CC BY
37БИОТЕХНОЛОГИИ
УДК: 573.6.086.83
/ ~ \ Создание низколактозной молочной сыворотки с
использованием бактериальной р-галактозидазы
Краснова Юлия Валерьевна
Межрегиональное общественное учреждение «Институт инженерной физики» Адрес: 142210, город Серпухов, Большой Ударный переулок, дом 1а
E-mail: [email protected]
Бутова Светлана Николаевна
ФГБОУ ВО «Московский государственный университет пищевых производств»
Адрес: 125080, Москва, Волоколамское шоссе, дом 11 E-mail: [email protected]
Вольнова Екатерина Романовна
ФГБОУ ВО «Московский государственный университет пищевых производств»
Адрес: 125080, Москва, Волоколамское шоссе, дом 11
E-mail: [email protected]
Николаева Юлия Владимировна
ФГБОУ ВО «Московский государственный университет пищевых производств»
Адрес: 125080, Москва, Волоколамское шоссе, дом 11 E-mail: [email protected]
На сегодняшний момент существует проблема переработки отходов молочной промышленности, в частности молочной сыворотки. Молочная сыворотка является ценным белоксодержащим продуктом, однако на переработку поступает не более 30 % от объёма её выработки в России. В настоящей статье представлены результаты исследования, посвящённые ферментативной переработке молочной сыворотки, направленной на получение низколактозного молочного полуфабриката. В работе использовался фермент бактериальной природы - ¿б-галактозидаза со стандартной активностью 5500 BLU/г. Изучалось влияние рН в интервале от 5,5 до 6,5, температуры в диапазоне от 40 до 45 °С, количества вносимой ¿б-галактозидазы (0,01-0,07 % от массы сыворотки), продолжительности процесса ( от 3 до 24 часов) на эффективность гидролиза молочной сыворотки. Установлено, что при рН= 6,0; температуре 40 °С; продолжительности гидролиза 3 часа ^-галакгозидаза в дозировке 0,05 % обеспечивает оптимальное остаточное количество лактозы в сыворотке, равное 0,6 %. Максимального снижения лактозы в сыворотке (массовая доля лактозы составила 0,1 %) также удалось добиться при следующих параметрах: рН=6,0; температура 40 °С, продолжительность 24 часа, количество фермента 0,07 %. Но проведение гидролиза при указанных параметрах было признано нерациональным и экономически нецелесообразным. Таким образом, были получены оптимальные параметры переработки молочной сыворотки при помощи бактериальной ^-галактозидазы. Был получен низколактозный молочный полуфабрикат, который является перспективной сырьевой основой функциональных и специализированных продуктов питания, предназначенных для людей, страдающих лактозной непереносимостью.
Ключевые слова: ^-галактозидаза, молочная промышленность, сыворотка, ферментативный гидролиз, низколактозный полуфабрикат
Введение
На сегодняшний день до сих пор остаётся нерешённой проблема, касающаяся переработки отходов молочной промышленности, особенно это касается молочной сыворотки - ценного белоксо-
держащего продукта. Для решения указанной проблемы особое значение приобретают биотехнологические процессы, позволяющие перерабатывать молочную сыворотку в новые виды функциональных и специализированных продуктов питания (Гаврилова, 2019).
Материал опубликован в соответствии с международной лицензией Creative Commons Attribution 4.0.
_ Как цитировать _
105 Краснова, Ю. В., Бутова, С. Н., Вольнова, Е. Р., & Николаева, Ю. В. (2019).
Создание низколактозной молочной сыворотки с использованием бактериальной р-галактозидазы. Health, Food & Biotechnology, 1(4). https:// doi.org/10.36107/hfb.2019.i4.s282
Литературный обзор
Стоит отметить, что молочную сыворотку можно использовать в очищенном, но не изменённом виде, при производстве на её основе различных видов сывороточных напитков1.
Использование молочной сыворотки в непере-работанном виде в различных секторах пищевой промышленности ограничено. Это связано, в первую очередь, с наличием в её составе природного углевода - лактозы. В настоящее время число людей, страдающих непереносимостью лактозы, неуклонно растёт. По статистическим данным в России около 35 % населения столкнулись с данной проблемой, в Германии - 16 %, Италии - 41 %, Китае - 99 %, Таиланд - 98 % (Кисель, 2019).
