Научная статья на тему 'Спектрофотометрический анализ бромдигидрохлорфенилбензодиазепина'

Спектрофотометрический анализ бромдигидрохлорфенилбензодиазепина Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

CC BY
356
25
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.
Ключевые слова
BROMDIGIDROHLORFENILBENZODIAZEPIN / UV SPECTRUM / SPECTROPHOTOMETRIC DETERMINATION / OPTICAL REFERENCE SAMPLE / CONVERSION FACTOR / METHYL RED / БРОМДИГИДРОХЛОРФЕНИЛБЕНЗОДИАЗЕПИН / УФ-СПЕКТР / СПЕКТРОФОТОМЕТРИЧЕСКОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ / ОПТИЧЕСКИЙ ОБРАЗЕЦ СРАВНЕНИЯ / КОЭФФИЦИЕНТ ПЕРЕСЧЕТА / МЕТИЛОВЫЙ КРАСНЫЙ

Аннотация научной статьи по фундаментальной медицине, автор научной работы — Лазицкая А. М., Чмелевская Н. В., Илларионова Е. А.

Разработана унифицированная методика спектрофотометрического определения бромдигидрохлорфенил-бен-зодиазепин в субстанции и таблетках, отличающаяся использованием в качестве образца сравнения метилового красного. Обоснованы оптимальные условия определения: выбор раствора сравнения, растворитель 0,1 М раствор хлористоводородной кислоты, аналитическая длина волны 290 нм. Определен коэффициент пересчета. Относительное стандартное отклонение разработанной методики для субстанции составило не более 0,003, для таблеток не более 0,008.

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

Похожие темы научных работ по фундаментальной медицине , автор научной работы — Лазицкая А. М., Чмелевская Н. В., Илларионова Е. А.

iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

SPECTROPHOTOMETRIC ANALYSIS OF BROMDIGIDROHLORFENILBENZODIAZEPIN

The unified technique of spektrofotometrichesky definition of a bromdigidrohlorfenilbenzodiazepin in substance and tablets differing in use as an example of methyl red comparison is developed. Optimum conditions of definition are proved: a comparison solution choice, solvent 0,1 M hydrochloric acid solution, analytical wavelength 290 nm. The recalculation coefficient is defined. The relative standard deviation of the developed technique for substance made no more than 0,003, for tablets no more than 0,008.

Текст научной работы на тему «Спектрофотометрический анализ бромдигидрохлорфенилбензодиазепина»

Фармакология и фармакогнозия

УДК 543.544.943.3.068.7:615.07

А.М. Лазицкая1, Н.В. Чмелевская1, Е.А. Илларионова2

СПЕКТРОФОТОМЕТРИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ БРОМДИГИДРОХЛОРФЕНИЛБЕНЗОДИАЗЕПИНА

Иркутское областное бюро судебно-медицинской экспертизы, 664022, бул. Гагарина, 4, тел. 8-(3952)-24-37-67; 2Иркутский государственный медицинский университет, 664003, ул. Красного Восстания, 1, тел. 8-(3952)-24-08-26, г. Иркутск

Резюме

Разработана унифицированная методика спектрофотометрического определения бромдигидрохлорфенил-бен-зодиазепин в субстанции и таблетках, отличающаяся использованием в качестве образца сравнения метилового красного. Обоснованы оптимальные условия определения: выбор раствора сравнения, растворитель - 0,1 М раствор хлористоводородной кислоты, аналитическая длина волны - 290 нм. Определен коэффициент пересчета. Относительное стандартное отклонение разработанной методики для субстанции составило не более 0,003, для таблеток не более 0,008.

Ключевые слова: бромдигидрохлорфенилбензодиазепин, УФ-спектр, спектрофотометрическое определение, оптический образец сравнения, коэффициент пересчета, метиловый красный.

