CC BY
30
УДК 547.914.4
DOI: 10.17122/bcj-2018-4-39-45
Р. Р. Губайдуллин (к.х.н., м.н.с.) 1, А. Ю. Каиров (студ.) 2, Ю. А. Прочухан (д.х.н., проф.) 2
СИНТЕЗ НОВЫХ АЛКИНИЛЬНЫХ ПРОИЗВОДНЫХ БЕТУЛИНОВОЙ КИСЛОТЫ И ИЗУЧЕНИЕ ИХ ЦИТОТОКСИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ
1 Институт нефтехимии и катализа УФИЦ РАН, лаборатория органического синтеза 450075, г. Уфа, пр. Октября 141, e-mail: [email protected] 2 Башкирский государственный университет, кафедра высокомолекулярных соединений и общей химической технологии 450076, г. Уфа, ул. Заки Валиди, 32, e-mail: [email protected], [email protected]
R. R. Gubaidullin A. Yu. Kairov 2, Yu. A. Prochukhan 2
SYNTHESIS OF NOVEL ALKYNYL DERIVATIVES OF BETULINIC ACID AND STUDIES OF THEIR CYTOTOXIC ACTIVITY
1 Institute of Petrochemistry and Catalysis of Russian Academy of Sciences 141, Prospekt Oktyabrya Str., 450075, Ufa, Russia, e-mail: [email protected]
2 Bashkir State University 32, Zaki Validi Str., 450076, Ufa, Russia, e-mail: [email protected], [email protected]
Синтезированы новые алкинильные производные тритерпеноидов из С2-пропаргильного производного бетулиновой кислоты реакцией кросс-сочетания по Соногашира. Реакции протекали за короткий промежуток времени в среде DMF под действием катализаторов PdCl2(PPh3)2, CuI и основания Et3N. Выход продуктов кросс-сочетания 5a-g составил 50—78 %. Полученные соединения испытаны на противоопухолевую активность в национальном институте рака США (NCI) в отношении девяти различных опухолей человека. Три соединения были идентифицированы как «активные» и отобраны на второй этап испытаний in vitro. Соединения 4 и 5g проявили значительную активность в отношении клеток лейкемии, немелкоклеточного рака легких, рака цнс, рака яичников, рака почек и рака молочных желез.
Ключевые слова: алкинильные производные тритерпеноидов; бетулин; бетулиновая кислота; цитотоксическая активность.
New alkynyl derivatives of triterpenoids are synthesized from C2 propargyl derivative of betulinic acid via Sonogashira cross-coupling reaction. The reactions proceeded in a short time in DMF under the action of PdCl2(PPh3)2, CuI, and Et3N base. A yield of cross-coupling products 5a-g was 50—78 %. The resulting compounds were tested in vitro for antitumor activity at the National Cancer Institute (NCI, United States) against nine different human tumors. Three compounds were identified as «active» and selected for the second stage of in vitro tests. Compounds 4 and 5g have significant activity against leukemia cells, non-small cell lung cancer, cancer of CNS, ovarian cancer, renal cancer and breast cancer.
Key words: alkynyl derivatives of triterpenoids; betulin; betulinic acid; cytotoxic activity.
Работа выполнена при финансовой поддержке Российского фонда фундаментальных исследований (Проект №1633-6008).
This work was supported by the Russian Foundation for Basic Research (Project No. 16-33-6008).
Дата поступления 17.10.18
Бетулин 1, бетулиновая и бетулоновая 2 кислоты относятся к классу лупановых тритер-пеноидов, обладающих разнообразной биологической активностью, например, такой, как противовоспалительная, гепатопротекторная, антивирусная, антипаразитарная и антираковая 1-4. Среди этих биологических свойств, противоопухолевые свойства бетулиновой кислоты и ее производных привлекают значительное внимание во всем мире, поскольку некоторые из них показали весьма многообещающие результаты в лечении различных типов рака 4'5. В связи с этим, в последние годы в нашей исследовательской группе проводятся систематические исследования по выявлению новых биологически активных веществ, полученных синтетическими трансформациями доступных растительных вторичных метаболитов — тритерпеноидов лупано-вого, урсанового и олеанового семейства 6-11.
Ранее нами были синтезированы С2-про-паргильные производные 3-оксо-тритерпено-вых кислот. Известно, что многие природные ацетиленовые метаболиты проявляют высокую антираковую активность 12. Поэтому нами были проведены исследования по модификации полученного С2-пропаргильного производного бетулоновой кислоты с получением ал-кинильных производных, которые были протестированы на противоопухолевую активность в национальном институте рака США (NCI) против следующих раковых клеточных линий: лейкемии, рака легких, толстой кишки, центральной нервной системы, меланомы, рака яичников, почек, простаты и рака молочных желез.
В качестве исходного субстрата мы использовали бетулин 1 , который в несколько стадий модифицировали в ацетиленовое производное бетулиновой кислоты 3 взаимодействием пропаргилбромида с енолят-анионом, полученным обработкой метилового эфира бе-
,OH a, b_
HO
Reagents and conditions:
a, CrO3, H2SO4, acetone;
b, CH2N2, Et2O;
c, KN(SiMe3)2-Et3B, propargyl bromide, DME;
d, NaBH 4, CeCl3 7H2O, MeOH/THF, -30 oC to 20 oC, Ar, 2 h;
e, Lil, DMF, reflux, Ar, 2 h.
f,ArI, PdCl 2(PPh3)2, Cul, Et3N, DMF, Ar, 20 oC;
тулоновой кислоты 2 реагентом KN(SiMe3)2-Et3B в 1,2-диметоксиэтане в разработанных нами ранее условиях 6 (схема 1).
