CC BY
38
Рис. 3. Коллагеновые волокна в стенке селезеночной вены. Окраска по Ван Гизону. Увеличение 10х20.
Рис. 4. Эластические волокна в стенке селезеночной вены. Окраска по Вейгерту. Увеличение 10х20.
ЛИТЕРАТУРА
1. Анисимов А. Ю. Настоящее и будущее хирургии портальной гипертензии. /А.Ю. Анисимов, РИ. Туишев, О.В. Булашова // Казанский медицинский журнал. - 2004. - № 2. - С. 99-102
2. Гарбузенко Д. В. Механизмы адаптации сосудистого русла к гемодинамическим нарушениям при портальной гипертензии. // Вестник РАМН. - 2013. - № 1. - С. 52-57.
3. Гетман Н. В. Гистоструктура и гистометрия селезеночной вены в норме и при портальной гипертензии. / Н.В. Гетман, С.В. Минаев, О.Б. Сумкина // Медицинский вестник Северного Кавказа. - 2014. № 1. - с. 58-62.
4. Доронин Ф. В. Особенность портальной гемодинамики в процессе лечения у детей с портальной гипертензией. / Ф.В. Доронин, С.В. Минаев, Н.В. Гетман [ и др.] // Проблемы биологии и медицины. - 2012. - № 3 (70). - С. 24
5. Доронин Ф. В. Результаты хирургического лечения ги-перспленизма при портальной гипертензии в детском возрасте. / Ф.В. Доронин, С.В. Минаев, Н.Н. Павлюк [и др.] // Медицинский вестник Северного Кавказа. - 2009. - № 1. -
С. 64-65.
6. Кательницкий И. И. Результаты спленоренального венозного шунтирования у больных с циррозом печени. / И.И. Кательницкий, Н.Г. Сапронова // Ангиология и сосудистая хирургия. - 2013. - Т. 19, № 2. - С. 112- 115.
7. Леонтьев А. Ф. Генез внепеченочной портальной гипертензии у детей. / А.Ф. Леонтьев, В.И. Шелковский // Детская хирургия. - 2005. - № 4. - С. 39-41.
8. Поршенников И. А. Мезентерико-кавальное шунтирование у больной внепеченочной портальной гипертензией на фоне эритремии. / И.А. Поршенников // Хирургия. - 2010. - № 9. - С. 68-70
9. Разумовский А. Ю. Мезопортальное шунтирование при внепеченочной портальной гипертензии у детей. // Анналы хирургии. - 2010. - № 6. - С. 46-50.
10. Разумовский А. Ю. Хирургическое лечение портальной гипертензии у детей / А.Ю. Разумовский, В.Е. Рачков // М.: Медицинское информационное агентство. - 2012. - С. 480
11. Страхов С. Н. Антологическая характеристика патологических изменений воротной вены при внепеченочной портальной гипертензии у детей. / С.Н. Страхов, В.Ю. Босин, З.М. Бондар [и др.] // Росс. Вестник перинатологии и педиатрии. -2013. - Т. 58, № 1. - С. 80-84.
12. Чудновец Л. Г. Локальная портальная гипертензия как причина расширения вен гроздьевидного сплетения. /Л.Г. Чуд-новец // Ангиология и сосудистая хирургия. - 2009. - № 2. -С. 54-56
13. Шаманов Ш. К. Гистотопография слоев воротной вены у детей и взрослых. // Тезисы докладов 54 научной конференции Сам. М.И. - Самарканд. - 1972. - С. 116-117
14. N. Chandok, Randomised clinical trial: the safety and efficacy of long- acting octreotide in patients with portal hypertension / N. Chandok, P. Kamath, A. Blei [et al.] // Aliment Pharmacol Ther. -2012. - Vol. 35, № 8. - P. 904-912.
15. Chichoz - Zach, H. Patophysiology of portal hypertension / H. Chichoz - Zach, K. Celinski, C. Slomka [ et al.] // Physiol. Pharmacol. - 2008. - Vol. 59, № 2. - P. 231-238
16. Rosenthal, P. When should we perform TIPS in children? / P. Rosenthal // J. Pediatr Gastroenterol Nutr. - 2012. - Vol. 54, № 5. - P.577-577.
17. J.S. Zhang, Gastroportal shunt for portal hypertension in children / J.S. Zhang, L. Li, S. L. Liu [et al.] // J. Pediatr Surg. -2012. - Vol. 47, № 1. - P. 253-257.