A.M. Lazitskaya1, N.V. Chmelevskaya1, E.A. Illarionova2 SPECTROPHOTOMETRIC ANALYSIS OF BROMDIGIDROHLORFENILBENZODIAZEPIN

'Irkutsk regional agency judicial-medical expert operation;

2Irkutsk State Medical University, Irkutsk

Summary

The unified technique of spektrofotometrichesky definition of a bromdigidrohlorfenilbenzodiazepin in substance and tablets differing in use as an example of methyl red comparison is developed. Optimum conditions of definition are proved: a comparison solution choice, solvent - 0,1 M hydrochloric acid solution, analytical wavelength - 290 nm. The recalculation coefficient is defined. The relative standard deviation of the developed technique for substance made no more than 0,003, for tablets no more than 0,008.

Key words: bromdigidrohlorfenilbenzodiazepin, UV spectrum, spectrophotometry determination, optical reference sample, conversion factor, methyl red.

Широкое применение в медицинской практике в качестве анксиолитического средства находит бромди-гидрохлорфенилбензодиазепин (I) [6]. Существующие методы оценки качества I в субстанции и таблетках не соответствуют современным требованиям [3, 7]. Они имеют ряд недостатков: трудоемкость, длительность выполнения, применение токсичных органических растворителей, дорогостоящих реактивов. Это свидетельствует о том, что проблема совершенствования существующих и разработка новых методов анализа I является актуальной. Перспективно использование нового варианта спектрофотометрического метода, осно-

ванного на применении оптических образцов сравнения. Использование этого метода позволит выполнять количественное определение препарата в субстанции и лекарственных формах одним и тем же методом, повысить воспроизводимость результатов определения, уменьшить трудоемкость, стоимость, токсичность и погрешность анализа.

Целью настоящего исследования является разработка новой методики количественного определения I спектрофотометрическим методом с использованием оптического образца сравнения.

Материалы и методы

В работе использовали фармацевтическую субстанцию I и таблетки I по 0,001 г, отвечающие требованиям нормативных документов [3, 7], метиловый красный квалификации «х.ч.», 0,1 М раствор натрия гидроксида, приготовленный из фиксанала, 0,1 М раствор хлористоводородной кислоты, приготовленный из фиксанала, воду очищенную. Оптическую плотность растворов измеряли на спектрофотометре СФ-

2000 в кюветах 1 см на фоне растворителя. Величину рН контролировали с помощью универсального ионо-метра ИТ-1101.

При статистической обработке результатов анализа использовали методы Стьюдента и Фишера [1]. Критический уровень значимости при проверке статистических гипотез р=0,05.

Результаты и обсуждение

Для оптимизации условий спекгрофотометриче-ского определения I был изучен спектр поглощения в интервале рН 1,1-13,0 в диапазоне длин волн 220400 нм. Спектр поглощения I в интервале рН от 10-13,0 характеризуются двумя полосами с максимумами поглощения при длинах волн 230±4 нм и 342±4 нм. При уменьшении кислотности среды (рН 1,1) наблюдается увеличение интенсивности поглощения вещества с одновременным батохромным смещением максимума поглощения. Спектр поглощения в этом случае имеет два максимума при 245±1 нм и 290±2 нм.

Изучение стабильности растворов I показало, что наиболее устойчив раствор I с рН 1,1. Поэтому в качестве оптимального растворителя для спектрофото-метрического определения I нами был выбран 0,1 М раствор хлористоводородной кислоты (рН 1,1).

Для количественного определения I в субстанции спектрофотометрическим методом необходимо выбрать образец сравнения. Выбор оптических образцов сравнения осуществляли исходя из аналитической длины волны лекарственного вещества, оптимального растворителя и оптимальной области поглощения образца сравнения [4, 5].

В качестве оптического образца сравнения для определения I использовали вещество органической природы метиловый красный. Метиловый красный выпускаются серийно промышленностью квалификации хч, на него имеется ТУ (ТУ 6-09-5169-84), регламентирующий его качество, он доступен, имеет низкую стоимость, содержание в нем основного вещества определено химическим методом и составляет не менее 99,9 %.

Спектры поглощения растворов метилового красного в интервале рН 1,1 характеризуются двумя полосами с максимумами поглощения при 290±1 нм и 515±5 нм [2].