Полученное пропаргильное производное 3 трансформировали в соединение 4 галогеноли-зом в присутствии LiI в ДМФА. Синтез алки-нильных производных тритерпеноидов 5a-g осуществляли кросс-сочетанием с арилиодида-ми по реакции Соногашира. Реакция протекала в течение 1—3 ч при комнатной температуре в среде ДМФА под действием катализаторов PdCl2(PPh3)2, CuI и основания Et3N. Выход конечных продуктов кросс-сочетания 5a-g составил 50—78 % (схема 1).
Противоопухолевая активность синтезированных алкинильных производных тритер-пеноидов (7 соединений) была изучена в Национальном институте рака США (NCI) в отношении клеточных культур (приблизительно 60 линий) девяти различных опухолей человека (лейкемии, рака легких, толстой кишки, центральной нервной системы, меланомы, яичников, почек, простаты, молочной железы) по методике, описанной в NCI 13-18.
При первичном тестировании активности соединения вносили в среду культивирования клеток в конечной концентрации 10-5 моль-л-1. Каждую клеточную линию предварительно инкубировали на микротитровальной пластинке, после чего добавляли испытуемое соединение и культуру инкубировали 48 ч.
В соответствии с критерием, принятым в NCI (вещества считаются активными в случае, если они ингибируют рост клеток до 32% от контроля или вызывают их гибель), соединения 5a-e оказались неактивными. Три соединения 4, 5f, 5g, которые ингибировали рост клеток или убивали некоторые клеточные линии, были идентифицированы как «активные».
COOMe
'COOH
5a-g
COOMe
'COOH
5a R =Ph 5b R = 4-ClCgH 5c R =4-FC6H4 5d R = 4-Cl-2-BrC6H4 5e R = 2-methypheny 5f R = 4-BrC6H4 5g R = 4-F3CC6H4
Схема 1
29
R
Все три соединения были отобраны на второй этап испытаний на той же панели опухолевых клеток человека, но уже в пяти логарифмических концентрациях (10-4, 10-5, 10-6, 10-7, 10-8 моль-л). Оценка в пяти концентрациях проводилась по трем параметрам GI50 (концентрация соединения, вызывающая уменьшение роста клеток на 50%), TGI (концентрация соединения, вызывающая 100% ингибирование роста клеток) и LC50 (концентрация, вызывающая гибель 50% раковых клеток в конце инкубационного периода, 48 ч). Соединения 4 и 5g показали значительную активность более чем в 5 различных клеточных линиях при концентрации GI50 меньшей, чем 2^M. Соединение 5f продемонстрировало активность в четырех различных клеточных линиях при концентрации GI50 меньшей, чем 3 ^M (табл. 1).
Таким образом нами получено семь новых производных бетулиновой кислоты путем модификации по С-2 позиции кольца А. Полученные соединения испытаны in vitro на противоопухолевую активность в Национальном институте рака США (NCI) в отношении девяти различных опухолей человека. Три соединения были идентифицированы как «активные» и отобраны
на второй этап испытаний in vitro. Два из них проявили значительную активность более чем в 5 различных клеточных линиях при концентрации GI50 меньше, чем 2 M. Полученные результаты в дальнейшем планируется использовать для синтеза новых производных бетулиновой кислоты с более перспективными противоопухолевыми свойствами.
