CC BY
50
УДК 577.175.534:618.2:616.523-036.65
СОДЕРЖАНИЕ КОРТИЗОЛА В ПЛАЦЕНТЕ ПРИ ОБОСТРЕНИИ ГЕРПЕС-ВИРУСНОЙ ИНФЕКЦИИ
НА РАННИХ СРОКАХ БЕРЕМЕННОСТИ
ИВ.Довжикова, М. Т. Луценко, И. А. Андриевская
Дальневосточный научный центр физиологии и патологии дыхания Сибирского отделения РАМН, 675000, г.
Благовещенск, ул. Калинина, 22
РЕЗЮМЕ
Цель исследования - изучение содержания кортизола в плаценте при обострении герпес-вирусной инфекции на ранних сроках беременности и выявление причины его изменения. Обследовано 98 образцов материала (ворсинчатого хориона), взятого при проведении медицинских абортов на сроке 5-10 недель беременности у практически здоровых матерей и женщин, перенесших обострение герпесвирусной инфекции во время беременности. Исследование проводили с помощью биохимического определения количества кортизола и гистохимического выявления lip-гидроксистероиддегидрогеназ
I и II типа. При обострении герпес-вирусной инфекции обнаружено значительное увеличение содержания кортизола (более чем в 2 раза) в ворсинчатых хорионах на ранних этапах гестации. Выявленное изменение являлось результатом нарушения процесса обмена указанного гормона: низкой активностью фермента lip-гидроксистероиддегидро-геназы II типа и высокой активностью lip-гидро-ксистероиддегидрогеназы I типа в плаценте, а также неадекватностью регуляторных механизмов реакций.
Ключевые слова: кортизол, П^-гидроксистероид-дегидрогеназы, плацента, герпес.
SUMMARY
CORTISOL CONTENT AT HERPES VIRUS INFECTION EXACERBATION AT EARLY PREGNANCY
LV.Dovzhikova, M.T.Lutsenko, I.A.Andrievskaya
Far Eastern Scientific Center of Physiology> and Pathology> of Respiration of Siberian Branch RAMS, 22 Kalinina Str., Blagoveshchensk, 675000, Russian Federation
The aim of the research is to study cortisol content in placenta in exacerbation of herpes virus infection at early pregnancy and to identify the reasons for its change. 98 samples of abortion material of 5-10 weeks of development taken from almost healthy women and women with herpes virus infection exacerbation were examined. The study was done with the help of biochemical identification of cortisol concentration and histochemical analysis of the 11 P-hydroxysteroid dehydrogenase of I and II types. At exacerbation of herpes virus infection a significant increase of cortisol content (more than two times) in villous chorions at early stages of pregnancy was found out. The revealed changes were the result of the hormone metabolism disturbance: low
activity of lip-hydroxysteroid dehydrogenase of II type and high activity of 11 p-hydroxy steroid dehydrogenase of I type in placenta, as well as inadequacy of reactions regulatory mechanisms.
Key words: cortisol, llfj-hydroxysteroid dehydrogenases, placenta, herpes.
Кортизол - основной представитель группы глюко-кортикоидов, которые прямо или опосредованно регулируют практически все физиологические и биохимические процессы. Он оказывают свое действие на ряд процессов метаболизма: активирует глю-когенолиз и глюконеогене з; стимулирует липолиз и увеличивает количество свободных жирных кислот; активирует обмен белков и увеличивает пул свободных аминокислот [1, 4, 6]. Глюкокортикоиды играют ключевую роль в защитных реакциях организма, которая обусловлена их выраженным стабилизирующим действием в отношении мембран клеток и органелл, торможением освобождения гистамина, серотонина, синтеза кининов и простагландинов, адгезии и эмиграции лейкоцитов, влиянием на активность комплемента [1, 4]. В период беременности кортизол является гормоном фетоплацентарного комплекса, так как его образование идет с участием плаценты, печени и надпочечников плода. В плаценте происходит начальный этап его образования из холестерина под действием фермента, отщепляющего боковую цепь молекулы холестерина - цитохром P450scc. В плаценте также присутствуют два примечательных типа 11 Р-гидроксистероиддегидрогеназы, катализирующие взаимопревращение активных и неактивных форм кортизола. Во время беременности данный глюкокорти-коид, кроме свойственных ему в негестационный период обычных эффектов, выполняет и ряд дополнительных функций.
