CC BY
42
УДК 612.017.1;617.723
СИСТЕМНЫЕ РАССТРОЙСТВА КЛЕТОЧНОГО ИММУНИТЕТА ПРИ ЭНДОГЕННОМ УВЕИТЕ
© Дикинов З.Х., Абидов М. Т.1
Медицинский факультет Кабардино-Балкарского государственного университета им. Х.М. Бербекова, Нальчик;
1 Центр современной медицины Московской академии рынка труда и информационных технологий, Москва
E-mail: [email protected]
У 90 пациентов с острым эндогенным увеитом и 17 больных с обострением хронического увеита исследованы в динамике показатели клеточного иммунитета и функционального состояния нейтрофильных гранулоцитов периферической крови. В острую фазу заболевания установлено снижение активности миелопероксидазы и кислородзависимо-го метаболизма нейтрофилов по данным НСТ-теста, а также общего числа лимфоцитов, в том числе их CD3+, CD4+, CD8+ и CD22+ субпопуляций, в сравнении с таковыми в группе здоровых доноров (n=40). Если общее количество лимфоцитов и число CD8+ и CD22+ клеток практически полностью восстанавливались до уровня референсных значений через 1-3 месяца от начала заболевания/обострения, то снижение абсолютного и относительного количества CD3+ и CD4+ лимфоцитов, а также функциональной активности нейтрофилов было более стойким.
Ключевые слова: эндогенный увеит, нейтрофилы, субпопуляции лимфоцитов.
SYSTEMIC DISORDERS OF CELLULAR IMMUNITY IN ENDOGENIC UVEITIS
Dikinov Z.H., Abidov M. T.1
Medical Faculty of H.M. Berbekov Kabardino-Balkarian State University, Nalchik;
1 Modern Medical Center of Moscow Academy of Labor Market and Information Technologies, Moscow
In 90 patients with acute endogenous uveitis and 17 patients with exacerbation of chronic uveitis, the dynamics of indicators of cellular immunity and the functional state of peripheral blood neutrophils have been investigated. In the acute phase of the disease, the activity of myeloperoxidase and oxygen-dependent metabolism of neutrophils according to the NBT test, and the total number of lymphocytes including their CD3+, CD4+, CD8+ and CD22+ subpopulation decreased in comparison with those of healthy donors (n = 40). The total number of lymphocytes and the number of CD8+ and CD22+ cells almost completely restored to the level of the reference values within 1-3 months from the disease onset/exacerbation. The reduction of the absolute and relative number of CD3+ and CD4+ lymphocytes as well as the functional activity of neutrophils was more persistent.
Keywords: endogenous uveitis, neutrophils, lymphocyte subpopulations.
Патогенез эндогенного увеита, с которым ассоциировано более 10% зарегистрированных случаев потери зрения в возрасте до 65 лет, связан не только с локальными аутоиммунными реакциями, но и системными иммунными нарушениями. Не случайно воспаление сосудистой оболочки глаз часто развивается у больных ревматоидным артритом, системной красной волчанкой, анкилози-рующим спондилитом, ВИЧ/СПИД-инфекцией, саркоидозом, язвенным колитом и рядом других заболеваний, характеризующихся расстройствами иммунитета на организменном уровне [17]. Вместе с тем эндогенный увеит представляет собой «зонтичный» термин, включающий в себя большое количество клинических фенотипов. Большой интерес представляет выявление наиболее общих нарушений системных показателей Т-клеточного и фагоцитарного звеньев иммунитета, которые сопровождают и, возможно, являются причиной различных форм увеита.
В свете ключевой роли клеточных иммунных расстройств в развитии внутриглазного воспале-
ния [6, 7, 8] оценка субпопуляционного состава лимфоцитов и функциональной активности нейтрофилов периферической крови выглядит востребованной с позиций направленного поиска эффективных средств иммунокорригирующей терапии при увеите.
Целью работы было выявление особенностей показателей клеточного иммунитета в разные фазы острого и обострения хронического эндогенного увеита.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
Обследовано 107 больных острыми и хроническими увеитами различной этиологии, поступивших на стационарное лечение в глазное отделение Республиканской клинической больницы (Кабардино-Балкарская Республика, г. Нальчик).