Экспериментальная часть
ИК-спектры получали на спектрометре «Bruker Vertex 70v» в тонком слое или в растворе CHCl3. Спектры ЯМР и 13С регистрировали на приборе «Bruker AVANCE-500» (рабочая частота для 1Н 500.13 МГц; для 13С 125.78 МГц) или на «Bruker AVANCE-400» (рабочая частота для 1Н 400.13 МГц; для 13С 100.62 МГц), внутренний стандарт Мe4Сi, растворитель CDCl3. Масс-спектры записывали на спектрометре «Bruker-Autoflex III» в режиме МALDI TOF с регистрацией положительных ионов и использованием в качестве матриц 2.5-дигидроксибензой-ной и а-циан-4-гидроксициннамовой кислот. Оптическое вращение определяли на поляриметре «Perkin-Elмer-141», [a]D — удельное враще-
Таблица 1
Противораковая активность полученных соединений
Панель / клеточная линия 4 | 5f 5g Панель/ клеточная линия 4 | 5f | 5g Панель/ клеточная линия 4 | 5f | 5g
GI50 GI50 GI50
Лейкемия Рак толстой кишки Рак яичников
CCRF-CEM 2.36 3.57 2.99 SW-620 1.98 3.73 2.85 OVCAR-8 2.17 5.84 3.55
HL-60(TB) 2.57 22.4 6.2 Рак ЦНС NCI/ADR-RES 2.03 62.6 4.73
K-562 2.32 15.6 1.93 SF-268 2.81 6.23 2.54 SK-OV-3 2.39 20.2
MOLT-4 3.16 4.44 2.75 SF-295 1.45 12.6 2 Рак почек
RPMI-8226 1.68 9.09 4.01 SF-539 2.68 22.5 2.22 786-0 1.71 5.27 3.2
SR 3.12 9.33 3.23 SNB-19 3.04 6.19 3.29 A498 1.88 2.42 3.16
Немелкоклеточный рак легкого SNB-75 1.95 13.5 1.73 ACHN 1.5 13.5 4.04
A549/ATCC 1.31 2.8 2.6 U251 1.57 2.12 1.98 CAKI-1 15.6 2.63
EKVX 2.63 3.82 Меланома RXF 393 1.7 5.5 2.39
HOP-62 2.08 12.4 2.37 LOX IM VI 2.63 5.65 2.09 SN12C 2.98 2.99 2.12
HOP-92 1.7 17 3.09 MALME-3M 2.53 3.48 2.11 TK-10 1.85 23.7 6.11
NCI-H226 2.05 24.2 2.91 M14 2.05 2.66 1.86 UO-31 1.83 > 100 6.52
NCI-H23 1.38 3.83 2.93 MDA-MB-435 3.03 4.94 Рак простаты
NCI-H322M 3.09 15.5 4.38 SK-MEL-2 2.4 2.58 2.08 PC-3 1.5 3.31 1.58
NCI-H460 1.62 57.1 3.38 SK-MEL-28 2.75 2.62 1.79 DU-145 3.23 7.59 3.52
NCI-H522 2.95 29.5 1.9 SK-MEL-5 2.27 32.4 8.97 Рак молочной железы
Рак толстой кишки UACC-257 3.73 > 100 MCF7 4.94 2.89
COLO 205 2.09 18.2 3.72 UACC-62 2.64 2.69 2.03 MDA-MB-231/ATCC 2.32 3.67 2.02
HCC-2998 4.44 36 8.48 Рак яичников HS 578T 2.34 6.26 3.88
HCT-116 4.34 2.34 IGROV1 4.21 4.07 3.56 BT-549 2.52 21 10.9
HCT-15 1.89 25.8 3.95 OVCAR-3 1.7 4.73 2.49 T-47D 1.79 9.02 4.75
HT29 1.93 4.83 3.01 O VC AR-4 1.93 4.95 2.18 MDA-MB-468 2.21 7.25 2.68
KM 12 1.64 4.54 2.78 O VC AR-5 3.07 94.3 2.39
ние, (град-мл-(г-дм)-1, с — концентрация раствора, г-(100 мл)-1. Элементный анализ выполнен на анализаторе «Karlo Erba 1106». Реактивы и растворители были приобретены у коммерческих поставщиков (Aldrich, Sigma и т.д.) и использовались без дальнейшей очистки. Тритер-пеноиды 3 и 4 получали, как описано ранее 6. Данные анализа всех новых соединений отвечали вычисленным.
Общая методика синтеза 2а-алкинильных производных тригерпенов 5a-g в условиях реакции Соногаширы.
К раствору тритерпеноида 4 (0.3 ммоль) в 4,5 мл DMF поочередно добавили арилиодид (0.25 ммоль) и 0.34 мл Et3N (2.47 ммоль). Затем к реакционной смеси добавили 4.6 мг CuI (0.03 ммоль) и 8.6 мг PdCl2(PPh3)2 (0.01 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1—3 ч в атмосфере аргона (контроль — ТСХ). После завершения реакции добавили H2O (6 мл) и экстрагировали EtOAc (3x10 мл). Органическую фазу сушили над безводным сульфатом магния. Продукты очищали колоночной хроматографией на силикагеле (элюент гексан—EtOAc 5:1). Получили соединения 5a-g.
2а-фенилпропинил-3^-гидроксилуп-20(29)-ен-28-овая кислота (5a). Выход 0.06 г (68%), белый порошок, т.пл. 228-230 °C. [a]D25-10 (с 0.37, CHCl3). Спектр ЯМР (8, м.д., CDCl3, 400 МГц): 0.78 (1H, д, J = 8.8 Гц, H-5), 0.83, 0.92, 0.98, 1.01, 1.03 (по 3H, все с, H-23-H-27), 1.72 (3H, с, H-30), 2.33-0.88 (22H, м, CH, CH2 в пентациклическом скелете и 2H, Ha-1, Hb-1), 2.56 (1H, дд, J = 16.8, 6.4 Гц, Hb-1'), 2.65 (1H, дд, J = 16.8, 3.6 Гц, Ha-1'), 3.04 (1H, м, H-19), 3.10 (1H, д, J = 10.4 Гц, H-3), 4.77, 4.63 (2H, оба уш с, H-29), 7.30 (3H, м, аром), 7.43 (2H, м, аром). Спектр ЯМР 13С (8, м.д., CDCl3 100 МГц): 14.8 (C-27), 16.1 (C-24), 16.3 (C-25)
17.0 (C-26), 18.5 (C-6), 19.4 (C-30), 20.9 (C-11)
23.5 (C-1'), 25.5 (C-12), 28.4 (C-23), 29.7 (C-15)
30.6 (C-21), 32.2 (C-16), 34.3 (C-7), 35.4 (C-2)
37.1 (C-22), 37.5 (C-4), 38.5 (C-13), 39.2 (C-10)
40.7 (C-8), 42.5 (C-14), 45.2 (C-1), 47 (C-19) 49.3 (C-18), 50.5 (C-9), 55.5 (C-17), 56.4 (C-5) 81.9 (C-3), 82.3 (C-3'), 88.6 (C-2'), 109.8 (C-29) 124.0, 127.5, 128.2, 131.7 (Аром), 150.4 (C-20) 182.5 (C-28). ИК (CHCl3): 1697 (C=O) см-1. Вычислено C39H54O3: C, 82.06; H, 9.54. Найдено: C, 82.29; H, 9.52.