В литературе недостаточно освещены вопросы, касающиеся особенностей влияния герпес-вирусной инфекции во время беременности на изменение содержания стероидных гормонов, в том числе и кортизола. Имеются лишь единичные работы, рассматривающие гормональный профиль в плазме периферической крови. Поэтому целью нашего исследования был анализ содержания кортизола в плаценте при обострении герпес-вирусной инфекции на ранних сроках беременности и выявление причины его изменения.
Материалы и методы исследования
Материалом для исследования послужили 198 образцов ворсинчатого хориона, взятого при проведении
медицинских абортов на сроке 5-10 недель беременности от 108 практически здоровых женщин (контрольная группа), и 90 беременных с признаками клинического и лабораторно диагностированного обострения герпес-вирусной инфекции I типа (опытная группа). По значимым параметрам (возраст, акушерско-гинекологический анамнез, наличие других хронических соматических заболеваний) на момент обследования сравниваемые группы достоверно не различались.
Диагностику герпес-вирусной инфекции I типа осуществляли путем определения антител класса М и G к вирусу простого герпеса иммуноферментным методом с помощью стандартных тест-систем ЗАО «Век-тор-Бест» (Новосибирск) на спектрофотометре «Stat-Fax 2100» (США).
Исследование содержания кортизола в плацентарном гомогенате проводили методом иммунофермент-ного анализа, используя наборы ЗАО «Алкор Био» (Санкт-Петербург) на спектрофотометре «Stat-Fax 2100» (США). Ворсинчатый хорион забирали сразу после проведения аборта. Кусочки ткани помещали в 200 мл физиологического раствора, отмывали от клеток крови, перемешивая в течение 15 мин. на магнитной мешалке. Для получения экстрактов отмытые кусочки хориона слегка подсушивали на фильтровальной бумаге, взвешивали, растирали пестиком в фарфоровой ступке и гомогенизировали до однородной кремообразной массы. К полученному гомогенату добавляли физиологический раствор в объеме, равном изначальному весу ткани (на 1 г - 1 мл физиологического раствора). Взвесь помещали в пластиковые пробирки Falcon и подвергали замораживанию при -20°С в течение суток. Затем гомогенат размораживали и центрифугировали при 4000 об/мин при температуре 4°С. Надосадочную жидкость разливали мелкими аликвотами и хранили при -20°С до проведения имму-ноферментного анализа.
Определение 11 Р-гидроксистероиддегидрогеназ производилось по методу 3.Лойда в модификации лаборатории механизмов этиопатогенеза и восстановительных процессов дыхательной системы ФГБУ ДНЦ ФПД СО РАМН. Работа выполнялась на криостатных срезах свежезамороженной ткани. Субстратом для выявления 11 Р-гидроксистероиддегидрогеназы II типа являлись 2мМ растворы гидрокортизона (Hemofarm, Сербия) и 11 Р-гидроксиэтиохоланолона (Serva, Германия). Субстратом для выявления lip-гидроксистероид-дегидрогеназы I типа являлись 2мМ растворы 11 Р-кетоэтиохоланолона (Serva, Германия) и 11-дегид -рокортикостерона (Serva, Германия). Для определения локализации энзима в качестве акцептора применялась соль тетразолия фирмы ICN Biomedicals (США) в конечной концентрации 5мМ. Как кофактор использовали НАДФ в конечной концентрации 1мМ. Инкубационный раствор готовился на основе 0,1М фосфатного буфера pH 7,4. Инкубацию проводили при
37°С в течение 30 мин. По окончании инкубации срезы промывали дистиллированной водой, фиксировали в 10% нейтральном формалине и заключали в глицерин-желатин.
Количество образующихся продуктов реакции проводили путем подсчета на программе компьютерной цитофотометрии методом измерения на стандартную единицу площади 0,1 (зонд) в 100 различных точках объекта. Статистический анализ полученного материала проводился на основе стандартных методов вариационной статистики с оценкой достоверности различий по критерию Стъюдента (I). Принимались во внимание уровни значимости (р) 0,05; 0,01; 0,001. Различия считали достоверными при р<0,05.
Результаты исследования и их обсуждение
Во время гестации отмечалось увеличение количества кортизола (табл.), что является физиологичным для периода беременности. Такой уровень глюкокортикостероида необходим для удовлетворения возросших метаболических потребностей организма беременной путем активации углеводного синтеза и липолиза. Кортизол контролирует транспорт глюкозы через плаценту [14]. Кроме этого гормон имеет значение для формирования ферментных систем печени, эпителия тонкого кишечника, клеток легких плода: развития альвеолярного эпителия и секреции сурфактанта, которые способствуют расправлению легких при первом вдохе [4].