Непереносимость лактозы вызвана дефицитом лактазы, фермента пищеварительного тракта здорового человека, и приводит к симптомам мальаб-собции лактозы (Lapides, 2018; Szilagyi, 2018). Главной причиной лактазной недостаточности считается существенное снижение потребления молочных продуктов (Zheng, 2015). В связи с этим существует острая необходимость в создании продуктов с низким содержанием лактозы или абсолютно безлактозных.
На сегодняшний день уже предложены пути и способы изменения состава и свойств молочной сыворотки. В первую очередь стоит отметить создание пробиотических микроорганизмов, способных облегчать и минимизировать симптомы нарушения работы ЖКТ (Кушугулова, 2010; Arhold, 2018). Эти микроорганизмы принадлежат родам Lactobacterium и Bifidobacterium (Красникова, 2012; Чернышова, 2016). Также положительные результаты дали исследования следующих микроорганизмов: Kluyveromyces lactis и Kluyveromyces marxianus (Mano, 2019).
Вторым путём коррекции сыворотки является её биотрансформация - ферментация. Существует ряд исследований, направленных на поиск микро-организмов-подуцентов, способных синтезировать ^-галактозидазу - фермент, наиболее активно гидролизующий лактозу (Остроумов, 2013; Серба, 2018). Был изучен огромный перечень микроорганизмов, к нему можно отнести: 1. дрожжи: Saccharomyces fragilis, Candida preutotropucalis, Torylopsis versatilisk (Остроумов, 2013) Cryptococcus flavescens (Сапунова, 2014);
2. бактерии: Streptococcus lactis, Lactobacillus plantarum (CY.6) (Kim, 2018), Bacillus pumilus, B. methylotrophicus (Adiguzel, 2018), B. Coagulans NL01 (Liu, 2019);
3. грибы: Aspergillus oryzae (Thum, 2019), Penicilluim terlikowskii, P. multicolor, P. Canescens и др. (Остроумов, 2013).
Применение ферментных препаратов, обеспечивающих гидролитическое расщепление лактозы, считается менее затратным путём, с точки зрения технического оснащения, а также путём, обеспечивающим требуемое качество продукта (Козлов, 2008).
Теоретическое обоснование
На современном этапе развития пищевой индустрии уже разработаны и созданы продукты питания (функциональные и специализированные) для людей с непереносимостью молочного сахара (Беркетова, 2018). Наибольшую долю составляют продукты с пониженным содержанием лактозы для детей и взрослых (Бедных, 2015)2: молочные смеси для детей, мороженое, молочные и кисломолочные напитки, йогурты, молочные консервы и т.д. (Добриян, 2010; Тихомирова, 2016; Судакова, 2017; Голубев, 2019; Афанасьева, 2019).
Исходя из всего вышеперечисленного, направленная модификация молочной сыворотки при помощи биотехнологических процессов сегодня весьма актуальна. Ферментативный гидролиз позволяет создавать новые молочные продукты с заданными свойствами. Продукты имеют увеличенную сладость, сниженное содержание лактозы, которое обеспечит её лучшую сбраживаемость в ЖКТ, увеличит стабильность продукта при хранении, так как моносахариды, образующиеся в результате гидролиза лактозы, увеличивают осмотическое давление (Арсеньева, 2010; Поротова, 2015; Калинина, 2015).
Основное влияния на ход и эффективность ферментативного процесса оказывает вид ферментного препарата и его природа. Из представленных выше данных, наибольшим предпочтением пользуются ß-галактозидазы дрожжевой и бактериальной природы. С этой точки зрения, несомненный интерес представляет Bacillus licheniformis. Возможность биосинтеза ß-галактозидазы бактериями B. licheniformis доказана рядом исследований (Juajin, 2011; Костеневич, 2013).
1 Ганина, А. Г. (2007). Значение функциональных продуктов в питании современного человека. Методические указания к практическому занятию. Оренбург: ИПК ГОУ ОГУ. с. 27
2 Там же, с 28.
Исходя их этого, ß-галактозидаза, полученная методом глубинной ферментации бактерий B. licheni-formis, имеет перспективы при организации промышленной переработки молочной сыворотки. Данный факт обуславливает необходимость проведения исследования.
Целью настоящего исследования является создание низколактозной молочной сыворотки с использованием бактериальной ß-галактозидазы. Для достижения цели были поставлены следующие задачи:
1. определение наиболее благоприятной температуры гидролиза сыворотки;
2. определение оптимальной продолжительности гидролиза;
3. установление наиболее соответсвующей рН среды;
4. определение оптимального количества вносимого ферментного препарата.
Материалы и методы Материалы
Молочная сыворотка, ферментный препарат Nola Fit®, содержащий ß-галактозидазу (продуцент Bacillus licheniformis), стандартная активность 5500 BLU/г.
