CC BY
22
DOI: 10.14258/jcpim.2020025507
УДК 582.28(045)
СОДЕРЖАНИЕ ЭКСТРАКТИВНЫХ ВЕЩЕСТВ И ПОЛИСАХАРИДОВ В ПЛОДОВЫХ ТЕЛАХ GRIFOLA FRONDOSA, КУЛЬТИВИРУЕМЫХ НА ЛИГНОЦЕЛЛЮЛОЗНЫХ СУБСТРАТАХ В ЗАВИСИМОСТИ ОТ МЕТОДОВ ИЗВЛЕЧЕНИЯ
© Д.В. Минаков1 *, Ю.В. Мороженко2, Н.Г. Базарнова1
1 Алтайский государственный университет, пр. Ленина, 61, Барнаул, 656049 (Россия), e-mail: MinakovD-1990@yandex.ru
2 Бийский технологический институт (филиал) Алтайского государственного технического университета им. И.И. Ползунова, ул. Трофимова, 27, Бийск, 659305 (Россия)
Работа посвящена сравнительному анализу количественного содержания экстрактивных веществ и водорастворимых полисахаридов, выделенных из плодовых тел грибов грифолы курчавой (Grifóla frondosa) в зависимости от методов извлечения. В качестве объектов исследования использован штамм грибов G. frondosa 2639, выделенный из коммерческого мицелия. Установлено, что выход грибов в полипропиленовых пакетах (объем до 4500 см3) составил 36.37%, что соответствовало выходу плодовых тел, культивируемых в стеклянных емкостях (объем 800-1000 см3). Гидролиз продуктов экстракции показал, что методы экстрагирования плодовых тел G. frondosa водой приводят к извлечению полисахаридов, различающихся по составу. Выявлено, что при использовании методов экстракции в аппарате Сокслета, кипячения и мацерации (25.0±1.0 °C) выход экстрактивных веществ из плодовых тел G. frondosa входил в интервал литературных данных и составил 6.04, 5.81 и 3.45% соответственно. Показано, что наибольшее содержание водорастворимых полисахаридов в плодовых телах G. frondosa было обнаружено при использовании метода экстракции в аппарате Сокслета - 14.92%, отличаясь от методов кипячения и мацерации (25.0±1.0 °C) в 1.15 и 1.33 раза. Методом ВЭЖХ установлено, что при применении экстракции мацерацией (25.0±1.0 °C) и кипячением мономерный состав полисахаридов плодовых тел G. frondosa представлен в основном глюкозой, маннозой, фукозой и рамнозой в соотношении 1.0 : 0.9 : 0.4 : 1.3 соответственно. При экстракции в аппарате Сокслета их соотношение составило 1.0 : 1.2 : 0.5 : 1.9.
Ключевые слова: биологически активные соединения, полисахариды, экстрактивные вещества, грибы, плодовые тела, Grifola frondosa, высокоэффективная жидкостная хроматография.
Исследование проводилось при финансовой поддержке РФФИ и Министерства образования и науки Алтайского края в рамках научного проекта № 19-48-220008.
Введение
Высшие грибы - уникальный источник природных биологически активных соединений (БАС). Эти вещества, присутствующие в тканях организма в очень малых количествах, оказывают заметное влияние на течение биохимических процессов, ускоряя их или замедляя. Биологическую активность можно наблюдать у самых разнообразных классов органических соединений. Среди высокомолекулярных веществ особое место принадлежит полисахаридам, в том числе выделенным из грибов [1].
Наиболее интересны в этом отношении грибы вида Grifola frondosa (Dicks.) Gray. Известно, что полисахариды, выделенные из плодовых тел мейтаке (G. frondosa), обладают противоопухолевой, антибактериальной, противовирусной, гепатопротекторной и антиоксидантной активностями, способны стимулировать иммунную
* Автор, с которым следует вести переписку.
Минаков Денис Викторович - кандидат биологических наук, доцент, e-mail: MinakovD-1990@yandex.ru Мороженко Юрий Васильевич - кандидат химических наук, доцент, профессор, e-mail: uv@bti.secna.ru Базарнова Наталья Григорьевна - доктор химических наук, профессор, заведующая кафедрой органической химии, e-mail: bazarnova@chem.asu.ru
систему, регулировать кровяное давление, понижать содержание сахара и холестерина в крови [2]. Полисахариды, выделенные из G. frondosa, не оказывают токсического действия на человеческий организм и безопасны с медицинской точки зрения. Это подтверждается множеством научных исследований, проведенных за последние три десятка лет [1, 2].