Поступила 26.09.2016
Ю. А. ГОНЧИКОВА1, Н. В. ЧМЕЛЕВСКАЯ2, Е. А. ИЛЛАРИОНОВА1
СОВЕРШЕНСТВОВАНИЕ МЕТОДА УФ-СПЕКТРОФОТОМЕТРИЧЕСКОГО
ОПРЕДЕЛЕНИЯ АБА^ИРА
1 Кафедра фармацевтической и токсикологической химии, ФГБОУ ВО «Иркутский государственный медицинский университет» Минздрава России, Россия, 664003, г. Иркутск, ул. Красного Восстания; тел. 8 (950) 070-58-42. E-mail: Gonchikova1984@mail.ru
2 Судебно- химическое отделение, ГБУЗ «Иркутское областное бюро судебно-медицинской экспертизы»
Россия, 664022, г. Иркутск, бульвар Гагарина, 4; тел. +7 (3952) 22-93-90; е^аИ: аnlаz2005@yаndеx.ru
Разработана методика количественного определения абакавира в субстанции и таблетках УФ-спектрофотоме-трическим методом. Подобраны оптимальные условия определения: растворитель - 0,1М раствор кислоты хлористоводородной, аналитическая длина волны - 297 нм, оптический образец сравнения - кислота сульфосалици-ловая. Вычислен коэффициент пересчета. Относительное стандартное отклонение для субстанции составило не более 0,009, для таблеток не более 0,033.
Ключевые слова: абакавир, Уф-спектрофотометрия, внешний оптический образец сравнения, коэффициент пересчета, кислота сульфосалициловая.
Y. А. GONCHIKOVA1, N. V. CHMELEVSKAYA2, Е. А. ILLARIONOVA1
SPECTRQPHQTQMETRIC ANALYSIS OF ABACAVIR
1 Department of pharmaceutical and toxicological chemistry, Irkutsk Stаtе Mеdiсаl Univеrsity, Russia, 664003, Irkutsk, str. Red rebellion; tel. 8 (950) 070-58-42. E-mail: Gonchikova1984@mail.ru 2Irkutsk rеgiоnаl аgеnсy judiсiаl-mеdiсаl еxpеrt оpеrаtiоn, Russia, 664022, Irkutsk, Gagarin Boulevard, 4;
tel.+7 (3952) 22-93-90; е-mаil: аnlаz2005@yаndеx.ru
The unified technique of spektrofotometrichesky definition of a abacavir in substance and tablets differing in use as an example of sulfosalicylic acidcomparison is developed. Optimum conditions of definition are proved: a comparison solution choice, solvent - 0,1M hydrochloric acid solution, analytical wavelength - 297 nm. The recalculation coefficient is defined. The relative standard deviation of the developed technique for substance made no more than 0,009, for tablets no more than 0,033.
Kеywоrds: abacavir, spectrophotometric determination, optical reference sample, conversion factor, sulfosalicylic acid.
Введение
ВИЧ - одна из глобальных проблем мирового здравоохранения. Современная антиретрови-русная терапия позволяет улучшить состояние больных, в значительной степени снижая риск развития связанных с ВИЧ заболеваний и летальности. Одно из ведущих мест в схемах ан-тиретровирусной терапии занимает абакавир [7]. Методы оценки качества абакавира, которые используются в настоящее время, не соответствуют современным требованиям [3]. Эти методы характеризуются рядом недостатков: высокая стоимость, сложность и длительность выполнения, использование токсичных органических растворителей [2, 4, 5, 6]. Разработка новых, более доступных, методик анализа абакавира, а также совершенствование существующих методов является актуальной проблемой. Использование нового варианта УФ-спектрофотометрического метода, основанного на применении внешних оптических образцов сравнения, даст возможность выполнять количественное определение препарата в субстанции и лекарственных формах одним и тем же унифицированным методом, это повысит воспроизводимость результатов определения, а также уменьшит трудоемкость, стоимость, токсичность и погрешность анализа [2,4,5,6].
Целью нашего исследования является разработка нового метода количественного определения абакавира УФ-спектрофотометрическим методом с использованием внешнего оптического образца сравнения.
Материалы и методы исследования
В ходе работы использовали абакавир в субстанции и таблетках по 0,60 г, отвечающие требованиям нормативного документа [3], кислоту сульфосалициловую квалификации «х.ч.», 0,1 М раствор натрия гидроксида, 0,1М раствор хлористоводородной, воду очищенную, спирт этиловый 95 %. Оптическую плотность растворов измеряли на спектрофотометре СФ-2000 в кюветах 1 см на фоне растворителя. Величину рН контролировали с помощью универсального ионометра ИТ- 1101.