Методы
1. Определение содержания лактозы по методике, представленной в учебно-методическом пособии «Методы исследования молока и молочных продуктов» (Сучкова, 2015).
2. Определение водородного показателя при помощи анализатора жидкости.
Методика исследования Оборудование
Весы AND DL-2000 WP; термометр жидкостной стеклянный ТС-7-М1; влагомер МВ-23 Ohaus, магнитная мешалка MS-500 Intllab; термостат суховоз-душный ТСО-1180 СПУ; фотоэлектроколориметр КФК-2УХЛ; холодильник Electolux ERN29850; электрическая плитка «Лазурь», водяная баня UT4308; автоклав лабораторный МПК-04; анализатор жидкости SevenCompact S220; встряхиватель лабораторный VM-2000; рефрактометр ИФР-454; лабораторная стеклянная посуда.
Процедура исследования
Осуществляли гидролиз молочной сыворотки при помощи ферментного препарата Nola Fit®. Исследовали влияние температуры (в диапазоне от 40 °С до 45 °С), продолжительности (3, 4 и 24 часа), количества ферментного препарата (от 0,01 % до 0,07 %) на эффективность гидролиза, которую контролировали по остаточному количеству лактозы в сыворотке. Для установления влияния рН среды на эффективность расщепления лактозы изучали действие ферментного препарата в количестве 0,01 %, 0,03 %, 0,05 % и 0,07 % при температуре 40 °С в течение 2 часов.
Анализ данных
Для обработки экспериментальных данных с целью снижения погрешности измерений рассчитывали среднее и стандартное отклонение, пользуясь пакетом прикладных программ STATISTICA.
Результаты
Изучили влияние температуры на содержание лактозы в сыворотке. Гидролиз проводили в течение 2 часов при рН=6,0, количество ферментного препарата составляла 0,01 %, 0,03 %, 0,05 % и 0,07 % к массе сыворотки. Указанная зависимость отражена на диаграмме 1.
Для оценки влияния параметров процесса на полноту расщепления лактозы гидролиз вели при температуре 40-45 °С, рН= 5,5-6,5 и количество препарата от 0,1 % до 0,07 %. Продолжительность варьировалась от 2 до 24 часов. Результаты в обобщённом виде демонстрирует таблица 1.
Результаты представлены в виде средних значений, величины доверительных интервалов средних арифметических значений составила 1,0-2,5 % при вероятности получения случайных отклонений 0,5.
В таблице 2 представлены оптимальные параметры гидролиза молочной сыворотки
Указанные в таблице 2 параметры обеспечили низкое содержание лактозы в сыворотке (0,61 %).
Диаграмма сыворотке
■35±1°С
1. Влияние температуры и количества фермента на остаточное количество лактозы в
Таблица 1
Влияние параметров гидролиза на эффективность расщепления лактозы
Массовая доля лактозы, %
№ п.п. Количество /?-галактозидазы, % 3 часа 4 часа 24 часа
2 часа
1 контроль 3,70 3,70 3,70 3,70
2 0,01 2,70 2,50 2,50 0,60
3 0,03 1,15 1,00 0,61 0,60
4 0,05 1,11 0,61 0,60 0,45
5 0,07 0,90 0,45 0,45 0,10
Таблица 2
Оптимальные параметры гидролиза молочной сыворотки
№ п.п. Количество Параметры
/V-галактозидазы, % р^ Температура,°С Продолжительность, ч
1 0,05±0,005 6,0±0,1 40±1 3
Обсуждение полученных результатов
Из рисунка 1 видно, что существует прямая зависимость: при увеличении количества ферментного препарата содержание лактозы уменьшается. Существование данной зависимости подтверждается многими исследованиями (Остроумов, 2013; Калинина, 2015; Liu, 2019). Причём, резкое снижение наблюдается при использовании препарата в количестве 0,03 %. Увеличение дозировки до 0,05 % и 0,07 % к существенным изменениям не приводили.
Что касаемо влияния температуры на эффективность гидролиза, было установлено, что при t=45±1°C гидролиз протекал слабо, это обусловлено процессами тепловой денатурации в-галак-тозидазы, которые снижают ферментативную активность. Оптимальной является температура
40±1 °С, так как при данном её значении наблюдали наименьшее содержание лактозы. Данные ранее проведённых исследований указывают другие значения температур, которые способствует максимальному расщеплению лактозы бактериальной ß-галактозидазой (продуцент Bacillus licheniformis): 37 °С (Juajun, 2011), 45 °С (Костеневич, 2013). Данные расхождения можно объяснить, некоторыми различиями в геноме продуцента фермента.
