CC BY
153
МИКРОБИОЛОГИЯ
DOI: https://doi. org/10.22263/2312-4156.2018.1.50
СИСТЕМА МИКРОБИОЛОГИЧЕСКОГО МОНИТОРИНГА ЭКСТРЕМАЛЬНО-АНТИБИОТИКОРЕЗИСТЕНТНЫХ И ПАНРЕЗИСТЕНТНЫХ БАКТЕРИАЛЬНЫХ ПАТОГЕНОВ С ОПРЕДЕЛЕНИЕМ ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТИ К КОМБИНАЦИЯМ АНТИБИОТИКОВ
ТАПАЛЬСКИЙ Д.В.1, БОНДА Н.А.2, ЛАГУН Л.В.1
1Гомельский государственный медицинский университет, г. Гомель, Республика Беларусь 2Гомельский областной центр гигиены, эпидемиологии и общественного здоровья, г. Гомель, Республика Беларусь
Вестник ВГМУ. - 2018. - Том 17, №1. - С. 50-58.
MICROBIOLOGICAL MONITORING SYSTEM OF EXTENSIVELY DRUG-RESISTANT AND PANDRUG-RESISTANT BACTERIAL PATHOGENS DETERMINING THE SENSITIVITY TO ANTIBIOTIC COMBINATIONS
TAPALSKI D.V.1, BONDA N.A.2, LAGUN L.V.1
1Gomel State Medical University, Gomel, Republic of Belarus
2Gomel Regional Center of Hygiene, Epidemiology and Public Health, Gomel, Republic of Belarus Vestnik VGMU. 2018;17(1):50-58.
Резюме.
Цель - организовать систему микробиологического мониторинга, основанную на выявлении эпидемически значимых антибиотикорезистентных штаммов и определении их чувствительности к антибиотикам и их комбинациям.
Материал и методы. Для 130 экстремально-антибиотикорезистентных клинических изолятов Klebsiella pneumoniae, Pseudomonas aeruginosa и Acinetobacter baumannii, выделенных в 2016-2017 гг. в 21 организации здравоохранения Гомельской области, выполнена детекция генов карбапенемаз методом ПЦР в реальном времени и определение минимальных подавляющих концентраций антибиотиков методом двукратных серийных разведений в бульоне. Дополнительно для каждого микроорганизма выполнено определение чувствительности к 11 двойным комбинациям антибиотиков методом тестирования бактерицидности различных концентраций. Результаты. Среди 82 экстремально-резистентных изолятов P.aeruginosa выявлено 8 изолятов (9,8%) с полной устойчивостью к антибиотикам (МПК колистина 4 и более мкг/мл) и 72 изолята (87,2%), чувствительных только к колистину. Большинство включенных в исследование штаммов A.baumannii и K.pneumoniae сохраняли чувствительность только к колистину и тигециклину. Продукция карбапенемаз выявлена у 11,0% изолятов P.aeruginosa (метало-бета-лактамаза VIM), всех изолятов A.baumannii (карбапенемаза OXA-23 - у 2,7% изолятов, карбапе-немаза 0XA-40 - у 97,3% изолятов), 30,6% изолятов K.pneumoniae (карбапенемаза OXA-48 у 25,0% изолятов, металло-бета-лактамаза NDM - у 5,6% изолятов). Выявлена бактерицидная активность всех комбинаций с включением колистина в отношении большинства исследуемых штаммов K.pneumoniae и A.baumannii. В отношении P.aeruginosa наиболее активными были комбинации меропенем-колистин и имипенем-колистин (бактерицидная активность для 82,9% и 89,0% изолятов).
Заключение. Показано, что экстремальная антибиотикорезистентность A.baumannii и K.pneumoniae ассоциирована с продукцией карбапенемаз. Выявлены комбинации антибиотиков, эффективные в отношении экстремально-антибиотикорезистентных микроорганизмов.
Ключевые слова: клебсиеллы, псевдомонады, ацинетобактеры, антибиотикорезистентность, комбинации антибиотиков, карбапенемазы.
