CC BY-ND
13
май HOC (278)
ЗНиСО
51
УДК 612.392.81
СИСТЕМА ЦИФРОВОЙ МИКРОСКОПИИ - ИНФОРМАЦИОННЫЙ ИСТОЧНИК МОНИТОРИНГА ЗА БИОГЕЛЬМИНТОЗАМИ НА ТЕРРИТОРИИ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ
К.Ю. Кузнецова1, М.М. Асланова2, Ф.М. Шихбабаева2
1 Научно-исследовательский институт медицинской паразитологии и тропической медицины им. Е.И. Марциновского ГБОУ ВПО «Первый Московский государственный медицинский университет им. И.М. Сеченова» Минздрава России, Москва, Россия
2ФБУЗ «Федеральный центр гигиены и эпидемиологии» Роспотребнадзора, Москва, Россия
Представлены ретроспективная эпидемиологическая ситуация по биогельминтозам на территории России и современный информационный источник мониторинга.
Ключевые слова: мониторинг за биогельминтозами, лабораторная диагностика, цифровая микроскопия, идентификация возбудителя, трихинелоскопия, цифровая микроскопия.
K.Yu. Kuznetsova, M.M. Aslanova, F.M. Shikhbabaeva □ TECHNOLOGY AND DIGITAL SCANNING MICROSCOPY - AN INFORMATION SOURCE FOR MONITORING BIOELIMINABLE ON THE TERRITORY OF THE RUSSIAN FEDERATION □
Martsinovsky Research Institute of Medical Parasitology and Tropical Medicine of Sechenov First Moscow State Medical University, Moscow, Russia; Federal Center of Hygiene and Epidemiology of Rospotrebnadzor, Moscow, Russia.
Presents a retrospective epidemiological situation on geohelminthiasis in the territory of the Russian Federation and modern information source monitoring.
Key words: monitoring bioeliminable, laboratory diagnostics, digital microscopy, identification of pathogen, trichinelloscopy, digital microscopy.
Проводимые в стране мероприятия по охране здоровья населения, обеспечению благоприятной санитарно-эпидемиологической обстановки и защиты прав потребителей осуществляется в соответствии с задачами, поставленными Президентом Российской Федерации.
Серьезное внимание Президента Российской Федерации обращено на необходимость сохранения здоровья нации, снижение уровня смертности, увеличение продолжительности жизни людей и преодоление демографического спада в стране.
На сохранение здоровья в стране значительное влияние оказывает санитарно-эпидемиологическая обстановка.
За последние годы существенного улучшения эпидемиологической обстановки не произошло. Отмечается рост заболеваемости некоторыми гельминтозами (трихинеллез, аскаридоз, описторхоз, геминолепидоз, энтеробиоз).
Основными причинами неэффективной борьбы с паразитозами, является недооценка
паразитарных болезней и их влияния на здоровье населения, в первую очередь детей, а также недостаточная их профилактика.
В обычной практике большинства лабораторий используются наиболее простые методы исследований копроскопии - нативный мазок с раствором Люголя, «толстый» мазок по Като -и при исследовании мяса и мяса рыбы метод поперечных срезов, которые обладают невысокой чувствительностью.
Сложная эпидемиологическая ситуация по-прежнему остается в очагах биогельминтозов — описторхоза, дифиллоботриозов, эхинококкозов, трихинеллеза, течение болезни при которых нередко сопровождается хронизацией процесса и необратимыми осложнениями, что приводит к утрате трудоспособности и летальности.
В структуре биогельминтозов в 2014 г. на долю описторхоза пришлось 78,6 %, дифилло-ботриоза — 18,7 %, эхинокококкоза — 1,4 %, те-ниидозов — 0,5 %, клонорхоза — 0,5 %, трихинеллеза — 0,3 % (рис.).
клонорхоз 0,5
трихинеллез 0,3 %
тениидозы 0,5
эхинококкоз 1,4 %
описторхоз 78,6 %
дифиллоботриоз 18,7 %
Рис. 1. Структура биогельминтозов, %
52
ЗНивО
МАЙ НАС (278)
Описторхоз является самым распространенным гельминтозом, передающимся через зараженную рыбу. В России расположен почти весь мировой ареал описторхоза. Проблема описторхоза осложнилась в связи с неконтролируемым увеличением числа приватизированных и частных рыбоперерабатывающих предприятий, грубо нарушающих технологический режим обеззараживания рыбы от личинок гельминта и реализующих населению эпидемически опасную продукцию [5].
Неблагополучными по описторхозу являются практически все территории, примыкающие к бассейнам рек Оби, Иртыша, Томи и их притокам.
