CC BY
4
£=35,20+0,68*1+2,59*6 #=0,3. За результирующую переменную (у) принята заболеваемость населения кишечными инфекциями неустановленной этиологии. Объясняющими переменными явились среднемесячные микробиологические показатели качества воды в течение 5 лет: относительная доля проб (в процентах) с коли-индек-^сом более 3 (Х\), более 20 (х3), в которых обнаружены патогенные и условно-патогенные бакте-> рии (х6), средний коли-индекс (хя) и др.
Полученные математические модели позволяют с определенной достоверностью судить об изменениях уровня заболеваемости при колебаниях качества воды. Модели объясняют небольшую часть рассматриваемого явления (до 40 % на основании коэффициента детерминации), что согласуется с реальными представлениями об эпидемиологической значимости водного и других факторов передачи.
Таким образом, разработанные и апробированные методы позволяют с разных позиций оценивать степень возможной эпидемической опасности питьевого водопользования при нарушении ^ гигиенических требований. Метод эпидемиологи-** ческой оценки гигиенических условий с использованием экспертного подхода как наиболее простой внедрен в практику работы санэпидслужбы с целью оперативного и перспективного прогнозирования эпидемиологической ситуации, выявления недостаточного уровня развития комму-
нальных служб водообеспечения населения при их устранении. Метод позволяет объединить усилия санитарного врача, бактериолога, эпидемиолога по обобщению и систематизации имеющегося в санэпидстанции материала для подготовки обоснованных рекомендаций по улучшению условий хозяйственно-питьевого водоснабжения.
Проведенные исследования позволяют совершенствовать критерии оценки качества воды по микробиологическим показателям в нормативных документах.
Литература
1. Методические указания по эпидемиологической оценке санитарно-гигиенических условии в целях профилактики кишечных инфекции. — М., 1986.
2. Тылес А. Е.// Окружающая среда и здоровье населения.— Таллин, 1964. — С. 55—56.
3. Тылес А. Е. Ц Эпидемиология, клиника, диагностика и профилактика антропонозиых и зоонозных инфекций. — Астрахань, 1982.— С. 17—19.
Поступило I0.11.S7
Summary. The study was designed to analyze three methods of measuring the degree of potential epidemic hazard according to sanitary and hygienic conditions of centralized water management. The role of watery route of transmission of a number of intestinal infections was investigated and the quantitative association of the incidence of intestinal infections among the population with the level of microbic contamination of drinking water established. The simplest and most effective method was recommended for practical application.
УДК 614.7:579.852.U|-078
Л. Ф. Ерусалимская
СОХРАНЕНИЕ ВИРУЛЕНТНЫХ СВОЙСТВ ПАТОГЕННЫХ ЭШЕРИХИИ В ОБЪЕКТАХ ОКРУЖАЮЩЕЙ СРЕДЫ
Киевский НИИ общей и коммунальной гигиены им. А. Н. Марзеева
Среди острых кишечных инфекций у людей эшерихиозы занимают в настоящее время значительный удельный вес. Полиморфизм клинической картины этой инфекции связан не только с возрастом и состоянием организма заболевшего, но и с биологическими свойствами возбудителя.
Известно, что детерминанты, контролирующие соответствующие свойства бактерий и способность эшерихий к внутриэпителиальному размножению, коррелируют с вирулентностью эшерихий, и поэтому их причисляют к факторам пато-генности этих бактерий [2].
В последние годы появились работы, свидетельствующие о корреляции между биохимическими, серологическими и инвазивными свойствами эшерихий [8]. J. Harris и соавт. [5] впервые продемонстрировали связь между присутствием плазмиды и инвазивностыо, определенной с помощью теста Шереня при изучении 31 штамма Е. coli, выделенных в основном из испражнений человека, а также других источников. Энтероток-
сигенные и энтероинвазивные штаммы эшерихии чаще всего определяют двумя тестами: Шереня и на культуре клеток [4]. Многие авторы отдают предпочтение культуре клеток как модели для исследования бактериальной адгезии и инвазии [3].
Эти работы направлены на изучение взаимодействия эшерихий с поверхностными структурами эпителиальных клеток, а также выявление фактора инвазии бактерий, определяющих патогенные свойства. Однако исследования проводились в основном со штаммами, выделенными от больных животных и людей. Что же касается патогенных свойств эшерихий, выделенных из окружающей среды, то в литературе сведения по этому вопросу очень скудны.
В связи с этим целью данной работы явилось изучение возможности сохранения вирулентных свойств патогенных эшернхий (ПЭ) в объекта:; окружающей среды.
