Количественное определение тинидазола спектрофотометрическим методом Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

// Кардиология. - 2002. - Т. 42. № 7. - С.53-62.

6. Сюч Н.И., Вокуев И.А. Диагностические возможности лейкоцитарной формулы крови у больных ишемической болезнью сердца пожилого и старческого возраста // Клин. лаб. диагностика. - 2000. - №11. - С.4.

7. Herder C., Baumert J., Thorand B., et al. Elevated systemic chemokine concentrations precede the incidence of coronary heart disease and type 2 diabetes: results from the MONICA/ KORA Augsburg study,1984-2002 // Diabetologia. - 2006. - 49 (Suppl). - 695 p.

Информация об авторах: 170036, г. Тверь, ул. Артюхиной д. 3, кв. 24, тел. 56-49-40, e-mail: [email protected], Белякова Наталья Александровна - заведующий кафедрой, д.м.н., профессор, Михайлова Дарья Геннадьевна - врач-интерн, Цветкова Инна Геннадьевна - ассистент, Горбачёва Светлана Алексеевна - аспирант, Лясникова Мария Борисовна - доцент,

Егорова Елена Николаевна - доцент, врач-лаборант.

© ТЕПЛЫХ А.Н., ИЛЛАРИОНОВА Е.А. - 2010

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ ТИНИДАЗОЛА СПЕКТРОФОТОМЕТРИЧЕСКИМ МЕТОДОМ

А.Н. Теплых, Е.А. Илларионова (Иркутский государственный медицинский университет, ректор - д.м.н., проф. И.В. Малов, кафедра фармацевтической и токсикологической химии, зав. - д.х.н., проф. Е.А. Илларионова)

Резюме. Разработана унифицированная методика спектрофотометрического определения тинидазола в субстанции и таблетках. Обоснованы оптимальные условия определения: растворители - 0,1 М раствор кислоты хлористоводородной; аналитическая длина волны - 274 нм. Определены коэффициенты пересчета. Относительное стандартное отклонение разработанной методики составило для субстанций не более 0,008, для таблеток - 0,012.

Ключевые слова: тинидазол, спектрофотометрия, внешний образец сравнения, коэффициент пересчета, кислота бензойная, фенолфталеин.

QUANTITATIVE DEFINITION OF TINIDAZOLE BY SPECTROPHOTOMETRICAL VETHOD

A.N. Teplykh, E.A. Illarionova (Irkutsk State Medical University)

Summary. The unified technique of spectrophotometrical definitions of tinidazole in substance and tablets has been developed. Optimum conditions of definition: solvents - 0,1 М solution of hydrochloric acid; analytical length of wave -274 nanometers have been grounded. Coefficients of counting have been defined. The relative standard deviation of the developed technique amounted to not more than 0,008, for tablets - 0,012.

Key words: tinidazole, spectrophotometra, the external sample of comparison, a conversion rate, acid benzoic, phenolphtalein.

Тинидазол - это средство для лечения протозой-ных инфекций. Действует против развития Trichomonas vaginalis, Entamoeba histolytica и Lamblia instestinalis. Проявляет также бактерицидное действие относительно анаэробных бактерий: Bacteroides fragilis, Bacteroides melaninogenicus, Bacteroides spp., Clostridium spp., Eubacterium spp., Fusobacterium spp., Peptococcus spp., Peptostreptococcus spp. и Veillonella spp. Благодаря высокой липофильности, легко проникает внутрь трихомонад и анаэробных микроорганизмов, где восстанавливается нитроредуктазой и разрушает бактериальную ДНК. Проникает через гематоэнцефалический барьер [2].

Действующая система контроля качества лекарственных средств требует от фармацевтической науки постоянного повышения эффективности имеющихся методов анализа.

Существующие методы оценки качества тинидазо-ла не всегда соответствуют современным требованиям [4,5]. Они имеют ряд недостатков: трудоемкость, длительность выполнения, применение токсичных органических растворителей, дорогостоящих реактивов и приборов. Это свидетельствует о том, что проблема совершенствования существующих и разработка новых методов анализа тинидазола является актуальной.