Наряду с типичными полисахаридами - крахмалом, гликогеном, инулином, клетчаткой и другими, являющимися веществами, легкомобилизуемыми в организме в качестве питательных резервов или составляющими основу опорных тканей, высшие грибы вырабатывают особые вещества, получившие название комплексных полисахаридов. Так же, как и полисахариды, эти соединения распадаются при гидролизе на олигосахариды и простые сахара, однако последние не являются единственными продуктами их распада [3]. Так, в состав комплексных полисахаридов входят различные сахарные кислоты и сульфокислоты, амино-производные сахаров; остатки кислот, спиртов и других соединений (рис. 1).
—R
OH
в г
Рис. 1. Различные структуры углеводсодержащих фрагментов полисахаридов грибов [1]: а - Lentinan, б - Maitake D-fraction, в - Krestin, г - Schizophyllan
Именно у этих веществ часто обнаруживают новые биологические свойства, позволяющие объединить значительную группу указанных соединений под общим названием: биологически активные полисахариды. Данные по методам анализа и биологической активности приводятся в работах [4, 5].
Глубокое изучение физиологической активности полисахаридов, выделенных из высших грибов, открывает возможности для их применения в биологии и медицине, а также показывает перспективность биотехнологических исследований проводимых в этом направлении.
Цель настоящей работы - изучение содержания полисахаридов в экстрактивных веществах плодовых тел Grifóla frondosa в зависимости от методов их извлечения.
Экспериментальная часть
Культивирование плодовых тел грибов G. frondosa в стеклянных емкостях объемом 800-1000 см3 представлено исследованиями, которые были частично затронуты в работе [6]. В процессе дальнейших исследований удалось вырастить плодовые тела в блоках (полипропиленовые пакеты) объемом до 4500 см3
б
а
о
о
(рис. 2) в условиях со следующими режимами: температура для роста мицелия 28.0±1 °С; значение рН субстрата 5.8-6.0; влажность субстрата - 65.0±5.0%; относительная влажность воздуха при формировании примордиев и образовании плодовых тел -85.0-90.0%; освещенность 200.0-250.0 люкс; обязательное присутствие СО2 в камере роста.
Выход грибов рассчитывали как отношение массы свежих плодовых тел к массе субстрата, в процентах.
Экстрактивные вещества извлекали из плодовых тел грибов дистиллированной водой с использованием трех стандартных методов - экстракцией в аппарате Сокслета, кипячением и мацерацией (25.0±1.0 °C) [7, 8].
Количественное определение полисахаридов в экстрактах определяли по количеству образующихся после их гидролиза моносахаридов методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) [9, 10] на жидкостном хроматографе (Shimadzu LC-20), оснащенном рефрактометрическим детектором и электронной системой для сбора и обработки данных.
Хроматографирование осуществляли в условиях, описанных в руководстве [11] и воспроизведенных нами при анализе: стальная колонка фирмы Waters Sugar Pak, 250.0x4.6 мм; температура колонки: 90.0 °С; объем пробы 2.0 мкл; скорость потока 0.5 мл/мин; подвижная фаза: вода для хроматографии; время хрома-тографирования - 25 мин.
в качестве растворов сравнения использовали стандартные растворы моносахаридов в концентрации 1.0 мг/мл - глюкоза, манноза, фукоза, рамноза (Sigma-Aldrich, США).
Исследования проводились в четырехкратной повторности. Статистическую обработку экспериментальных данных осуществляли с использованием компьютерных программ Microsoft Office.
Обсуждение результатов
Изучая возможность интенсивного культивирования G. frondosa различными способами, установили, что скорость зарастания субстратов и плодоношения грибов определяется объемом субстрата и его составом (табл. 1). В качестве основных компонентов субстрата были выбраны березовые опилки (размер 5-10 мм) и пшеничные отруби (2-3 мм) в соотношении 3 : 1. Обоснование выбора субстрата и способы его подготовки описаны в работе [6].