Abstract.
Objectives. To organize the system of microbiological monitoring based on the detection of epidemiological^ significant antibiotic-resistant isolates and determination of their sensitivity to antibiotics and their combinations. Material and methods. Carbapenemases genes detection by means of real-time PCR method and determination of minimal inhibitory antibiotic concentrations with the help of twofold serial broth dilutions method were carried out for 130 extensively drug-resistant Klebsiella pneumoniae, Pseudomonas aeruginosa and Acinetobacter baumannii clinical strains isolated in 2016-2017 years in 21 health care institutions of Gomel Region. In addition, for each microorganism sensitivity to 11 double antibiotic combinations was determined by testing the bactericidal activity of various concentrations. Results. 8 isolates (9,8%) with resistance to all antibiotics (with colistin MIC of 4 and more mcg/ml) and 72 isolates (87,2%) sensitive only to colistin were detected among 82 extensively drug-resistant P.aeruginosa isolates. Most of the strains of A.baumannii and K.pneumoniae included in the study remained sensitive only to colistin and tigecycline. The carbapenemases production was detected in 11,0% of the P.aeruginosa isolates (metallo-P-lactamase VIM); all isolates of A.baumannii (carbapenemase OXA-23 - in 2,7% of the isolates, carbapenemase 0XA-40 - in 97,3% of the isolates); 30,6% of the K.pneumoniae isolates (carbapenemase OXA-48 - in 25,0% of the isolates, metallo-P-lactamase NDM - in 5,6% of the isolates). The bactericidal activity of all combinations with the inclusion of colistin for the majority of the investigated strains of K.pneumoniae and A.baumannii has been revealed. The combinations of meropenem-colistin and imipenem-colistin demonstrated the greatest activity against P.aeruginosa (bactericidal activity was detected for 82,9% and 89,0% of the isolates).
Conclusions. It has been shown that the extensive antibiotic resistance of A.baumannii and K.pneumoniae is associated with the production of carbapenemases. Antibiotic combinations, effective against extensively antibiotic-resistant microorganisms have been found.
Key words: Klebsiella, Pseudomonas, Acinetobacter, antibiotic resistance, antibiotic combinations, carbapenemases.
Формирование устойчивости к антибиотикам среди энтеробактерий и грамотрицательных неферментирующих бактерий может быть связано с различными механизмами, однако наибольшее клиническое и эпидемиологическое значение имеет продукция приобретенных карбапенемаз. Опасность этих ферментов обусловлена их широким спектром каталитической активности и способностью к быстрому горизонтальному распространению в бактериальных популяциях [1]. Отдельные эпидемиологически значимые клоны полиантибиотикорезистентных продуцентов кар-бапенемаз способны быстро распространяться на обширных территориях и вызывать тяжелые генерализованные инфекции [2].
Основным направлением терапии инфекций, вызванных экстремально-антибиотикоре-зистентными бактериями, является использование комбинаций антибиотиков, обладающих синергидным действием [3]. В многочисленных исследованиях установлено, что для подбора эффективных комбинаций антибиотиков целесообразно проводить микробиологическое тестирование бактериальных изолятов, выделенных от конкретного пациента [4]. В Беларуси и странах СНГ тестирование эффективности комбинаций антибиотиков не проводится, что связано с отсутствием доступных методик и подготовленных кадров. С исследовательской целью для опре-
деления антимикробного эффекта комбинаций антибиотиков в мире используются различные методы, большинство из них является дорогостоящими и трудозатратными, не применимыми для рутинного использования в клинической практике. На основе разработанного в 2000 г. в Канаде метода MCBT (Multiple combination bactericidal testing, тестирование бактерицидности различных комбинаций) [5], с учетом современных данных о фармакокинетике и фармакодинамике антибиотиков, нами создан и адаптирован микробиологический метод, позволяющий подбирать эффективные комбинации из двух или трех антибиотиков, обладающие бактерицидной активностью в отношении экстремально-антибиотикоре-зистентных бактерий.