Среди современных методов фармацевтического анализа важное место занимают оптические методы контроля, которые широко применяются как для целей количественного определения, так и для контроля чистоты и идентификации лекарственных средств. Перспективно использование нового варианта спектрофотометрического метода, основанного на применении оптических образцов сравнения. Использование этого метода позволит выполнять количественное определение препаратов в субстанции и лекарственных формах

одним и тем же методом, повысить воспроизводимость результатов определения, уменьшить трудоемкость, стоимость, токсичность и погрешность анализа.

Целью данной работы является разработка унифицированных методик количественного определения тинидазола в субстанции и лекарственных формах спектрофотометрическим методом с использованием внешних образцов сравнения.

Материалы и методы

В работе использовали субстанцию тинидазола, отвечающую требованиям нормативного документа, фенолфталеин хч, бензойная кислота хч, 0,1 М раствор кислоты хлористоводородной, приготовленного из фиксанала, спирт этиловый 95%.

Электронные спектры регистрировали на спектрофотометре Specord UV VIS. Оптическую плотность растворов измеряли на спектрофотометрах СФ-26 и СФ-46 в кюветах 1 см на фоне растворителя. Величину рН контролировали с помощью универсального иономе-тра ЭВ-74. Результаты экспериментальных исследований представлены в виде средних значений из 7 опытов (n=7).

Результаты и обсуждение

Тинидазол обладает способностью поглощать в ультрафиолетовом свете, поэтому были изучены спектральные характеристики данного лекарственного вещества в области от 220 до 400 нм в интервале рН 1,513,3. УФ-спектр тинидазола в 0,1 М растворе кислоты хлористоводородной характеризуются двумя полосами при 206±1 нм и 274±1 нм. Увеличение рН раствора до

5,3 приводит к батохромному смещению максимумов поглощения до 232±1 нм и 314±1 нм с одновременным гиперхромным эффектом.

Дальнейшее увеличение рН раствора до 13,3 приводит к гипсохромному смещению более длинноволнового максимума на 4 нм (рис. 1). Изучение стабильности растворов в течение суток показало, что при рН=1,5 раствор тинидазола наиболее стабилен. Поэтому в качестве оптимального растворителя выбрали 0,1М раствор кислоты хлористоводородной.

В качестве аналитической длины волны выбрали длину 274 нм.

Для количественного определения тинидазола в субстанции спектрофотометрическим методом необходимо выбрать образец сравнения.

Учитывая требования, предъявляемые к образцам сравнения, были выбраны химические соединения, которые могут быть внешними образцами сравнения в спектрофотометрическом анализе - фенолфталеин, бензойная кислота [3].

Оптимальные области поглощения, в которых пред-

сравнения для спектрофотометрического определения тини-дазола [3].

Нами разработаны унифицированные методики спектрофотометрического определения тинидазола с использованием внешнего образца сравнения.

Для определения количественного содержания лекарственных веществ в расчетную формулу вводили коэффициент пересчета. В таблице 1 приведены значения коэффициентов пересчета тинидазола по внешним образцам сравнения бензойной кислоте и фенолфталеину.

таблице 2 представлены результаты количественного определения тинидазола по внешнему образцу сравнения бензойной кислоте и фенолфталеину.

Разработанная нами методика количественного

Таблица 3

Результаты спектрофотометрического определения тинидазола в таблетках по 0,5 г, покрытые оболочкой по бензойной кислоте и фенолфталеину

Таблица 1

Результаты определения коэффициента пересчета

Метрологические характеристики (п=7, 5 9 = р

Бензойная кислота X Б2 Б Бх дх Е,% Бг

0,5417 0,496х10-5 0,00223 0,00084 0,00207 0,38 0,0041

Фенолфталеин 0,8986 0,525х10-5 0,00229 0,00087 0,00212 0,24 0,0026

Примечание здесь и далее: п - объем выборки, р - доверительная вероятность Х - средний результат, 82 - дисперсия, 8 - стандартное отклонение, - стандартное отклонение среднего результата, АХ - полуширина доверительного интервала величины, Е,% - относительная ошибка среднего результата, 8г - относительное стандартное отклонение.