При культивировании грибов в полипропиленовых пакетах появление первых примордиев было отмечено на 5-е сутки культивирования в камере роста. При этом их формирование происходило в течение 3 сут. Число сформировавшихся примордиев составляло около 100 штук. Первая волна плодоношения была отмечена на 10 сут выращивания в камере роста. Вторая волна образования плодовых тел наблюдалась на 10-11 сут инкубации в камере роста, после выгонки плодовых тел первой волны, третья волна плодоношения - на 11-12 сут инкубации. Сравнивая данные, полученные нами ранее и опубликованные в работе [6], можно отметить, что существенных различий между исследуемыми способами выращивания по времени появления примордиев и длительности созревания плодовых тел не обнаружено. Выход грибов в полипропиленовых пакетах (объем до 4500 см3) составлял 36.37%, мало отличаясь от выхода плодовых тел в стеклянных емкостях (объем 800-1000 см3). Морфология плодовых тел не зависела от способа выращивания грибов.
После получения плодовых тел G. frondosa они были исследованы на содержание экстрактивных веществ, полисахаридов и их мономерного состава.
Для определения полисахаридов в объектах с большим числом компонентов (сложных смесях) чаще всего используют хроматографию. Из-за термической и химической лабильности большинства определяемых соединений применяют высокоэффективную жидкостную хроматографию (ВЭЖХ) [12, 13].
Трудности, возникающие при определении полисахаридов, связаны в основном с необходимостью предварительной очистки экстрактов. Нам удалось сократить количество операций по пробоподготовке экстрактов для гидролиза до минимума - центрифугирование образца в течение 5 мин при факторе разделения 600-800. В результате получали совершенно прозрачные растворы, готовые для исследований методами физико-химического анализа.
Рис. 2. Плодовые тела G. frondosa, выращенные в полипропиленовом пакете (4000 см3)
Таблица 1. Выход G. frondosa в зависимости от способа выращивания
Образец субстрата Способ выращивания Волна плодоношения Образование плодовых тел, сут Выход, %
Березовые опилки/пше- Стеклянные емкости объемом 8001000 см3* 1 2 3 X 29 7-8 7-8 44±1 16.75±0.23 10.37±0.23 6.38±0.23 33.50±0.23
ничные отруби (3 : 1) Полипропиленовые пакеты объемом до 4500 см3 1 2 3 X 45 10-11 11-12 67±1 19.60±0.21 11.29±0.16 5.48±0.22 36.37±0.23
Примечание: * - литературные данные [6].
Известно, что содержание экстрактивных веществ и полисахаридов в плодовых телах культивируемых грибов зависит от компонентов субстрата, условий выращивания, а также от применяемых методов извлечения [14-16].
Проведенные эксперименты показали, что наибольшее количество экстрактивных веществ содержалось в продуктах экстракции, полученных в аппарате Сокслета и при использовании метода кипячения, соответственно, 6.04±0.21% и 5.81±0.16%. Применение метода мацерации дает более низкие значения суммы экстрактивных веществ (3.45±0.14%) (табл. 2).
При сравнении суммы полисахаридов в плодовых телах G. frondosa было установлено, что наибольший их выход получен при использовании метода экстракции в аппарате Сокслета - 14.92%. При экстракции плодовых тел методами кипячения и мацерации (25 °С) водных суспензий выход полисахаридов был в 1.15 и 1.33 раза ниже соответственно (табл. 2).
По данным литературных источников, содержание экстрактивных веществ и полисахаридов в плодовых телах G. frondosa колеблется от 1.71 до 59.10% и 11.40 до 45.00% соответственно, в зависимости от исследуемых штаммов грибов, условий их произрастания и способов водной экстракции (табл. 2).
Известные полисахариды высших грибов, обладающие биологической активностью, значительно различаются по углеводному составу и структуре [9]. Так, в составе продуктов гидролиза плодовых тел G. frondosa найдены рамноза, арабиноза, ксилоза, манноза, глюкоза, галактоза, фукоза [10]. Проведенные эксперименты показали, что в условиях выращивания на субстратах [22] в мажорных количествах в состав углеводных цепей полисахаридов G. frondosa входят остатки моносахаридов - глюкозы, маннозы, фукозы и рамнозы. В исследованных методах мацерации и кипячения их соотношение составило 1.0 : 0.9 : 0.4 : 1.3 соответственно. Однако при экстракции в аппарате Сокслета их соотношение было равным 1.0 : 1.2 : 0.5 : 1.9 (табл. 3).