Цель исследования - организовать систему микробиологического мониторинга, основанную на выявлении эпидемически значимых антибио-тикорезистентных штаммов и определении чувствительности к антибиотикам и их комбинациям.
Материал и методы
При проведении рутинных микробиологических исследований в микробиологической лаборатории Гомельского областного центра гигиены, эпидемиологии и общественного здоровья (ГОЦГЭиОЗ) в 2016-2017 гг. был отобран 141
клинический изолят K.pneumoniae, P.aeruginosa, A.baumannii со множественной и экстремальной устойчивостью к антибактериальным препаратам. Указанные изоляты были выделены от пациентов, госпитализированных в 11 организаций здравоохранения г. Гомеля. Также в исследование включены 40 клинических экстремально-анти-биотикорезистентных изолятов K.pneumoniae, P.aeruginosa, A.baumannii, поступивших на реи-дентификацию в микробиологическую лабораторию ГОЦГЭиОЗ из 10 районных и зональных центров гигиены и эпидемиологии Гомельской области. Все изоляты были выделены из различных видов клинического материала - мокроты, крови, раневого отделяемого, экссудатов, интрао-перационного материала, мочи в диагностически значимых количествах. Реидентификация изолятов была выполнена с использованием автоматического микробиологического анализатора VITEK 2 Compact на идентификационных картах VITEK 2 GN (bioMerieux, Франция).
Определение чувствительности к 17 антибактериальным препаратам (ампициллин/ сульбактаму, пиперациллину, цефуроксиму, це-фуроксим аксетилу, цефиксиму, цефтриаксону, цефепиму, азтреонаму, меропенему, левофлокса-цину, моксифлоксацину, миноциклину, тетрациклину, тигециклину, хлорамфениколу, колистину, триметоприму) выполнено на анализаторе VITEK 2 Compact с использованием диагностических карт AST-XN-05 в соответствии с инструкциями производителя.
Для определения различных уровней анти-биотикорезистентности использовались международные согласительные критерии: мульти-резистентность (MDR - multidrug resistance)
- нечувствительность по крайне мере к одному антибиотику в трех и более категориях антимикробных препаратов, экстремальная резистентность (XDR - extensively drug resistance)
- нечувствительность по крайне мере к одному антибиотику во всех категориях антимикробных препаратов, за исключением 1-2 категорий, пан-резистентность (PDR - pandrug resistance) - не-
чувствительность ко всем антибиотикам во всех категориях антимикробных препаратов [6].
Для изолятов K.pneumoniae, P.aeruginosa и A.baumannii с выявленной автоматизированным методом экстремальной антибиотикорези-стентностью методом ПЦР в реальном времени выполнена детекция генов карбапенемаз. Для проведения ПЦР использовали диагностические наборы производства ФБУН ЦНИИ Эпидемиологии Роспотребнадзора, г. Москва, Российская Федерация. Информация о выявляемых генах и используемых тест-системах представлена в таблице 1.
Экстракцию ДНК бактериальных культур, амплификацию с гибридизационно-флуорес-центной детекцией в режиме реального времени на амплификаторе RotorGene 3000 (Corbett Research, Австралия), анализ и интерпретацию полученных результатов выполняли в соответствии с инструкциями производителя диагностических наборов.
Минимальные подавляющие концентрации (МПК) антибиотиков определяли методом двукратных серийных разведений в бульоне Мюллера-Хинтона (BD, Франция). Тестирование проводили в стерильных 96-луночных полистироловых планшетах (Sarstedt, Германия) в соответствии с ГОСТ Р ИСО 20776-1-2010 [7]. При учете и интерпретации результатов руководствовались стандартами EUCAST [8]. Качество исследований контролировали штаммами E.coli ATCC 25922 и P.aeruginosa ATCC 27853.