Разработанные оптимальные условия спектрофотометрического определения тинидазола были использованы для количественного определения субстанции. В

Таблица 2

Результаты спектрофотометрического определения тинидазола в субстанции

Серия Метрологические характеристики (п=7, р=95%)

бензойная кислота фенолфталеин

X Б2 Б Бх дх Е,% Бг X Б2 Б Бх дх Е,% Бг

11375 100,01 0,17 0,41 0,16 0,38 0,38 0,004 100,01 0,65 0,81 0,31 0,75 0,75 0,008

23156 100,27 0,15 0,39 0,15 0,36 0,36 0,004 100,38 0,35 0,59 0,22 0,55 0,55 0,006

22177 100,43 0,24 0,49 0,18 0,45 0,45 0,005 100,13 0,14 0,38 0,14 0,35 0,35 0,004

Метрологические характеристики (п=7, ) % 5 9 = Г1

Серия бензойная кислота фенолфталеин

X Б2 Б Бх дх Е,% Бг X Б2 Б Бх дх Е,% Бг

481009 99,28 0,91 0,96 0,36 0,89 0,89 0,01 101,46 1,51 1,23 0,47 1,14 1,12 0,012

130010 100,88 0,86 0,93 0,35 0,86 0,85 0,009 102,46 0,67 0,82 0,31 0,76 0,74 0,008

240309 99,57 0,61 0,78 0,30 0,72 0,72 0,008 103,04 0,64 0,80 0,30 0,74 0,72 0,008

лагаемые химические соединения можно использовать в качестве образцов сравнения, были определены на основании разработанных нами ранее условий выбора образцов сравнения [1]. Аналитическая длина волны тинидазола при рН=1,5 (274 нм) входит в интервал, оптимальный для фенолфталеина (268-282 нм) и бензойной кислоты (266-280 нм), поэтому фенолфталеин и бензойная кислота могут быть внешними образцами

определения тинидазола в субстанции была применена для анализа лекарственной формы - таблетки тинида-зола по 0,5 г, покрытые оболочкой (табл. 3).

Из представленных результатов видно, что метод внешнего стандарта для количественного определения тинидазола в субстанции и таблетках характеризуется хорошей воспроизводимостью, является не трудоемким и не требует использования дорогостоящих реактивов.

ЛИТЕРАТУРА

1. Илларионова Е. А., Сыроватский И.П., Плетенева Т.В. Модифицированный метод сравнения в спектрофотометрическом методе анализа лекарственных средств// Вестник РУДН. Серия медицина. - 2003. - Т. 24. №5. - С.66-70.

2. Регистр лекарственных средств России. - 16-е изд. - М., 2008. - С.862-863.

3. Теплых А.Н., Илларионова Е.А. Количественное определение метронидазола спектрофотометрическим методом // Сибирский медицинский журнал. - 2QQ9 (Иркутск). - Т. 88. №5. - C48-5Q.

4. Фармакопейная статья ФС 42-Q281-Q7. Тинидазол.

5. Фармакопейная статья ФС 42-12824-Q3. Таблетки тинидазола, покрытые оболочкой, 5QQ мг.

Информация об авторах: 664003, Иркутск, ул. Красного Восстания, 1, ИГМУ, e-mail: [email protected]; Илларионова Елена Анатольевна - д.х.н., проф., заведующая кафедрой; Теплых Анастасия Николаевна - аспирант

© НАГОРНОВА К.А., БУГРОВА О.В., СТОЛЯРОВА Е.Н. - 2010

СОСТОЯНИЕ ВНУТРИПОЧЕЧНОЙ ГЕМОДИНАМИКИ У БОЛЬНЫХ СИСТЕМНОЙ КРАСНОЙ ВОЛЧАНКОЙ

К.А. Нагорнова1, О.В. Бугрова1, Е.Н. Столярова2 ('Оренбургская государственная медицинская академии, ректор - д.м.н., проф. В.М. Боев, кафедра факультетской терапии, зав. - д.м.н., проф. Р.И. Сайфутдинов; 2Оренбургская областная клиническая больница, гл. врач -А.М. Чевычалов, отделение радиоизотопной и ультразвуковой диагностики, зав. - Е.Н. Столярова)

Резюме. С целью изучения особенностей внутрипочечной гемодинамики у больных системной красной волчанкой (СКВ) обследован 71 больной с СКВ и 20 лиц контрольной группы. Оценивали характер поражения и функцию почек, состояние внутрипочечной гемодинамики ультразвуковым методом с использованием импульсноволнового допплеровского режима. У больных с активным волчаночным нефритом отмечался рост скоростных показателей и снижение сосудистого сопротивления; в условиях почечной недостаточности - снижение кровотока с увеличением сопротивления в паренхиматозных сосудах. Описаны особенности внутрипочечного кровотока в виде его обеднения и неравномерности (мозаичности) у больных со вторичным антифосфолипидным синдромом и почечным поражением.

