CC BY
9
ТЕЗИСЫ ПОСТЕРНЫХ ДОКЛАДОВ И ПРИНЯТЫЕ К ПУБЛИКАЦИИ
на 2,82 нг/ мл выше по сравнению со здоровыми добровольцами (4,3 ± 1,31 нг/мл, p < 0,05); влияние пола на показатель не обнаружено. По данным ИГХ в клетках опухоли экспрессия uPA оказалась также значительно выше по сравнению с нормальной тканью. При этом изменяется и локализация uPA: если в норме uPA обнаруживается в цитоплазме клеток эпителия и стромы, то в случае опухоли содержание uPA не только резко возрастает в цитоплазме клеток опухоли и стромы, но также обнаруживается в высокой концентрации в ядрах клеток опухоли. При анализе uPAR в сыворотке здоровых доноров его концентрация составила 2,69 ± 0,74 нг / мл у мужчин и 3,32 ± 1,24 нг / мл у женщин; при этом обнаружилось достоверное его повышение на 1,97 нг/ мл у онкобольных пациентов женского пола по сравнению со здоровыми донорами (5,29 ± 1,52 нг/ мл; p < 0,05); у мужчин разницы между здоровыми и онкобольными пациентами не обнаружено. При оценке результатов ИГХ обнаружено значимое увеличение содержания uPAR в мембране и цитоплазме клеток как самой опухоли, так и окружающей опухоль стромы по сравнению со здоровой тканью. Выводы: Предварительная оценка возможности использования компонентов урокиназной системы как оптимальных дифференциально-диагностических маркеров у пациентов с аденокарциномой ЖКТ показала, что uPA и uPAR являются перспективными мишенями в онкодиа-гностике. В ходе дальнейшего исследования предстоит проанализировать возможность использования сывороточных концентраций uPA и uPAR на этапе обращения пациента с целью выявления онкозаболевания и оценить риск неблагоприятного прогноза (рецидива). Данные ИГХ позволяют сделать вывод о том, что источниками высокого уровня uPAи uPAR в сыворотке является ткань опухоли — сами опухолевые клетки и клетки окружающей опухоль стромы.
Транслокация урокиназы в ядро опухолевой клетки может означать активацию ЭМП. Ранее мы показали, что в клетках опухоли нейробластомы in vitro «ядерная» урокиназа запускает программу эпителиально-мезенхимального перехода, переводя клетки в промиграторное состояние, устойчивое к химиотерапевтическим агентам (цисплатин, доксорубицин). Возможно, что при аденокациноме ЖКТ происходит аналогичная урокиназо-зависимая трансформация — повышенное содержание урокиназы в опухоли позволяет ей транслоцироваться в ядра клеток опухоли, активируя в них ЭМП, инвазию и метастазирование, а также их химиорезистентность. Выявление уровней экспрессии этих белков в опухолевых тканях и поиск их взаимосвязи с экспрессией маркеров ЭМП позволит дополнительно разрабатывать дифференцированные подходы к стратификации и лечению онкобольных, в том числе с признаками метастазирования.
Работа выполнена в рамках выполнения НИР ГЗ «Поиск оптимальных дифференциально-диагностических алгоритмов у пациентов с онкологическими заболеваниями ЖКТ с учётом молекулярных механизмов онкогенеза».
Экспериментальная онкология
СОСТАВ МИКРОБИОМА И ОПУХОЛЕВОЙ СТРОМЫ ПЛОСКОКЛЕТОЧНОГО РАКА ПИЩЕВОДА - НОВЫЙ ПОДХОД К ОПРЕДЕЛЕНИЮ ПРОГНОЗА ЗАБОЛЕВАНИЯ
О.В. Ковалева, П.А. Подлесная, М.А. Рашидова, В.В. Мочаль-никова, А.Н. Грачев
Место работы: ФГБУ «НМИЦ онкологии имени Н. Н. Блохина» Минздрава России, Москва, Россия Эл. почта: ovkovaleva@gmail.com
Цель: Целью данной работы является изучение прогностической значимости общей бактериальной нагрузки опухолей пищевода в зависимости от фенотипа клеток воспалительного инфильтрата стромы опухолей. Материалы и методы: В данное исследование включены 48 пациентов, оперированных по поводу плоскоклеточного рака пищевода в ФГБУ «НМИЦ онкологии имени НН Блохина». Исследование фенотипа клеток воспалительного инфильтрата опухолевой стромы проводилось методом иммуногистохимии с использованием антител к маркерам макрофагов классической М1 (iNOS) и альтернативной М2 (CD206) активации, а также регуляторных Т-клеток (FOXP3). Оценку общей бактериальной нагрузки опухолей проводили по уровню экспрессии гена 16S рРНК методом ПЦР в режиме реального времени. Анализ выживаемости проводился путем построения кривых дожития по методу Каплана-Майера.