Bacillus licheniformis DSM 13 (Juajun, 2011) был целенаправленно генетически изменён. Исходя из этого, можно утверждать, что термо-оптиум для каждого ферментного препарата - это индивидуальная характеристика, зависящая от многих факторов (вид и природа продуцента, особенности условий его культивирования, степень очистки ферментного препарата и пр.).
Следующим важным параметром гидролиза была величина рН. При рН=5,5 содержание лактозы уменьшалось незначительно. Даже увеличение количества фермента не приводило к существенным изменениям. При рН=6,5 и количестве фермента 0,01 % гидролиз практически не протекал. При увеличении дозировки препарата до 0,03 % и 0,05 % интенсивность гидролиза увеличивалась, но, тем не менее, она оставалась ниже, чем при процессе, протекающем при рН= 6,0. Следовательно, оптимальным рН среды является значение 6,0. Однако ряд исследований указывает на то, что максимальную активность бактериальные ^-галактозида-зы имеют в диапазоне 6,5-7,5 (Костеневич, 2013; Juajin, 2011). Данное противоречие, еще раз доказывает тот факт, что оптимальные условия работы ферментов, полученных из разных микроорганизмов, существенно могут различаться, особенно в диапазонах рН.
Проведённое исследование, касающееся подбора оптимальной продолжительности гидролиза, позволило установить, что при длительности гидролиза 3 часа и количестве препарата 0,05%, 4 часа и количестве препарата 0,03 % удалось добиться низкого содержания лактозы в сыворотке. При времени гидролиза 24 часа и количестве препарата 0,01%, 0,03%, 0,05 % и 0,07 % массовая доля лактозы достигала значения 0,6 %. Стоит отметить, что данная продолжительность нерациональна, хоть и обеспечивает самое низкое количество лактозы (0,10 %) в сыворотке при дозировке препарата 0,07 %. Увеличение продолжительности процесса и количества фермента не приводило к ощутимым изменениям, поэтому было признано нецелесообразным с технологической и экономической точки зрения. Установленный оптимум продолжительности гидролиза сыворотки согласуется с данными, ранее проведенных исследований (Калинина, 2015; Поротова, 2015).
Таким образом, были установлены оптимальные параметры гидролиза молочной сыворотки: t=40±1 °С, продолжительность 3 часа, рН=6,0 и количество ферментного препарата 0,05 % от массы сыворотки.
Заключение
Подобранные оптимальные параметры процесса гидролиза позволят проводить модификацию молочной сыворотки. Таким образом возможна организация безотходных и малоотходных молочных производств. Получен низколактозный молочный полуфабрикат с массовой долей лактозы 0,61 %,
который может стать перспективной сырьевой основой функциональных и специализированных продуктов питания, предназначенных для людей, страдающих лактозной непереносимостью.
Литература
Арсеньева, Т. П. (2010). К чему приводит лактазная недостаточность. Молочная промышленность, 7, 28-30.
Афанасьева, М. М., & Широкова, Н. В. (2019). Низколактозный кисломолочный продукт с растительным наполнителем. В Научные основы создания и реализации современных технологий здоровьесбережения (с. 229-232). Бедных, Б. С., & Евдокимов, И. А. (2015). Моделирование углеводного состава в продуктах детского питания. Научные и практические аспекты. Молочная промышленность, 9, 50-52. Беркетова, Л. В. (2018). Разработка продуктов с пониженным содержанием лактозы В Ю.Н. Зубцов (ред.), Здоровьесберегающие технологии в ВУЗе: состояние и перспективы (с.91-95). Гаврилова, Н. Б., & Бортникова, О. А. (2019). Перспективы использования молочной сыворотки в технологии производства специализированных молочных продуктов. В Состояние и перспективы развития наилучших доступных технологий специализированных продуктов питания (с.148-150). Голубев, А. Е., Ионова, И. И., & Машков В. В. (2019). Актуальность расширения низколактозных кисломолочных напитков. Вестник науки, 4 (4), 137-141.
Добриян, Е. И., & Зоров И. Н. (2010). Основные направления применения ^-галактозида-зы в производстве молочных консервов. В Перспективные биокатализаторы для перерабатывающих отраслей АПК (с. 354-359). Калинина, Е. Д., Гаврилов, А. В., & Филонов, Р. А. (2015). Исследование влияния массовой доли ^-галактозидазы и продолжительности процесса на гидролиз лактозы молока. Известия сельскохозяйственной науки Тавриды, 2 (165), 98-103.