2 а-(4-хлорфенилпропинил)-3 ^-гидрокси-луп-20(29)-ен-28-овая кислота (5b). Выход 0.06 г (70%), светло-желтый порошок, т.пл. 251253 оС [a]D23-11 (с 0.08, CHCl3). Спектр ЯМР
(8, м.д., CDCl3, 500 МГц): 0.77 (1H, д, J = 9.0 Гц, H-5), 0.82, 0.91, 0.97, 1.00, 1.02 (по 3H, все с, H-23-H-27), 1.71 (3H, с, H-30), 2.31-0.85 (22H, м, CH, CH2 в пентациклическом скелете и 2H, Ha-1, Hb-1), 2.51 (1H, дд, J = 17.0, 7.0 Гц, Hb-1'), 2.65 (1H, дд, J = 17.0, 4.0 Гц, Ha-1'), 3.02 (1H, м, H-19), 3.06 (1H, д, J = 10.5 Гц, H-3), 4.76, 4.62 (2H, оба уш с, H-29), 7.28 (2H, м, аром), 7.35 (2H, д, J = 8.0 Гц, аром). Спектр ЯМР 13С (8, м.д., CDCl3, 125 МГц): 14.8 (C-27), 16.1 (C-24), 16.2 (C-25), 17.0 (C-26), 18.5 (C-6), 19.4 (C-30), 20.9 (C-11), 23.5 (C-1'), 25.5 (C-12), 28.4 (C-23), 29.7 (C-15), 30.5 (C-21), 32.2 (C-16), 34.2 (C-7), 35.4 (C-2), 37.1 (C-22), 37.5 (C-4), 38.4 (C-13), 39.2 (C-10), 40.7 (C-8), 42.5 (C-14), 45.2 (C-1), 46.9 (C-19), 49.3 (C-18), 50.5 (C-9), 55.5 (C-17), 56.4 (C-5), 81.2 (C-3'), 81.9 (C-3), 89.8 (C-2'), 109.8 (C-29), 122.5, 128.5, 132.9, 133.5 (Аром), 150.4 (C-20), 182.2 (C-28). ИК (CHCl3): 1695 (C=O) см-1. Вычислено C39H53ClO3: C, 77.39; H, 8.83. Найдено: C, 77.15; H, 8.87.
2а-(4-фторфенилпропинил)-3^-гидрокси-луп-20(29)-ен-28-овая кислота (5c). Выход 0.06 г (67%), белый порошок, т.пл. 141-143 [a]D22-37 (с 0.49, CHCl3). Спектр ЯМР (8 м.д., CDCl3, 500 МГц): 0.77 (1H, м, H-5), 0.81 0.91, 0.97, 1.01, 1.02 (по 3H, все с, H-23-H-27) 1.71 (3H, с, H-30), 2.31-0.85 (22H, м, CH, CH2 в пентациклическом скелете и 2H, Ha-1, Hb-1) 2.50 (1H, дд, J = 16.8, 6.9 Гц, Hb-1'), 2.65 (1H дд, J = 16.8, 3.6 Гц, Ha-1'), 3.03 (1H, м, H-19) 3.07 (1H, д, J = 10.5 Гц, H-3), 4.76, 4.62 (2H оба уш с, H-29), 7.00 (2H, t, J = 8.5 Гц, аром) 7.40 (2H, м, аром). Спектр ЯМР 13С (8, м.д. CDCl3, 125 МГц): 14.8 (C-27), 16.1 (C-24), 16.2 (C-25), 17.0 (C-26), 18.5 (C-6), 19.4 (C-30), 20.9 (C-11) (C-15) (C-2), (C-10) (C-19) (C-5), (C-29) (C-20)
23.4 (C-1'), 25.5 (C-12), 28.4 (C-23), 29.7
30.6 (C-21), 32.2 (C-16), 34.2 (C-7), 35.4
37.1 (C-22), 37.5 (C-4), 38.4 (C-13), 39.2
40.7 (C-8), 42.5 (C-14), 45.2 (C-1), 47.0 49.3 (C-18), 50.5 (C-9), 55.5 (C-17), 56.4
81.2 (C-3'), 81.9 (C-3), 88.3 (C-2'), 109.8 115.4, 120.1, 133.4, 162.1 (Аром), 150.4 182.5 (C-28). ИК (CHCl3): 1696 (C=O)
см-1. Вычислено C39H53FO3: C, 79.55; H, 9.07. Найдено: C, 79.75; H, 9.11.
