CC BY
87
УДК 615.07
СПЕКТР0Ф0Т0МЕТРИЧЕСК0Е ОПРЕДЕЛЕНИЕ ГИПОКСЕНА В СОСТАВЕ ТРАНСДЕРМАЛЬНОГО ПЛАСТЫРЯ
С.О.Лосенкова1 Э.Ф.Степанова2
1)Смоленская государственная медицинская академия
В статье представлены сведения о разработке легко воспроизводимой методики количественного определения гипоксена(поли-(дигидроксифенилен)тиосульфоната натрия) в составе трансдер-мального пластыря.
Пятигорская государственная фармацевтическая академия
Ключевые слова: УФ-спектрофотометрия, трансдермальный пластырь с гипоксеном, спектры поглощения, методика количественного определения.
e-mail: [email protected]
Спектрофотометрия используется в фармацевтическом анализе для установления подлинности лекарственных веществ, определения степени их чистоты, количественного определения. Характеризуется высокой специфичностью, чувствительностью и точностью измерений. Спектрофотометрический метод анализа используют не только для количественного определения ингредиентов в однокомпонентной, но и в многокомпонентной лекарственной форме. Но только в том случае, если спектр поглощения анализируемого лекарственного вещества имеет участок, свободный от наложения светопоглощения мешающих ингредиентов или поглощение мешающих ингредиентов настолько мало, что им можно пренебречь.
Нами предложен состав матричного трансдермального пластыря: субстанции гипоксена (поли(дигидроксифенилен)тиосульфоната натрия), пропиленгликоля-1,2, поливинилпирролидона К 30 (ПВП К 30), натрия метабисульфита, спирта этилового 95%. Гомогенизацию смеси и растворение препарата проводили под воздействием источника ультразвука (ультразвуковой скальпель УРСК-7Н) в течение зосекунд (22-25 кгц). Полученную вязкую пластырную массу наносили на непроницаемую плёнку-подложку с неметаллизированной стороны площадью 25 см? и высушивали при комнатной температуре 24 часа.
Согласно фармакопейной статьи предприятия (ФСП) спектрофотометрический метод анализа используется для идентификации и количественного определения препарата в лекарственной форме (ЛФ). УФ-спектр поглощения водного раствора поли(дигидро-ксифенилен)тиосульфоната натрия измеряется в диапазоне волн 200-380 нм [1].
Для разработки методики спектрофотометрического анализа количественного определения поли(дигидроксифенилен)тиосульфоната натрия в составе трансдермального пластыря в присутствии вспомогательных веществ нами проанализированы электронные спектры поглощения рабочего стандартного образца поли(дигидро-ксифенилен)тиосульфоната натрия, вспомогательных веществ ПВП К-30 BioChemica (поливинилпирролидон среднемолекулярный с М.м. 40000 g/mol), пропиленгликоля-1,2, натрия метабисульфита, матрицы с лекарственным веществом (ЛВ) в воде бидистил-лированной в интервале длин волн от 200 до 380 нм. Спектры поглощения фиксировали в режиме их наложения на спектрофотометре СФ-2000-02. В качестве растворов сравнения использовали воду бидистиллированную.
Состав матрицы с ЛВ растворяли в мерной колбе на 100,0мл в части воды биди-стиллированной. Помещали на водяную баню до полного растворения компонентов матрицы. После охлаждения раствор доводили до метки. Далее 1,0 мл данного разведения помещали в мерную в колбу на 50,0 мл и доводили водой до метки. Полученное
разведение анализировали спектрофотометрически в диапазоне волн 200-380 нм в кювете с толщиной слоя юмм [1]. Аналогично готовили разведение ПВП К-30, пропи-ленгиколя-1,2, натрия метабисульфита.
Параллельно регистрировали УФ-спектры стандартного образца гипоксена. В настоящее время в спектрофотометрии наиболее часто используется способ расчёта, основанный на сравнении поглощения анализируемой лекарственной формы, содержащей ЛВ с поглощением стандартного образца аналогичного наименования, измеренным в одинаковых условиях. Такой подход позволяет исключить влияние многочисленных факторов (погрешности разведения, установки длинны волны, влияние температуры).
Для приготовления раствора стандартного образца о,1г (точную навеску) по-ли(дигидроксифенилен)тиосульфоната натрия помещали в мерную колбу вместимостью 100 мл и растворяли в части воды бидистиллированной. Помещали на водяную баню до полного растворения ЛВ. После охлаждения раствора доводили до метки. 1,0 мл разведения помещали в колбу на 50,0 мл и доводили до заданного объёма тем же растворителем. Измерение оптической плотности проводили, выбирая максимальное значение (А) при длине волны от 302 до 307 нм в диапазоне волн 200-380 нм. Результаты исследования приведены в табл. 1.