Относительно недавно было установлено, что физиологически протекающая гестация характеризуется балансом положительных и отрицательных сторон действия глюкокортикоида. К первым относится активация продукции хорионического гонадотропина, супрессивное действие на клеточный и гуморальный иммунитет, стимуляция роста и инвазии трофобласта, ко вторым - ограничение работы цитокин-простаглан-диновой системы сигнализации, ингибирование роста плаценты и зародыша вследствие активации ингибитора-1, а также индукция апоптоза [8]. То есть для поддержания гомеостаза беременности необходимо адекватное количество кортизола.
Исследование ворсинчатого хориона, после обострения герпес-вирусной инфекции в первом триместре беременности, показало значительное повышение количества этого стероида - в 2,8 раза (табл.). Увеличенное содержание кортизола способно вызвать целый ряд патологий беременности и развития плода. Во-первых, высокие значения показателей содержания гормона предполагают увеличение его продукции, что, в свою очередь, подразумевает смещение расхода прекурсоров стероидогенеза [15]. В случае, когда при фетоплацентарной недостаточности наблюдается снижение количества половых стероидных гормонов, подобная ситуация представляет опасность для грави-дарного гомеостаза.
Таблица
Содержание кортизола в гомогенате ворсинчатых хорионов при обострении герпес-вирусной инфекции
на различных сроках беременности (М±т)
Группы Содержание кортизола, нмоль/мл
5-6 недель 6-8 недель 9-10 недель
Контрольная 138,6±10,34 154,8±10,67 161,7± 11,85
Опытная 395,1±15,57* 439,6±19,80* 468,7±13,75*
Примечание: * - уровень статистической значимости различий показателей в сравнении с контрольной группой (р<0,001).
Особенно внушает опасение увеличение концентрации кортизола непосредственно в самой плаценте. В последние годы целым рядом зарубежных ученых установлено, что повышенное количество кортизола, проникающее через плаценту, способно вызвать развитие патологий, которые могут проявиться в детском и подростковом возрасте [7, 9].
Доказательства важной роли глюкокортикоидных гормонов в эмбриональном программировании системных заболеваний, развивающихся во взрослом возрасте, были получены рядом зарубежных авторов [5, 7, 9, 10, 12]. В своих работах они показывают, что воздействие высокой концентрации глюкокортикоидов во время беременности может замедлять рост и развитие плода и перенастраивать состояние функциональной системы гиппокамп-гипоталамус-гипофиз-надпочечники. Данная ситуация может также прямо способствовать повышению артериального давления и формированию инсулинорезистентности. Причем это может проявиться уже во взрослом возрасте. Для объяснения развития таких нарушений были выдвинуты потенциальные механизмы так называемого «программирования плода», которые состоят в том, что возникающие в период беременности изменения внутриутробной среды могут иметь отдаленные долговременные последствия и запускать цепь событий, приводящую к развитию функциональных нарушений во взрослом возрасте. Заключаются они в следующем. Стресс материнского организма приводит к активации оси гиппокамп-гипоталамус-гипофиз-надпочечники у беременной. В результате вырабатывается большое количество кортизола. При нормально протекающей гестации оно инактивируется соответствующими ферментами плаценты. В противном случае высокие концентрации кортикостероидов воздействуют на плод. Значительный уровень глюкокортикоидов в крови плода способствует изменению числа стероидных рецепторов в гиппокамп-гипоталамус-гипофиз-надпочечниковой системе плода. Следствием данной патологии будет более высокая, чем в норме, секреция глюкокортикоидов в ответ на любое стрессорное воздействие, что приведет к изменению активности других функциональных систем (соотношение гормон роста/инсулин-зависимый фактор роста, ренин-ангио-тензиновая система). Нарушается структура печени, в которой снижается активность глюкокиназы, а также поджелудочной железы плода, где происходит замеще-
ние ее клеток - клетками, характерными для взрослого организма (при участии системы инсулин-подобных факторов роста) и т.д. В конечном итоге данные нарушения будут приводить к патологическим изменениям во взрослом возрасте. В таких случаях у детей прогнозируется развитие диабета 2 типа, ожирения, гипертензии [5, 7, 9, 10, 12, 16].
