Содержание иридоидов в растениях рода вероника
О.Н. Немерешина, к.б.н, ГБОУ ВПО ОрГМУ; Н.Ф. Гусев,
д.б.н., профессор, Г.В. Петрова, д.с.-х.н., профессор, ФГБОУ ВПО Оренбургский ГАУ
Терапевтическое действие фитопрепаратов, как известно, объясняется способностью лекарственных растений синтезировать и накапливать биологически активные вещества [1—4, 7]. К группе биологически активных веществ (БАВ), синтезируемых высшими растениями, относят флавоноиды, иридоиды, азотсодержащие вещества, фитонциды, эфирные масла, таниды, гликозиды, сапонины, ферменты, кумарины, органические кислоты, горечи и многие другие соединения, накапливаемые
растениями [3, 5, 8]. Среди указанных соединений высокой биологической активностью и терапевтическим действием обладают иридоиды [1, 2, 4].
Иридоиды распространены в растениях семейств 8сгорНы1апасеае, Plantaginaceae, Ьаш1аееае и некоторых других [4, 10]. Исследованию ири-доидов посвящено множество работ и пособий по фитохимическому исследованию растений [1, 6, 7, 9, 11]. Иридоиды по химической природе представляют собой производные циклопентаноидных монотерпенов [9]. Сырьё иридоидсодержащих растений широко применяется в медицине при заболеваниях желудочно-кишечного тракта, для улучшения пищеварения и повышения аппети-
та [1]. Иридоиды способны проявлять и другие виды фармакологического действия: мочегонное (аукубин, каталпозид), желчегонное (аукубин), (ау-кубин, плюмерицин, генциопикрозид), седативное и транквилизирующее (валепотриаты), гипотензивное, коронарно-расширяющее, спазмолитическое и антиаритмическое (олеуропеин).
Целью настоящего исследования является поиск перспективных лекарственных растений, содержащих комплекс биологически активных веществ, обладающих терапевтическим действием.
Материалы и методы исследований. Для исследования были выбраны виды рода Veronica L. семейства Scrophulariaceae Juss.: Veronica chamaedrys, V. teucrium и V. incana, произрастающие в различных зонах Предуралья и обладающие значительным ресурсным запасом, но на сегодняшний день мало используемые официальной медициной России.
Вероника дубравная (Veronica chamaedrys L.) — многолетнее травянистое растение, мезофит, до 45 см высотой, с округло-яйцевидными листьями и светло-синими цветками, расположенными в супротивных кистях. В Предуралье растёт на лугах, опушках, разреженных лесах, в луговых степях. Наибольшие ресурсные запасы V. chamaedrys отмечались нами в фитоценозах Среднего Предуралья.
Траву V. chamaedrys, собранную в период цветения, применяют в народной медицине России при различных заболеваниях в виде припарок и настоек при маститах, простудных заболеваниях, одышке, зубной и головной боли, туберкулёзе лёгких, грыже, золотухе, кожных болезнях и «от судорожных припадков» в груди [2]. В Пермском крае настой травы Veronica chamaedrys пьют и применяют припарки при болезнях горла, ангине, фурункулах, кожных сыпях, болях в суставах. Водные и спиртовые экстракты вероники дубравной проявляют антибактериальное и диуретическое действие, обладают гипотензивной активностью и высоким антикоагулянтным действием [4].
Вероника широколистная (Veronica teucrium L.) — многолетнее травянистое растение до 70 см высотой, с цельными продолговато-яйцевидными листьями и синими цветками, собранными в супротивные густые кисти. Растение произрастает на суходольных лугах, в светлых берёзовых лесах, на опушках.
Траву V. teucrium издавна применяют в народной медицине при простудных заболеваниях, «от ломоты», подагры, «от грудной боли». Листья в виде припарок прикладывают к ранам при укусе ядовитых змей, в виде промываний при заболеваниях глаз, дают пить «испорченным колдовством». В Ординском районе Пермского края препараты травы V. teucrium применяется как ранозажив-ляющее средство и при укусах ядовитых змей [2]. В Башкортостане траву V. teucrium применяют как ранозаживляющее, при кровотечениях, заболеваниях органов дыхания, туберкулёзе лёгких [2].
Вероника седая (Veronica incana L.) — многолетнее травянистое растение высотой 15—40 см, с простыми супротивными листьями и колосовидными соцветиями, образующими верхушечную колосовидную кисть. Всё растение серое или белое, войлочно-опушённое от многочисленных волосков. Растение V. incana как ксерофит встречается в степях, в сухих сосновых лесах, на каменистых склонах.