Активность воспалительного процесса при увеитах представляли в баллах, рассчитанных как общая сумма оценки основных проявлений вос-
5S
палительного процесса: инъекция глазного яблока - 0 (есть), 1 (нет); слезотечение - 0 (есть), 1 (нет); светобоязнь - 0 (есть), 1 (нет); цилиарные боли - 0 (есть), 1 (нет); роговица вне раны -
0 (прозрачная), 1 (отек эндотелия), 2 (десцеме-тит), 3 (преципитаты); гипотония - 0 (есть),
1 (нет); влага передней камеры - 0 (прозрачная), 1 (опалесцирующая), 2 (экссудат); радужка -0 (спокойная), 1 (отек), 2 (гиперемия, синехии); стекловидное тело - 0 (спокойное), 1 (экссудат).
Исследование системных иммунологических параметров проводили на базе иммунологической лаборатории Республиканского центра борьбы со СПИДом и инфекционными заболеваниями Минздрава Кабардино-Балкарской Республики (г. Нальчик).
Нейтрофильные гранулоциты выделяли из периферической крови, как описано ранее [15]. Для оценки функционального состояния активности этих клеток использовали спонтанный НСТ-тест [18]. Активность миелопероксидазы нейтро-фильных гранулоцитов определяли по методу Кй^ага М. et а1. [19].
Количественную оценку Т-лимфоцитов и их субпопуляций проводили, как описано Земсковым А.М. и соавторами [8].
Для выявления референсных значений исследуемых показателей изучены образцы крови 40 здоровых студентов медицинского факультета КБГУ им. Х.М. Бербекова в возрасте от 17 до 25 лет.
Полученные данные обрабатывали согласно общепринятым методам статистической обработки [14] с помощью программы STATGRAF и представляли в виде средней ± стандартное отклонение. Межгрупповые сравнения проводили с помощью /-критерия Стьюдента для нормально распределенных показателей и непараметрических критериев Манна-Уитни и Вилкоксона для распределений, отличных от нормального. Различия считали значимыми при р<0,05. Связь между нормально распределенными количественными
показателями и ее направленность оценивали, используя коэффициент корреляции Пирсона. Коэффициент ранговой корреляции Спирмена рассчитывали при анализе связи переменных с ненормальным распределением.
РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
У 80 пациентов выявлен острый передний увеит (иридоциклит), у 8 - острый серозный хо-риоретинит и у 2 - острый серозно-пластический панувеит; хронический увеит в стадии обострения верифицирован у 17 больных (табл. 1).
У всех больных уже при поступлении (в первые 3 суток заболевания/обострения) наблюдалась высокая активность воспалительного процесса (11,2-12,2 балла). Несмотря на проведение стандартного лечения, включающего стероидные препараты, антибиотики и нестероидные противовоспалительные средства, к 7-8-м суткам от начала заболевания активность воспалительного процесса несколько увеличивалась и составляла в среднем 13,6 балла. Только на 14-15-е сутки воспалительные проявления (инъекция глазного яблока, цилиарные боли, слезотечение) снижались до уровня таковых в начале заболевания (9,1 балла). Резорбция преципитатов на роговице и хрусталике происходила медленно. Преципитаты наблюдали через месяц от начала заболевания, а у некоторых больных - и через 3 месяца. К концу первого месяца от начала лечения у 40-50% больных отмечалось наличие синехий и экссудата в передней камере.