Кисель, А. А. (2019). Растительные альтернативы молоку - развивающийся сегмент функциональных напитков. В Конкурентоспособность территорий (с. 184-186). Козлов, С. Г. (2008). Исследование и разработка технологии сывороточных гелеобразных продуктов с использованием растительного сырья [Кандидатская диссертация, Кемеровский технологический институт пищевой промышленности]. Кемерово, Российская Федерация
Костеневич, А. А., & Сапунова, Л. И.(2013). Бактериальные в-галактозидазы: биохимическое и генетическое разнообразие. Труды БГУ 2013, 8 (1), 52-63.
Красникова, Л.В., Маркелова, В.В., Вербицкая, Н.Б., Добролеж, О.В. (2012). Функциональные продукты из молочной сыворотки с использованием антагонистически активных штаммов ацидофильных лактобактерий. Известия высших учебных заведений. Пищевая технология, 1 (325), 41-43.
Кушугулова, А. Р. (2010). Актуальные вопросы исследований и производства пробиотической продукции. Биотехнология. Теория и практика, 2, 25-31.
Остроумов, Л. А., & Гаврилов, В. Г. (2013). Биотрансформация лактозы ферментными препаратами ^-галактозидазы. Техника и технология пищевых производств, 1, 1-5.
Поротова, Е. Ю., Храмицев, А. Г., & Лодыгин, А. Д. (2015). Исследование закономерностей ферментативного гидролиза лактозы во вторичном молочном сырье. Известия сельскохозяйственной науки Тавриды, 3(166), 36-40.
Сапунова, Л. И., & Костеневич, А. А. (2014). Внеклеточные полисахариды дрожжевого гриба Cryptococcus flavescens - продуцента р-га-лактозидазы. Успехи медицинской микологии, 12, 264-266.
Серба, Е. М., Оверченко, М. Б., Игнатова, Н. И., Медриш, М. Э., & Римарева, Л. В. (2018). Обоснование метода определения в-галакто-зидазной активности ферментных препаратов. Вестник российской сельскохозяйственной науки, 6, 65-68. https://doi.org/10.30850/ vrsn/2018/6/65-68
Судакова, О. А., Вийтив, И. М., & Лашеб, С. Л. (2017). Анализ рыночного предложения детских молочных смесей в Москве. Тверской медицинский журнал, 1, 51-52.
Тихомирова, Н. А. (2016). Низколактозные и без-лактозные продукты детского и лечебного питания. Переработка молока, 3 (197), 16-23.
Чернышова, К. С., Андреева, А. А., & Кузнецова, Д. С. (2016). Вторичная лактазная недостаточность в аспекте симбионтного пищеварения. В Ыолодежь, наука, медицина (с. 536-537).
Adiguzel, A., Nadaroglu, H., & Adiguzel, G. (2018). Purification and characterization of -mannanase from Bacillus pumilus (M27) and its applications in some fruit juices. Journal of Food Science and Technology-mysore, 52(8), 5292-5298. https://doi. org/10.1007/s13197-014-1609-y
Arnold, J. W., Simpson, J. B., Roach, J., Bruno-Barcena, J. M., & Azcarate-Peril, M. A. (2018). Prebiotics for Lactose Intolerance: Variability in
Galacto-Oligosaccharide Utilization by Intestinal Lactobacillus rhamnosus. Nutrients, 10(157), https://doi.org/10.3390/nu10101517 Bosso, A., Setti, A. C. I ., Tomal, A. B., Guemra, S., Morioka, L. R. I., & Suguimoto, H. H. (2019). Substrate consumption and beta-galactosi-dase production by Saccharomyces fragilis IZ 275 grown in cheese whey as a function of cell growth rate. Biocatalysis and agricultural biotechnology, 21, UNSP 101335. https://doi.org/10.10Wj. bcab.2019.101335 Juajin, O., Nguen, Thu-Ha, Maischberger, T., Iqbal, S., Haltrich, P., & Yamabhai, M. (2011). Cloning, purification, and characterization-of в-galactosidase from Bacillus licheniformis DSM 13. Biotechnologically Relevant Enzymes and Proteins, 89, 645-654. https://doi.org/10.1007/ s00253-010-2862-2 Kim, S., Huang, E., Park, S., Holzapfel, W., & Lim, S. D. (2018). Physiological Characteristics and Anti-obesity Effect of Lactobacillus plantarum K10. Korean Journal for Food Science of Animal resources, 38(3), 554-569. https://doi.org/10.5851 / kosfa.2018.38.3.554 Lapides, R. A., & Savaiano, D. A. (2018). Gender, Age, Race and Lactose Intolerance: Is There Evidence to Support a Differential Symptom Response? A Scoping Review. Nutrients, 10(12). 