CC BY
1002
«Дни иммунологии в СПб 2017» Immunology Days in St. Petersburg 2017
Медицинская Иммунология Medical Immunology (Russia)/Meditsinskaya Immunologiya
ном для проведения кожных аллергологических проб, основанных на выявлении ^Е-опосредованной сенсибилизации и важных для диагностики всех атопических аллергических болезней, включая аллергическую астму (Ильина Н.И., Феденко Е.С., 2004). В регуляции иммунных ответов на аллергены как в норме, так и при ато-пиях большое значение имеют неадаптивные иммуноре-гуляторные Т-клетки, адаптивные хелперные Т-клетки (ТЫ, ^2, ТЬ9, ТЫ7, ^22), а также недавно охарактеризованные врождённые лимфоидные клетки нескольких субпопуляций (ГЬС1, ШС2, ШС17, ШС22 и другие). Многие из них действуют на локальном уровне и, естественно, секретируют цитокины (Farahani ег а1., 2014; Asano ег а1., 2015).
Целью настоящей работы была оценка содержания ГЬ-17 и ГЬ-22 как ключевых цитокинов ТЫ7 и ТЬ22 в кожных экссудатах при бронхиальной астме.
Обследовано 25 пациентов обоего пола в возрасте от 18 до 55 лет с бронхиальной астмой в периоде ремиссии болезни. Диагностика патологий включала сбор жалоб, семейного анамнеза и анамнеза заболевания, клиническое и аллергологическое обследование, структурировалась согласно принятой классификации. Контрольную группу составили 10 практически здоровых доноров-добровольцев в возрасте 17-24 лет.
Материалом для исследования уровня цитокинов служили бесклеточные фракции кожного экссудата, полученные с помощью камеры. В работе применялись «кожное окно» и камера — модель, которая позволяла исследовать цитокины на локальном уровне (Климов В.В. и соавт., 2014). Определение цитокинов проводилось с помощью твёрдофазного иммуноферментного анализа с пересчётом на 1 г белка в экссудате.
У пациентов с бронхиальной астмой в экссудатах «кожного окна» выявлено статистически значимое снижение ^-17 (0,9 (0,7-1,2) пг/г белка) и повышение ^-22 (2,0 (1,7-2,6) пг/г белка) по отношению к контролю. Полученные данные могут свидетельствовать о дисбалансе локально действующих хелперных субпопуляций Т-лимфоцитов с активацией ^22 и инактивацией ТЫ7. Известно, что ТЫ7 действуют в синергизме с ТЫ, ШС1 и ^С17, а ^22, несмотря на некоторую амбивалентность, проявляют синергизм с ^2, ^С2 и ШС22 (С^ ег а1., 2011; Агаию-Ркев ег а1., 2014; Авапо ег а1., 2015).
Полученные нами результаты носят предварительный характер. Для уточнения активности иммунорегулятор-ных Т-клеток на уровне кожи при бронхиальной астме необходимы дополнительные исследования.
ДИАГНОСТИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ ЭОЗИНОФИЛЬНОГО КАТИОННОГО БЕЛКА ПРИ АЛЛЕРГИЧЕСКОМ ВОСПАЛЕНИИ У ВЗРОСЛЫХ С АЛЛЕРГИЧЕСКИМ РИНИТОМ И БРОНХИАЛЬНОЙ АСТМОЙ
Кляусов А.С., Осипов С.А.
ФГБОУ ВО «Волгоградский государственный медицинский университет», Волгоград, Россия
Введение. Эозинофильный катионный белок (ЕСР) — один из специфических секреторных гранул клеток эо-зинофилов, обладающий цитотоксическим эффектом, т.е. участвующий в повреждении мембран клеток в поздней фазе аллергических реакций (Вувггот J. ег а1., 2011). Значимость повышения концентрации ЕСР при раз-
личной тяжести бронхиальной астмы подтверждается рядом исследований, тем не менее в современных стандартах лечения аллергических заболеваний отсутствуют рекомендации по использованию ECP в качестве диагностически значимого маркера (Rondón C. et al., 2010; Gerald C.-H. Koh et al., 2007).
Цель и задачи. Определить возможность использования значения концентрации эозинофильного катионно-го белка в сыворотке крови у больных с аллергическим ринитом или бронхиальной астмой для прогнозирования изменения состояния пациента.
Материалы и методы. Исследование проводилось на базе поликлиник г. Волгограда. 88 пациентов с аллергическими заболеваниями в возрасте от 18 лет были отобраны для проведения исследования. Пациенты (54 человека, средний возраст 38±15 лет) с подтвержденным врачом-аллергологом диагнозом «интермиттирующий аллергический ринит» (АР) были поделены на 2 группы в зависимости от состояния пациента (ремиссия или обострение) на момент включения в исследование. Третью и четвертую группы (34 человека, средний возраст 47±16 лет) составили пациенты с подтвержденным диагнозом атопическая бронхиальная астма (БА) в стадии ремиссии и состоянии обострения. Концентрации IgE и ECP определялись в сыворотке крови у больных c использованием анализатора SIEMENS IMMULITE 2000 XPi (Siemens Healthcare Diagnostics Inc, США). Статистическая обработка данных проводилась при помощи программы STATISTICA 6.0 с использованием непараметрического U-теста Манна— Уитни и корреляционного анализа: тест Спирмена.
