response inpatients with chronic hepatitis C. The dynamics of T-lymphocyte subpopulation levels during IFN-a therapy indicates an important role of T-cell mediated immunity in antiviral host defence mechanisms against chronic НСV-infection. (Med.Immunol., 2001, vol.3, N 4, pp 557-562)
~ Введение
Хронический гепатит (ХГ), причиной которого в 70% случаев является вирус гепатита С (HCV), как правило, протекает без клинической симптоматики в течение многих лет, а сопутствующее ему поражение печени варьирует от минимальной до среднетяжелой формы гепатита или цирроза печени. Такие особенности хронической HCV-инфекции
Адрес для переписки:
Маммаев Сулейман Нуратдинович - км.н., кафедра пропедевтики внутренних болезней, гастроэнтерологии и гепатологии Московской медицинской академии им. И.М.Сеченова. Москва, 119881, ГСП-3, Погодинская, 5.
Тел.: (095) 248-37-00; факс:(095) 248-36-10.
обусловлены состоянием иммунной системы макроорганизма, от которого зависит течение и исход заболевания.
Иммунные реакции при вирусной инфекции могут быть разделены на врожденные, обусловленные системой комплемента, мононуклеарными фагоцитами и естественными киллерами (МК), и адаптивные, формирующиеся в процессе ответа на специфические антигены. Важнейшая особенность адаптивной системы иммунитета - избирательное вовлечение в иммунный ответ только тех лимфоцитов, которые несут рецепторы, распознающие антигены [5].
С04+ Т-клеточный ответ на вирусные белки является важным механизмом защиты макроорганизма, поскольку СБ4+-клетки -Т-хелперы (ТЬ) стимулируют продукцию антител В-лимфоцитами и активируют СЭ8+ Т-клетки, специфичные для ви-русинфицированных клеток. Для активации ТЬ необходимо образование комплекса Т-клеточного рецептора с вирусным антигенным пептидом, представленным молекулами главного комплекса гистосовместимости (МНС) II класса на поверхностной мембране антигенпрезентирующих клеток (АПК). К последним относятся дендритные клетки, В-лим-фоциты и активированные макрофаги. Пролиферация СБ4+ лимфоцитов сопровождается выработкой цитокинов, участвующих в формировании антиген-специфического клеточного (ТЫ) и гуморального (ТЬ2) иммунного ответа [22].
С08+-цитотоксические Т-лимфоциты (ЦТЛ) играют важную роль в патогенезе вирусных заболеваний. Функцией этих клеток является распознавание антигенов на клеточной поверхности в комплексе с молекулами МНС I класса. НСУ-специфи-ческие ЦТЛ постоянно обнаруживаются у больных ХГ С и могут оказывать повреждающее действие на клетки печени [8].
Выраженные нарушения в иммунной системе при хронической НСУ-инфекции служат предпосылками к применению иммунотерапии, одним из перспективных направлений которой является использование цитокинов, в том числе препаратов интерферона (1РМ). Известно, что ШЫ-а совместно с интерлейкином-12 (1Ь-12) усиливает функции ТЫ [11]. Таким образом, использование 1П\г-а может рассматриваться как патогенетическая терапия ХГ С.
К сожалению, стабильных положительных результатов лечения удается достичь лишь у 20-25% больных ХГ С [13,17]. В связи с этим продолжается изучение механизмов “иммунного ускользания” при хронической НСУ-инфекции и поиск путей повышения эффективности терапии 1РЫ-а.
Цель исследования -изучение спектра поверхностных антигенов Т- и В -лимфоцитов крови у больных ХГ С до и после 12-недельного курса терапии 1РЫ-а.
Материал и методы
Исследования проведены у 25 больных (15 мужчин, 10 женщин) ХГ С в возрасте от 17 до 48 лет (средний возраст 32,5±4,8). Контрольную группу составили 20 здоровых добровольцев из числа студентов и ординаторов ММА им. И.М. Сеченова (средний возраст 25,5±2,3).