Определение чувствительности к комбинациям антибиотиков выполняли модицфициро-ванным методом тестирования бактерицидности различных комбинаций. Готовили рабочие растворы антибиотиков, содержащие тестируемые пороговые фармакокинетические/фармакодина-мические концентрации (ФК/ФД концентрации) антибиотика (табл. 2), увеличенные в 10 раз. В качестве разбавителя использовали бульон Мюл-лера-Хинтона. В бульоне Мюллера-Хинтона готовили взвеси исследуемых микроорганизмов, содержащих 6^8 * 105 мл-1 бактериальных клеток
Таблица 1 - Гены карбапенемаз и используемые диагностические наборы для их выявления
Микроорганизм Выявляемые гены карбапенемаз Диагностические наборы
K.pneumoniae bla KPC bla OXA-48 АмплиСенс MDR KPC/0XA-48-FL
bla VIM, bla IMP, bla NDM АмплиСенс MDR MBL-FL
P.aeruginosa bla „„„ bla „,„ bla .IIW АмплиСенс MDR MBL-FL
A.baumannii bla OXA-23, bla 0XA-40, bla OXA-58 АмплиСенс MDR Ab-OXA-FL
Таблица 2 — Концентрации антибиотиков для тестирования в составе комбинаций
Антибиотик Краткое обозначение Тестируемая в составе двойных комбинаций концентрация (ФК/ФД), мкг/мл
Меропенем МЕР 8
Имипенем ИМП 8
Цефтазидим ЦЕФ 8
Азтреонам АЗТ 8
Амикацин АМК 16
Левофлоксацин ЛЕВ 1
Тигециклин ТИГ 0,5
Фосфомицин ФОС 32
Колистин КОЛ 2
Сульбактам СУЛ 4
в логарифмической стадии роста. Комбинации из двух антибиотиков готовили в лунках стерильных 96-луночных полистироловых планшетов (Sarstedt, Германия). Для тестирования одной культуры использовали горизонтальный ряд из 12 лунок, при этом в лунки 1-11 вносили различные комбинации из двух антибиотиков, лунка 12 не содержала антибиотиков и использовалась в качестве контроля роста культуры. На одном планшете в горизонтальных рядах A.. .H проводили определение чувствительности к 11 комбинациям антибиотиков одновременно для 8 различных бактериальных культур, принадлежащих к одному виду. После инокуляции лунок суспензиями исследуемых микроорганизмов планшеты закрывали крышками, помещали в герметичные пакеты из полиэтилена для предотвращения испарения среды из лунок и инкубировали 48 ч при температуре 35°С.
Для определения бактерицидного эффекта комбинаций антибиотиков после инкубации планшетов делали высев 10 мкл содержимого из каждой лунки на сектор плотной питательной среды, посевы инкубировали 18-24 ч при 35°С. Оценивали микробиологическую эффективность каждой из тестируемых комбинаций антибиотиков. Положительный результат (бактерицидный эффект комбинации) указывали при отсутствии микробного роста на соответствующем секторе либо при наличии роста в нем не более чем 1 колонии микроорганизмов.
Результаты и обсуждение
Из 36 клинических изолятов K.pneumoniae, включенных в исследование, экстремальная ан-тибиотикорезистентность выявлена у 11 изоля-
тов. Все они сохраняли чувствительность только к колистину и тигециклину и являлись продуцентами карбапенемаз (МБЛ NDM - 2 изолята, OXA-48 - 9 изолятов). Гистограммы распределения МПК меропенема, тигециклина, фосфомицина и колистина для экстремально-антибиотикорези-стентных изолятов K.pneumoniae представлены на рисунке 1.
Из 92 клинических изолятов P.aeruginosa, включенных в исследование, экстремальная анти-биотикорезистентность выявлена у 82 изолятов. Из них 74 изолята сохраняли чувствительность только к колистину, 8 изолятов были устойчивы ко всем антибиотикам, включая колистин (состояние панрезистентности). Продукция карбапе-немаз (метало-бета-лактамаза VIM) выявлена у 9 изолятов (11,0%), у остальных 73 экстремаль-но-антибиотикорезистентных и панрезистентных изолятов P.aeruginosa устойчивость к Р-лактамам не была связана с продукцией карбапенем-гидро-лизующих ферментов. Гистограммы распределения МПК меропенема, имипенема, цефтазидима и колистина для экстремально-антибиотикорези-стентных изолятов P.aeruginosa представлены на рисунке 2.