Для выяснения возможной причины повышенного содержания гормона представляется целесообразным анализ одного из ключевых моментов обмена стероида. Проводилось исследование активности фермента, отвечающего за превращение кортизола в неактивный кортизон и предохраняющего от избытка глюкокортикоидов - 11р-гидроксистероиддегидроге-назы II типа [16].
В контрольной группе гистохимическим методом энзим выявлялся в синцитио- и цитотрофобласте ворсинок плаценты (рис 1). Цитофотометрически его содержание в контроле при сроке беременности 5-6 недель составило 2,67±0,079 уел. ед. По мере увеличения срока гестации интенсивность реакции в синцитио- и цитотрофобласте здоровых беременных женщин повышалось до 3,23±0,067 уел. ед. на сроке 78 недель и до 4,51±0,077 уел. ед. на сроке 9-10 недель. В плацентах беременных, перенесших обострение гер-пес-вирусной инфекции наблюдалось снижение активности ПР-гидроксистероиддегидрогеназы II типа (рис. 2). При регистрации титра антител класса О к вирусу простого герпеса 1:12800 цитофотометрический показатель уменьшился до 1,02±0,059 уел. ед. на сроке беременности 5-6 недель, до 1,44±0,121 уел. ед. на сроке 7-8 недель, до 1,88±0,095 уел. ед. на сроке 9-10 недель.
Особенностью синтеза гормонов в плаценте является то, что в его регуляции не принимают участие соединения, которые действуют в других стероидогенных органах. Считается, что в данном случае, в регуляции биосинтеза кортизола принимают участие эстрогены [11], и, что интересно, цГМФ и оксид азота [13]. В выполненных нами ранее исследованиях было обнаружено резкое увеличение активности ЫО-сип-тазы при обострении герпес-вирусной инфекции во время беременности [2]. Высокая концентрация N0 будет приводить к ингибированию активности 11р-гидроксистероиддегидрогеназы II типа, и, следственно, к повышению количества активных глюкокортикоидов.
Рис. 1. Синцитиотрофобласт ворсинки хориона женщин контрольной группы. Гистохимическая реакция на ПР-гидроксистероиддегидрогеназу II типа. Реакция по З.Лойда. Увеличение: 10x40.
Рис. 2. Синцитиотрофобласт ворсинок хориона женщин, перенесших герпес-вирусную инфекцию (титр антител класса - 1:12800). Гистохимическая реакция на 11Р - г и д ро кс и ст с ро и д д с г и д ро геи а зу II типа. Реакция по З.Лойда. Увеличение: 10x40.
Следующим фактором, на который, по нашему мнению, следует обратить внимание при рассмотрении регуляции работы 11 Р-гидроксистероиддегидрогеназы
II типа, является интенсивность работы другого вторичного мессенджера - цГМФ. В ворсинчатых хорионах, полученных от беременных с обострением герпес-вирусной инфекции, нами была выявлена высокая активность фермента, ответственного за накопление данного вторичного мессенджера в клетках [2]. Это позволило прийти к выводу о том, что увеличение интенсивности продукции цГМФ ингибировало активность 11 Р-гидроксистероиддегидрогеназы II типа, тем самым, повышая количество кортизола.
Гистохимически была проанализирована активность фермента - 11 Р-гидроксистероиддегидрогеназы
I типа. Она отвечает за превращения 11-кето-формы глюкокортикоидов в активную 11 -гидроксильную форму. В контрольной группе активность энзима в синцитио- и цитотрофобласте ворсинок хориона начинала проявляться с 5-6 недели гестации (рис. 3). Цитофотометрически его содержание на этом сроке составило 1,41±0,085 уел. ед. По мере увеличения срока беременности активность фермента нарастала.
При гестации 7-8 недель - до 2,33±0,086 уел. ед., 9-10 недель - до 3,02±0,098 уел. ед. При обострении гер-пес-вирусной инфекции интенсивность гистохимической реакции на выявление 11 Р-гидроксистероиддегидрогеназы данного вида резко возрастала (рис. 4), что предполагает увеличение выработки кортизола. Цитофотометрически ее содержание при регистрации титра антител класса О к вирусу простого герпеса 1:12800 повысилось до 2,59±0,095 уел. ед. на сроке беременности 5-6 недель, до 3,19±0,049 уел. ед. на сроке 7-8 недель, до 4,99±0,101 уел. ед. на сроке 9-10 недель.