Надземная часть V. incana хорошо известна народной медицине и применяется для лечения заболеваний сердечно-сосудистой системы, как детоксикационное при укусах ядовитых змей и бешеных животных, а наружно (примочки, припарки, обмывания) — при угрях, гнойниках, дерматомикозах, при ожогах и чесотке [2]. Препараты V. incana повышают кровяное давление у животных, стимулируют сердечную деятельность, проявляют антибактериальную и фунгицидную активность, оказывает седативное действие, угнетают рефлекторную возбудимость, способствуют расслаблению гладкой мускулатуры кишечника и уменьшению перистальтики [2, 5]. В современной фитотерапии трава вероники седой входит в состав сборов, применяемых для лечения кожных болезней и бронхиальной астмы. В Башкортостане V. incana используется в качестве кровоостанавливающего средства наравне с тысячелистником. В Самарской области препараты из травы в. седой применяют для лечения заболеваний сердечно-сосудистой системы и кожных болезней. В южных районах Оренбургской области (Соль-Илецкий, Курмана-евский, Первомайский р-ны) V. incana под названием «сердечная трава» применяется при болезнях сердца, гипертонии и как успокаивающее средство. В восточных районах Оренбуржья (Кувандыкский, Адамовский, Домбаровский р-ны) V. incana под местным названием шалфей используется для лечения заболеваний верхних дыхательных путей и полости рта [2].
Надземная часть (трава) видов Veronica chama-edrys, V. teucrium и V. incana, собранных в период цветения в типичных местообитаниях лесостепного и степного Предуралья, была исследована на содержание иридоидов.
Выделение иридоидов из растительного сырья проводили по классической методике, изложенной в литературе [6, 10]. В качестве экстрагента иридоидов из растительного сырья использовали метанол. В извлечениях иридоиды обнаруживали качественными реакциями с реактивом Трим— Хилла [4, 9-11, 6].
Изучение качественного состава иридоидов в траве вероники проводили методом восходящей хроматографии на бумаге марки FN-1 «Filtrak» (Германия) в системе растворителей: н-бутанол — уксусная кислота — вода в соотношении 4:1:5 (БУВ 4:1:5) [6]. В качестве «свидетелей» использовали спиртовые растворы стандартных образцов ауку-
бина, каталпозида и изокаталпола. Детектировали хроматограммы 1-процентным спиртовым раствором п-диметил-аминобензальдегида в присутствии концентрированной соляной кислоты.
Количественное определение содержания суммы иридоидов проводили в сырье вероники (трава), собранной в разные годы (1985, 2011). Содержание иридоидов определяли методом фотоэлектроколо-рометрии по методике, принятой для этой группы соединений [6, 9, 11]. Количественное содержание суммы иридоидов определяли по калибровочной кривой, построенной по аукубину.
Результаты исследований. Наиболее характерные реакции на иридоиды отмечены в траве и листьях вероники. Несколько меньшим содержанием иридоидов характеризуются цветки растения. Самое низкое содержание иридоидов отмечено в его стеблях (табл. 1).
Исследование методом восходящей одномерной хроматографии на бумаге позволило обнаружить в сырье разных видов вероники от трёх до пяти веществ иридоидной природы (рис.). Самое большое количество пятен веществ обнаружено в траве V. 1еиспиш — пять веществ с Rf 0,14; Rf 0,32; Rf 0,53; ЯГ 0,68; Rf 0,93. Три вещества иридоидной
природы (ЯГ 0,14, ЯГ 0,31 и ЯГ 0,52) обнаружено в извлечении из травы V. скашаейу (рис.). Трава V. тсапа также характеризуется наличием трёх веществ группы иридоидов (ЯГ 0,14; ЯГ 0,32 и ЯГ 0,68).
Вещество с ЯГ 0,32 имеет синее окрашивание после проявления хромогенными реактивами, другие пятна окрашены слабее — в сине-сиреневый цвет. Иридоид с ЯГ 0,32 при сравнении с аутентичным препаратом идентифицирован как аукубин. Иридоид со значением ЯГ 0,68 идентифицирован как каталпозид [6]. Вещество со значением ЯГ 0,14 на хроматограмме после проявления хромогенными реактивами идентифицировали как изокаталпол [2]. Вещество со значением ЯГ 0,93 идентифицировано как каталпол.
Для идентификации индивидуальных выделенных веществ использовали спектрофотоме-трические методы анализа. УФ-спектры чистых соединений снимали на спектрофотометре СФ-16 и СФ-4А в кюветах с толщиной слоя 10 мм, а ИК-спектры на спектрофотометре иЯ-20 [1].