Изучение мономерного состава полисахаридов G. frondosa (табл. 2) показало, что независимо от метода экстракции полисахариды образованы остатками моносахаридов, с преобладанием рамнозы - от 3.04% (мацерация) до 6.13% (экстракция в аппарате Сокслета).
Таблица 2. Содержание экстрактивных веществ и полисахаридов в водных экстрактах плодовых тел
G. frondosa
Исследуемый образец Содержание, %
Экстрактивные вещества (ЭВ) Полисахариды в ЭВ
М К С М К С
Плодовые тела G. frondosa 2639 3.45±0.14 5.81±0.16 6,04±0,21 11,23 12,91 14,92
Плодовые тела G. frondosa* 1.71-59.10 11.40-45.02
Примечание: М - мацерация; К - экстракция при кипячении; С - экстракция в аппарате Сокслета. * - литературные данные [17-21].
Таблица 3. Данные ВЭЖ-хроматографии продуктов гидролиза полисахаридов G. Frondosa, полученные
различными методами
Моносахариды Содержание, %
Мацерация (25.0±1.0 °C) Экстракция при кипячении Экстракция в аппарате Сокслета
Глюкоза 3.04 3.49 3.20
Манноза 2.84 3.26 3.79
Фукоза 1.37 1.58 1.81
Рамноза 3.98 4.58 6.13
Выделение или получение биологически активных полисахаридов из грибов сопряжены с большими трудностями. Эти трудности обусловлены, прежде всего, тем, что полисахариды присутствуют в высших грибах в незначительных количествах, исчисляемых долями процента (при расчете на сухую массу исходного образца). Дальнейшее изучение этих соединений позволит расширить наши представления о подборе лигноцеллюлозных субстратов для успешного культивирования плодовых тел G. frondosa и повышения концентрации в них целевых полисахаридов. При этом исследование качественного и количественного состава экстрактивных веществ высших базидиомицетов, в зависимости от разработанных методов извлечения, может представлять значительный интерес для создания лекарственных субстанций и биологически активных добавок к пище.
Выводы
1. Установлено, что выход грибов в полипропиленовых пакетах (объем до 4500 см3) составил 36.37%, что соответствовало выходу плодовых тел культивируемых в стеклянных емкостях (объем 800-1000 см3).
2. С помощью гидролиза продуктов экстракции выявлено, что методы экстрагирования плодовых тел G. frondosa водой приводят к извлечению полисахаридов различающихся по составу.
3. Установлено, что при использовании методов экстракции в аппарате Сокслета, кипячения и мацерации (25.0±1.0 °C) выход экстрактивных веществ из плодовых тел G. frondosa входил в интервал литературных данных и составил 6.04, 5.81 и 3.45% соответственно.
4. Показано, что наибольшее содержание водорастворимых полисахаридов в плодовых телах G. frondosa было обнаружено при использовании метода экстракции в аппарате Сокслета - 14.92%, отличаясь от методов кипячения и мацерации (25.0±1.0 °C) в 1.15 и 1.33 раза.
5. Методом ВЭЖХ установлено, что при применении экстракции мацерацией (25.0±1.0 °C) и кипячением мономерный состав полисахаридов полученных плодовых тел G. frondosa представлен в основном глюкозой, маннозой, фукозой и рамнозой в соотношении 1.0 : 0.9 : 0.4 : 1.3 соответственно.
При экстракции в аппарате Сокслета их соотношение составило 1.0 : 1.2 : 0.5 : 1.9.
Список литературы
1. Pandya U., Dhuldhaj U., Sahay N.S. Bioactive mushroom polysaccharides as antitumor: an overview // Natural Product Research. 2018. Vol. 4. Pp. 1-13. DOI: 10.1080/14786419.2018.1466129.
2. Hea X., Wang X., Fang J., Changa Y., Ning N., Guoa H., Huang L., Huang X., Zhao Z. Polysaccharides in Grifola frondosa mushroom and their health promoting properties: A review // International journal of biological macromole-cules. 2017. Vol. 101. Pp. 910-921. DOI: 10.1016/j.ijbiomac.2017.03.177.
3. Sasidhara R., Bakki V. Screening of mushrooms for polysaccharides // Iranian journal of biotechnology. 2014. Vol. 12(4). Pp. 73-76. DOI: 10.15171/IJB.1089.