Рис. 3. Синцитиотрофобласт ворсинки хориона женщин контрольной группы. Гистохимическая реакция на 11 Р-гидроксистероиддегидрогеназу I типа. Реакция по З.Лойда. Увеличение: 15x90
Рис. 4. Синцитиотрофобласт ворсинок хориона женщин, перенесших герпес-вирусную инфекцию (титр антител класса - 1:12800). Интенсивность гистохимической реакции на 11 Р-гидроксистероиддегидрогеназу I типа резко возросла. Реакция по З.Лойда. Увеличение: 15x90.
При беременности активность 11 Р-гидроксистероиддегидрогеназы I типа ингибируется эстрогенами [11]. Нами было выявлено снижение концентрации женских половых стероидных гормонов при обострении герпеса в гравидарный период [3]. Отсюда следует, что сниженное количество эстрогенов не могло в достаточной мере контролировать интенсивность работы энзима, продуцирующего кортизол.
Таким образом, обострение герпес-вирусной инфекции на ранних сроках беременности сопровождалось изменениями в работе разных видов
11 Р-гидроксистероиддегидрогеназ в плаценте, что, по нашему мнению, способствовало повышенному содержанию кортизола. Высокий уровень этого гормона при беременности будет способствовать изменению активности ряда функциональных систем матери и плода.
ЛИТЕРАТУРА
1. Гончаров Н.П. Колесникова Д.С. Кортикостероиды: метаболизм, механизм действия и клиническое проявление М.: Адаманть, 2002. 180 с.
2. Довжикова И.В. Гистохимическая характеристика активности НАДФН-диафоразы (маркера NO-синтазы), аденилат- и гуанилатциклаз в плаценте при беременности, осложненной герпес-вирусной инфекцией // Бюл. физиол. и патол. дыхания. 2003. Вып. 15. С.14-19.
3. Довжикова И.В. Изменение активности синтеза эстрогенов в плаценте на фоне обострения герпес-вирусной инфекции // Бюл. физиол. и патол. дыхания. 2010. Вып. 37. С.11-14.
4. Теппермен Дж. Теппермен X. Физиология обмена веществ и эндокринной системы: пер. с англ. М.: Мир, 1989. 656 с.
5. Alexander В.Т. Fetal programming of hypertension // Am. J. Physiol. Regul. Integr. Comp. Physiol. 2006. Vol.290, №1. P.R1-R10.
6. Effects of cortisol on carbohydrate, lipid, and protein metabolism: studies of acute cortisol withdrawal in adrenocortical failure / J.J.Christiansen [et al.] // J. Clin. Endocrinol. Metab. 2007. Vol.92, №9. P.3553-3559.
7. Programming effects of short prenatal exposure to cortisol / M. Dodic [et al.] // FASEB J. 2002. Vol. 16, №9. P.1017-1026.
8. Michael A.E., Papageorghiou A.T. Potential significance of physiological and pharmacological glucocorticoids in early pregnancy // Hum. Reprod. Update. 2008. Vol. 14, №5. P.497-517.
9. Maternal glucocorticoid treatment programs alterations in the renin-angiotensin system of the ovine fetal kidney / K.M.Moritz [et al.] // Endocrinology. 2002. Vol. 143, №11. P.4455-4463.
10. Myatt L. Placental adaptive responses and fetal programming // J. Physiol. 2006. Vol.572, Pt.l. P.25-30.
11. Pepe G.J., Albrecht E.D. Central integrative role of oestrogen in the regulation of placental steroidogenic maturation and the development of the fetal pituitary-adrenocortical axis in the baboon // Hum. Reprod. Update. 1998. Vol.4, №4. P.406-419.
12. Glucocorticoids and fetal programming / J.R.Seckl [et al.] // Biochem. Soc. Trans. 1999. Vol.27, №2. P.74-78.
13. Sun K., Yang K., Challis J.R.G. Differential regulation of 11 B-hydroxysteroid dehydrogenase type 1 and 2 by nitric oxide in cultured human placental trophoblast and chorionic cell preparation // Endocrinology. 1997. Vol. 138, №11. P.4912-4920.
14. Ward J.W., Wooding F.B.P, Fowden A.L. Ovine feto-placental metabolism: regulation by cortisol // J. Physiol. 2004. Vol.554, Iss.2. P.529-541.
15. Relationship between salivary cortisol and proges-
terone levels in humans / M.M.Wirth [et al.] // Biol. Psychol. 2007. Vol.74, №1. P.104-107.