2а-(4-хлор-2-бромфенилпропинил)-3^-гидроксилуп-20(29)-ен-28-овая кислота (5d). Выход 0.05 г (50%), желтый порошок, т.пл. 158160 оС [a]D22+1 (с 0.59, CHCl3). Спектр ЯМР (8, м.д., CDCl3, 500 МГц): 0.78 (1H, м, H-5), 0.82, 0.91, 0.96, 1.00, 1.02 (по 3H, все с, H-23-H-27), 1.70 (3H, с, H-30), 2.31-0.84 (22H, м, CH, CH2 в пентациклическом скелете и 2H, Ha-1, Hb-
I), 2.65 (2Н, м, На-1' апё Нь-1'), 3.04 (1Н, м, Н-19), 3.21 (1Н, д, I = 10.5 Гц, Н-3), 4.75, 4.62 (2Н, оба уш с, Н-29), 7.24 (1Н, д, I = 8.0 Гц, аром), 7.36 (1Н, д, I = 8.0 Гц, аром), 7.60 (1Н, д, I = 1 Гц, аром). Спектр ЯМР 13С (5, м.д., СЭС13, 125 МГц): 14.7 (С-27), 16.1 (С-24), 16.2 (С-25), 17.0 (С-26), 18.5 (С-6), 19.4 (С-30), 20.9 (С-11), 23.5 (С-1'), 25.5 (С-12), 28.4 (С-23), 29.7 (С-15), 30.6 (С-21), 32.2 (С-16), 34.3 (С-7), 35.2 (С-2), 37.1 (С-22), 37.5 (С-4), 38.4 (С-13), 39.2 (С-10), 40.7 (С-8), 42.5 (С-14), 45.0 (С-1), 46.9 (С-19), 49.3 (С-18), 50.5 (С-9), 55.5 (С-17), 56.4 (С-5), 80.1 (С-3'), 81.3 (С-3), 95.0 (С-2'), 109.8 (С-29), 124.7, 126.0, 127.4, 132.1, 133.8 (Аром), 150.4 (С-20), 182.4 (С-28). ИК (СНС13): 1698 (С=0) см-1. Вычислено С39Н52ВгС103: С, 68.46; Н, 7.66. Найдено: С, 68.32; Н, 7.63.
2а-(2-метилфенилпропинил)-3^-гидро-ксилуп-20(29)-ен-28-овая кислота (5е). Выход 0.07 г (78%), белый порошок, т.пл. 241242 оС. [а]025-12 (с 0.49, СНС13). Спектр ЯМР (5, м.д., СЭС13, 400 МГц): 0.78 (1Н, д, I = 8.8 Гц, Н-5), 0.83, 0.92, 0.98, 1.01, 1.03 (по 3Н, все с, Н-23-Н-27), 1.72 (3Н, с, Н-30), 2.310.92 (22Н, м, СН, СН2 в пентациклическом скелете и 2Н, На-1, Нь-1), 2.46 (3Н, с, МеРЬ), 2.58 (1Н, дд, I = 16.8, 6.4 Гц, Нь-1' ), 2.71 (1Н, дд, I = 16.8, 3.2 Гц, На-1'), 3.04 (1Н, м, Н-19), 3.14 (1Н, д, I = 10.8 Гц, Н-3), 4.77, 4.63 (2Н, оба уш с, Н-29), 7.16 (1Н, м, аром), 7.21 (2Н, м, аром), 7.39 (1Н, д, I = 7.6 Гц, аром). Спектр ЯМР 13С (5, м.д., СЭС13, 100 МГц): 14.7 (С-27), 16.1 (С-24), 16.2 (С-25), 17.0 (С-26), 18.5 (С-6), 19.4 (С-30), 20.9 (С-
II), 21.0 (МеРЬ), 23.6 (С-1'), 25.5 (С-12), 28.4 (С-23), 29.7 (С-15), 30.6 (С-21), 32.2 (С-16), 34.3 (С-7), 35.5 (С-2), 37.1 (С-22), 37.4 (С-4), 38.5 (С-13), 39.2 (С-10), 40.7 (С-8), 42.5 (С-14), 45.2 (С-1), 47.0 (С-19), 49.3 (С-18), 50.6 (С-9), 55.6 (С-17), 56.4 (С-5), 81.2 (С-3'), 81.8 (С-3), 92.7 (С-2'), 109.8 (С-29), 123.9, 125.5, 127.5, 129.3, 131.9 (Аром), 150.4 (С-20), 182.3 (С-28). ИК (СНС13): 1696 (С=0) см-1. Вычислено С40Н5603: С, 82.14; Н, 9.65. Найдено: С, 81.94; Н, 9.62.
2а-(4-бромфенилпропинил)-3^-гидрокси-луп-20(29)-ен-28-овая кислота (5£). Выход 0.07 г (70%), светло-желтый порошок, т.пл.