1956. https:// doi.org/10.3390/nu10121956 Liu, P., Xie, J. X., Liu, J. H., & Ouyang, J. (2019). A novel thermostable beta-galactosidase from Bacillus co-agulans with excellent hydrolysis ability for lactose in whey. Journal of Dairy Science, 102(11), 97409748. https://doi.org/10.3168/jds.2019-16654 Mano, M. C. R., Paulino, B. N., & Pastore, G. M. (2019). Whey permeate as the raw material in galacto-oli-gosaccharide synthesis using commercial enzymes. Food Research International, 124, 78-85. https:// doi.org/10.1016/j.foodres.2018.09.019 Szilagyi, A., & Ishayek, N. (2018). Lactose Intolerance, Dairy Avoidance, and Treatment Options. Nutrients, 10(12), 1994. https://doi.org/10.3390/ nu10121994
Thum, C., Weinborn, V., Barile, D., McNabb, W. C., Roy, N. C., & Bell, J. M. L. N. D. (2019). Understanding the Effects of Lactose Hydrolysis Modeling on the Main Oligosaccharides in Goat Milk Whey Permeate. Molecules, 24(18), 3294. https://doi. org/10.3390/molecules24183294 Zheng, X., Chu, H., Cong, Y., Deng, Y., Long, Y., Zhu, Y., Pohl, D., Fried, M., Dai, N., & Fox, M. (2015). Self-reported lactose intolerance in clinic patients with functional gastrointestinal symptoms: prevalence, risk factors, and impact on food choices. Neurogastroenterology and Motility, 27(8), 11381146. https://doi.org/10.1111/nmo.12602
BIOTECHNOLOGY
/ \
Creation of Low-Lactose Milk Serum
using Bacterial p-Galactosidase
Yuliya V. Krasnova
Interregional public organization «Institute of Engineering Physics» 1a, Bolshoy Udarniy pereulok, Serpukhov, 142210, Russian Federation
E-mail: [email protected]
Svetlana N. Butova
Moscow State University of Food Production 11 Volokolamskoe highway, Moscow, 125080, Russian Federation
E-mail: [email protected]
Ekaterina R. Volnova
Moscow State University of Food Production 11 Volokolamskoe highway, Moscow, 125080, Russian Federation
E-mail: [email protected]
Julia V. Nikolaeva
Moscow State University of Food Production 11 Volokolamskoe highway, Moscow, 125080, Russian Federation
E-mail: [email protected]
Today, there is a problem of processing waste of the dairy industry, in particular whey. Whey is a valuable protein-containing product, but no more than 30% of the volume of its generation in Russia goes into processing. This article presents the results of research on enzymatic processing of whey aimed at obtaining low-lactose dairy semi-finished product. The enzyme of bacterial nature - ¿8-galactosidase with a standard activity of 5500 BLU/g was used in the research. The influence of pH in the range from 5.5 to 6.5, temperature in the range from 40 to 45 °C, amount of /i-galactosidase introduced (0.01-0.07% of serum mass) and the duration of the process (from 3 to 24 hours) on the efficiency of whey hydrolysis was studied. It was found that at pH = 6.0; temperature of 40 °C and the duration of hydrolysis of 3 hours the dosage of ^-galactosidase amounting to 0.05% provides optimal residual amount of lactose in serum equal to 0.6%. The maximum reduction of lactose in serum (the mass fraction of lactose was 0.1%) was also achieved at the following parameters: pH = 6.0; temperature 40 °C, duration 24 hours, the amount of enzyme 0.07%. But the hydrolysis at these parameters was considered irrational and economically inappropriate. Thus, optimal parameters for milk whey processing using bacterial ^-galactosidase were determined. A low-lactose dairy semi-finished product was obtained, which is a promising raw material for functional and specialized food products intended for people suffering lactose intolerance.
Keywords: ^-galactosidase, dairy industry, serum, enzymatic hydrolysis, low-lactose semifinished product
References
Arsen'eva, T. P. (2010).What lactase deficiency leads to. Molochnaya promyshlennost' [Dairy industry], 7, 28-30.