Аналитическая длина волны I (290 нм) входит в интервал оптимальный для метилового красного (280300 нм), поэтому метиловый красный может быть предложен в качестве оптического образца сравнения для спектрофотометрического определения I. Следует отметить, что у метилового красного и I совпадают максимумы поглощения 290±1 нм. Следовательно, можно предположить, что погрешность анализа I при отмеченных выше оптимальных условиях не будет превышать допустимую.

Значения удельных показателей поглощения исследуемого вещества и оптического образца сравнения различаются, поэтому для учета данных факторов в формулу расчета результатов количественного определения I необходимо ввести коэффициент пересчета,

который представляет собой отношение удельного показателя поглощения оптического образца сравнения и удельного показателя поглощения рабочего образца сравнения. Результаты определения коэффициента пересчета для спектрофотометрического анализа I по метиловому красному приведены в таблице 1.

Таблица 1

Результаты определения коэффициента пересчета бромдигидрохлорфенилбензодиазепина по метиловому красному

Метрологические характеристики (п=10, Р=95 %)

К З2 8 Эх DX Е %

1,0999 0,0828 0,2871 0,0910 0,2056 0,21 0,003

Разработанные оптимальные условия спектрофо-тометрического определения I были использованы для количественного определения субстанции и таблеток данного препарата. Результаты количественного определения I в субстанции и таблетках приведены в таблице 2.

Таблица 2

Результаты спектрофотометрического определения феназепама в субстанции по оптическому образцу сравнения метиловому красному

Метрологические характеристики (п=10, Г=95%)

Субстанция бромдигидрохлорфенилбензодиазепина

X Э2 ЭХ АХ Е%

99,91 0,0922 0,3037 0,0960 0,2170 0,22 0,003

Таблетки бромдигидрохлорфенилбензодиазепина по 0,001 г

108,70 0,8424 0,9178 0,3469 0,8326 0,77 0,008

108,90 0,5774 0,7599 0,2872 0,6893 0,63 0,007

108,72 0,1564 0,3955 0,1495 0,3588 0,33 0,004

Из представленных в таблице 2 данных следует, что спектрофотометрическое определение I в субстанции и таблетках по оптическому образцу сравнения метиловому красному соответствует нормативным требованиям. Относительная ошибка определения не превышает 0,22 % для субстанции и 0,77 % для таблеток. Методика спектрофотометрического определения с использованием оптического образца сравнения характеризуется хорошей воспроизводимостью не превышает 0,008). В таблице 3 представлены результаты сравнительной оценки методов количественного определения I по разработанной методике и методике нормативного документа [3]. Видно, что метод спектрофотометрического определения I по метиловому

красному и метод нормативного документа дают правильные результаты (; < . ) и не различаются по

г ^ 4 выч. таолУ г

воспроизводимости ^выч^табл). Однако методика нормативного документа не является правильной, так как имеет систематическую погрешность (; > , ), усту-

^ г ч выч. табл/' ^ ^

пает спектрофотометрическому методу по продолжительности анализа и требует использования токсичных и летучих растворителей (ледяная уксусная кислота, уксусный ангидрид).

Таблица 3

Сравнительная оценка методов количественного определения I (п=9, t (Р, 1)(т„б,)=2,26; Р=95 %; F (Р, f1, f2)(т„íл)=5,47; Р=99 %)

Валидационную оценку разработанной методики спектрометрического определения бромдигидрохлор-фенилбензодиазепина с использованием оптического образца сравнения метилового красного проводили по критериям: специфичность, правильность, прецизиоз-ность, линейность результатов, аналитическая область методики. Результаты, представленные в таблице 4, свидетельствуют о пригодности предложенной методики.

Таблица 4

Результаты валидационной оценки методики спектрофотометрического определения бромдигидрохлорфенилбензодиазепина

Наименование метода

Ациди-метрия в ледяной уксусной кислоте

Спектрофо-тометрия по метиловому красному

100

100

Х,%

98,50

99,96

S2

0,25

0,09

0,5

0,3

Е,%

0,69

0,27

8,49

0,39

2,78

Продолжительность анализа, мин.