Диагноз ХГ устанавливали на основании клинического обследования и общепринятых лабораторно-инструментальных методов исследования. Маркеры HCV в сыворотке крови определяли иммуно-ферментным методом. У всех больных методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) исследовали в крови HCV РНК (HCV RNA).
Морфологическое исследование биоптатов печени проведено 21 (84%) больному ХГ С с определением индекса гистологической активности по Knodell и степени фиброза по Desmet. Исследование поверхностных антигенов CD3, CD4, CD8, CD16, CD25 и CD19 на лимфоцитах периферической крови проводили на проточном цитофлуори-метре (Partec, Германия) с помощью моноклональных антител CD3-, CD4-, CD16-, CD25- FITC и CD8-,CD19-R-PRE (Caltag, США). После установления клинического диагноза всем больным была назначена терапия IFN-a-2b (Интроном А) в дозе 3 млн ME 3 раза в неделю. Изучение экспрессии антигенов на лимфоцитах проводили до начала и после 12-недельного курса интерферонотерапии.
Полученные результаты обработаны статистически по стандартной программе с вычислением достоверности различия по критерию t Стьюдента.
Результаты
Основным клиническим проявлением у большинства исследованных больных ХГ С был астенонев-ротический синдром. При объективном (физическом или ультразвуковом) исследовании у всех больных выявлена незначительная или умеренная гепа-томегалия, как правило, без сочетанного увеличения селезенки. Активность сывороточных транса-миназ была незначительно повышенной (1,5-3 нормы) у 18 (72%) больных, умеренно повышенной (3,5-5 норм) у 7 (28%) больных.
У всех обследованных больных ХГ С в крови обнаружены анти-HCV антитела и HCV RNA, что в совокупности с результатами биохимического исследования крови явилось показанием для назначения IFN-a.
При гистологическом исследовании диагностических биоптатов печени выявлена картина гепатита с минимальной и слабовыраженной активностью воспалительного процесса (3-8 баллов по Knodell) у 67% больных, с умеренной активностью (9-12 баллов) - у 33%.
По степени фиброза печени больные ХГ С раз-
Табл.1. ДИНАМИКА ЭКСПРЕССИИ ПОВЕРХНОСТНЫХ МАРКЕРОВ Т- И В -ЛИМФОЦИТОВ КРОВИ БОЛЬНЫХ ХГ С ДО И ПОСЛЕ 12-НЕДЕЛЬНОГО КУРСА ТЕРАПИИ 1т-сс (х±т)
Группа Обслед. С03,% СР4,% С08,% С04/Сй8 С016,% С019,% С025,%
БольныеХГС до леч.п=25 59,6+1,2 25,3±0,6* 32,5±2,2 0,7±0,2 4,2±0,3* 17,2±3,5* 9,5±1,8*
БольныеХГС пос. леч.п=20 63,9+1,7 37,4+1,1** 21,6+0,4** 1,7±0,5 9,6±1,7 13,8±2,8 32,7±3,3***
Контроль п=20 65,3+1,4 36,5±0,9 24,3±1,3 1,37+0,3 12,7+2,6 8,6+1,3 20,3+2,4
Примечание: *р<0,05 по отношению к контролю, **р<0,05, ***р<0,01 между группами
делились следующим образом: слабый и умеренный фиброз (1-2 балла) обнаружен у 81% больных, у 19% больных была картина тяжелого фиброза (3 балла).
При изучении экспрессии поверхностных антигенов на лимфоцитах крови выявлено снижение СБЗ+, С04+, С016+ и СБ25+ соответственно у 13 (52%), 17 (68%), 18 (72)% и у 21 (84%) больных ХГ С по сравнению с контролем. При этом экспрессия антигенов СБ4, СБ16 и СВ25 достоверно (р<0,05) отличалась от показателей контроля. Исследование экспрессии поверхностного антигена С08+ на лимфоцитах показало значительное, но недостоверное (р>0,05) повышение у 16 (64%) больных ХГ С по сравнению с контролем. Экспрессия антигена С019+ была повышенной у 19 (76%) больных ХГ С и достоверно (р<0,05) отличалась от контрольного уровня (табл.1).