Результаты: Мы охарактеризовать 2 группы опухолей плоскоклеточного рака пищевода, прогностически значимо отличающиеся друг от друга содержанием грам-положи-тельных бактерий и фенотипом опухолевой стромы. Первый тип характеризуется высокой бактериальной нагрузкой, большим содержанием CD206 макрофагов и имеет неблагоприятный прогноз.
В данных опухолях преобладают грам-положительные бактерии, что по-видимому и обуславливает их «иммуносу-прессорый» фенотип. Преобладание грам-положительных бактерий происходит за счет снижения количества доминирующих грам-отрицательных микроорганизмов в данной группе опухолей (например, род Gemmatimonas, r =-0,742, p =0,033). Иммуносупрессия в данном типе опухолей также подтверждается большим содержанием FOXP3 регуляторных Т-клеток. Второй тип опухолей характеризуется низкой грам-положительной бактериальной нагрузкой и, аналогично первой группе, большим содержанием CD206 макрофагов. Данная комбинация маркеров прогностически благоприятна. Для данной группы опухолей характерна ассоциация содержания грам-отрицательных бактерий (r =-0,83, p = 0,013) и общего их числа в опухоли (r =-0,76, p = 0,029) и количеством iNOS. А именно преобладание в данном типе опухолей грам-отрицательных бактерий, способствует повышению экспрессия iNOS и активному воспалительному ответу, что в конечном итоге может способствовать благоприятному прогнозу.
ЗЛОКАЧЕСТВЕННЫЕ ОПУХОЛИ Российское общество клинической онкологии
том / vol. 11 №3s1 • 2021
MALIGNANT TUMOURS
Russian Society of Clinical Oncology
Российский Ж ж* онкологический Ami« ▼ конгресс
Экспериментальная онкология
Заключение: В результате проведенных исследований впервые показано, что микробиом опухолей пищевода, который на сегодняшний день может считаться полноценным компонентом опухолевой стромы, может являться прогностически значимым, особенно в совокупности с другими стромальными маркерами.
Исследование выполнено при финансовой поддержке РФФИ в рамках научного проекта № 18-29-09069.
ФОРМИРОВАНИЕ ИММУНОЛОГИЧЕСКОЙ ТОЛЕРАНТНОСТИ ОПУХОЛИ К ЦИТОТОКСИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ КЛЕТОК ВРОЖДЕННОГО ИММУНИТЕТА
П.А. Подлесная, О.В. Ковалева, А.Н. Грачев Место работы: НИИ канцерогенеза, ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н. Н. Блохина» Минздрава России, Москва, Россия Эл. почта: polina.pod@yandex.ru
Цель: Изучение механизмов формирования устойчивости опухолевых клеток к цитотоксическому действию макрофагов и поиск детерминант данного вида устойчивости.
Материалы и методы: Использованы клеточные линии рака предстательной железы (РС3, Du145) и легкого (H1975, H1299), клеточная линия миелоидного происхождения — THP-1. Получение цитотоксических макрофагоподобных клеток проводили путем стимуляции THP-1 провоспалитель-ными цитокинами. Устойчивые клоны опухолевых клеток получали путем сокультивирования последних с цитоток-сическими макрофагоподобными клетками. Анализ дифференциальной экспрессии генов полученных устойчивых производных опухолевых клеток проводился при помощи RNA-seq.