Результаты. В ходе исследования было выявлено, что в группе пациентов с аллергическим ринитом в состоянии ремиссии уровень ECP составлял 23,00 [17,50-5,50] нг/мл при уровне нормальных показателей 0-24 нг/мл, значение общего IgE: 86,60 [53,90-302,00] МЕ/мл. Абсолютное и относительное количество эозинофилов в крови: 0,16 [0,11-0,28] х 109/л и 3,05 [1,90-3,88] % соответственно. В группе пациентов с АР в состоянии обострения уровень ECP оказался выше нормы 30,00 [20,50-65,00] нг/мл при значениях общего IgE: 131,20 [43,65-293,50] МЕ/мл. Абсолютное и относительное количество эозинофилов: 0,18 [0,09-0,26] х 109/л и 2,35 [1,40-5,13] %. При сравнении данных групп было выявлено достоверное отличие по уровню концентрации ECP (p < 0,05), данный показатель оказался значимо выше в группе пациентов в состоянии обострения. Также в группе больных с АР в состоянии обострения при анализе корреляционных связей показателей выявлена прямая коррелятивная связь (r = 0,427 при p < 0,05) между уровнем ECP и общим IgE.
У пациентов с диагнозом «бронхиальная астма» в состоянии обострения концентрация ECP была значительно выше нормы и составила 49,00 [37,00-105,00] нг/мл, значения общего IgE: 133,00 [36,70-209,00] МЕ/мл. Абсолютное и относительное количество эозинофилов: 0,32 [0,17-0,50] х 109/л и 5,65 [2,63-8,40] %. При анализе линейных связей показателей в данной группе была выявлена прямая корреляционная связь (r = 0,630, p < 0,05) между абсолютным количеством эозинофилов и уровнем ECP, а также между относительным содержанием эозино-филов и концентрацией ECP (r = 0,571, p < 0,05). У больных с диагнозом бронхиальная астма в состоянии ремиссии уровень ECP составлял 24,00 [15,00-30,00] нг/мл при значениях общего IgE: 37,85 [15,63-180,00] МЕ/мл. Абсолютное и относительное количество эозинофилов: 0,21 [0,14-0,24] х 109/л и 2,80 [1,65-3,63] %. Анализ пока-
2017, Т. 19, Специальный выпуск 2017, Vol. 19, Special Issue
Аллергические заболевания Allergic diseases
зателей данной группы позволил выявить наличие достоверной положительной зависимости (г = 0,524, p < 0,05) между уровнем ECP и абсолютным количеством эозино-филов.
Заключение. ECP имеет потенциал в качестве маркера аллергического воспаления, однако более информативным становится в сочетании с другими маркерами аллергических заболеваний. При аллергическом рините возможно использование изменения концентрации ECP с целью общей оценки состояния пациента, а также для прогнозирования перехода заболевания из одной стадии в другую (обострение < = > ремиссия).
ВЛИЯНИЕ АНТИМИКОТИЧЕСКОЙ ТЕРАПИИ НА ИММУНОЛОГИЧЕСКИЕ ПОКАЗАТЕЛИ БОЛЬНЫХ АЛЛЕРГИЧЕСКИМ БРОНХОЛЕГОЧНЫМ АСПЕРГИЛЛЕЗОМ
Козлова Я.И., Фролова Е.В., Филиппова Л.В., Учеваткина А.Е., Аак О.В., Климко Н.Н.
ГБОУ ВПО «Северо-Западный государственный медицинский университет им. И.И. Мечникова», Санкт-Петербург, Россия
Научно-исследовательский институт медицинской микологии им. П.Н. Кашкина, Санкт-Петербург, Россия
Введение. Aspergillus spp. — один из основных плесневых грибов, который может быть источником аллергенов. Клинические проявления гиперчувствительности к Aspergillus spp. у больных с атопией могут варьировать от обострений бронхиальной астмы (БА) до развития тяжелой БА с микогенной сенсибилизацией и аллергического бронхолегочного аспергиллеза (АБЛА). Для АБЛА характерны неконтролируемое течение бронхиальной астмы, рецидивирующие легочные инфильтраты, бронхоэктазы и прогрессирующая дыхательная недостаточность. Количество исследований эффективности применения азолов в лечении АБЛА ограничено, а влияние антимикотиче-ской терапии на иммунологические показатели пациентов требует дальнейшего изучения.
Цель. Изучить динамику иммунологических показателей у больных аллергическим бронхолегочным аспер-гиллезом на фоне применения антимикотической терапии.
