CC BY
6
МАТЕРИАЛЫ КОНФЕРЕНЦИИ
Ю.В. Сидорова, Н.А. Северина, Б.В. Бидерман, Н.В. Рисинская, О.А. Глинщикова, А.С. Пшеничный, О.М. Королева, В.А. Васильева, Л.А. Кузьмина, Е.Н. Паровичникова, А.Б. Судариков
СЛУЧАЙ АЛЛОГЕННОЙ ТРАНСПЛАНТАЦИИ АЛЛОГЕННЫХ ГЕМОПОЭТИЧЕСКИХ
СТВОЛОВЫХ КЛЕТОК ОТ НЕРОДСТВЕННОГО ДОНОРА С МУТАЦИЕЙ DNMT3A
Федеральное государственное бюджетное учреждение «Национальный медицинский исследовательский центр гематологии» Министерства здравоохранения Российской Федерации, г. Москва
Введение. Соматические мутации гена DNMT3A (ДНК-метилтрансфераза 3А) выявляются у 30-36% пациентов с острым миелоидным лейкозом (ОМЛ) с нормальным карио-типом. При гематологических опухолях на аминокислотную замену в положении 882 приходится 92% всех точечных соматических мутаций гена DNMT3A, по данным базы COSMIC. Мутации гена DNMT3A относят к ранним, предлейкемическим изменениям. Соматические мутации гена DNMT3A p.R882 обнаруживаются у 0,8% здоровых людей старше 55 лет, так называемый клональный гемопоэз, что однако не всегда приводит к развитию опухоли. ДНК-метилтрансферазы отвечают за метилирование ДНК, что играет важную роль в эпигенетическом регулировании экспрессии генов. Считается, что нарушение метилирования ДНК - база для последующих мутационных изменений. Мутации гена DNMT3A являются факторами неблагоприятного прогноза при ОМЛ, а также ассоциированы с появлением других мутационных изменений, чаще в генах NPM1, FLT3, IDH1/2.
Цель. Описание клинического случая трансплантации ал-логенных гемопоэтических стволовых клеток от неродственного донора с соматической мутацией в гене DNMT3A.
Материалы и методы. Исследована ДНК костного мозга пациентки с ОМЛ, 36 лет, которая проходила лечение в НМИЦ гематологии с 2016 года. Для исследования мутаций применяли методы аллель-специфичной ПЦР (ас-ПЦр) и NGS.
Результаты. В декабре 2016 года у пациентки верифицирован диагноз острого миеломонобластного лейкоза, трансформация из миелодиспластического синдрома. При первичном молекулярно-генетическом обследовании выявлены мутации DNMT3A p.R882L (40%), IDH2 p.R140Q (40,6%), FLT3 p.D835A (1,8%), NPM1 (31,5%). Пациентке успешно было проведено химиотерапевтическое лечение. В материале костного мозга через три месяца от начала лечения не было обнаружено мутаций, выявляемых ранее. Учитывая молодой возраст
больной, неблагоприятный прогноз основного заболевания, в схему лечения решено включить трансплантацию аллоген-ных гемопоэтических стволовых клеток (алло-ТГСК) от неродственного HLA-идентичного донора. Через три года после трансплантации при повторном исследовании у пациентки не обнаружено мутаций в генах №М1, FLT3, ШН2, однако обнаружена мутация гена DNMT3A с другой аминокислотной заменой р^882Н (6,25%). Эта соматическая мутация гена DNMT3A (р^882Н) была нами выявлена в лейкоконцентрате донора с аллельной нагрузкой 0,6%, но отсутствовала в костном мозге пациентки до алло-ТГСК. Мы исследовали костный мозг пациентки в динамике после алло-ТГСК и обнаружили постепенное увеличение количества клеток с мутацией р^882Н в костном мозге: 0,8%-1,23%-2%-4,4%-6,25%, соответственно через 1 мес, 3 мес, 6 мес, 1,5 года, 3 года после алло-ТГСК. Из осложнений посттрансплантационного периода у пациентки через год после алло-ТГСК развилась изолированная тром-боцитопения (снижение тромбоцитов до 7 тыс. в мкл) с геморрагическим синдромом и гипоплазия костного мозга, по данным трепанобиоптата. Тромбоцитопения была расценена как реакция трансплантат против хозяина. После выполнения процедур экстракорпорального фотофореза количество тромбоцитов практически нормализовалось (105 тыс. в мкл). В настоящее время пациентка находится под наблюдением.
Выводы. Вопрос о генетическом типировании доноров костного мозга возможно станет актуальным уже в ближайшее время. Вероятно, часть осложнений в посттрансплантационном периоде может быть связана с генетическими аномалиями, приобретенными пациентом в ходе ТГСК. В данном случае кроме самого факта пересадки аллогенного костного мозга с мутацией гена DNMT3A, мы наблюдаем постепенный рост клонального гемопоэза, что может привести к развитию миелодиспластического синдрома/вторичного острого лейкоза.
С.Ю. Смирнова, Н.Г. Габеева, Е.Е. Никулина, В.А. Ковалева, Э.Г. Гемджян, Е.Е. Звонков, А.Б. Судариков
СВОБОДНО-ЦИРКУЛИРУЮЩАЯ ДНК ПЛАЗМЫ КРОВИ У ПАЦИЕНТОВ С ДИФФУЗНОЙ В-КЛЕТОЧНОЙ КРУПНОКЛЕТОЧНОЙ ЛИМФОМОЙ
Федеральное государственное бюджетное учреждение «Национальный медицинский исследовательский центр гематологии» Министерства здравоохранения Российской Федерации, г. Москва
Введение. Диффузная В-клеточная крупноклеточная лимфома (ДБККЛ) - гетерогенная группа лимфатических опухолей, различающихся прогнозом и ответом на лечение. На сегодняшний день универсального прогностического маркера для пациентов с ДБККл нет. Все больший интерес приобретает изучение свободно-циркулирующей ДНК плазмы крови (сцДНКп). Kurtz и соавт. в своем исследовании показали, что по количеству опухолевой сцДНКп до лечения и скорости ее элиминации в процессе терапии можно прогнозировать течение заболевания. Мы исследовали сцДНКп у пациентов с ДБККЛ, выбрав в качестве маркера опухоли В клеточную клональность (В-КК).
Цель работы: оценить концентрацию и В-КК сцДНКп у пациентов с ДВККЛ на различных этапах терапии, сравнить их с клиническими данными.
Материалы и методы. В исследование включены 16 пациентов с ДВККЛ и 7 здоровых доноров (ЗД). До лечения у всех больных В-КК исследовали в опухолевом материале (ОМ) и сцДНКп (ПЦР, фрагментный анализ). Плазму получали из цельной крови центрифугированием. СцДНКп выделяли коммерческим набором Quagen, измеряли концентрацию на флуориметре Qubit. Лечение проводили по схеме NHL-BFM-90.
Результаты. У больных с ДБККЛ до начала терапии концентрация сцДНКп была достоверно выше (411 пг/мкл), чем у ЗД (<50 пг/мкл). Начало лечения (2 дня предфазы) значимо увеличило концентрацию сцДНКп - 2800 пг/мкл vs 411 пг/ мкл у пациентов без терапии. У 13 из 14 (93%) больных при исследовании В-КК в сцДНКп до начала лечения был выявлен клональный продукт (КП), который по длине совпадал с выявленным в ОМ. У 2 больных при исследовании В-КК