Проявление инвазивных свойств ПЭ на биологических моделях
% поражен-
ных клеток
Серогруппы Изучено Число поло- Vero
штаммов житсльных
проб Шереня в первые часы через 24 ч
01 2/0 0 _ _
02 4/0 0 — —
015 2/1 0 51 —
020 2/0 0 — —
025 20/3 5 24 26,5
026 16/3 4 6 2
027 3/0 0 — —
033 2/2 0 20 9,5
044 8/3 1 8,3 —
055 3/2 0 18,5 4
075 2/0 0 — —
091 6/1 1 100 14
0111 15/3 4 10,4 37
0112 1/1 0 8 —
0114 5/4 0 20 11,2
0116 1/0 1 _ —
0117 1/0 0 — —
0119 9/1 1 100 5
0124 4/3 1 9 2
0125 2/1 0 0 —
0126 2/0 0 — —
0127 1/0 1 — —
0144 1/0 0 — —■
0151 22/2 5 20 2
«408» i/o 0 — —
Всего ... 25/14 135/30 24 (17,7%) 28,2 11,3
Примечание. В числителе — число штаммов, изученных методом Шереня, в знаменателе — число штаммов, испытанных в культуре Vero. — исследования не проводились.
Исследования проводили на экспериментальных биологических моделях. Объектом изучения служили ПЭ, выделенные из сточных вод, воды поверхностных водоемов, смывов с оборудования, из почвы и пищевых продуктов. Всего изучено 135 штаммов ПЭ 25 серогрупп (см. таблицу) . Факторы патогенности у ПЭ изучали по двум тестам: кератоконъюнктивальной пробе на морских свинках и на перевиваемой культуре клеток Vero, наблюдая способность этих бактерий к внутриклеточной инвазии.
Кератоконъюнктивальную пробу ставили по методике Шереня [6] с некоторой модификацией. В конъюнктивальную полость глаза гвинейской свинки вносили по 2 капли культуры (0,5 млрд/мл микробных клеток ПЭ в изотоническом растворе хлорида натрия). В течение 14 дней, помимо клинических проявлений, контролировали факт заражения посевом отделяемого из глаза с последующим выделением и идентификацией чистой культуры.
Клеточную культуру Vero выращивали на стеклах в пробирках. В опытные пробирки вносили по 0,1 мл 0,5 млрд. взвеси бактериальной суспензии ПЭ и по 1 мл поддерживающей пита-
тельной среды 199. После 3-часовой экспозиции при 37 °С среду сливали, клетки промывали раствором Хенкса и заменяли на свежую среду 199 с добавлением 2 % бычьей сыворотки. После 1 —
2—24-часовой экспозиции в термостате готовили препараты для учета реакции. Стекла с инфицированной тканью вынимали, тщательно промыва- . ли в растворе Хенкса для удаления внеклеточно" расположенных бактерий. После фиксации мазков этиловым спиртом препараты окрашивали по ¡ Романовскому — Гимзе или гематоксилин-эозином. При микроскопии мазков производили подсчет пораженных ПЭ на 100 клеток культуры Vero. Контролем служили не зараженные ПЭ клетки.
Определение факторов вирулентности ПЭ из окружающей среды позволило выявить наиболее инвазивные штаммы по способности их активно проникать в культуру клеток или вызывать экспериментальный кератоконъюнктивит.
В наших опытах проба Шереня проявлялась лишь конъюнктивитом, который возникал на 2—
3-й сутки и исчезал на 4—5-е сутки. Классический кератит с образованием бельма дал 1 штамм лк серогруппы 0124, который подтвердился в трех -последующих повторностях. Всего 24 штамма дали положительный результат, т. е. 17,7 % культур 10 серогрупп 025, 026, 044, 091, 0111, 0116, 0119, 0124, 0127, 0151. Чаще это были ПЭ, выделенные из сточных вод (11) и смывов (9).
У некоторых животных в первые часы после введения ПЭ в конъюнктиву глаза наблюдали только повышенную слезоточивость, которая быстро проходила. Эту реакцию мы расценивали как отрицательную.
В литературе имеются сведения о том, что культуры эшерихий серогрупп 0111: В.,, 026 : В6, 055 : Bs и др., являющиеся возбудителями коли-энтеритов у детей раннего возраста, не вызывают кератоконъюнктивит у морских свинок [1]. ш Однако можно предположить, что в окружающей -среде ПЭ, обладая относительной устойчивостью, сохраняют не только жизнеспособность, но при , определенных условиях могут получать с помощью фага и конъюгации от более вирулентных микроорганизмов гены, детерминирующие вирулентность [7]. В результате этого возможно проявление вирулентности таких штаммов для лабораторных животных, что подтвердилось в наших опытах.
В таблице представлены также результаты действия ПЭ на культуру клеток Vero в сравнении с пробой Шереня. Всего изучено 30 штаммов ПЭ 14 серогрупп. Как видно из таблицы, большинство изученных штаммов (24 из 30) оказывали цитотоксическое действие на культуру клеток. Отрицательный результат дали 2 штамма серогруппы 026 и по 1 штамму серогрупп 025, 0114, 0124, 0125, которые не оказывали выражен- { ного действия. При микроскопии мазков в этом случае не было выявлено дегенерации клеточных
культур. Остальные штаммы инвазивные свойства, т. е. способность проникать в культуру клеток, проявляли с разной интенсивностью. Процент пораженных клеток в первые часы контакта колебался в среднем от 6 до 51. Наибольший процент (18,5—51) пораженных клеток вызывали штаммы 6 серогрупп (015, 025, 033, 055, 0114, *151), из которых в 3 с наибольшим постоянством обнаруживался только энтеротоксин либо > энтеротоксин в сочетании с фактором колонизации. Штаммы серогрупп 091 и 0119 вызывали полную дегенерацию культур клеток в первые часы заражения. Изучаемые ПЭ, выделенные из окружающей среды, оказались способны не только проникать в культуру клеток, но и размножаться в ней. Это подтверждалось увеличением количества ПЭ через 24 ч контакта с клетками.