Ключевые слова: системная красная волчанка, внутрипочечная гемодинамика, волчаночный нефрит, антифос-фолипидный синдром.

CONDITION OF THE INTRARENAL HEMODYNAMICS IN PATIENTS WITH SYSTEMIC LUPUS ERYTHEMATOSUS

K.A. Nagornova1, O.V. Bugrova1, E.N. Stolyarova2 ('Orenburg State Medical Academy, 2Orenburg Regional Hospital)

Summary. The aim of the study was to investigate the renal perfusion in patients with systemic lupus erythematosus (SLE). We investigated 71 patients with SLE and 20 persons of control group. We estimated character of a lesion and function of kidneys, condition of renal perfusion with ultrasound Doppler. In patients with active lupus nephritis the increase in velocity indices and decrease of vascular resistance have been observed; in conditions of renal insufficiency decrease of blood flow with increase of resistance in parenchymatous vessels has been observed. The features of intrarenal blood flow in the form of its decrease and irregularity in the patients with secondary antiphospholipid syndrome and renal lesion are described.

Key words: systemic lupus erythematosus, intrarenal hemodynamics, lupus nephritis, antiphospholipid syndrome.

В последнее время изучение внутрипочечной гемодинамики с помощью ультразвуковых методов приобретает все большее значение для оценки состояния сосудистого русла при различной почечной патологии, поскольку данная методика является неинвазивной и позволяет выявить изменения в сосудистом русле прижизненно. Оцениваемые качественные и количественные показатели являются весьма информативными

[5.9]. Изменения в почечных сосудах в виде пролиферативного эндартериита, аретериолосклероза, фиброза интимы внутрипочечных артерий, закономерно возникающие при диффузных заболеваниях с поражением паренхимы почек (хронический гломерулонефрит (ХГН), тубулоинтерстициальный нефрит) проявляются повышением индексов сосудистого сопротивления на уровне внутрипочечных артерий [2,9,13]. В настоящее время описаны особенности внутрипочечной гемодинамики у больных различными клиническими вариантами ХГН

[2.9]. Предиктором снижения функции почек является достоверный рост скоростных параметров кровотока с постепенным их снижением и ростом индексов сопротивления [2]. У больных с тромботической микро-ангиопатией (ТМА) вследствие первичного антифос-фолипидного синдрома описаны «мозаичность» форм спектров кровотока и индекса резистивности, обеднение кровотока, снижение систолических скоростных показателей [3,4].

При системной красной волчанке (СКВ) внутрипо-чечная гемодинамика оценивалась в единичных исследованиях. Отмечено, что у больных волчаночным нефритом (ВН) рост периферического сопротивления в мелких внутрипочечных сосудах также, по-видимому, свойственен изменениям почечной гемодинамики [13]. Ряд авторов выявили изменение показателей скоростей кровотока, и рост индексов сопротивления у больных СКВ еще до развития клинических симптомов поражения почек [1,8].

Таким образом, изучение возможности ультразвукового доплеровского исследования для оценки почечной гемодинамики у больных СКВ является весьма актуальным, в частности при сочетании СКВ со вторичным АФС, что ранее у этих больных не оценивалось.

Цель исследования: изучить особенности внутрипо-чечной гемодинамики у больных СКВ.

Материалы и методы

Был обследован 91 человек, из них 71 больной (4 мужчины и 67 женщин) с СКВ в среднем возрасте 36,5±11,6 года, средней давностью болезни 9,3±8,2 лет, и 20 относительно здоровых лиц, сопоставимых по полу и возрасту с больными СКВ (контрольная группа).

Диагноз СКВ устанавливался на основании критериев Американской ревматологической ассоциации (1997).