Afanas'eva, M. M., & Shirokova, N. V. (2019). Low-lactic fermented milk product with vegetable filler. In Nauchnye osnovy sozdaniya i realizacii sovre-mennyh tekhnologij zdorov'esberezheniya [Scientific foundations for the creation and implementation
of modern technologies for health conservation] (p.229-232).
Bednyh, B. S., & Evdokimov, I. A. (2015). Modeling of carbohydrate composition in baby food. Scientific and practical aspects. Molochnaya promyshlennost' [Dairy industry], 9, 50-52.
Berketova, L. V. (2018). Development of low lactose products. In Zdorov'esberegayushchie tekhnologii v VUZe: sostoyanie i perspektivy [Healthy-saving technologies in university: state and prospects]
_ How to Cite _
Krasnova, Y. V., Butova, S. N., Volnova, E. R., & Nikolaeva, J. V. (2019). Creation of Low-Lactose Milk Serum using Bacterial p-Galactosidase. Health, Food & Biotechnology, 1(4). https://doi.org/10.36107/hfb.2019.i4.s282
This article is published under the Creative ......
Commons Attribution 4.0 International License. 111
(p.91-95).
Gavrilova, N. B., & Bortnikova, O. A. (2019). Prospects for the use of whey in the production technology of specialized dairy products. In Sostoyanie i per-spektivy razvitiya nailuchshih dostupnyh tekhnologij specializirovannyh produktov pitaniya [State and development prospects of the best available technologies for specialized food products] (p. 148-150).
Golubev, A. E., Ionova, I. I., & Mashkov V. V. (2019). The relevance of expanding low-lactic fermented milk drinks. Vestnik nauki [Herald of Science], 4(4), 137-141.
Dobriyan, E. I., & Zorov I. N. (2010). The main areas of application of y#-galactosidase in the production of canned milk. In Perspektivnye biokatalizatory dlya pererabatyvayushchih otraslej APK [Promising biocatalysts for the processing industries of the agro-industrial complex] (p.354-359).
Kalinina, E. D., Gavrilov, A. V., & Filonov, R. A. (2015). Investigation of the influence of the mass fraction of jff-galactosidase and the duration of the process on the hydrolysis of milk lactose. Izvestiya sel'sko-hozyajstvennoj nauki Tavridy [News of agricultural science of Tauris], 2 (165), 98-103.
Kisel', A. A. (2019). Plant-based alternatives to milk - a growing segment of functional beverages. In Konkurentosposobnost' territorij [Competitiveness of territories] (p.184-486).
Kozlov, S. G. (2008). Issledovanie i razrabotka tekh-nologii syvorotochnyh geleobraznyh produktov s is-pol'zovaniem rastitel'nogo syr'ya [Research and development of technology for whey gel products using plant materials] [Candidate dissertation/ Kemerovo.
Kostenevich, A. A., & Sapunova, L. I.(2013). Bacterial j#-galactosidases: biochemical and genetic diversity. Trudy BGU 2013 [Proceedings of BSU 2013], 8 (1), 52-63.
Krasnikova, L. V., Markelova, V. V., Verbickaya, N. B., & Dobrolezh, O. V . (2012). Functional whey products using antagonistically active strains of acidophilic lactobacilli. Izvestiya vysshih uchebnyh zavedenij. Pishchevaya tekhnologiya [News of higher educational institutions. Food technology], 1 (325), 41-43.
Kushugulova, A. R. (2010). Current issues of research and production of probiotic products. Biotekhnologiya. Teoriya i praktika [Biotechnology. Theory and practice], 2, 25-31.
Ostroumov, L. A., & Gavrilov, V. G. (2013). Biotransformation of lactose with jff-galactosidase enzyme preparations. Tekhnika i tekhnologiya pish-chevyh proizvodstv [Technique and technology of food production], 1, 1-5.
Porotova, E. YU., Hramicev, A. G., & Lodygin, A. D. (2015). The study of the patterns of enzymatic hy-
drolysis of lactose in secondary milk raw materials. Izvestiya sel'skohozyajstvennoj nauki Tavridy [News of agricultural science of Tauris], 3(166), 36-40. Sapunova, L. I., & Kostenevich, A. A. (2014). Extracellular polysaccharides of the yeast fungus Cryptococcus flavescens - producer of в-galacto-sidase. Uspekhi medicinskoj mikologii [Advances in Medical Mycology], 12, 264-266. Serba, E. M., Overchenko, M. B., Ignatova, N. I., Medrish, M. E., & Rimareva, L. V. (2018). Justification of the method for determining p-ga-lactosidase activity of enzyme preparations. Vestnik rossijskoj sel'skohozyajstvennoj nauki [Bulletin of the Russian agricultural science], 6, 65-68. https://doi.org/10.30850/vrsn/20W6/65-68 Sudakova, O. A., Vijtiv, I.M., & Lasheb, S. L. (2017). Analysis of the market supply of infant formula in Moscow. Tverskoj medicinskij zhurnal [Tver Medical Journal], 1, 51-52. Tihomirova, N. A. (2016). Low-lactose and lactose-free products for children and medical nutrition. Pererabotka moloka [Milk processing], 3(197), 16-23.