Материалы и методы. В исследование включили 11 больных АБЛА в возрасте от 29 до 78 лет (медиана — 36 лет). Аллергологическое обследование включало кожное тестирование с 6 грибковыми аллергенами: Alternaria, Aspergillus, Cladosporium, Penicillium, Rhizopus, Candida. Методом иммуноферментного анализа определяли уровень общего IgE (ООО «Полигност», Россия) и специфических IgE (sIgE) к грибковым (панель биоти-нилированных аллергенов «Алкор Био», Россия) в сыворотке крови. Диагноз АБЛА устанавливали на основании критериев R. Agarwal et al. (2013). Для оценки продукции интерферона-у (IFNy) использовали цельную кровь, взятую в вакутейнеры с гепарином (20 МЕ/мл). Кровь разводили 1:5 питательной средой RPMI 1640 с добавлением L-глутамина («Биолот», Россия), 200 мкг/мл гентамици-на и 10% эмбриональной телячьей сыворотки («Биолот», Россия). Спонтанную продукцию IFNy цитокинов определяли в супернатанте культуры клеток без добавления индукторов. Для оценки митогениндуцированной продукции IFNy инкубацию клеток крови проводили в те-
чение 24 часов с ФГА в концентрации 50 мг/мл (Sigma, США). Продукцию IFNy, активированную аллергеном A. fumigatus, («Алкор Био», Россия) в концентрации 10 мкг/мл, определяли на 6 сутки. После окончания инкубации надосадочную жидкость аликвотировали и замораживали при -20 °C до проведения анализа. Полученные супернатанты использовали для определения спонтанной и индуцированной продукции IFNy методом иммуноферментного анализа с использованием коммерческих тест-систем («Вектор-Бест», Россия). Полученные в процессе исследования данные обрабатывали с помощью программной системы STATISTICA 10.
Результаты. У всех больных АБЛА prick-тест с A. fumigatus был положительный, в сыворотке крови выявлен повышенный уровень sIgE к A. fumigatus (Ме 1,56 (0,36 4- 10,56) МЕ/мл) и общего IgE (Ме 986 (873 4 1695) МЕ/мл). При посеве мокроты и/или БАЛ у 9 больных (81%) выявляли рост A. fumigatus, у 2 (18%) — A. niger. В анализируемых случаях по данным КТ органов грудной клетки у 6 (55%) больных обнаружена очаговая и сегментарная инфильтрация легких, у 5 (45%) — брон-хоэктазы. В ходе исследования больным АБЛА проведено лечение итраконазолом в дозе 400 мг в сутки. У всех больных после 24 недель терапии отмечен выраженный клинический эффект: уменьшение одышки и кашля, улучшение показателей функции внешнего дыхания, положительная динамика на КТ органов грудной клетки. Все больные переносили препарат хорошо, нежелательных явлений не было. При повторном обследовании через 24 недели у всех больных отмечено статистически значимое снижение уровня sIgE к A. fumigatus (Ме 0,66 (0,0145,24) МЕ/мл, p = 0,003) и общего IgE (Ме 540 (73 4 613) МЕ/мл, p = 0,003). Выявлено повышение способности клеток крови к продукции IFNy в ответ на стимуляцию клеток крови ФГА (1914 (1294 4 2232) vs 910 (852 4 1648) пг/мл, р = 0,004) и на индукцию аллергеном A. fumigatus (48,0 (24,0 4 61,0) vs 19,0 (2,0 4 34,0) пг/мл, р = 0,001). Установлено снижение абсолютного числа эо-зинофилов (р = 0,05).
Заключение. Тенденция к нормализации иммунологического профиля больных на фоне клинических признаков улучшения состояния свидетельствует об успешном использовании антимикотической терапии у больных АБЛА. Применение итраконазола с целью снижения грибковой нагрузки и восстановления ТЪ2/ТЫ-дисба-ланса эффективно у данной категории больных. Адекватная противовоспалительная и антимикотическая терапия способствует предотвращению прогрессирования этого тяжелого хронического заболевания легких и профилактики инвалидизации пациентов с АБЛА.
ПОИСК НОВЫХ БИОМАРКЕРОВ ИНФЕКЦИОННЫХ ОБОСТРЕНИЙ АТОПИЧЕСКОЙ БРОНХИАЛЬНОЙ АСТМЫ
Косякова Н.И.1, Прохоренко С.В.2, Андреева Л.А.1, Панкратова Е.В.1, Сахаров П.А.1
1 Больница Научного центра РАН, Пущино, Россия
2 Федеральный научно-клинический центр реаниматологии и реабилитологии, Москва, Россия
В процессе обострения атопической бронхиальной астмы (АБА) индуцируется специфическая реакция организма, которая характеризуется повышением уровня белков острой фазы и других биомаркеров. Среди них широко известны такие, как С-реактивный белок (СРБ), про-