При сравнении проявления инвазивных свойств по двум тестам можно отметить четкое совпадение положительной пробы Шереня с проникновением в культуру клеток штаммов ПЭ некоторых серогрупп: 0,25, 026, 0111, 0151 и др., т. е. почти все серогруппы ПЭ, дававшие положительную (¿пробу Шереня, поражали и культуру клеток, но не наоборот. Штаммы серогрупп 033, 091 и 0114 вызывали легкую слезоточивость, которая исчезала в течение первых 2—3 сут, хотя эти же штаммы были инвазивны по отношению к клеточным культурам.
В литературе существуют противоречивые мнения по вопросу, являются ли энтероинвазивные свойства строго приуроченными к определенным серогруппам эшерихий пли это всего лишь штам-мовые различия. По нашим данным, проявление этих факторов — скорее штаммовые различия, но доминирующих в вирулентном отношении серогрупп. Определенной закономерности между фактором патогенности ПЭ и объектом выделения *
УДК 628.191:5781:628.162.8
их не обнаружено, хотя большая часть микроорганизмов выделена из сточных вод, осадков и смывов.
Таким образом, результаты исследований факторов патогенности изученных штаммов ПЭ при взаимодействии с перевиваемой культурой клеток и эпителием конъюнктивы глаза морских свинок свидетельствуют о различиях в проявлении эффекта и характере действия ПЭ и подтвердили способность ПЭ активно проникать в клетки и размножаться в них.
Из изученных двух тестов метод культур клеток оказался более чувствительным при выявлении инвазивности ПЭ, выделенных из объектов окружающей среды. Последнее может свидетельствовать о наличии фактора риска заболеваемости эшерихиозами при распространении таких штаммов в окружающей среде.
Литература
1. Борисов JI. Б. Энтеропатогенные кишечные палочки и их фаги.— Л., 1976.
2. Энтеробактерии / Под ред. В. И. Покровского. — М., 1985.
3. Dickinson R. J., Braneh W. J., Warren R. E„ Neale C. // J. clin. Path. — 1984. — Vol. 37, № 5. — P. 587—591.
4. Gross R. J.. Thomas L. V., Cheasty T. D. et al.//J. clin. Microbiol. — 1983.— Vol. 17, № 3. — P. 521—523.
5. Harris J. R.. Wachsmuth Kaye /., Davis B. R. et al. // Infect. and Immun.— 1982.— Vol. 37, № 3. — P. 1295—1298.
6. Sereny B. //Acta microbiol. Acad. Sci. hung. — 1955. — Vol. 2, № 3. — P. 293—296.
7. Smith H. W.. Green P., Parsell S. // J. gen. Microbiol. — 1983. — Vol. 129, № 10. — P. 3121—3137.
8. Toledo M„ Regina F., Trabulsi L. R. // J. clin. Microbiol. — 1983. — Vol. 17, № 3. — P. 419—421.
Поступила 30.09.86
Summary. The potentiality of virulence conservation in pathogenic Escherichia isolated from various environmental objects was demonstrated by means of 2 tests, i. е., keratoconjunctivitis Scherene sample and that on Vero cell culture. Of 135 studied strains 17.7 % had positive Scherene sample. The method of cell culture appeared to be more sensitive.
I H.A. Русанова, В. А. Рябченко
ЭФФЕКТИВНОСТЬ МЕТОДОВ ОЧИСТКИ И ОБЕЗЗАРАЖИВАНИЯ ПРИ ОБРАБОТКЕ ВОДЫ, СОДЕРЖАЩЕЙ ВИРУСЫ
НИИ коммунального водоснабжения и очистки воды Академии коммунального хозяйства им. К- Д. Памфилова, Москва
В целях повышения надежности обработки воды и снабжения населения высококачественной питьевой водой в течение ряда лет проводились работы, направленные на оценку барьерной роли водоочистных сооружений и на повышение эффективности очистки и обеззараживания воды в отношении различных микроорганизмов. Настоящая статья посвящена результатам исследова-I ний по обработке воды, содержащей вирусы.
Работу проводили в лабораторных условиях на опытно-технологической установке производи-
тельностью 500 л/ч и на действующих водопроводных станциях средней полосы РСФСР в летнее и зимнее время.
В экспериментах использовали дехлорированную водопроводную воду, в которую при необходимости вводили отстоенную глиняную суспензию и торфяную вытяжку для создания требуемого уровня мутности и цветности. Приготовленная таким образом вода имела мутность 10—12 или 76—110 мг/л, цветность 30—63°, температуру 5—10 °С (зимой) и 15—20°С (летом), рН