247-249 0С. [а]с25-13 (с 0.45, СНС13). Спектр ЯМР (5, м.д., СЭС13, 400 МГц): 0.77 (1Н, д, I = 9.2 Гц, Н-5), 0.82, 0.91, 0.97, 1.00, 1.01 (по 3Н, все с, Н-23-Н-27), 1.71 (3Н, с, Н-30), 2.320.84 (22Н, м, СН, СН2 в пентациклическом скелете и 2Н, На-1, Нь-1), 2.5 (1Н, дд, I = 16.8, 6.4 Гц, Нь-1'), 2.65 (1Н, дд, I = 16.8, 3.6 Гц, На-1'), 3.02 (1Н, м, Н-19), 3.06 (1Н, д, I = 10.4 Гц, Н-
3), 4.76, 4.62 (2Н, оба уш с, Н-29), 7.28 (2Н, м, аром), 7.44 (2Н, д, / = 8.4 Гц, аром). Спектр ЯМР 13С ( , м.д., СЭС13, 100 МГц): 14.2 (С-27), 16.0 (С-24), 16.2 (С-25), 17.0 (С-26), 18.5 (С-6), 19.4 (С-30), 20.9 (С-11), 23.5 (С-1'), 25.5 (С-12), 28.4 (С-23), 29.7 (С-15), 30.5 (С-21), 32.2 (С-16), 34.2 (С-7), 35.4 (С-2), 37.1 (С-22), 37.5 (С-
4), 38.4 (С-13), 39.2 (С-10), 40.7 (С-8), 42.5 (С-14), 45.2 (С-1), 46.9 (С-19), 49.3 (С-18), 50.5 (С-9), 55.5 (С-17), 56.4 (С-5), 81.2 (С-3'), 81.9 (С-3), 90.0 (С-2'), 109.8 (С-29), 121.7, 123, 131.4, 133.1 (Аром), 150.4 (С-20), 181.8 (С-28). ИК (СНС13): 1695 (С=0) см-1. Вычислено С39Н53Вг03: С, 72.09; Н, 8.22. Найдено: С, 71.88; Н, 8.23.
2а-(трифторметилфенил)пропинил-3^-гидроксилуп-20(29)-ен-28-овая кислота (5g). Выход 0.07 г (70%), белый порошок, т.пл. 214216 0С. [а]с25-13 (с 0.51, СНС13). Спектр ЯМР (5, м.д., СЭС13, 400 МГц): 0.78 (1Н, д, I = 9.2 Гц, Н-5), 0.82, 0.92, 0.97, 1.01, 1.02 (по 3Н, все с, Н-23-Н-27), 1.71 (3Н, с, Н-30), 2.31-0.85 (22Н, м, СН, СН2 в пентациклическом скелете и 2Н, На-1, Нь-1), 2.53 (1Н, дд, I = 16.8, 6.8 Гц, Нь-1'), 2.70 (1Н, дд, I = 16.8, 3.6 Гц, На-1'), 3.02 (1Н, м, Н-19), 3.06 (1Н, д, I = 10.4 Гц, Н-3), 4.76, 4.62 (2Н, оба уш с, Н-29), 7.54 (4Н, м, аром). Спектр ЯМР 13С (5, м.д., СЭС13, 100 МГц): 14.7 (С-27), 16.1 (С-24), 16.2 (С-25), 16.9 (С-26), 18.5 (С-6), 19.4 (С-30), 20.9 (С-11), 23.5 (С-1'), 25.5 (С-12), 28.4 (С-23), 29.7 (С-15), 30.6 (С-21), 32.2 (С-16), 34.2 (С-7), 35.4 (С-2), 37.1 (С-22), 37.5 (С-4), 38.4 (С-13), 39.2 (С-10), 40.8 (С-8), 42.5 (С-14), 45.2 (С-1), 46.9 (С-19), 49.3 (С-18), 50.5 (С-9), 55.5 (С-17), 56.4 (С-5), 81.1 (С-3'), 81.8 (С-3), 91.6 (С-2'), 109.7 (С-29), 125.1, 127.9, 129.3, 131.9 (Аром), 150.4 (С-20), 181.6 (С-28). ИК (СНС13): 1694 (С=0) см-1. Вычислено С40Н53Г303: С, 75.20; Н, 8.36. Найдено: С, 75.04; Н, 8.40.
Литература
1. Cichewicz R.H., Kouzi S.A. Chemistry, biological activity, and chemotherapeutic potential of betulinic acid for the prevention and treatment of cancer and HIV infection // Med. Res. Rev.- 2004.- V.24, №1.- Pp.90-114.
2. Sarek J., Kvasnica M., Vlk M., Urban M. The Potential of Triterpenoids in the Treatment of Melanoma.- Vukovar: IntechOpen, 2011.-Pp.125-158.
3. Mukherjee R., Kumar V., Srivastava S. K., Agarwal S. K., and Burman A. C. Betulinic acid derivatives as anticancer agents: structure activity relationship // Anticancer. Agents Med. Chem.- 2006.- V.6, №3.- Pp.271-279.
4. Csuk R. Betulinic acid and its derivatives: a patent review (2008-2013) // Expert Opin. Ther. Pat.- 2014.- V.24, №8.- Pp.913-923.
5. Zhang H., Li F., Zhu P., Liu J., Yao H., Jiang J., Ye W., Wu X., and Xu J. Synthesis and Biological Evaluation of Oxygen-containing Heterocyclic Ring-fused 23-Hydroxybetulinic Acid Derivatives as Antitumor Agents // Chem. Biol. Drug Des.- 2015.- V.86, №4.- Pp.424431.