В процессе лечения ГИМ-а 5 больных были исключены из исследования по разным причинам. У остальных 20 больных наблюдалась положительная клинико-лабораторная динамика, что проявлялась нормализацией уровня трансаминаз и исчезновением НСУ ЮМ.
Через 3 месяца от начала терапии 1РЫ-а больных ХГС отмечено повышение экспрессии антигенов СБЗ, СБ4, С016 и СЭ25 у 12 (60%), 16 (80%), 13 (65%) и у 17 (85%) на лимфоцитах крови соответственно по сравнению с показателями до лечения. Экспрессия СБ4 и С0254 достоверно (р<0,05 и р<0,01 соответственно) повысилась по сравнению с исходными данными. Кроме того, на фоне лечения 1ЕМ-а обнаружена положительная корреляция (г=0,48, р<0,05) между экспрессией антигенов СБ4 и СВ25 на лимфоцитах крови (рис.1). Экспрессия антигена СБ8 после 12-недельного курса терапии 1Р1Ч-а достоверно (р<0,05) снизилась у 14 (70%) больных по сравнению с исходным уровнем. Экспрессия СО 19 на лимфоцитах имела тенденцию к снижению, но оставалась повышенной по отношению к контролю.
Обсуждение
Цитотоксический иммунный ответ играет важную роль в защите организма от внутриклеточных патогенов, в том числе вирусов, и включает неспецифическое звено - ЇЧК-клетки, и антигенспецифи-ческое звено адаптивного иммунного ответа - ЦТЛ [5,22].
Активация ЬТК-клеток опосредована секрецией макрофагами 1РЫ-а/Р и особенно 1Ь-12, который способен 100-кратно увеличить активность этих клеток. При этом усиливается адгезивность МК-кле-ток, изменяется экспрессия некоторых мембранных молекул, индуцируется секреция 1РЫ-у [ 6 ].
Реализация функций МК по отношению к клеткам-мишеням обусловлена экспрессией на их поверхности антигена СО 16, который распознает Рс-пор-ции иммуноглобулинов ЄЗ и Єї. Конечным результатом такого распознавания является антителозависимый клеточно-опосредованным цитолиз инфицированных клеток [16,25]. Клетки-эффекторы, которые его осуществляют, называют К-клетками (разновидность МК-клеток).
Достоверно низкая экспрессия антигена СО 16 на лимфоцитах у обследованных нами больных ХГ С по сравнению с контролем может свидетельствовать о слабой противовирусной резистентности мак-
Рис.1. Корреляционная зависимость между экспрессией антигенов СЭ4 и Сй25 на лимфоцитах крови больных ХГС после 12-недельного курса терапии 1РЫ-а (г=0,48, р<0,05).
роорганизма, обусловленной NK-клетками. При хронической HCV-инфекции, вероятно, страдают механизмы активации NK-клеток. Известно, что при ХГ С продукция макрофагами IFN-a и (3 значительно снижена [1]. Сниженная экспрессия CD16 у больных ХГ С, в свою очередь, может определять слабую активность К-клеток и их участие в антителозависимом клеточно-опосредованном цитолизе.
Нормальное функционирование иммунной системы строится на балансе Thl и Th2, основанном на равноценной продукции ими регуляторных ци-токинов. Полученные нами данные о низкой экспрессии CD25 (a-цепи рецептора IL-2) на лимфоцитах согласуются с предположением о нарушении равновесия в активации Thl и Th2 типов по пути доминирования Th2 при хронической HCV-инфек-ции. Постоянная активация лимфоцитов на фоне низкой экспрессии CD25, но обычного содержания IL-4 может привести к постепенному преобладанию ТЬ2-ответа. Кроме того, отмечена способность IL-4, IL-10 подавлять продукцию IL-2 Т-лимфоцитами [19], экспрессию CD25 на Т-лимфоцитах и (3-цепи на В-лимфоцитах и NK-клетках, активность NK [9,18].