Из 44 клинических изолятов A.baumannii, включенных в исследование, экстремальная антибиотикорезистентность выявлена у 37 изо-лятов. Все они были чувствительны к тигециклину, 35 изолятов сохраняли чувствительность к колистину, 4 изолята были чувствительны к сульбактаму. Все экстремально-антибиотико-резистентные изоляты являлись продуцентами OXA-карбапенемаз: OXA-23 - 1 изолят (2,7%), OXA-40 - 36 изолятов (97,3%). Гистограммы распределения МПК меропенема, тигецикли-на, сульбактама и колистина для экстремально-
Меропенем
Фосфомицин
16 32 64 128 256 512 МПК, мкг/мл
Тигециклин
0,25 0,5 1 2
МПК, мкг/мл
7 6
5 ™ 4
CD 4
О „
го 3 т
2 1 0
6 5
Р4
§3
ГО ^ 2
1
0
128 256 МПК, мкг/мл
Колистин
0,125 0,25 0,5 1
МПК, мг/мл
Рисунок 1 - Распределение МПК меропенема, фосфомицина, тигециклина и колистина для экстремально-антибиотикорезистентных изолятов K.pneumoniae.
Меропенем
Имипенем
16 32 64 128 256 512 1024 МПК, мкг/мл
Цефтазидим
16 32 64 128 256 512 1024 МПК, мкг/мл
25
20
¡5 15 о ь о
10 5 0
16 32 64 128 256 512 1024 МПК, мкг/мл
Колистин
0,25 0,5
1 2 4 МПК, мкг/мл
для
Рисунок 2 - Распределение МПК меропенема, имипенема, цефтазидима и колистина экстремально-антибиотикорезистентных изолятов P. aeruginosa, выделенных в Гомельской области.
антибиотикорезистентных изолятов A.baumannii представлены на рисунке 3.
Отмечена бактерицидная активность всех
комбинаций с включением колистина (меропе-нем - колистин, амикацин - колистин, левофлок-сацин - колистин, тигециклин - колистин, фос-
4
8
2
4
2
4
8
8
2
4
8
Меропенем
Тигециклин
16 14 12
¡5 10 -§ 8 ГС с
т 6 4 -2 0
32 64 128 256
МПК, мг/мл
512
1024
25 20 15 10 5 0
20 15 10 5 0
0,125
0,25 0,5
МПК, мкг/мл
Колистин
0,125 0,25 0,5 1 2 МПК, мкг/мл
Рисунок 3 - Распределение МПК меропенема, тигециклина, сульбактама и колистина для экстремально-антибиотикорезистентных изолятов A.baumannii, выделенных в Гомельской области.
2
Рисунок 4 - Эффективность различных комбинаций из двух антибиотиков в отношении экстремально-антибиотикорезистентных изолятов P. aeruginosa: МЕР - меропенем, ИМП - имипенем, ЦЕФ - цефтазидим, АМК - амикацин, ЛЕВ - левофлоксацин, КОЛ - колистин, «У» - устойчивость, «Ц» - бактерицидный эффект.
фомицин - колистин) в отношении большинства исследуемых штаммов K.pneumoniae, что может быть связано с невысокими значениями МПК колистина и отсутствия устойчивости к нему у всех тестируемых изолятов. Комбинации меропенема
с фосфомицином, левофлоксацином, амикаци-ном, а также комбинации амикацин-тигециклин и амикацин-левофлоксацин не обладали бактерицидной активностью.