6. Spivak A.Y., Gubaidullin R.R., Galimshina Z.R., Nedopekina D.A., and Odinokov V.N. Effective synthesis of novel C(2)-propargyl derivatives of betulinic and ursolic acids and their conjugation with ¿8-d-glucopyranoside azides via click chemistry // Tetrahedron.- 2016.- V.72, №9.-Pp.1249-1256.
7. Gubaidullin R.R., Yarmukhametova D.S., Nedopekina D.A., Khalitova R.R., Spivak A.Y. Effective synthesis of novel furan-fused pentacyclic triterpenoids via anionic 5-exo dig cyclization of 2-alkynyl-3-oxotriterpene acids // Arkivoc.- 2017.- V.2017, №5.- Pp.100-116.
8. Spivak A.Y., Nedopekina D.A., Khalitova R.R., Gubaidullin R.R., Odinokov V.N., Bel'skii Y.P., Bel'skaya N.V., Khazanov V.A. Triphenylphos-phonium cations of betulinic acid derivatives: synthesis and antitumor activity // Med. Chem. Res.- 2017.- V.26, №3.- Pp.518-531.
9. Nedopekina D.A., Gubaidullin R.R., Odinokov V.N., Maximchik P.V., Zhivotovsky B., Bel'Skii Y.P., Khazanov V.A., Manuylova A.V., Gogvadze V., Spivak A.Y. Mitochondria-targeted betulinic and ursolic acid derivatives: synthesis and anticancer activity // Med. Chem. Commun.- 2017.- V.8, №10.- Pp.1934-1945.
10. Spivak A.Y., Keiser J., Vargas M., Gubaidullin R.R., Nedopekina D.A., Shakurova E.R., Khalitova R.R., and Odinokov V.N. Synthesis and activity of new triphenylphosphonium derivatives of betulin and betulinic acid against Schistosoma mansoni in vitro and in vivo // Bioorg. Med. Chem.- 2014.- V.22, №21.-Pp.6297-6304.
11. Gubaidullin R.R., Khalitova R.R., Galimshina Z.R., and Spivak A.Y. Synthesis of novel [3,2-b] furan-fused pentacyclic triterpenoids via gold -Catalyzed intramolecular heterocyclization of 2-alkynyl-3-oxotriterpene acids // Tetrahedron.-2018.- V.74, №15.- Pp.1888-1899.
References
1. Cichewicz R.H., Kouzi S.A. [Chemistry, biological activity, and chemotherapeutic potential of betulinic acid for the prevention and treatment of cancer and HIV infection]. Med. Res. Rev., 2004, vol.24, no.1, pp.90-114.
2. Sarek J., Kvasnica M., Vlk M., Urban M. [The Potential of Triterpenoids in the Treatment of Melanoma]. Vukovar, IntechOpen, 2011, pp.125158.
3. Mukherjee R., Kumar V., Srivastava S. K., Agarwal S. K., and Burman A. C. [Betulinic acid derivatives as anticancer agents: structure activity relationship]. Anticancer. Agents Med. Chem., 2006, vol.6, no.3, pp.271-279.
4. Csuk R. [Betulinic acid and its derivatives: a patent review (2008—2013)]. Expert Opin. Ther. Pat., 2014, vol.24, no.8, pp.913-923.
5. Zhang H., Li F., Zhu P., Liu J., Yao H., Jiang J., Ye W., Wu X., and Xu J. [Synthesis and Biological Evaluation of Oxygen-containing Heterocyclic Ring-fused 23-Hydroxybetulinic Acid Derivatives as Antitumor Agents]. Chem. Biol. Drug Des., 2015, vol.86, no.4, pp.424-431.
6. Spivak A.Y., Gubaidullin R.R., Galimshina Z.R., Nedopekina D.A., and Odinokov V.N. [Effective synthesis of novel C(2)-propargyl derivatives of betulinic and ursolic acids and their conjugation with ¿6-d-glucopyranoside azides via click chemistry]. Tetrahedron, 2016, vol.72, no.9, pp.1249-1256.
7. Gubaidullin R.R., Yarmukhametova D.S., Nedopekina D.A., Khalitova R.R., and Spivak A.Y. [Effective synthesis of novel furan-fused pentacyclic triterpenoids via anionic 5-exo dig cyclization of 2-alkynyl-3-oxotriterpene acids]. Arkivoc, 2017, vol.2017, no.5, pp.100-116.
8. Spivak A.Y., Nedopekina D.A., Khalitova R.R., Gubaidullin R.R., Odinokov V.N., Bel'skii Y.P., Bel'skaya N.V., and Khazanov V.A. [Triphenylphosphonium cations of betulinic acid derivatives: synthesis and antitumor activity]. Med. Chem. Res., 2017, vol.26, no.3, pp.518531.
9. Nedopekina D.A., Gubaidullin R.R., Odinokov V.N., Maximchik P.V., Zhivotovsky B., Bel'Skii Y.P., Khazanov V.A., Manuylova A.V., Gogvadze V., and Spivak A.Y. [Mitochondria-targeted betulinic and ursolic acid derivatives: synthesis and anticancer activity]. Med. Chem. Commun., 2017, vol.8, no.10, pp.1934-1945.