Иммунные нарушения при хронической HCV-инфекции в основном отражают дефекты Т-клеточ-ного звена иммунитета, как в количественном, так и в качественном составе Т-клеток. Так, нами выявлена низкая экспрессия CD3 - общего популяционного маркера Т-лимфоцитов у больных ХГС. Достоверно низкая экспрессия молекул CD4 у обследованных нами больных свидетельствует о том, что при хронической HCV-инфекции CD4+ Т -клеточный пролиферативный ответ на антигены HCV является достаточно слабым. Подобные предположения высказываются и другими авторами [10 ].
Известно, что увеличение концентрации IL-lp и туморнекротизирующего фактора-a в сыворотке инфицированных ВИЧ обратно коррелировало с числом СЭ4+-клеток, иммунорегуляторным индексом и пролиферативной активностью лимфоцитов [4]. Высокая концентрация туморнекротизирующего фактора-a в сыворотке крови больных ХГ С обнаружена нами в предыдущих исследованиях [3]. Поскольку биологические характеристики HCV и его взаимодействие с клетками иммунной системы человека во многом сходны с характеристиками и поведением ВИЧ-1 [14], логично предположить, что в ингибировании экспрессии СБ4+-клеток при хронической HCV-инфекции определенную роль играют провоспалительные цитокины.
У большинства больных, инфицированных HCV, ответ ЦТЛ является мультиспецифичным, направленным как на структурные, так и неструктурные белки вируса [15].
Незначительное повышение экспрессии CD8+ Т-лимфоцитов больных ХГ С по сравнению с контро-
лем свидетельствует о том, что ответ ЦТЛ недостаточен для элиминации HCV. Сходные результаты получены и другими авторами [23].
Предполагают существование нескольких путей индукции экспансии и дифференцировки цитоток-сических CD8+ Т-клеток [5,22]. Один из них связан с действием АПК, способных обеспечивать достаточный стимул, чтобы активировать CD8+ клетки и заставить их вырабатывать IL-2-аутокринный фактор, обусловливающий их дальнейшее развитие и пролиферацию. Моноциты, усиленно экспрессирующие CD95 у больных ХГ С [2], возможно, в свою очередь, подвержены апоптозу, что может вести к развитию дефицита АПК и ко-стимулирующих молекул, необходимых для активации С08тклеток.
Допускается, что CD4+ Т-клетки после стимуляции АПК синтезируют большое количество IL-2 (паракринный механизм), которым они обеспечивают умеренно стимулированные СБ8+-клетки. Активация CD8+ Т-клеток и по этому механизму недостаточна, что связано с низкой экспрессией CD4 и CD25 у исследованных нами больных ХГ С.
Существенное прогностическое значение при течении HCV-инфекции имеет отношение количества С04+-лимфоцитов к количеству CD8\ которое в норме превышает единицу, а у больных ХГ С по результатам наших исследований ниже единицы. Изменение количества CD4+ и СБ8+-лимфоци-тов находится в реципрокных взаимоотношениях: лечение IFN-a ведет к повышению количества Т-клеток с фенотипом CD4 и параллельному снижению СВ8-позитивных лимфоцитов.
Повышенная экспрессия CD 19 - общего популяционного рецептора В-лимфоцитов у больных ХГ С свидетельствует об активном участии В-лимфоцитов в противовирусном иммунном ответе. Но вместе с тем их протективная эффективность в условиях персистенции HCV-инфекции ограничена. Причиной “ускользания” от антител, несмотря на повышенную экспрессию CD19, вероятно, является высокая мутационная изменчивость вирусного генома (одновременное существование “квази-штам-мов”), при которой антитела не способны предотвратить инвазию вируса [24].
Увеличение активности NK-клеток и обусловленные ими регуляторные функции под влиянием IFN-
а, по-видимому, происходят через усиление экспрессии CD 16 на их поверхности. Повышение цитотоксичности NK-клеток через активацию перфори-нового пути может быть одним из механизмов противовирусного действия IFN-a при лечении больных ХГ С [21].