16. Yang K. Placental 11 beta-hydroxysteroid dehydrogenase: barrier to maternal glucocorticoids // Rev. Reprod. 1997. Vol.2, №3. P.129-132.
REFERENCES
1. GoncharovN.P, Kolesnikova D.S. Kortikosteroidy: metabolism, mechanism deystviya i klinicheskoeproyavle-nie [Corticosteroids: metabolism, action mechanism and clinical effect]. Moscow: Adamant; 2002.
2. Dovzhikova I.V. Bûlleten’ fiziologii ipatologii dy-haniyci 2003; 15:14-19.
3. Dovzhikova I.V. Bûlleten’fiziologii ipatologii dy-haniyci 2010; 37:11-14.
4. Tepperman J., Tepperman H. Fiziologiya obmena vezchestv i endokrinnoy sistemy [Metabolic and endocrine physiology]. Moscow: Mir; 1989.
5. Alexander B.T. Fetal programming of hypertension. Am. J. Physiol. Regul. Integr. Comp. Physiol. 2006; 290(1):R1-R10.
6. Christiansen J.J., Djurhuus C.B., Gravholt C.H., Iversen P., Christiansen J.S., Schmitz O., Weeke J., Jorgensen J.O., MollerN. Effects of cortisol on carbohydrate, lipid, and protein metabolism: studies of acute cortisol withdrawal in adrenocortical failure. J. Clin. Endocrinol. Metab. 2007; 92(9):3553-3559.
7. Dodic M., Hantzis V., Duncan J., Rees S., Koukoulas I., Johnson K., Wintour E.M., Moritz K. Programming effects of short prenatal exposure to cortisol. FASEB J. 2002; 16(9):1017—1026.
8. Michael A.E., Papageorghiou A.T. Potential significance of physiological and pharmacological glucocorticoids in early pregnancy. Hum. Reprod. Update 2008; 14(5):497-517.
9. Moritz K.M., Johnson K., Douglas-Denton R., Wintour E.M., Dodic M. Maternal glucocorticoid treatment programs alterations in the renin-angiotensin system of the ovine fetal kidney. Endocrinology> 2002; 143(11): 44554463.
10. Myatt L. Placental adaptive responses and fetal programming. J. Physiol. 2006; 572(Pt.l):25-30.
11. Pepe G.J., Albrecht E.D. Central integrative role of oestrogen in the regulation of placental steroidogenic maturation and the development of the fetal pituitary-adrenocortical axis in the baboon. Hum. Reprod. Update 1998; 4(4): 406-419.
12. Seckl J.R., Nyirenda M.J., Walker B.R., Chapman K.E. Glucocorticoids and fetal programming. Biochem. Soc. Trans. 1999; 27(2):74-78.
13. Sun K., Yang K., Challis J.R.G. Differential regulation of 11 B-hydroxysteroid dehydrogenase type 1 and 2 by nitric oxide in cultured human placental trophoblast and chorionic cell preparation. Endocrinology> 1997; 138(11): 4912-1920.
14. Ward J.W., Wooding F.B.P. Fowden A.L. Ovine feto-placental metabolism: regulation by cortisol. J. Physiol. 2004; 554(2):529-541.
15. Wirth M.M., Meier E.A., Fredrickson B.L.,
Schultheiss О.С. Relationship between salivary cortisol
16. Yang K. Placental 11 beta-hydroxysteroid dehydro-
and progesterone levels in humans. Biol. Psychol. 2007; genase: barrier to maternal glucocorticoids. Rev. Reprod.
Поступила 02.04.2012
Контактная информация
Инна Викторовна Довжикова, доктор биологических наук, ведущий научный сотрудник лаборатории механизмов этиопатогенеза и восстановитечьных процессов дыхательной системы при НЗЛ, Дальневосточный научный центр физиологии и патологии дыхания Сибирского отделения РАМН,
675000, г. Благовещенск, ул. Калинина, 22.
E-mail: cfpd@amur.ru Correspondence should be addressed to Inna V. Dovzhikova,
PhD, Leading staff scientist of Laboratory of Etiopathogenesis Mechanisms and Recovery Processes of the Respiratory System at Non-Specific Pulmonary Lung Diseases, Far Eastern Scientific Center of Physiology> and Pathology> of Respiration SB RAMS, 22 Kalinina Str., Blagoveshchensk, 675000, Russian Federation.
E-mail: cfpd@amur.ru
74( 1): 104—107