4. Ruiz-Matute A.I., Hernández-Hernández O., Rodríguez-Sánchez S., Sanz M.L., Martínez-Castro I. Derivatization of carbohydrates for GC and GC-MS analyses // Journal of chromatography B. 2011. Vol. 879(17-18). Pp. 1226-1240. DOI: 10.1016/j.jchromb.2010.11.013.
5. He Y., Li X., Hao C., Zeng P., Zhang M., Liu Y., Chang Y., Zhang L. Grifola frondosa polysaccharide: a review of antitumor and other biological activity studies in China // Discov. Med. 2018. Vol. 25(138). Pp. 159-176.
6. Минаков Д.В., Севодина К.В., Шадринцева А.И., Севодин В.П. Зависимость продуктивности G. frondosa от размера частиц лигноцеллюлозного субстрата // Техника и технология пищевых производств. 2017. №1(44). С. 24-30.
7. Леонова М.В., Климочкин Ю.Н. Экстракционные методы изготовления лекарственных средств из растительного сырья: учебно-методическое пособие. Самара: Самарский государственный технический университет, 2012. 118 с.
8. Корулькин Д.Ю., Музычкина Р.А. Лабораторный практикум по химии и технологии природных соединений. Алматы: ЦДК Глобус, 2016. 90 с.
9. Ting Z., Yina F., Guanghua M., Weiwei F., Yanmin Z., Ye Z., Liuqing Y., Xiangyang W. Purification, characterization and antioxidant activities of enzymolysis polysaccharide from Grifola frondosa // Iranian journal of pharmaceutical research. 2017. Vol. 16(1). Pp. 347-356.
10. Meng M., Cheng D., Han L., Chen Y., Wang C. Isolation, purification, structural analysis and immunostimulatory activity of water-soluble polysaccharides from Grifola frondosa fruiting body // Carbohydrate polymers. 2017. Vol. 157. Pp. 1134-1143. DOI: 10.1016/j.carbpol.2016.10.082.
11. Никулин С.В., Стародубцева Н.Л., Попов И.А. Высокоэффективная жидкостная хроматография: учебно-методическое пособие. М., 2016. 39 с.
12. Chiocchio V.M., Matkovic L. Determination of ergosterol in cellular fungi by HPLC. A modified technique // The journal of the argentine chemical society. 2011. Vol. 98. Pp. 10-15.
13. Cui F.J., Qian L.S., Sun W.J., Zhang J.S., Yang Y., Li N., Zhuang H.N., Wu D. Ultrasound-assisted extraction of polysaccharides from Volvariella volvacea: Process optimization and structural characterization // Molecules. 2018. Vol. 23. Pp. 1706. DOI: 10.3390/molecules23071706.
14. Bach F., Helm C.V., Lima E.A.D., Bellettini M.B., Haminiuk C.W.I. Influence of cultivation methods on the chemical and nutritional characteristics of Lentinula edodes // Emirates journal of food and agriculture. 2018. Vol. 30(12). Pp. 1006-1013. DOI: 10.9755/ejfa.2018.v30.i12.1879.
15. Wu J.Y. Ultrasound-assisted extraction of polysaccharides from edible and medicinal fungi: major factors and process kinetics // MOJ Food processing and technology. 2017. Vol. 4(2). Pp. 48-52. DOI: 10.15406/mojfpt.2017.04.00086.
16. Khatua S., Sikder R., Acharya K. Chemical and biological studies on a recently discovered edible mushroom: a Report // FABAD Journal of pharmaceutical sciences. 2018. Vol. 43(3). Pp. 241-247.
17. Montoya S., Orrego C.E., Levin L. Growth, fruiting and lignocellulolytic enzyme productionby the edible mushroom Grifola frondosa (maitake) // World journal of microbiology and biotechnology. 2012. Vol. 28(4). Pp. 1533-1541. DOI: 10.1007/s11274-011-0957-2.
18. Zhang Y., Wang N., Wu T.X. Effect of the extracts from Gastrodia elata BL. on mycelial growth and polysaccharide biosynthesis by Grifola frondosa // African journal of microbiology research. 2012. Vol. 6(2). Pp. 379-384. DOI: 10.5897/AJMR11.1151.
19. Zhang A., Deng J., Yu S., Zhang F., Linhardt R.J., Sun P. Purification and structural elucidation of a water-soluble polysaccharide from the fruiting bodies of the Grifola frondosa // International journal of biological macromolecules. 2018. Vol. 115. Pp. 221-226. DOI: 10.1016/j.ijbiomac.2018.04.061.