Результаты количественного определения иридоидов в траве V. скашаейгуз, V. 1еиспиш и V. тсапа позволили установить, что содержание суммы ири-
1. Результаты исследования видов Veronica L. Предуралья на содержание иридоидов
Вид Часть растения Иридоиды
результаты исследования литературные данные
V.chamaedrys трава листья стебли соцветия ++ ++ сл. + + +
V. teucrium трава листья стебли сцветия ++ ++ сл. + + +
V. incana трава листья стебли соцветия +++ ++ + + ++
Примечание:--отсутствие сведений; 0 — отсутствие
веществ (отрицательная реакция); сл. — следы, едва заметная реакция; + — наличие, заметная реакция; ++ — значительное количество, выраженная реакция; +++ — высокое содержание, ярко выраженная реакция
Рис. - Схема хроматограммы иридоидов Veronica:
1 - в. дубравная (V Chamaedrys); 2 - в. седая (V. Incana); 3 - в. широколиственная (V Teucrium); И - изокаталпол (свидетель); А - аукубин (свидетель); К - каталпозид (свидетель)
Аукубин
Изокаталпол 139
Каталпозид
2. Содержание суммы иридоидов в траве видов Veronica L. лесостепного и степного Предуралья, % на абсолютно сухой вес
Вид Зона исследования Местообитание Год
1985 2011
V. chamaedrys Среднее Предуралье опушка соснового леса (окр. г. Кунгура, Пермский край) 0,62 0,71
Южное Предуралье поляны в смешанном лесу (окр. г. Бирска) 0,63 0,76
V. teucrium Среднее Предуралье суходольный луг (Ординский р-н, Пермский край) 0,58 0,44
Южное Предуралье суходольный луг на южном склоне к р. Сакмаре (Сакмарский р-н, Оренбургская обл.) 0,76 0,64
V. incana Южное Предуралье степь разнотравно-злаковая ассоциация (окр. г. Стерлитамака) 0,86 0,98
степь разнотравно-типчаковая ассоциация (Саракташский р-н, Оренбургская обл.) 0,91 1,19
доидов (в пересчёте на аукубин) в траве вероники зависит от её местообитания и внутривидовых различий (табл. 2). Максимальное количество суммы иридоидов обнаружено в траве V. incana (до 1,19%). Минимальное содержание иридоидов было характерно для травы V. chamaedrys и V. teucrium (табл. 2). Сумма иридоидов в сырье видов Veronica несколько выше у растений, собранных в разные годы на территории Южного Предуралья.
Выводы. 1. Растения Veronica ^amaedrys, V. teucrium и V. incana, произрастающие на территории Среднего и Южного Предуралья, характеризуются высоким содержанием веществ группы иридоидов.
2. В сырье Veronica сhamaedrys, Veronica teucrium и Veronica incana идентифицированы иридоиды группы производных аукубина — аукубин, изо-каталпол и каталпозид.
3. Наибольшим содержанием суммы иридоидов характеризуется сырьё Veronica incana L., встречающейся в степной зоне Южного Предуралья.
4. Содержание суммы иридоидов в траве трёх исследуемых видов Veronica L. несколько увеличивается в меридиональном направлении.
5. Результаты исследований содержания иридоидов в траве Veronica сhamaedrys, Veronica teucrium и Veronica incana свидетельствуют о целесообразности дальнейшего изучения указанных видов и разработки на основе их сырья препаратов для
дальнейшего использования в современной фитотерапии.
Литература
1. Деготь А.В., Литвиненко В.И. Иридоиды семейства норичниковых. Современные проблемы фармацевтической науки и практики. Киев, 1972. С. 76.
2. Гусев Н.Ф. Биологические особенности и перспективы использования растений рода Veronica L. (сем. Scrophulariaceae Juss.) лесостепного и степного Предуралья: дисс. ... докт. биол. наук. Оренбург, 2010. 542 с.
3. Стогний В.В., Журавская А.Н., Кершенгольц Б.М. Влияние условий произрастания на активность антиоксидантных систем семян различных видов дикорастущих растений // Растительные ресурсы. 2000. Вып. 1. С. 57—64.
4. Петриченко В.М., Сухинина Т.В., Сыропятов Б.Я. и др. Гипотензивная активность извлечений из некоторых видов сем. Scrophulariaceae, произрастающих в Пермском крае // Растительные ресурсы. 2009. Т. 45. № 1. С. 140—146.
5. Немерешина О.Н., Гусев Н.Ф. К вопросу изучения антиокислительной защиты высших растений в условиях влияния атмосферных выбросов предприятий ГАЗПРОМа // Известия Оренбургского государственного аграрного университета. 2011. № 2 (30). С. 218—224.
6. Выделение и анализ природных биологически активных веществ / под ред. Е.Е. Сироткиной. Томск: Изд-во. Том. гос. ун-та, 1987. 184 с.
7. Albach D.C. et al. Phylogenetic placement of Triaenophora (formerly Scrophulariaceae) with some implications for the phylogeny of Lamiales // Taxon. 2009. Т. 58. № 3. С. 749—756.
8. Kooiman P. The occurrence of iridoid glycosides in the Scrophulariaceae // Acta Bot. Neerl. 1970. Т. 19. С. 329—340.
9. Trim A.R. The preparation and properties of aucubin, asperulosid and some related glucosides / A.R. Trim, R. Hill // Biochem. J. 1952. Vol. 50. P. 310.
10. Groger D. Zur Kentnisiridoider Pflanzenstoffe / D. Groger, P. Simchen // Die Pharmazie. 1967. Bd. 22. № 6. S. 315.
11. Dulger B., Ugurlu E. Evaluation of antimicrobial activity of some endemic Scrophulariaceae members from Turkey // Pharmaceutical biology. 2005. Т. 43. № 3. С. 275—279.