Таблица 1
Результаты спектрофотометрического исследования рабочего стандартного образца (PCO) (поли(дигидроксифенилен)тиосульфоната натрия) и компонентов матрицы в водном растворе
Исследуемый образец Максимум поглощения, нм
Поли(дигидроксифенилен)тиосульфонат натрия PCO (2? 10-5) Плечо
Матрица с поли(дигидроксифенилен)тиосульфонатом натрия, раствор (2? 10-5) Плечо
ПВП К-30 раствор (6,6? 10_5) Нет максимума
Пропиленгликоль-1,2 (4,5? 10"5) Нет максимума
Натрия метабисульфит (0,023? 10"5) Нет максимума
Максимум поглощения ПВП К-30 зафиксирован только в диапазоне волн 200-38онм и составляет 217±2нм.
Рис. 1. Спектры поглощения PCO поли(дигидроксифенилен)тиосульфоната натрия и вспомогательных веществ в диапазоне 200-1100 нм: 1 - раствор пропиленгликоля-1,2; 2 - раствор натрия метабисульфита;з - раствор ПВП К30; 4 - разведение PCO поли(дигидроксифенилен)тиосульфоната натрия; 5 - разведение компонентов матрицы пластыря с поли(дигидроксифенилен)тиосульфонатом натрия (отсчёт спектров от оси абсцисс)
Рис. 2. Спектры поглощения PCO поли(дигидроксифенилен)тиосульфоната натрия и в спомогательных веществ в диапазоне 200-380 ни: 1 - раствор пропиленгликоля-1,2; 2 - раствор натрия метабисульфита;з - раствор ПВП К30; 4 - разведение PCO поли(дигидроксифенилен)тиосульфоната натрия; 5 - разведение компонентовматрицы пластыря с поли(дигидроксифенилен)тиосульфонатом натрия
Таким образом, установлено, что в диапазоне волн 200-380НМ УФ-спектр раствора матрицы с ЛВ практически идентичен спектру PCO поли(дигидро-ксифенилен)тиосульфоната натрия и имеет плечо. Вспомогательные вещества не имеют максимумов поглощения в этом диапазоне волн, но оказывают влияние на поглощение поли(дигидроксифенилен)тиосульфоната натрия. Влияние оказывает ПВП К30 и незначительно натрия метабисульфит (рис. 1, 2).
Рис. 3. Спектры поглощения разведения PCO поли(дигидроксифенилен) тиосульфоната натрия и матрицы пластыря в диапазоне 200-380 нм:
1 - разведение PCO поли(дигидроксифенилен)тиосульфоната натрия; 2,3 - разведения матрицы пластыря (отсчёт спектров от оси абсцисс)
С целью учёта фонового влияния вспомогательных веществ на поглощения по-ли(дигидроксифенилен)тиосульфоната натрия в диапазоне волн 200-380НМ нами рассчитан поправочный коэффициент. Расчёт осуществляли по формуле 1:
К=БРСО/Виспытуемого раствора (1)
Исходя из серии анализов среднее значение поправочного коэффициента для данного состава пластыря равно 0,98.
Рис. 4. Градуировочный график зависимости оптической плотности от концентрации раствора поли(дигидроксифенилен)тиосульфоната натрия
Для подтверждения линейности предлагаемой методики на примере стандартного образца строили градуировочный график зависимости оптической плотности от концентрации раствора поли(дигидроксифенилен)тиосульфоната натрия. Для этого 0,05 г (точная навеска) СО гипоксена помещали в мерную колбу вместимостью юо мл, добавляли 50,0 мл воды бидистиллированной, раствор взбалтывали и доводили водой до метки. Колбу помещали на водяную баню до растворения гипоксена (первичное разведение). Затем в мерные колбы на 50,0 мл помещали соответственно 0,5; 1,0; 2,0; 3,0; 4,0; 5,0 мл полученного разведения, доводили до метки водой бидистиллированной, перемешивали. В мерные колбы на юо,омл помещали 3,0 мл первичного разведения и доводили до метки растворителем. При изготовлении разведения также использовали мерные колбы на 250,0 мл, куда помещали 2,0; 3,0 и 4,0 мл первичного разведения соответственно. Измеряли оптическую плотность полученных разведений в диапазоне волн 200-380 нм. Полученные результаты представлены в табл. 2 .
Таблица 2
Значения оптической плотности разведений поли(дигидроксифенилен)тиосульфоната натрия
Смкг/мл C% А
8,0 0,8x10" 5 0,176
10,0 i,oxio"5 0,212
12,0 1,2X10" 5 0,248
16,0 1,6x10" 5 0,337
20,0 2,0X10" 5 0,405
30,0 3,0X10" 5 0,597
40,0 4,0x10" 5 0,766
60,0 6,0x10" 5 1,161
80,0 8,0x10" 5 1,545
100,0 10" 4 1,934
По полученным данным строили градуировочный график (рис. 4) и рассчитывали r - коэффициент корреляции или линейной регрессии (проводили линию тренда), по которому в первом приближении можно судить о жесткости линейной зависимости. Чем ближе этот коэффициент к единице, тем менее случайна линейная зависимость. В аналитической химии в большинстве случаев используют линейные зависимости с коэффициентом корреляции r>o,98.
