CC BY
20
2017, Т. 19, Специальный выпуск 2017, Vol. 19, Special Issue
Аллергические заболевания Allergic diseases
желатина-АОЛ адсорбированным на планшете по сравнению с контролем — не конъюгированной желатиной. IgE-антител к альтернариолу обнаружено не было.
Заключение. Выявление позитивных сывороток к АОЛ может свидетельствовать о факте «встречи» человека с микотоксином, возможно в результате употребления контаминированных альтернариолом продуктов питания, содержание которого не вызывает выраженный токсический эффект, но стимулирует выработку IgG антител. Однако данный факт требует подтверждения проведением дальнейших исследований на расширенном контингенте лиц.
ПОДХОДЫ СИСТЕМНОЙ БИОЛОГИИ И БИОИНФОРМАТИКИ В МЕТОДОЛОГИИ ДИАГНОСТИЧЕСКИХ ИССЛЕДОВАНИЙ АЛЛЕРГИЧЕСКИХ ЗАБОЛЕВАНИЙ
Гурьянова С.В.
Институт биоорганической химии им. академиков М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова РАН, Москва, Россия
Распространенность аллергических заболеваний (АЗ), несмотря на значительные успехи современной медицины, продолжает год от года увеличиваться. С целью повышения эффективности и качества специализированной медицинской помощи создаются регламентирующие документы по диагностике и терапии АЗ, основанные на принципах доказательной медицины, в том числе и «Федеральные клинические рекомендации» по клинической иммунологии и аллергологии, разработанные Российской ассоциацией аллергологов и клинических иммунологов. Доказательной базой для их формирования служили публикации, вошедшие в базы данных EMBASE и PubMed/MEDLINE, данные международных согласительных документов. «Федеральные клинические рекомендации» являются важным и необходимым руководством в ежедневной практике врача, содержат разработки интегрированного алгоритма диагностики и лечения АЗ, но, тем не менее, не решают многих проблем, стоящих перед клиницистами: сложности дифференциальной диагностики, ложно положительные и ложно отрицательные результаты клинико-лабораторных исследований, генетические особенности пациентов, гендерные отличия, болезненность, а иногда и опасность в провокационных тестов, не учитывают географические особенности. Для формирования документов, дающих исчерпывающие ответы на поставленные вопросы необходим анализ большого массива данных: только в базе данных PubMed насчитывается более 400 тысяч публикаций по аллергии, при этом в нее не входит значительная часть исследований национальных профессиональных сообществ, в том числе и российских. Очевидно, что столь необходимый инструмент в повседневной практике врача, как «Федеральные клинические рекомендации» должны постоянно обновляться, учитывать и представлять медицинскому сообществу новые научные данные для формирования адекватных стратегий диагностики и терапии аллергических заболеваний. Для решения этой сложной задачи необходима консолидация врачей и ученых различных направлений на базе современных технологий: биоинформатики и системной биологии.
Создаваемые ресурсы посвящены решению различных задач: постоянное обновление базы данных номен-
клатуры аллергенов, распределение аллергенов по молекулярному весу, структуре, сезонности и географии, наличие их в продуктах питания, в том числе природного и биотехнологического происхождения, перечень эпито-пов аллергенности, генотипирование. Эти данные позволяют определять, прогнозировать и предотвращать воздействие аллергенов, находящихся в пищевых продуктах, лекарственных средствах, окружающей среде.
Интегрировать данные научных исследований в понимание функционирования живых систем с учетом многочисленных взаимодействий на молекулярном, клеточном уровне, на уровне тканей, органов и организмов, позволяет системная биология. Разрабатываются многочисленные модели, учитывающие взаимовлияние факторов разных уровней в попытке связать их с соответствующими заболеваниями, в том числе и аллергическими. Используются стратегии для визуализации причинно-следственных связей: например, анализ корреляции уровней экспрессии генов, белков, пептидов у перенесших заболевание и здоровых людей. Для отображения более сложных связей между компонентами описываемой системы создаются программные продукты. Самым современным является язык OpenBEL (open-access biological expression language). В выражении BEL могут быть отображены взаимосвязи между молекулами (их наименование регламентируется соответствующими базами данных), модификациями, процессами, трансформациями и т.д. с установлением прямых и корреляционных взаимосвязей. Язык BEL разработан как семантическая тройка (подлежащиее, сказуемое, дополнение) для представления конкретных научных результаты в виде причинно-следственных связей. Например, p (HGNC: CCND1) = > kin (p (HGNC: CDK4) является выражением, эквивалентным следующему «Увеличенное количество белка, обозначенного «CCND» в базе данных HGNC, непосредственно увеличивает активность киназы «CDK4» обозначенной таким образом в базе данных HGNC». Наиболее широкий охват множественных вариантов биологических процессов в клетках представляет ресурс SBV Improver, охвативший более 100 сетей. Удобство данного ресурса заключается в возможности выделить любой ци-токин или биологический процесс и определить его взаимосвязь с объектами в клеточных сетях системы.