У включённых в исследование больных установлено стойкое снижение функциональной активности нейтрофилов (табл. 2), что может быть связано с длительным применением стероидов и отчасти объясняет замедленную резорбцию преципитатов на роговице и хрусталике. Уровень активности миелопероксидазы и показатели
Таблица 1
Клинические формы увеита у обследованных больных
Клиническая форма заболевания Количество пациентов
Абс. %
Острые увеиты
Серозный иридоциклит 54 60,0
Фибринозно-пластический иридоциклит 23 25,6
Г еморрагический иридоциклит 2 2,2
Г нойный иридоциклит 1 1,1
Острый серозный хориоретинит S 8,9
Серозно-пластический панувеит 2 2,2
Хронические увеиты
Хронический фибринозно-пластический иридоциклит 15 88,2
Хронический хориоретинит 2 11,8
Изменения иммунного статуса больных с эндогенными увеитами
Таблица 2
Показатель Норма Время от начала острого / обострения хронического заболевания
1-3-е сутки 8-10-е сутки 14-16-е сутки 1 месяц 3 месяца
Миелопероксидаза нейтрофилов (Ед) 240±35 165±24* 125±19* 135±25* 140±19* 170±29*
НСТ-тест (Ед) 12,0±2,4 8,5±1,6* 6,5±1,2* 7,8±1,4* 8,0±1,2* 9,5±2,2*
Лейкоциты, тыс/мкл 6,42±0.81 7,25±0,59* 8,47±0,93* 7,71±1,54* 7,04±0,76 6,82±0,73
Лимфоциты, тыс/мкл 2,02±0,38 1,60±0,33* 1,26±0,20* 1,74±0,31* 1,85±0,43* 2,04±0,35
Лимфоциты, % 30,9±4,2 21,5±3,9* 15,5±2,8* 21,4±3,7* 27,1±4,5* 28,6±4,4
CD3+ лимфоциты, клеток/мкл 1070±210 620±180* 580±160* 630±160* 720±120* 850±120*
CD3+ лимфоциты, % 54,3±10.4 41,5±8,3* 43,9±9,3* 38,1±7,9* 37,9±6,7* 43,5±6,2*
CD4+ лимфоциты, клеток/мкл 713±73 450±59* 370±48* 420±61* 480±56* 570±52*
CD4+ лимфоциты, % 36,1±5,3 29,0±3,6* 28,0±3,1* 25,4±3,9* 25,2±4,0* 29,2±3,8*
CD8+ лимфоциты, клеток/мкл 355±66 320±54 290±60* 305±45* 335±57 363±74
CD8+ лимфоциты, % 18,0±4,1 20,6±4,4 21,9±3,2* 18,5±4,0 17,6±2,8 18,5±3,9
CD22+ лимфоциты, клеток/мкл 282±50 220±45* 191±59* 210±67* 243±71 276±75
CD22+ лимфоциты, % 14,3±2,5 14,1±3,9 14,4±2,0 12,7±3,1 12,6±2,9 13,8±3,0
CD4/CD8 2,0±0,5 1,4±0,3* 1,3±0,4* 1,4±0,3* 1,4±0,4* 1,6±0,3*
Примечание: * - р <0.05 по сравнению с нормой
НСТ-теста, характеризующего кислородзависи-мый метаболизм нейтрофилов, не возвращались к норме и через 3 месяца от начала острого или обострения хронического увеита.
Кроме того, на пике клинических проявлений заболевания в периферической крови больных выявлено снижение числа лимфоцитов, В-клеток и основных субпопуляций Т-лимфоцитов (табл. 2). Если общее количество лимфоцитов и число CD8+ и CD22+ клеток практически полностью восстанавливались до уровня референсных значений через 1-3 месяца от начала заболевания/обострения, то депрессия абсолютного и относительного количества CD3+ и CD4+ лимфоцитов была более стойкой.
Меньший уровень падения числа CD8+ клеток и относительно быстрая нормализация их количества в период реконвалесценции заслуживают внимания в свете литературных данных о регуляторной (супрессорной) роли этой популяции Т-лимфоцитов при регрессии воспаления в сосудистой оболочке глаза [16].
На основании полученных результатов сложно судить о причинно-следственных связях выявленных иммунологических расстройств и клинических проявлений эндогенного увеита. Тем не менее корреляция лабораторных сдвигов с выра-
женностью клинических признаков внутриглазного воспаления говорит о целесообразности поиска эффективных средств коррекции вышеописанных системных иммунофенотипических нарушений в комплексной терапии острого и хронического увеита. Очевидно, эти нарушения на уровне целого организма определяют и местные иммунологические расстройства, в частности избыточную продукцию провоспалительных ци-токинов и неоптерина, описанные ранее у больных с эндогенным [6] и посттравматическим увеи-
том [7]. Поэтому рациональными объектами выбора иммуномодуляторов в данном случае представляются препараты, обладающие не только способностью корригировать измененные функциональные и количественные показатели клеточного иммунитета, но и свойством подавлять в острую фазу воспаления излишнюю активность иммунокомпетентных клеток и выработку ими провоспалительных медиаторов [11, 12, 13]. Примером такого иммуномодулятора может служить аминофталгидразид [1, 2, 3], который уже был успешно апробирован на больных увеитом инфекционной природы [4, 5].