В дальнейшем с использованием метода наименьших квадратов рассчитывали свободный член линейной зависимости (a), угловой коэффициент линейной зависимости (Ь).
В результате установлено, что в данной области концентраций измеряемого раствора поли(дигидроксифенилен)тиосульфоната натрия (8-100 мкг/мл) график имеет линейный характер (рис.4) и описывается уравнением у=0,019х + 0,017. Коэффициент корреляции равен 0,999, что позволяет использовать данную методику для количественного определения содержания поли(дигидроксифенилен)тиосульфоната натрия в данном диапазоне концентраций.
Таким образом, методика может быть использована для количественного определения поли(дигидроксифенилен)тиосульфоната натрия в трансдермальном пластыре.
Для определения количественного содержания поли(дигидроксифени-лен)тиосульфоната натрия (о,1г) удаляли защитное покрытие и помещали пластырь в чашку Петри. Далее прибавляли 50,0мл горячей воды бидистиллированной для растворения компонентов матрицы. Полученный раствор количественно переносили в мерную колбу на 100,0мл и доводили до метки. Помещали колбу на водяную баню до полного растворения компонентов матрицы. После этого колбу охлаждали. 1,омл данного разведения помещали в мерную в колбу на 50,0мл и доводили водой до метки (испытуемый раствор). Полученное разведение анализировали спектрофотометриче-ски в диапазоне волн 200-380НМ (плечо) в кювете с толщиной слоя юмм. Измерение оптической плотности проводили, выбирая максимальное значение (А) при длине волны от 302 до 307НМ. Количество поли(дигидроксифенилен)тиосульфоната натрия в граммах вычисляли по формуле 2:
Di? К? a? Vi? V2?Vpco = Di? К? 0,1? 100? 50? 1,0 , (2)
gr = DPCO? V? V0? VHaB. DPCO? 100? 50? 1,0 где D1 -оптическая плотность испытуемого раствора;
DPCO - оптическая плотность разведения РСО;
а - навеска РСО поли(дигидроксифенилен)тиосульфоната натрия в граммах (0,1);
V1, V2 - объёмы разведений испытуемого раствора (100 и 50мл);
К -поправочный коэффициент (0,98 )
V, V0 - объёмы разведений РСО поли(дигидроксифенилен)тиосульфоната натрия, мл (100 и 50мл);
Vpco - объём навески разведения РСО в мл (1,0мл);
VHaB - объём навески исследуемого образца в мл (1,0мл).
Параллельно измеряли оптическую плотность стандартного раствора по-ли(дигидроксифенилен)тиосульфоната натрия по методике описанной ранее.
Результаты количественного определения поли(дигидроксифенилен)тиосуль-фоната натрия в трансдермальном пластыре представлены в табл. 3.
Таблица 3
Результаты количественного определения поли(дигидроксифенилен)-тиосульфоната натрия в трансдермальном пластыре УФ-спектрофотометрическим методом
Acm - 0,405
№п/п Оптическая плотность Найдено, г. Метрологические характеристики
1 0,393 0,095 X =0,096 S = 1,265-10-3 S х = 5,164-ю-4 ДХ =1,327 -ю-3 s = ± 1,382 %
2 0,397 0,096
3 0,393 0,095
4 0,401 0,097
5 0,393 0,095
6 0,405 0,098
Из данных таблицы видно, что относительная погрешность [2] определения по-ли(дигидроксифенилен)тиосульфоната натрия в трансдермальном пластыре составляет ±1,38%.
Таким образом, полученные результаты хорошо воспроизводятся и методика может быть рекомендована для количественного определения поли(дигидрокси-фенилен)тиосульфоната натрия в составе трансдермального пластыря.
Литература
1. ФСП «Гипоксен Поли(дигидроксифенилен)тиосульфонат натрия» № 42-0064345302.
2. ГФ XI издания, выпуск 1,1987.
SPECTROPHOTOMETRIC DEFINITION OF HYPOXEN IN TRANSDERMAL PLASTER
S.O.Losenkova1 E.F.Stepanova2
1)Smolensk State Medica Academy
2)Pyatigorsk State Pharmaceutical Academy
e-mail: [email protected]
In article data of easily reproduced technique of quantitative definition development of hypoxen (weed (dihydroxyphe-nilen)thiosulfonas sodium) in structure of transdermal plaster are presented.
Key words: Uf-spectrophotometry, transdermal plaster with hypoxen, spectrum of absorption, a technique of quantitative definition.