Превышение среднероссийского показателя в 2014 г. зарегистрировано в 13 субъектах Российской Федерации. Высокая эндемичность в этих очагах обусловлена сочетанием благоприятных для описторхоза природных и социальных факторов:
- функционирование многочисленных биотопов промежуточного хозяина паразита;
- низкая степень благоустройства неселен-ных мест, расположенных по берегам рек;
- развитое любительское рыболовство;
- укоренившаяся этническая особенность аборигенов употреблять в пищу малосоленую и сырую рабу;
- нарушение технологического режима производства и реализации рыбной продукции.
Самым напряженным очагом описторхоза на территории Обь-Иртышского бассейна является Ханты-Мансийский автономный округ. Удельный вес описторхоза составляет 89 % от всех выявляемых ежегодно гельминтозов. Профилактика описторхоза невозможна без эффективных мер охраны открытых водоемов, имеющих хозяйственное и рекреационное значения, регуляции численности моллюсков - промежуточных хозяев и ларвальных форм возбудителя, разработки и внедрения на рыбоперерабатывающих предприятиях технологических режимов обеззараживания рыбы семейства карповых, воспитания у населения паразитологичес-ки безопасных навыков и рецептов приготовления рыбы [4, 5].
Кроме предупреждения заражения людей значительной проблемой является оказание адекватной медицинской помощи больным описторхозом. При проведении лечебно-профилактических мероприятий необходимо учитывать недостаточность напряженности иммунитета как во время инвазии, так и после освобождения, что обусловливает высокую частоту суперинвазий [3, 4, 5].
Заболеваемость трихинеллезом носит волнообразный характер. В 2014 г. зарегистрировано 94 (0,06 на 100 тыс.населения) случая трихинеллеза, а в 2013 г. было зарегистрировано 30 (0,02 на 100 тыс. населения) случаев трихинеллеза.
В последние годы увеличилась доля случаев заражения, связанных с употреблением мя-
са бурого медведя в сыром (строганина), жа- ^с реном, вялено-копченом виде, мяса собак, мя- ^^ са барсуков, свинины в виде свиного сала с прослойками мяса и грудинки в сыром виде без термической обработки. Также заражение людей трихинеллезом происходит в большей ^^ степени в сезон массового подворного убоя свиней и охоты [5]. <~ь
В пределах эндемичных территорий подвержены высокому риску заражения трихинеллезом сельские жители, выращивающие свиней, охотники и лица, длительное время пребывающие в условиях природных очагов (геологи, нефтегазодобытчики и др.).
Поэтому одним из важнейших факторов в мониторинге за биогельминтозами является развитие лабораторных технологий, которые направлены на обеспечение точности, воспроизводимости и прослеживаемости этапов исследования и их стандартизации [6, 5, 7].
Цель исследования - определить наиболее эффективные методы исследования установления паразитарного заболевания и паразитарного заражения пищевых продуктов (мясо, мясо рыбы).
Материалы и методы. Исследования проводились независимо друг от друга в ФБУЗ «Федеральный центр гигиены и эпидемиологии» Роспотребнадзора и Научно-исследовательском институте медицинской паразитологии и тропической медицины им. Е.И. Марци-новского ГБОУ ВПО «Первого Московского государственного медицинского университета им. И.М. Сеченова» Минздрава России с применением технологий цифровой и сканирующей микроскопии (табл.).
Использовано в общей сложности 30 проб мяса медвежатины (720 поперечных срезов), 40 проб мяса дикого кабана (960 поперечных срезов) и 50 проб мяса рыбы язь (1 080 поперечных срезов). Мясо диких животных (медведь и кабан) было доставлено в лаборатории из ветеринарных станций Великого Новгорода и Нижнего Новгорода с положительным результатом трихинелоскопии для приготовления музейных образцов на базе лабораторий ФБУЗ ФЦГиЭ Роспотребнадзора и института медицинской паразитологии. Мясо рыбы язь с положительным результатом было доставлено из ФБУЗ Тюменской области также для приготовления готовых музейных препаратов для демонстрации на циклах усовершенствования специалистов.
Результаты и обсуждение. Исследования показали, что метод обнаружения и распознавания паразитологических объектов с применением технологий цифровой и сканирующей микроскопии позволяет увеличить число находок в пробе и архивировать полученные данные за счет системы сбора автоматических функций с использованием особенностей архитектуры аппарата и промежуточных фиксируемых моделей образцов каждого уровня распознавания в представленном материале [1, 2, 7].