10. Spivak A.Y., Keiser J., Vargas M., Gubaidullin R.R., Nedopekina D.A., Shakurova E.R., Khalitova R.R., and Odinokov V.N. [Synthesis and activity of new triphenylphosphonium derivatives of betulin and betulinic acid against Schistosoma mansoni in vitro and in vivo]. Bioorg. Med. Chem., 2014, vol.22, no.21, pp.6297-6304.
11. Gubaidullin R.R., Khalitova R.R., Galimshina Z.R., and Spivak A.Y. [Synthesis of novel [3,2-b] furan-fused pentacyclic triterpenoids via gold -Catalyzed intramolecular heterocyclization of 2-alkynyl-3-oxotriterpene acids]. Tetrahedron, 2018, vol.74, no.15, pp.1888-1899.
12. Galm U., Hager M.H., Van Lanen S.G., Ju J., Thorson J.S., and Shen B. Antitumor Antibiotics: Bleomycin, Enediynes, and Mitomycin // Chem. Rev.- 2005.- V.105, №2.- Pp.739-758.
13. Alley M.C; Scudiero D.A; Monks A; Hursey M; Czerwinski M.J; Fine D.L; Abbott B.J; Mayo J.G; Shoemaker R; and Boyd M.R. Feasibility of drug screening with panels of human tumor cell lines using a microculture tetrazolium assay // Cancer Res.- 1988.- V.48, №3.- Pp.589-601.
14. Grever M.R., Schepartz S.A., Chabner B.A. The National Cancer Institute: cancer drug discovery and development program // Semin. Oncol.-1992.- V.19, №6.- Pp.622-638.
15. Boyd M.R., Paull K.D. Some practical considerations and applications of the national cancer institute in vitro anticancer drug discovery screen // Drug Dev. Res.- 1995.- V.34, №2.-Pp.91-109.
16. Shoemaker R.H. The NCI60 human tumour cell line anticancer drug screen // Nat. Rev. Cancer.- 2006.- V.6, №10.- Pp.813-823.
17. Weinstein J.N., Myers T.G., O'Connor P.M., Friend S.H., Fornace A.J., Kohn K.W., Fojo T., Bates S.E., Rubinstein L.V., Anderson N.L., Buolamwini J.K., Van Osdol W.W., Monks A.P., Scudiero D.A., Sausville E.A., Zaharevitz D.W., Bunow B., Viswanadhan V.N., Johnson G.S., Wittes R.E., Paull K.D. An informationintensive approach to the molecular pharmacology of cancer. // Science.- 1997.-V.275, №5298.- Pp.343-349.
18. Monks A., Scudiero D., Skehan P., Shoemaker R., Paull K., Vistica D., Hose C., Langley J., Cronise P., Vaigro-wolff A., Gray-goodrich M., Campbell H., Mayo J., Boyd M. Feasibility of a high-flux anticancer drug screen using a diverse panel of cultured human tumor cell lines. // J. Natl. Cancer Inst.- 1991.- V.83, №11.- Pp.757766.
12. Galm U., Hager M.H., Van Lanen S.G., Ju J., Thorson J.S., and Shen B. [Antitumor Antibiotics: Bleomycin, Enediynes, and Mitomycin]. Chem. Rev., 2005 vol.105, no.2, pp.739-758.
13. Alley M.C; Scudiero D.A; Monks A; Hursey M; Czerwinski M.J; Fine D.L; Abbott B.J; Mayo J.G; Shoemaker R; and Boyd M.R. [Feasibility of drug screening with panels of human tumor cell lines using a microculture tetrazolium assay]. Cancer Res., 1988, vol.48, no.3, pp.589-601.
14. Grever M.R., Schepartz S.A., Chabner B.A. [The National Cancer Institute: cancer drug discovery and development program]. Semin. Oncol., 1992, vol.19, no.6, pp.622-638.
15. Boyd M.R., Paull K.D. [Some practical considerations and applications of the national cancer institute in vitro anticancer drug discovery screen]. Drug Dev. Res., 1995, vol.34, no.2, pp.91-109.
16. Shoemaker R.H. [The NCI60 human tumour cell line anticancer drug screen]. Nat. Rev. Cancer., 2006, vol.6, no.10, pp.813-823.
17. Weinstein J.N., Myers T.G., O'Connor P.M. Friend S.H., Fornace A.J., Kohn K.W., Fojo T. Bates S.E., Rubinstein L.V., Anderson N.L. Buolamwini J.K., Van Osdol W.W., Monks A.P. Scudiero D.A., Sausville E.A., Zaharevitz D.W. Bunow B., Viswanadhan V.N., Johnson G.S. Wittes R.E., Paull K.D. [An information-intensive approach to the molecular pharmacology of cancer]. Science, 1997, vol.275, no.5298, pp.343-349.
18. Monks A., Scudiero D., Skehan P., Shoemaker R., Paull K., Vistica D., Hose C., Langley J., Cronise P., Vaigro-wolff A., Gray-goodrich M., Campbell H., Mayo J., Boyd M. [Feasibility of a high-flux anticancer drug screen using a diverse panel of cultured human tumor cell lines]. J. Natl. Cancer Inst., 1991, vol.83, no.11, pp.757766.