Провели статистическую обработку результатов анализа. Использовали методы Стьюдента и Фишера [1]. Критический уровень значимости при проверке статистических гипотез р=0,05.
Результаты исследования и обсуждение
Для разработки новой унифицированной методики УФ-спектрофотометрического определения абакавира были изучены спектры его растворов в воде (рН 8,8), 0,1М растворе натрия гидроксида (рН 13,0) , 0,1М растворе кислоты хлористоводородной (рН 1,1) и спирте этиловом 95 % (рН 7,5) в диапазоне длин волн 220-400 нм (рис. 1).
Из рисунка видно, что изменение рН среды вносит существенные изменения в спектры поглощения исследуемого вещества. В 0,1 М растворе кислоты хлористоводородной спектр поглощения абакавира имеет три полосы поглощения с максимумами при длинах волн 209±1 нм, 257±1 нм; и 297±1 нм. В спектрах поглощения растворов абакавира, где растворителями служили вода
Рис. 1. УФ-спектры поглощения 0,001 % раствора абакавира при различных значениях рН (1- рН 13,0; 2 - рН 8,8; 3 - рН 1,1; 4 - 7,5)
очищенная и спирт этиловый 95 %, наблюдается как батохромный, так и гипсохромный сдвиг максимумов поглощения. В спектре поглощения абакавира при рН 7,5-8,8 присутствуют три максимума поглощения при длинах волн 216±1 нм; 258±1 нм и 268±нм. В 0,1 М растворе натрия гидроксида спектр поглощения абакавира характеризуется наличием двух полос поглощения при длинах волн 209±1 нм; 285±1 нм, а также наличием «плеча» в области 260-266 нм. Сдвиг максимумов поглощения обусловлен образованием ионизированных и неионизированных форм абакавира при различных значениях рН, которые имеют отличия в электронном строении.
Выбор оптимального растворителя был основан на изучении физико-химических свойств абакавира и стабильности его раствора. Для УФ-спек-трофотометрического определения абакавира в качестве растворителя был выбран 0,1М раствор кислоты хлористоводородной (рН 1,1).
В УФ-спектрофотометрии в качестве стандартных образцов обычно используются вещества той же природы, что и исследуемые. Однако выпуск стандартных образцов абакавира является дорогостоящим и малодоступным для многих лабораторий. Ранее нами была изучена возможность замены стандартных образцов лекарственных веществ на стандарт-
ные образцы свойств (оптические образцы сравнения) [4,5,6]. Исходя из того что стандартными образцами свойств могут быть соединения органической и неорганической природы были изучены спектральные характеристики кислоты сульфосалициловой. Кислота сульфосалициловая широко используется в аналитической практике, выпускаются промышленностью квалификации хч (ТУ 4478-78), она доступна, имеет низкую стоимость, содержание в ней основного вещества составляет не менее 99,9 % [1].
УФ-спектр кислоты сульфосалициловой в деци-молярном растворе кислоты хлористоводородной (рН 1,1) имеет две полосы поглощения с максимумами при 235±1нм и 297±3нм, при длине волны 260±5нм наблюдается минимум поглощения [2].
Максимумы поглощения абакавира и кислоты сульфосалициловой (297 нм) совпадают, следовательно, кислота сульфосалициловая может быть предложена в качестве внешнего оптического об-
Таблица 1 Результаты определения коэффициента пересчета абакавира по кислоте сульфосалициловой
Меторологические ха рактеристики n=10, Р= 95 %
К S2 S S х D Е % S r
0,2306 0,00000094 0,00097 0,0003 0,00068 0,29 0,004
разца сравнения для УФ-спектрофотометрическо-го определения абакавира.
Значения удельных показателей поглощения абакавира и кислоты сульфосалициловой не идентичны, поэтому для определения количественного содержания абакавира в формулу расчета необходимо ввести коэффициент пересчета [4,5,6]. Результаты определения коэффициента пересчета для УФ-спектрофотометрического анализа абакавира по кислоте сульфосалициловой приведены в табл.1.
Подобранные новые условия УФ-спектрофо-тометрического определения абакавира в дальнейшем были использованы для количественного определения в субстанции и таблетках данного препарата.
Результаты количественного определения аба-кавира в субстанции и таблетках занесены в табл. 2.