Chernyshova, K. S., Andreeva, A. A., & Kuznecova, D. S. (2016).Secondary lactase deficiency in the aspect of symbiotic digestion. In Molodezh', Nauka, Medicina [Youth, Science, Medicine] 536-537. Adiguzel, A., Nadaroglu, H., & Adiguzel, G. (2018). Purification and characterization of -mannanase from Bacillus pumilus (M27) and its applications in some fruit juices. Journal of Food Science and Technology-mysore, 52(8), 5292-5298. https://doi. org/10.1007/s13197-014-1609-y Arnold, J. W., Simpson, J. B., Roach, J., Bruno-Barcena, J. M., & Azcarate-Peril, M. A. (2018). Prebiotics for Lactose Intolerance: Variability in Galacto-Oligosaccharide Utilization by Intestinal Lactobacillus rhamnosus. Nutrients, 10(157), https://doi.org/10.3390/nu10101517 Bosso, A., Setti, A. C. I ., Tomal, A. B., Guemra, S., Morioka, L. R. I., & Suguimoto, H. H. (2019). Substrate consumption and beta-galactosi-dase production by Saccharomyces fragilis IZ 275 grown in cheese whey as a function of cell growth rate. Biocatalysis and agricultural biotechnology, 21, UNSP 101335. https://doi.org/10.10Wj. bcab.2019.101335 Juajin, O., Nguen, Thu-Ha, Maischberger, T., Iqbal, S., Haltrich, P., & Yamabhai, M. (2011). Cloning, purification, and characterization-of в-galactosidase from Bacillus licheniformis DSM 13. Biotechnologically Relevant Enzymes and Proteins, 89, 645-654. https://doi.org/10.1007/ s00253-010-2862-2 Kim, S., Huang, E., Park, S., Holzapfel, W., & Lim, S. D. (2018). Physiological Characteristics and
Anti-obesity Effect of Lactobacillus plantarum K10. Korean Journal for Food Science of Animal resources, 38(3), 554-569. https://doi.org/10.5851 / kosfa.2018.38.3.554 Lapides, R. A., & Savaiano, D. A. (2018). Gender, Age, Race and Lactose Intolerance: Is There Evidence to Support a Differential Symptom Response? A Scoping Review. Nutrients, 10(12). 1956. https:// doi.org/10.3390/nu10121956 Liu, P., Xie, J. X., Liu, J. H., & Ouyang, J. (2019). A novel thermostable beta-galactosidase from Bacillus co-agulans with excellent hydrolysis ability for lactose in whey. Journal of Dairy Science, 102(11), 97409748. https://doi.org/10.3168/jds.2019-16654 Mano, M. C. R., Paulino, B. N., & Pastore, G. M. (2019). Whey permeate as the raw material in galacto-oli-gosaccharide synthesis using commercial enzymes. Food Research International, 124, 78-85. https://
doi.org/10.1016/j.foodres.2018.09.019
Szilagyi, A., & Ishayek, N. (2018). Lactose Intolerance, Dairy Avoidance, and Treatment Options. Nutrients, 10(12), 1994. https://doi.org/10.3390/ nu10121994
Thum, C., Weinborn, V., Barile, D., McNabb, W. C., Roy, N. C., & Bell, J. M. L. N. D. (2019). Understanding the Effects of Lactose Hydrolysis Modeling on the Main Oligosaccharides in Goat Milk Whey Permeate. Molecules, 24(18), 3294. https://doi. org/10.3390/molecules24183294
Zheng, X., Chu, H., Cong, Y., Deng, Y., Long, Y., Zhu, Y., Pohl, D., Fried, M., Dai, N., & Fox, M. (2015). Self-reported lactose intolerance in clinic patients with functional gastrointestinal symptoms: prevalence, risk factors, and impact on food choices. Neurogastroenterology and Motility, 27(8), 11381146. https://doi.org/10.1111/nmo.12602