После 12-недельного курса лечения IFN-a у больных ХГ С с положительной динамикой клиниколабораторных показателей наблюдали усиление экспрессии CD3, CD4 и С025-молекул, что указывает на важную роль Th 1-клеточного звена имму-
нитета в механизмах элиминации HCV. Положительная корреляция между экспрессией CD25+ и CD4 в процессе лечения IFN-a, вероятно, отражает изменение Thl/Th2 баланса в сторону Thl типа и усиление CD4+T-K/ieT04H0ro пролиферативного ответа на антигены HCV. С этим предположением согласуется отмеченное нами уменьшение экспрессии CD 19 на фоне эффективного лечения IFN-a больных ХГ С. На отсутствие решающей роли В-лимфоцитов в элиминации HCV из организма хозяина свидетельствуют и результаты других клинических исследований [7,12].
Через 3 мес. на фоне успешного лечения IFN-a у обследованных нами больных ХГ С наблюдалось достоверное снижение доли CD8T-K/ieTOK по сравнению с исходным уровнем, что свидетельствует об уменьшении количества Fas-положительных клеток [20].
Благодарности
За коллегиальную помощь и содействие в проведении работы выражаю искреннюю благодарность сотрудникам Гематологического научного центра РАМН и Российской медицинской академии последипломного образования М3 РФ : д.м.н. Лукиной Е.А., д.м.н., проф. Луговской С.А., к.м.н. Почтарь М.Е.
Литература
1. Ершов Ф.И. Система интерферона в норме и при патологии.-М.,1996.
2. Маммаев С.Н., Лукина Е.А., Луговская С.А., Шульпекова Ю.О., Левина А.А., Почтарь М.Е., Ивашкин В.Т. Влияние интерферона-а на цитоки-новый профиль больных хроническим вирусным гепатитом С //Медицинская иммунология. -2000.-Том.2.№4.-С.409-414.
3. Маммаев С.Н., Шульпекова Ю.О., Левина А.А., Лукина Е.А., Ивашкин В.Т. Содержание провоспа-лительных цитокинов и факторов роста в сыворотке крови больных хроническими вирусными гепатитами и циррозом печени // Росс.журн.гастроен-терол. гепатол.колопроктол.-2000.-№5.-С.30-34.
4. Шемшура А.Б., Сизякина Л.П. Особенности макрофагального звена в динамике ВИЧ-инфекции у детей различных возрастных групп // Иммуно-логия.-2000.-№1.-С.13-18.
5. Ярилин А.А. Основы иммунологии. - М. Медицина,-1999.-608 с.
6. Bona С., Bonilla F. Textbook of Immunology.-2-d Ed. - Amsterdam, 1996.
7. Burioni R., Plaisant P., Manzin A., Rosa D., Delli C.V., Bugli F„ Solforosi L., Abrignani S., Varaldo PE., Fadda G., Clementi M. Dissection of human humoral immune response against hepatitis С Virus E2
glycoprotein by repertoire cloning and generation of recombinant Fab fragments // Hepatology.- 1998.-Vol.28.-P.810-814.
8. Chang KM., Reherman B., Chisari FV. Immunopathology of hepatitis C. Springer Semin // Immunopathol.-1997.- Vol.l9.-P.57-68.
9. Chastagner P., Moreau J.Jacgues Y., Tanaka T., Miyasaka M„ Kondo M„ Sugamura K., Theze J. Lack of intermediate-affinity interleukin-2 receptor in mice leads to dependence on interleukin-2-receptor alfa, beta and gamma chain expression for T cell growth // Eur.J.Immunol.-1996.-Vol.26.-P.201-206.
10. Cramp ME., Carucci P., Rossol S., Chokshi S.,Maertens G., Williams P., Naoumov NV. Hepatitis C virus (HCV) specific immune response in anti-HCV positive patients without hepatitis C viraemia // Gut-1999.- Vol.44.-P.424-429.