Таблица 2
Результаты УФ-спектрофотометрического определения абакавира по оптическому образцу сравнения кислоте сульфосалициловой
Метрологические характеристики (n=10, P=95 %)
Субстанция абакавира
X S2 S S х D Е % S r
99,04 0,77780 0,88200 0,2790 0,630 0,64 0,009
Таблетки абакавира по 0,60 г
0,5986 0,00039 0,01981 0,0066 0,016 2,60 0,033
Таблица 3
Параметры валидационной оценки методики спектрофотометрического определения абакавира по кислоте сульфосалициловой
Параметры Критерии валидности Результаты испытания
Специфичность Специфична
Правильность 1выч < 1табл 1выч = 0,39, (табл =2,36), n=9
Прецизионность RSD < 2 % 0,64 %
Линейность результатов r > 0,999 r = 0,9990; У=0,808Х-0,0049
Аналитическая область методики интервал концентраций 0,005-0,010г/мл
Данные представленные в таблице 2 свидетельствуют, что УФ-спектрофотометрическое определение абакавира в субстанции и таблетках по оптическому образцу сравнения кислоте сульфосалициловой соответствует нормативным требованиям. Относительная ошибка определения не превышает 0,64 % для субстанции и 2,60 % для таблеток. Метод нового УФ-спектрофотометриче-ского определения абакавира с использованием оптического образца сравнения характеризуется хорошей воспроизводимостью не превышает 0,009).
Провели валидирование разработанной методики УФ-спектрофотометрического определения абакавира с использованием оптического образца сравнения кислоты сульфосалициловой. Параметры валидации: специфичность, правильность, прецизионность, линейность результатов, аналитическая область методики. Результаты представлены в табл. 3.
Результаты, представленные в табл. 3, свидетельствуют о пригодности предложенной методики.
Разработанная унифицированная методика УФ-спектрофотометрического определения аба-кавира по оптическому образцу сравнения кисло-
те сульфосалициловой отличается доступностью, быстротой, высокой воспроизводимостью, отсутствием высокотоксичных реактивов.
ЛИТЕРАТУРА
1. Государственная Фармакопея. - Т. 1. - 13-е. изд. - 2015. - 1470 с.
2. Иноземцев П.О., Илларионова Е.А., Гордеева В.В. Суль-фосалициловая кислота как оптический образец сравнения для спектрофотометрического анализа // Вопросы естествознания. - 2013. - № 1. - С.96-100.
3. Нормативный документ 000590-270513. Абакавир. -М., 2008. - 5 с.
4. Лазицкая А. М, Илларионова Е.А. Спектрофотометри-ческий анализ флуоксетина // Сибирский медицинский журнал (Иркутск). - 2016. - Т.136, № 1. - С.25-26.
5. Лазицкая А. М, Илларионова Е.А., Токарева М.Г. Спек-трофотометрический анализ тофизопама // Сибирский медицинский журнал (Иркутск). - 2015. - Т.135, № 4. - С.22-25.
6. Теплых А. Н, Илларионова Е.А. Количественное определение тинидазола спектрофотометрическим методом // Сибирский медицинский журнал (Иркутск). - 2010. - Т. 99, № 8. -С. 64-66.
7. Регистр лекарственных средств России. - 19 изд., пере-раб., испр. и доп. - М.: РЛС-МЕДИА, 2010. - 1368 с.
Поступила 13.02.2017
О. В. ГУЛЕНКО1, В. В. ВОЛОБУЕВ2, А. Ф. ВЕРАПАТВЕЛЯН2, А. С. ГРАЧЕВА4, А. С. ГУМЕНЮК1,
Ю. А. ВАСИЛЬЕВ3
СРАВНИТЕЛЬНЫЙ АНАЛИЗ ЗАБОЛЕВАЕМОСТИ КАРИЕСОМ ЗУБОВ У ДЕТЕЙ С ПСИХОНЕВРОЛОГИЧЕСКИМИ РАССТРОЙСТВАМИ И ВРОЖДЕННЫМ НЕСРАЩЕНИЕМ ГУБЫ И НЕБА, ПРОЖИВАЮЩИХ В КРАСНОДАРЕ
1 Кафедра хирургической стоматологии и челюстно-лицевой хирургии,
2Кафедра детской стоматологии, ортодонтии и челюстно-лицевой хирургии,
3Кафедра общественного здоровья, здравоохранения и истории медицины ФГБОУ ВО «Кубанский Государственный Медицинский Университет» Минздрава России, Краснодар, 350063, ул. Седина, 4.
4Лаборатория популяционной генетики Институт общей генетики им. Н.И. Вавилова, РАН, 119991, Москва, ул. Губкина, 3. тел. 8901-008-38-88. E-mail: Yurii-59@mail.ru