Систематизация знаний об аллергических процессах на основе подходов системной биологии и биоинформатики является важным инструментом в поиске новых лекарственных средств, в том числе для АСИТ, биомаркеров, а также разработки интегрированного алгоритма диагностики и лечения аллергических заболеваний.
СОДЕРЖАНИЕ IL-17 И IL-22 В «КОЖНОМ ОКНЕ» ПРИ БРОНХИАЛЬНОЙ АСТМЕ
Климов В.В., Исаев П.Ю.
Сибирский государственный медицинский университет, Томск, Россия
Среди атопических аллергических болезней на основе гиперпродукции IgE особое место занимает бронхиальная астма, корректная диагностика которой возможна только при аллергологическом обследовании. IgE является единственным цитофильным иммуноглобулином, который через высоко-аффинный FcgRI соединяется с клетками-мишенями в коже, носу, бронхах и других органах. Кожа является универсальным орга-
«Дни иммунологии в СПб 2017» Immunology Days in St. Petersburg 2017
Медицинская Иммунология Medical Immunology (Russia)/Meditsinskaya Immunologiya
ном для проведения кожных аллергологических проб, основанных на выявлении ^Е-опосредованной сенсибилизации и важных для диагностики всех атопических аллергических болезней, включая аллергическую астму (Ильина Н.И., Феденко Е.С., 2004). В регуляции иммунных ответов на аллергены как в норме, так и при ато-пиях большое значение имеют неадаптивные иммуноре-гуляторные Т-клетки, адаптивные хелперные Т-клетки (ТЫ, ^2, ТЬ9, ТЫ7, ^22), а также недавно охарактеризованные врождённые лимфоидные клетки нескольких субпопуляций (ГЬС1, ШС2, ШС17, ШС22 и другие). Многие из них действуют на локальном уровне и, естественно, секретируют цитокины (Farahani ег а1., 2014; Asano ег а1., 2015).
Целью настоящей работы была оценка содержания ГЬ-17 и ГЬ-22 как ключевых цитокинов ТЫ7 и ТЬ22 в кожных экссудатах при бронхиальной астме.
Обследовано 25 пациентов обоего пола в возрасте от 18 до 55 лет с бронхиальной астмой в периоде ремиссии болезни. Диагностика патологий включала сбор жалоб, семейного анамнеза и анамнеза заболевания, клиническое и аллергологическое обследование, структурировалась согласно принятой классификации. Контрольную группу составили 10 практически здоровых доноров-добровольцев в возрасте 17-24 лет.
Материалом для исследования уровня цитокинов служили бесклеточные фракции кожного экссудата, полученные с помощью камеры. В работе применялись «кожное окно» и камера — модель, которая позволяла исследовать цитокины на локальном уровне (Климов В.В. и соавт., 2014). Определение цитокинов проводилось с помощью твёрдофазного иммуноферментного анализа с пересчётом на 1 г белка в экссудате.
У пациентов с бронхиальной астмой в экссудатах «кожного окна» выявлено статистически значимое снижение ^-17 (0,9 (0,7-1,2) пг/г белка) и повышение ^-22 (2,0 (1,7-2,6) пг/г белка) по отношению к контролю. Полученные данные могут свидетельствовать о дисбалансе локально действующих хелперных субпопуляций Т-лимфоцитов с активацией ^22 и инактивацией ТЫ7. Известно, что ТЫ7 действуют в синергизме с ТЫ, ШС1 и ^С17, а ^22, несмотря на некоторую амбивалентность, проявляют синергизм с ^2, ^С2 и ШС22 (С^ ег а1., 2011; Агаию-Ркев ег а1., 2014; Авапо ег а1., 2015).
Полученные нами результаты носят предварительный характер. Для уточнения активности иммунорегулятор-ных Т-клеток на уровне кожи при бронхиальной астме необходимы дополнительные исследования.
ДИАГНОСТИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ ЭОЗИНОФИЛЬНОГО КАТИОННОГО БЕЛКА ПРИ АЛЛЕРГИЧЕСКОМ ВОСПАЛЕНИИ У ВЗРОСЛЫХ С АЛЛЕРГИЧЕСКИМ РИНИТОМ И БРОНХИАЛЬНОЙ АСТМОЙ
Кляусов А.С., Осипов С.А.
ФГБОУ ВО «Волгоградский государственный медицинский университет», Волгоград, Россия
Введение. Эозинофильный катионный белок (ЕСР) — один из специфических секреторных гранул клеток эо-зинофилов, обладающий цитотоксическим эффектом, т.е. участвующий в повреждении мембран клеток в поздней фазе аллергических реакций (Вувггот J. ег а1., 2011). Значимость повышения концентрации ЕСР при раз-
личной тяжести бронхиальной астмы подтверждается рядом исследований, тем не менее в современных стандартах лечения аллергических заболеваний отсутствуют рекомендации по использованию ECP в качестве диагностически значимого маркера (Rondón C. et al., 2010; Gerald C.-H. Koh et al., 2007).
Цель и задачи. Определить возможность использования значения концентрации эозинофильного катионно-го белка в сыворотке крови у больных с аллергическим ринитом или бронхиальной астмой для прогнозирования изменения состояния пациента.
Материалы и методы. Исследование проводилось на базе поликлиник г. Волгограда. 88 пациентов с аллергическими заболеваниями в возрасте от 18 лет были отобраны для проведения исследования. Пациенты (54 человека, средний возраст 38±15 лет) с подтвержденным врачом-аллергологом диагнозом «интермиттирующий аллергический ринит» (АР) были поделены на 2 группы в зависимости от состояния пациента (ремиссия или обострение) на момент включения в исследование. Третью и четвертую группы (34 человека, средний возраст 47±16 лет) составили пациенты с подтвержденным диагнозом атопическая бронхиальная астма (БА) в стадии ремиссии и состоянии обострения. Концентрации IgE и ECP определялись в сыворотке крови у больных c использованием анализатора SIEMENS IMMULITE 2000 XPi (Siemens Healthcare Diagnostics Inc, США). Статистическая обработка данных проводилась при помощи программы STATISTICA 6.0 с использованием непараметрического U-теста Манна— Уитни и корреляционного анализа: тест Спирмена.
Результаты. В ходе исследования было выявлено, что в группе пациентов с аллергическим ринитом в состоянии ремиссии уровень ECP составлял 23,00 [17,50-5,50] нг/мл при уровне нормальных показателей 0-24 нг/мл, значение общего IgE: 86,60 [53,90-302,00] МЕ/мл. Абсолютное и относительное количество эозинофилов в крови: 0,16 [0,11-0,28] х 109/л и 3,05 [1,90-3,88] % соответственно. В группе пациентов с АР в состоянии обострения уровень ECP оказался выше нормы 30,00 [20,50-65,00] нг/мл при значениях общего IgE: 131,20 [43,65-293,50] МЕ/мл. Абсолютное и относительное количество эозинофилов: 0,18 [0,09-0,26] х 109/л и 2,35 [1,40-5,13] %. При сравнении данных групп было выявлено достоверное отличие по уровню концентрации ECP (p < 0,05), данный показатель оказался значимо выше в группе пациентов в состоянии обострения. Также в группе больных с АР в состоянии обострения при анализе корреляционных связей показателей выявлена прямая коррелятивная связь (r = 0,427 при p < 0,05) между уровнем ECP и общим IgE.
У пациентов с диагнозом «бронхиальная астма» в состоянии обострения концентрация ECP была значительно выше нормы и составила 49,00 [37,00-105,00] нг/мл, значения общего IgE: 133,00 [36,70-209,00] МЕ/мл. Абсолютное и относительное количество эозинофилов: 0,32 [0,17-0,50] х 109/л и 5,65 [2,63-8,40] %. При анализе линейных связей показателей в данной группе была выявлена прямая корреляционная связь (r = 0,630, p < 0,05) между абсолютным количеством эозинофилов и уровнем ECP, а также между относительным содержанием эозино-филов и концентрацией ECP (r = 0,571, p < 0,05). У больных с диагнозом бронхиальная астма в состоянии ремиссии уровень ECP составлял 24,00 [15,00-30,00] нг/мл при значениях общего IgE: 37,85 [15,63-180,00] МЕ/мл. Абсолютное и относительное количество эозинофилов: 0,21 [0,14-0,24] х 109/л и 2,80 [1,65-3,63] %. Анализ пока-