Результаты тестирования 11 комбинаций
антибиотиков в отношении 74 экстремально-антибиотикорезистентных изолятов P.aeruginosa представлены на рисунке 4. Наиболее активными были комбинации меропенем-колистин и имипенем-колистин (бактерицидная активность в отношении 82,9% и 89,0% изолятов соответственно). В отношении панрезистентного изоля-та P.aeruginosa БП-018 ни одна из тестируемых двойных комбинаций антибиотиков не проявляла бактерицидной активности. В отношении экс-тремально-антибиотикорезистентных и панрези-стентных изолятов P.aeruginosa БП-005, БП-020, БП-022, БП-033, БП-035, БП-061, БП-109 бактерицидная активность обнаружена только для одной из 11 протестированных комбинаций антибиотиков (меропенем-колистин или имипенем-колистин). Для указанных изолятов дополнительно проведено определение чувствительности к двойным и тройным комбинациям антибиотиков, включающим в себя ванкомицин или ри-фампицин. Комбинация рифампицин-колистин-меропенем оказывала бактерицидный эффект на все включенные в дополнительное исследование штаммы. Комбинации ванкомицин-колистин-ме-ропенем, ванкомицин-колистин-имипенем, ри-фампицин-колистин-амикацин были бактерицидными в отношении 7 из 8 исследуемых штаммов.
Результаты тестирования 11 комбинаций антибиотиков в отношении 37 экстремально-
антибиотикорезистентных изолятов A.baumannii представлены на рисунке 5. Отмечена бактерицидная активность для всех комбинаций с включением колистина. Бактерицидная активность других комбинаций не превышала 6% для всех комбинаций с включением меропенема и 30% для комбинаций с включением сульбактама.
Заключение
Показано, что экстремальная антибиотико-резистентность A.baumannii и K.pneumoniae ассоциирована с продукцией карбапенемаз - ферментов, способных эффективно гидролизовать большинство Р-лактамных антибиотиков. Штаммы A.baumannii и K.pneumoniae, продуцирующие карбапенемазы, отличались высокими значениями МПК карбапенемов, многократно превышающими пороговые ФК/ФД концентрации. Большинство включенных в исследование штаммов A.baumannii и K.pneumoniae сохраняли чувствительность только к колистину и тигециклину, однако фармакокинетические и фармакодинами-ческие особенности колистина не позволяют использовать его в виде монотерапии.
Методом тестирования бактерицидности различных комбинаций показано, что только двойные комбинации антибиотиков, включающие в себя колистин (меропенем - колистин, ами-
100% 90% 80% 70% 60% 50% 40% 30% 20% 10% 0%
■0,0
5-,4:
2,7
400
^ # / ^ ¿Г Ж Ж
97Я
94,6
1000 1000
29,7
' ^ ^ ^ ^ # с/ ^
& /
□ У% шЦ%
0
8
Рисунок 5 - Эффективность различных комбинаций из двух антибиотиков в отношении экстремально-антибиотикорезистентных изолятов A.baumannii: МЕР - меропенем, АМК - амикацин, ЛЕВ - левофлоксацин, СУЛ - сульбактам, ТИГ - тигециклин, КОЛ - колистин, «У» - устойчивость, «Ц» - бактерицидный эффект.
кацин - колистин, левофлоксацин - колистин, ти-гециклин - колистин, фосфомицин - колистин), оказывают бактерицидное воздействие действие на экстремально-антибиотикорезистентные изо-ляты K.pneumoniae. Двойные комбинации с включением колистина (меропенем - колистин, амикацин - колистин, левофлоксацин - колистин, сульбактам - колистин, тигециклин - колистин) также оказывали бактерицидное воздействие на 95-100% экстремально-антибиотикорезистент-ных изолятов A.baumannii.
Продукция карбапенемаз (метало-бе-та-лактамазы VIM) была выявлена только у 11% экстремально-антибиотикорезистентных изолятов P.aeruginosa. Таким образом, устойчивость к карбапенемам большинства экстремально-резистентных P.aeruginosa не связана с ферментативной инактивацией антибиотика, а вызвана другими механизмами (например, нарушением проницаемости клеточной стенки или активным выведением антибиотика из периплазмы). Среди 82 экстремально-резистентных изолятов P.aeruginosa выявлено 8 изолятов с полной устойчивостью к антибиотикам (МПК колисти-на 4 и более мкг/мл). Наиболее активными в отношении экстремально-резистентных изолятов P.aeruginosa были комбинации меропенем-ко-листин и имипенем-колистин (бактерицидная активность для 82,9% и 89,0% изолятов соответственно). Тройная комбинация рифампицин-колистин-меропенем оказалась бактерицидной в отношении всех панрезистентных изолятов.