40

25

Число опера-

Параметры Критерии валидности Результаты испытания

Специфичность Специфична

Правильность tBbi4<tia6i t =0,39, С=2,36х n=9

Прецизионность RSD<2 % 0,30 %

Линейность результатов r>0,999 r=0,9990; у=0,2683-х-0,2273

Аналитическая область методики интервал концентраций 0,008-0,012 г/мл

1. Государственная Фармакопея. - Т. 1. - 13-е. изд. -2015. - 1470 с.

2. Илларионов А.И., Чмелевская Н.В., Илларионова Е.А., Сыроватский И.П. Количественное определение натриевой соли 4-(никотиноиламино) масляной кислоты спектрофотометрическим методом // известия высших учебных заведений. Физика. - 2011. -№ 2. - С. 174-179.

3. Нормативный документ 42-14110-06. Феназе-пам. - 5 с.

4. Теплых А.Н., Илларионова Е.А. Количественное определение метронидазола спектрофотометриче-

Разработанная методика спектрофотометрического определения бромдигидрохлорфенилбензодиазе-пина по оптическому образцу сравнения метиловому красному отличается доступностью, экспрессностью, высокой воспроизводимостью, отсутствием высокотоксичных реактивов.

Литература

ским методом // Сибирский медицинский журнал (Иркутск). - 2009. - Т. 88, № 5. - С. 48-50.

5. Теплых А.Н., Илларионова Е.А. Количественное определение тинидазола спектрофотометрическим методом // Сибирский медицинский журнал (Иркутск). -2010. - Т. 99, № 8. - С. 64-66.

6. Регистр лекарственных средств России. - 19-е изд., перераб., испр. и доп. - М.: РЛС-МЕДИА, 2010. -1368 с.

7. Фармакопейная статья предприятия ОАО «Ва-лента Фармацевтика» № 42-5293-08 Таблетки феназе-пама по 0,5 мг, 1 мг и 2,5 мг.

Literature

1. State Pharmacopoeia. - Vol. 1. - 13 ed. -2015. -1470 p.

2. Illarionov A.I., Chmelevskaya N.V, Illariono-va E.A., Syrovatskii I.P. Quantitative determination of sodium salt of 4-(nicotinoyl amino) butyric acid by spectrophotometry method // News of Higher Educational Establishments. Physics. - 2011. - №. 2. - P. 174-179.

3. Normative document 42-14110-06. Phenazepam. -M., 2006. - 5 p.

4. Teplykh A.N., Illarionova E.A. Quantitative definition of Metronidazole by spectrophotometrical method //

iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.

Siberian Medical Journal (Irkutsk). - 2009. - Vol. 88 (№ 5). - P. 48-50.

5. Teplykh A.N., Illarionova E.A. Quantitative definition of Tinidazole by spectrophotometrical method // Siberian Medical Journal (Irkutsk). - 2010. - Vol. 99 (№ 8). -P. 64-66.

6. Register of Medicines of Russia. - 19 ed., Revised and updated. - Moscow: RLS-MEDIA 2010. - 1368 p.

7. Pharmacopoeial monograph of the JSC «Valenta Pharmaceuticals» No. 42-5293-08 Tablets of phenazepam 0,5 mg, 1 mg and 2,5 mg.

Координаты для связи с авторами: Лазицкая Анна Марковна - аспирант, врач судебно-медицинский эксперт ГБУЗ МЗ «Иркутское областное бюро судебно-медицинской экспертизы», тел. 8-(3952)-22-93-90, e-mail: [email protected]; Чмелевская Наталья Владимировна - канд. фарм. наук, зав. судебно-химическим отделением ГБУЗ МЗ «Иркутское областное бюро судебно-медицинской экспертизы», тел. 8-(3952)-22-93-90, e-mail: [email protected]; Илларионова Елена Анатольевна - д-р хим. наук, профессор, зав. кафедрой фармацевтической и токсикологической химии ИрГМУ, тел. +7-914-876-09-23, e-mail: [email protected].

S

F

6

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.