20. Ulziijargal E., Mau J.L. Nutrient compositions of culinary-medicinal mushroom fruiting bodies and mycelia // International journal of medicinal mushrooms. 2011. Vol. 13(4). Pp. 343-349. DOI: 10.1615/IntJMedMushr.v13.i4.40
21. Mizuno M. Anti-tumor polysaccharides from mushrooms during storage // BioFactors. 2000. Vol. 12. Pp. 275-281. DOI: 10.1002/biof.5520120141.
22. Патент №2595737 (РФ). Субстрат для выращивания грибов Grifola frondosa / Д.В. Минаков, К.В. Севодина, В .А. Куничан, В.П. Севодин. 2016.
Поступила в редакцию 27 апреля 2019 г.
После переработки 18 января 2020 г. Принята к публикации 28 января 2020 г.
Для цитирования: Минаков Д.В., Мороженко Ю.В., Базарнова Н.Г. Содержание экстрактивных веществ и полисахаридов в плодовых телах Grifola frondosa культивируемых на лигноцеллюлозных субстратах в зависимости от методов извлечения // Химия растительного сырья. 2020. №2. С. 241-247. DOI: 10.14258/jcprm.2020025507.
Minakov D.V.1*, Morozhenko Yu.V.2, Bazarnova N.G.1 CONTENT OF EXTRACTIVE SUBSTANCES AND POLYSACCHARIDES IN FRUIT BODIES OF GRIFOLA FRONDOSA CULTIVATED ON LIGNOCELLULUS SUBSTRATES DEPENDING ON EXTRACTION METHODS
1 Altai State University, pr. Lenina, 61, Barnaul, 656049 (Russia), e-mail: MinakovD-1990@yandex.ru
2Biysk Technological Institute (branch) of the Altay State Technical University, ul. Trofimova, 27, Biysk, 659305 (Russia)
The work is devoted to a comparative analysis of the quantitative content of extractives and water-soluble polysaccharides isolated from the fruit bodies of mushrooms Grifola frondosa depending on the extraction methods. As objects of study used strain of fungi G. frondosa 2639, isolated from commercial mycelium. It was established that the yield of fungi in polypropylene bags (volume up to 4500 cm3) was 36.37%, differing little from the yield of fruit bodies in glass containers (volume 800-1000 cm3). Using the hydrolysis of extraction products it was found that the methods of extracting the fruit bodies of G. frondosa with water lead to the extraction of polysaccharides of different composition. It was established that when using extraction methods in the Soxhlet apparatus, boiling and maceration (25.0±1.0 °C), the yield of extractive substances from the fruit bodies of G. frondosa was within the literature data interval and amounted to 6.04, 5.81 and 3.45%, respectively. It was shown that the highest content of water-soluble polysaccharides in the fruit bodies of G. frondosa was found using the extraction method in the Soxhlet apparatus - 14.92 %, differing from boiling and maceration methods (25.0±1.0 °C) in 1.15 and 1.33 times. By HPLC it was found that when maceration extraction was used (25.0±1.0 °C) and boiling, the monomelic composition of the polysaccharides of the fruit bodies of G. frondosa is mainly glucose, mannose, fucose and rhamnose in a ratio of 1.0 : 0.9 : 0.4 : 1.3, respectively. During extraction in the Soxhlet apparatus, their ratio was 1.0 : 1.2 : 0.5 : 1.9.
Keywords: biologically active compounds, polysaccharides, extractives, mushrooms, fruit bodies, Grifola frondosa, high performance liquid chromatography.
References
1. Pandya U., Dhuldhaj U., Sahay N.S. Natural Product Research, 2018, vol. 4, pp. 1-13. DOI: 10.1080/14786419.2018.1466129.
2. Hea X., Wang X., Fang J., Changa Y., Ning N., Guoa H., Huang L., Huang X., Zhao Z. International journal of biological macromolecules, 2017, vol. 101, pp. 910-921. DOI: 10.1016/j.ijbiomac.2017.03.177.
3. Sasidhara R., Bakki V. Iranian journal of biotechnology, 2014, vol. 12(4), pp. 73-76. DOI: 10.15171/IJB.1089.
4. Ruiz-Matute A.I., Hernández-Hernández O., Rodríguez-Sánchez S., Sanz M.L., Martínez-Castro I. Journal of chromatography B, 2011, vol. 879(17-18), pp. 1226-1240. DOI: 10.1016/j.jchromb.2010.11.013.