По результатам проведенного исследования подготовлена и утверждена Министерством здравоохранения Республики Беларусь инструкция по применению «Методы определения чувствительности к комбинациям антибиотиков грамотрицательных бактерий с экстремальной и полной антибиотикорезистентностью».
Работа выполнена при финансовой поддержке Инновационного фонда Гомельского областного исполнительного комитета (инновационный проект «Внедрить в практику
References
1. Tapal'skiy DV, Osipov VA, Zhavoronok SV. Carbapenemases of gram-negative pathogens: spread and methods of detection. Med Zhurn. 2012;(2): 10-5. (In Russ.)
2. Woodford N, Turton JF, Livermore DM. Multiresistant
здравоохранения Гомельской области систему микробиологического тестирования комбинаций антибиотиков в отношении экстремально-антибиотикорезистентных возбудителей бактериальных инфекций», договор .№30/08 от 30 августа 2016 г., № госрегистрации 20164463 от 05.12.2016).
Литература
1. Тапальский, Д. В. Карбапенемазы грамотрицательных бактерий: распространение и методы детекции / Д. В. Тапальский, В. А. Осипов, С. В. Жаворонок // Мед. журн. - 2012. - № 2. - С. 10-15.
2. Woodford, N. Multiresistant Gram-negative bacteria: the role of high-risk clones in the dissemination of antibiotic resistance / N. Woodford, J. F. Turton, D. M. Livermore // FEMS Microbiol. Rev. - 2011 Sep. - Vol. 35, N 5. - P. 736-755.
3. Zavascki, A. P. Combination therapy for carbapenem-resistant Gram-negative bacteria / A. P. Zavascki, J. B. Bulitta, C. B. Landersdorfer // Expert. Rev. Anti Infect. Ther. - 2013 Dec. - Vol. 11, N 12. - P. 1333-1353.
4. In vitro synergistic activity of colistin and ceftazidime or ciprofloxacin against multidrug-resistant clinical strains of Pseudomonas aeruginosa / B. B. D'Souza [et al.] // Microb. Drug Resist. - 2014 Dec. - Vol. 20, N 6. - P. 550-554.
5. Multiple combination bactericidal antibiotic testing for patients with cystic fibrosis infected with Burkholderia cepacia / S. D. Aaron [et al.] // Am. J. Resp. Crit. Care Med.
- 2000 Apr. - Vol. 161, N 4, pt. 1. - P. 1206-1212.
6. Multidrug-resistant, extensively drug-resistant and pandrug-resistant bacteria: an international expert proposal for interim standard definitions for acquired resistance / A. P. Magiorakos [et al.] // Clin. Microbiol. Infect. - 2012 Mar.
- Vol. 18, N 3. - P. 268-281.
7. ГОСТ Р ИСО 20776-1-2010. Клинические лабораторные исследования и диагностические тест-системы in vitro. Исследование чувствительности инфекционных агентов и оценка функциональных характеристик изделий для исследования чувствительности к антимикробным средствам. Часть 1. Референтный метод лабораторного исследования активности антимикробных агентов против быстрорастущих аэробных бактерий, вызывающих инфекционные болезни. - Введ. 2012-03-01. - М. : Стандартинформ, 2011. - 23 с.
8. Breakpoint tables for interpretation of MICs and zone diameters. V. 6.0 [Electronic resource] / The European Committee on Antimicrobial Susceptibility Testing. - 2016.
- Mode of access: http://www.eucast.org/ast_of_bacteria/ previous_versions_of_documents/.