ЛИТЕРАТУРА
1. Абидов М.Т., Баштаненко А.Ф., Нелюбов М.В., Шкалев М.В., Ковалевская Е.О., Калюжин О.В. Регуляция иммунных реакций в лечении хронических и острых воспалительных заболеваний // Якутский медицинский журнал. - 2004. - № 3. -C. 58-60.
2. Абидов М.Т., Калюжин О.В., Гришина Т.И. Новый отечественный иммуномодулирующий и противовоспалительный препарат // Военно-медицинский журнал. - 1999. - № 1. - С. 41-45.
3. Абидов М.Т., Калюжин О.В., Нелюбов М.В. Иммунотерапия острых и хронических воспалительных заболеваний // Terra Medica Nova. - 2001. - № 2. -С. 3-7.
4. Аджави Ш.М., Волик Е.И., Аджави С.М. Современные методы лечения задних увеитов вирусной, хламидийной, токсоплазмозной этиологии // Кубанский научный медицинский вестник. - 2005. -№ 3-4. - С. 54-57.
5. Дикинов З.Х. Местная локальная иммунокоррекция в сочетании с оксигенобаротерапией в лечении острых гнойных заболеваний сосудистой оболочки глаз // International Journal on Immunorehabilitation. - 2003. - Т. 5, № 2. - C. 242.
6. Дикинов З.Х. Молекулярные маркеры воспаления при эндогенном увеите // Иммунопатология, аллергология, инфектология. - 2011. - № 3. -С. 22-26.
7. Дикинов З.Х. Поиск надежных и информативных молекулярных маркеров воспаления при посттравматическом увеите // Курский научнопрактический вестник «Человек и его здоровье». -2011. - № 3. - С. 33-38.
8. Земсков А.М., Земсков В.М., Караулов А.В. Клиническая иммунология / Под ред. А.В. Караулова. -М. : Медицинское информационное агентство,
1999. - 604 c.
9. Калюжин О.В., Дикинов З.Х., Евсегнеева И.В. Иммунные механизмы экспериментальных увеорети-нитов // Курский научно-практический вестник
«Человек и его здоровье». - 2011. - № 1. -С. 153-159.
10. Калюжин О.В., Дикинов З.Х., Евсегнеева И.В. Модели интраокулярного воспаления // Иммунопатология, аллергология, инфектология. - 2011. -№ 2. - С. 14-19.
11. Караулов А.В., Калюжин О.В. Иммунотерапия инфекционных болезней: проблемы и перспективы // Терапевтический архив. - 2013. - Т. 85, № 11. -С. 100-108.
12. Караулов А.В., Калюжин О.В. Иммунотропные препараты: принципы применения и клиническая эффективность. - М. : МЦФЭР. - 2007. - 144 с.
13. Караулов А.В., Калюжин О.В., Ликов В.Ф. Подходы к иммунотерапии воспалительных заболеваний // Кремлевская медицина. Клинический вестник. - 2002. - № 1. - С. 62-64.
14. Платонов А.Е. Статистический анализ в медицине и биологии: задачи, терминология, логика, компьютерные методы. - М. : Издательство РАМН,
2000. - 52 с.
15. Boyum A. Isolation of mononuclear cells and granulocytes from human blood // Scand. J. Clin. Lab. Invest. - 1968. - Vol. 97 (suppl). - P. 77-89.
16. Caspi R.R. A look at autoimmunity and inflammation in the eye // J. Clin. Invest. - 2010 - Vol. 120, N 9. -P. 3073-3083.
17. Goldstein D.A., Pyatetsky D., Tessler H.H. Classification, symptoms, and signs of uveitis // In: Duane’s Ophthalmology / W.Tasman, E.A.Jaeger, eds. - 15th ed. - Philadelphia, Pa: Lippincott Williams & Wilkins, 2009. - №ap. 32.
18. Gordon P.A., Stuart J., Lee T.R., Breeze G.R., Pugh R.N.H. The cytocentrifuge NBT test // J. Clin. Pathol. - 1975. - Vol. 28, N 8. - P. 674-679.
19. Kitahara M., Simnonian Y., Eyre H.J. Neutrophil myeloperoxidase: a simple reproducible technique to determine activity // J. Lab. Clin. Med. - 1979. -Vol. 93. - P. 232-237.