5. He Y., Li X., Hao C., Zeng P., Zhang M., Liu Y., Chang Y., Zhang L. Discov. Med, 2018, vol. 25(138), pp. 159-176.
6. Minakov D.V., Sevodina K.V., Shadrintseva A.I., Sevodin V.P. Tekhnika i tekhnologiya pishchevykh proizvodstv, 2017, no. 1(44), pp. 24-30. (in Russ.).
7. Leonova M.V., Klimochkin Yu.N. Ekstraktsionnyye metody izgotovleniya lekarstvennykh sredstv iz rastitel'nogo syr'ya: uchebno-metodicheskoye posobiye. [Extraction methods for the manufacture of medicines from plant materials. Teaching Aid]. Samara, 2012, 118 p. (in Russ.).
8. Korul'kin D.Yu., Muzychkina R.A. Laboratornyypraktikum po khimii i tekhnologiiprirodnykh soyedineniy. [Laboratory Workshop on Chemistry and Technology of Natural Compounds]. Almaty, 2016, 90 p. (in Russ.).
9. Ting Z., Yina F., Guanghua M., Weiwei F., Yanmin Z., Ye Z., Liuqing Y., Xiangyang W. Iranian journal ofpharmaceutical research, 2017, vol. 16(1), pp. 347-356.
10. Meng M., Cheng D., Han L., Chen Y., Wang C. Carbohydrate polymers, 2017, vol. 157, pp. 1134-1143. DOI: 10.1016/j.carbpol.2016.10.082.
11. Nikulin S.V., Starodubtseva N.L., Popov I.A. Vysokoeffektivnaya zhidkostnaya khromatografiya. Uchebno-metodicheskoye posobiye. [High performance liquid chromatography. Teaching Aid]. Moscow, 2016, 39 p. (in Russ.).
12. Chiocchio V.M., Matkovic L. The journal of the argentine chemical society, 2011, vol. 98, pp. 10-15.
13. Cui F.J., Qian L.S., Sun W.J., Zhang J.S., Yang Y., Li N., Zhuang H.N., Wu D. Molecules, 2018, vol. 23, pp. 1706. DOI: 10.3390/molecules23071706.
14. Bach F., Helm C.V., Lima E.A.D., Bellettini M.B., Haminiuk C.W.I. Emirates journal offood and agriculture, 2018, vol. 30(12), pp. 1006-1013. DOI: 10.9755/ejfa.2018.v30.i12.1879.
15. Wu J.Y. MOJ Food processing and technology. 2017, vol. 4(2), pp. 48-52. DOI: 10.15406/mojfpt.2017.04.00086.
16. Khatua S., Sikder R., Acharya K. FABAD Journal of pharmaceutical sciences, 2018, vol. 43(3), pp. 241-247.
17. Montoya S., Orrego C.E., Levin L. World journal of microbiology and biotechnology, 2012, vol. 28(4), pp. 1533-1541. DOI: 10.1007/s11274-011-0957-2.
18. Zhang Y., Wang N., Wu T.X. African journal of microbiology research, 2012, vol. 6(2), pp. 379-384. DOI: 10.5897/AJMR11.1151.
19. Zhang A., Deng J., Yu S., Zhang F., Linhardt R.J., Sun P. International journal of biological macromolecules, 2018, vol. 115, pp. 221-226. DOI: 10.1016/j.ijbiomac.2018.04.061.
20. Ulziijargal E., Mau J.L. International journal of medicinal mushrooms, 2011, vol. 13(4), pp. 343-349. DOI: 10.1615/IntJMedMushr.v13.i4.40
21. Mizuno M. BioFactors, 2000, vol. 12, pp. 275-281. DOI: 10.1002/biof.5520120141.
22. Patent 2595737 (RU). 2016. (in Russ.).
Received April 27, 2019 Revised January 18, 2020 Accepted January 28, 2020
For citing: Minakov D.V., Morozhenko Yu.V., Bazarnova N.G. Khimiya Rastitel'nogo Syr'ya, 2020, no. 2, pp. 241-247.
(in Russ.). DOI: 10.14258/jcprm.2020025507.
* Corresponding author.