Поступила 15.12.2017 г. Принята в печать 31.01.2018 г.
Gram-negative bacteria: the role of high-risk clones in the dissemination of antibiotic resistance. FEMS Microbiol Rev. 2011 Sep;35(5):736-55. doi: 10.1111/j.1574-6976.2011.00268.x. 3. Zavascki AP, Bulitta JB, Landersdorfer CB. Combination therapy for carbapenem-resistant Gram-negative bacteria.
Expert Rev Anti Infect Ther. 2013 Dec;11(12):1333-53. doi: 10.1586/14787210.2013.845523.
4. D'Souza BB, Padmaraj SR, Rekha PD, Tellis RC, Prabhu S, Pothen P. In vitro synergistic activity of Colistin and ceftazidime or ciprofloxacin against multidrug-resistant clinical strains of Pseudomonas aeruginosa. Microb Drug Resist. 2014 Dec;20(6):550-4. doi: 10.1089/mdr.2014.0006.
5. Aaron SD, Ferris W, Henry DA, Speert DP, Macdonald NE. Multiple combination bactericidal antibiotic testing for patients with cystic fibrosis infected with Burkholderia cepacia. Am J Resp Crit Care Med. 2000 Apr;161(4 Pt 1): 1206-12. doi: 10.1164/ajrccm.161.4.9907147
6. Magiorakos AP, SrinivasanA, Carey RB, Carmeli Y, Falagas ME, Giske CG, et al. Multidrug-resistant, extensively drug-resistant and pandrug-resistant bacteria: an international
expert proposal for interim standard definitions for acquired resistance. Clin Microbiol Infect. 2012 Mar;18(3):268-81. doi: 10.1111/) .1469-0691.2011.03570.x.
7. GOST R ISO 20776-1-2010. Clinical laboratory studies and diagnostic test systems in vitro. Study of the sensitivity of infectious agents and evaluation of functional specifications for the study of sensitivity to antimicrobial means. Part 1. Reference method laboratory studies of the activity of antimicrobial agents against rapidly growing aerobic bacteria causing infectious diseases. Vved 2012-03-01. Moscow, RF: Standartinform; 2011. 23 p. (In Russ.)
8. The European Committee on Antimicrobial Susceptibility Testing. Breakpoint tables for interpretation of MICs and zone diameters. V. 6.0 [Electronic resource]. 2016. Mode of access: http://www.eucast.org/ast_of_bacteria/previous_ versions_of_documents/.
Submitted 15.12.2017 Accepted 31.01.2018
Сведения об авторах:
Тапальский Д.В. - к.м.н., доцент, заведующий кафедрой микробиологии, вирусологии и иммунологии, Гомельский государственный медицинский университет;
Бонда Н.А. - врач-бактериолог микробиологической лаборатории, Гомельский областной центр гигиены, эпидемиологии и общественного здоровья;
Лагун Л.В. - к.м.н., доцент кафедры микробиологии, вирусологии и иммунологии, Гомельский государственный медицинский университет.
Information about authors:
Tapalski D.V - Candidate of Medical Sciences, associate professor, head of the Chair of Medical Microbiology, Virology and Immunology, Gomel State Medical University;
Bonda N.A. - doctor-bacteriologist of the Microbiological Laboratory, Gomel Regional Centre of Hygiene, Epidemiology and Public Health;
Lagun L.V. - Candidate of Medical Sciences, associate professor of the Chair of Medical Microbiology, Virology and Immunology, Gomel State Medical University.
Адрес для корреспонденции: Республика Беларусь, 246050, г. Гомель, ул. Ланге, 5, Гомельский государственный медицинский университет, кафедра микробиологии, вирусологии и иммунологии. E-mail: tapalskiy@gsmu.by - Тапальский Дмитрий Викторович.
Correspondence address: Republic of Belarus, 246050, Gomel, 5 Lange str., Gomel State Medical University, Chair of Medical Microbiology, Virology and Immunology. E-mail: tapalskiy@gsmu.by - Dmitry V. Tapalski.