11. Gutterman J.U. Cytokine therapeutics:lessons from interferon alfa // Proc.nat.Acad.Sci.USA.-1994.-Vol.91.-P.1198-1205.
12. Hempel G., Galle P.R., Lohr H.F. Charakterization of HCV-specific cellular and humoral immune responses referred to virus elimination // J.Hepatology.-2000.-Suppl..№.2.-Vol.32.-P.172.
13. Knolle P., Kremp S., Hohler T., Krummenauer F., Schrmacher P., Cerken G. Viral and host factors in the prediction of response to interferon-alpha therapy in chronic hepatitis C after long-term follow-up // J.Viral.Hepat.-1998.- Vol.5.-P.399-406.
14. Koziel MG., Walker BD. Characteristics of the intrahepatic cytotoxic T lymphocyte response in chronic hepatitis C virus infection. Springer Semin // Immunopathol.-1997.-Vol.l9.-P.69-83.
15. Koziel MG. The role of immune responses in the pathogenesis of hepatitis C virus infection // J.Vir.Hepat.-1997.- Vol.4.-Suppl.2.-P.31-41.
16. Mason L.H., Yagita H., Ortaldo J.R. LGL-l:a potential triggering molecule on murine NK-cells // J.Leukocyte Biol.-1994.-Vol.55.-№3.-P.362-370.
17. Me Hutchison J., Gordon S., Schiff E., Shiffman ML., Lee WM., Rustgi VK., Goodman ZD., Ling MH„ Cort S., Albrecht JK. Interferon alpha-2b alone or in combination with ribavirin as initial treatment for chronic hepatitis C. Hepatitis Interventional Therapy Group // N.Eng.J.Med.-1998.-Vol.339.-P. 1485-1492.
18. Moreau J., Chastagner P., Nanaka T., Miyasaka M„ Kondo M., Sugamura K., These J. Control of the IL-2 responsiveness of B lymphocytes by IL-2 and IL-4 // J.Immunol.-1995,-Vol. 155.-P.3401 -3408.
19. Mosmann T., Sad S. The expanding universe of T-cells subsets: Thl, Th2 and more // Immunol.Today.-1996.-Vol.17.-P. 138-146.
20. Okazaki M., Hino K., Fujii K., Kobayashi N.. Okita K. Hepatic Fas antigen expression before and after interferon therapy in patients with chronic hepatitis C // Digest.Dis.Ski.-1996.-Vol.41.-P.2453-2458.
21.Par G., Par A., Rukavina D., Horanyi M., Szekeres-Bartho J., Hegedus G., Paal M„ Mozsik Gy. Decrease in CD3 CD8 and Vy9/V82 TCR* Tcell count and low perforin expression in associated with an impairment of natural killer cell activity in hepatitis C virus (HCV)infection. The enchancing effects of interferon a 2b treatment // J.Hepatology.-2000.-Suppl..№.2.-Vol.32.-P.93.
22.Roitt I., Brostoff J., Male D. Immunology. Fifth edition.- 1998.-P.423.
23.Reherman B., Chang KM., Me Hutchison JG., Kokka R., Houghton M., Chisari FV. Quantitative
analysis of the peripheral blood cytotoxic T lymphocyte response in patients with chronics hepatitis С virus infection //J.Clin.Invest.-1996.- Vol.98.-P.1432-1440.
24.van Doom LJ., Capriles I., Maertens G., Deleys R., Murray K., Kos Т., Schellekens H., Quint W. Sequense evolution of the hypervariable region in the putative envelope region E2/NS1 of hepatitis С virus is correlated with specific humoral immune responses //J.Virol.-1995.- Vol.69.-P.773-778.
25.Wallace P.K., Howell A.L., Fanger M.W. Role of Fc gamma receptors in cancer and infectious disease // J.Leukocyte Biol.-1994.-Vol.55.-№6.-P.816-826.
поступила в редакцию 23.05.2001 принята к печати 05.07.2001