май № (270)
ЗНиСО
Таблица 1. Результаты исследования проб мяса, мяса рыбы с применением технологий цифровой и сканирующей микроскопии
Методы исследования Мясо дикого медведя Мясо дикого кабана Мясо рыбы язь
всего исследовано проб, абс. из них с положительным результатом, абс. удельный вес, % всего исследовано проб, абс. из них с положительным результатом, абс. удельный вес, % всего исследовано проб, абс. из них с положительным результатом, абс. удельный вес, %
Метод с применением технологий цифровой и сканирующей микроскопии 720 700 97,2 960 902 93,9 1 020 991 91,7
Микроскопия с применением микроскопа МБС-10 720 634 88,0 960 833 86,7 1 020 884 81,8
Работа на системе цифровой микроскопии предлагает два режима эксплуатации: 1) ручная микроскопия с использованием рук и глаз врача-исследователя в качестве анализатора и 2) комплекс автоматизированной микроскопии (КАМ) с автоматическими функциями сканирования и анализа изображений препарата. Преимущества применения первой группы анализаторов связаны с максимальным составом анализируемых типов биоматериалов, с диагностически полным составом оцениваемых морфологических параметров, в меньшей стоимости расходных материалов. Применение КАМ позволяет увеличить чувствительность и воспроизводимость диагностически значимой морфологии в 2-5 раз по сравнению с применяемыми современными методиками исследований. Ошибка распознавания объектов поиска при данном режиме работы не превышает статистический показатель ошибки анализа и позволяет в 1,5-2 раза повысить точность дифференциальной диагностики широкой группы паразитарных и других патологий, увеличить вы-являемость искомых патогенов [1, 2, 7].
Заключение. Таким образом, полученные результаты позволяют рекомендовать применение технологий цифровой и сканирующей микроскопии для использования в работе пара-зитологических лабораторий, т. к. технологии цифровой и сканирующей микроскопии являются бурно развивающимся направлением, вытесняющим традиционную ручную микроскопию из большинства областей применения. Прогресс в области анализов санитарно-парази-тологической экспертизы также неосуществим без этих технологий.
Современные системы цифровой микроскопии требуют небольших средств и усилий для своего внедрения, могут применяться для проведения санитарно-паразитологической экспертизы материалов (образцов) всех типов. Основной вклад таких систем - объективизация и
повышение точности анализов, контроль качества препаратов и результатов анализа [2, 3].
Более продвинутая система сканирующей микроскопии благодаря автоматизации и стандартизации рутинных операций микроскопии значительно повышает пропускную способность лаборатории, улучшает условия труда, точность и контроль результатов анализа.
ЛИТЕРАТУРА
1. Медовый В.С. Автоматизированные методики микроскопического анализа морфологии биоматериалов. Аналитический обзор. Лаборатория. 2014. №2. С. 37-39.
2. Медовый В.С. и др. Технологии сканирующей микроскопии для морфологических исследований / В.С. Медовый, С.А. Панов, А.М. Пятницкий, Б.З. Соколинский / Лабораторная служба. 2015. № 4. С. 23-31.
3. Кузнецова К.Ю. Автоматизация лабораторной диагностики гельминтозов (экспериментальные исследования): Автореф. дисс. канд. мед. наук. М., 2005. С. 28.
4. Сыскова Т.Г. и др. Санитарно-паразитологический надзор за объектами окружающей среды / Т.Г. Сыскова, М.М. Асланова // Материалы Х съезда Всероссийского научно-практического общества, эпидемиологов, микробиологов и паразитологов. Апрель. 2012. Т. 2. С. 382.
5. Асланова М.М. и др. Паразитологический мониторинг как составная часть эпидемиологического надзора за гельминтозами в Российской Федерации / М.М. Асланова, Т.Г. Сыскова, Е.А. Черникова // Медицинская паразитология и паразитарные болезни. 2014. № 1. С. 13.
6. Асланова М.М. и др. Опыт участия паразитологических лабораторий в межлабораторных сравнительных испытаниях / М.М. Асланова, Е.А. Черникова, М.В. Заро-ченцев // Здоровье населения и среда обитания. 2014. № 7. С. 52.
7. Асланова М.М. и др. Эффективная лабораторная диагностика - основа мониторинга паразитарных болезней / М.М. Асланова, К.Ю. Кузнецова, Е.Н. Морозов // Здоровье населения и среда обитания. 2016. № 1 (274). С. 34-37.
Контактная информация:
Асланова Мария Михайловна, тел.: +7 (903) 964-11-45, +7 (495) 954-09-98, e-mail: [email protected] Contact information: АэЫпоуа Maria,
phone: +7 (903) 964-11-45, +7 (495) 954-09-98, e-mail: [email protected]