Результаты: Создана уникальная модельная система, позволяющая в условиях in vitro моделировать процесс отбора опухолевых клеток под воздействием цитоток-сической активности макрофагов. Впервые получены производные опухолевых клеток рака предстательной железы и легкого, устойчивые к цитотоксической активности макрофагов. Обнаружено, что устойчивые клетки имеют тенденцию к увеличению скорости пролиферации. Результаты анализа транскриптома продемонстрировали порядка 350 дифференциально экспрессирующихся генов в полученных устойчивых производных по сравнению с контролем. Среди них экспрессия порядка 170 генов была повышена, а экспрессия около 180 генов была подавлена. В устойчивых клетках активируются гены, относящиеся к ответу на стимуляцию цитокинами, иммунному ответу, клеточной коммуникации и адгезии. Гены с пониженной экспрессией относились к ответу на жасмоновую кислоту, метаболизму поликетидов и алкогольных соединений, а также к метаболизму стероидов.
Заключение: Создана уникальная модель получения опухолевых клеток, устойчивых к цитотоксической ак-
тивности клеток врожденного иммунитета. Устойчивые опухолевые клетки имеют тенденцию к повышенной скорости пролиферации. На основании полученных данных были определены генетические детерминанты, потенциально влияющие на устойчивость опухолевых клеток к иммунотерапии.
Работа выполнена при поддержке Российского Фонда Фундаментальных Исследований (грант № 20-015-00479).
СПОСОБ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЙ ЛУЧЕВОЙ ТЕРАПИИ С ПРИМЕНЕНИЕМ МИКРОЧАСТИЦ ОКСИДА ТАНТАЛА ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ ЗЛОКАЧЕСТВЕННЫХ НОВООБРАЗОВАНИЙ
О.С. Плотникова, В.И. Апанасевич, М.А. Медков, Д.Н. Гри-щенко, И.В. Панкратов, А.С. Федоров
Место работы: ГБУЗ «Приморский краевой онкологический диспансер», Владивосток, Россия; ФГБОУ ВО «Тихоокеанский государственный медицинский университет» Минздрава России, Владивосток, Россия; Институт химии Дальневосточного отделения РАН, Россия, Владивосток Эл. почта: radiolog2906@gmail.com
Цель: Оптимизация лечения злокачественных новообразований методом лучевой терапии. В эксперименте задействовано 28 животных — мыши, самки, весом 20-22 гр. Для проведения исследования был подготовлен раствор фосфатного стекла, включающего 40%Та205. Для приготовления раствора сделана навеска сухого вещества 150 мг, которая разведена до состояния взвеси в 15 мл физиологического раствора (1 мл взвеси =1% раствору).
Проведена перевивка опухоли в правую заднюю лапу (аденокарцинома Эрлиха 500 000 клеток) всем животным. Далее животные распределены на 2 группы, 14 мышей в каждой группе. Проведено введение препаратов в область опухоли и на аппарате True Beam фирмы Varian осуществлен сеанс лучевой терапии области правой задней лапы с применением болюса 1 см мощностью 6 МэВ, одна фракция, СОД 20 Гр. 1 группа — контроль: опухоль доза ионизирующего излучения одна фракция СОД 20 Гр; 2 группа — введение в область опухоли 0,3 мл взвеси фосфатного стекла с включенным 40 % Та2О5 в физиологическом растворе. Дальнейшее наблюдение за животными проводилось в течение 63 дней до естественной смерти последнего животного.
Результаты: Исходя из данных выживаемости животных наилучшие показатели наблюдаются во второй группе, где испытуемым было проведено введение в область опухоли 0,3 мл взвеси фосфатного стекла с включенным 40 % Та2О5 в физиологическом растворе доза ионизирующего излучения одна фракция СОД 20 Гр: в первой группе продолжительность жизни составила 30 дней, во второй — 63 дня.
ЗЛОКАЧЕСТВЕННЫЕ ОПУХОЛИ Российское общество клинической онкологии
том / vol. 11 № 3s1 • 2021
MALIGNANT TUMOURS
Russian Society of Clinical Oncology
